T-SDYZXCP 001.2-2023 禽蛋中藥物殘留量的測定 第2部分：6 種喹諾酮類藥物的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（固相萃取法）

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B

45團 體 標 準T/SDYZXCP

禽蛋中藥物殘留量的測定第

2

部分：6

種喹諾酮類藥物的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（固相萃取法）2023-10-13

發(fā)布 2023-12-13

實施發(fā)布學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

001.2—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載 本文件按照GB/T

1.1－《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。T/SDYZXCP

001《禽蛋中藥物殘留量的測定》分為如下部分：——第1部分：6種喹諾酮類藥物的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（QuEChERS法）；——第2部分：6種喹諾酮類藥物的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（固相萃取法）；……本文件是

T/SDYZXCP

的第2部分。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由山東省優(yōu)質(zhì)畜產(chǎn)品協(xié)會提出并歸口。公司、國檢（青島）檢測技術有限公司、陽信縣綜合檢驗檢測中心、萊西市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。徐海峰。Ⅰ學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

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部分：

液相色譜1 范圍本文件規(guī)定了禽蛋中6種喹諾酮類藥物殘留量測定的固相萃取-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。本文件適用于雞蛋、鴨蛋、鵝蛋、鴿子蛋和鵪鶉蛋中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、諾氟沙星、培氟沙星、氧氟沙星的測定。本文件氧氟沙星、洛美沙星、恩諾沙星、諾氟沙星、培氟沙星的檢出限為

，定量限為

2μg/kg

1.2

，定量限為

4

。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，文件。。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4 原理試樣中的喹諾酮類藥物用

-Mcllvaine

緩沖溶液提取，經(jīng)親水-親脂平衡固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定，內(nèi)標法定量。5 試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。5.1 水：GB/T

，一級。5.2 乙腈：色譜純。5.3 甲醇：色譜純。5.4 甲酸：色譜純。5.5 磷酸氫二鈉溶液（

）：稱取

71.63

g

磷酸氫二鈉，用水溶解并定容至

1

000

，混勻。5.6 檸檬酸溶液（

）：稱取

21.01

g

1

，混勻。5.7 Mcllvaine

1000mL0.1

磷酸氫二鈉溶液（5.5）混合，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)

至

4.0±0.05。1學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

001.2—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載5.8 EDTA-Mcllvaine

緩沖溶液（

）：稱取

g

乙二胺四乙酸二鈉至

1625

Mcllvaine

緩沖溶液（5.9 乙酸鋅溶液（2

）：稱取

36.7

g

乙酸鋅，用水溶解并定容至

，混勻。5.105%甲醇水溶液：甲醇（5.3）+水=5+95。5.11 0.2%甲酸水溶液：甲酸（）+水=2+998。5.12 5mmol/L

0.1%

0.385g

1

5.4并稀釋至

，混勻。5.13 標準儲備溶液（1.0

）：稱取

6

種喹諾酮類藥物標準品（中英文名稱、分子式、分子量、CAS

號和純度按附錄

A

執(zhí)行）各

10

（精確至

，折算純度和相應的含鹽量之后的實際質(zhì)量）分別置于

棕色容量瓶中，用甲醇（5.3）溶解并定容。-

℃以下避光保存，有效期

6

個月。5.14 混合標準中間溶液（10

）：分別準確移取標準儲備溶液（5.13）各

0.1

于

10

容量瓶中，用甲醇（5.3）定容至刻度，混勻。-18

℃

1

個月。5.15 1.05.14）1

于

容量瓶中，用甲醇（4

℃

1

個月。5.16

3

CAS號和純度按附錄

A

執(zhí)行）各

10

（精確至

0.01

，折算純度和相應的含鹽量之后的實際質(zhì)量）分別置于

棕色容量瓶中，用甲醇（5.3）溶解并定容。-

℃以下避光保存，有效期

6

個月。5.17 混合內(nèi)標標準中間溶液（

μg/mL）：準確移取內(nèi)標儲備溶液（5.16）各

0.1

于

10

容量瓶中，用甲醇（5.3）定容至刻度，混勻。-18

℃

1

個月。5.18 混合內(nèi)標工作溶液（0.1

）：準確移取混合內(nèi)標標準中間溶液（5.17）0.1

于

容量瓶中，用甲醇（4

℃

1

個月。5.19 親水-親脂平衡型固相萃取柱：

5.20 微孔濾膜：0.22

μm，水系。6 儀器設備6.1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（）。6.2分析天平：精度為

0.01

g

和

0.01

。6.3 渦旋混合器。6.4 超聲波清洗機。6.5 冷凍離心機：轉速≥10

，溫度≤4

℃。6.6 氮吹儀。6.7 固相萃取裝置。6.8均質(zhì)機。6.9 pH

計。7 樣品g18℃待測物保留時間處，儀器響應值小于方法定量限30%的樣品，作為空白樣品。2時間A%%09010390108703010703010.55951359513.19010159010兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ學兔．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

001.2—2023兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ學兔．ｃｏｍ標準下載8 試驗步驟8.1 提取平行做兩份試驗，稱取試樣

5.00

g±0.05

g（精確至

0.01g），置于

離心管中，準確加入500

5.18），用

15

EDTA-Mcllvaine

緩沖溶液（）稀釋，加入

5

乙酸鋅溶液（），渦旋混合

1

min，超聲提取

10

min，10

000

離心

25

容量瓶中，用

EDTA-

緩沖溶液（）定容。8.2 凈化取固相萃取柱（5.19），依次用

6

甲醇（）洗滌、6

水活化。準確移取

5

提取液（8.1）過柱，用

2

甲醇水溶液（5.10

10

甲醇（）洗脫，收集洗脫液，40氮氣吹干，用

1

mL0.2%甲酸水溶液（5.11）溶解，渦旋混勻，過膜（5.20），待測。8.3標準工作曲線的制備準確移取混合標準工作溶液（5.15）、混合內(nèi)標工作溶液（5.18），用

0.2%甲酸水溶液（5.11）逐級稀釋成

2.0

、5.0

、10.0

、20.0

、50.0

和

100.0

的混合標準系列溶液，內(nèi)標濃度均為

。8.4 測定8.4.1 液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下：a）

色譜柱：C色譜柱，內(nèi)徑

，柱長

50

，粒徑

1.7

μm，或性能相當者；b）

柱溫：40

℃；c）

流速：0.2

；d）

進樣量：2

；e）

流動相：A

相為

5

乙酸銨溶液（含

0.1%甲酸）（5.12），B

相為乙腈（）。梯度洗脫程序見表

1。表1表1 梯度洗脫程序序號組分母離子子離子錐孔電壓V碰撞能量V1諾氟沙星320.2302.01621231.115392氧氟沙星362.2318.23018261.130283洛美沙星352.0265.02523308.025174培氟沙星334.0290.12518316.225215環(huán)丙沙星332.1314.12521287.824176恩諾沙星360.0316.41320342.127207D5-恩諾沙星365.1321.111198D8-環(huán)丙沙星340.3322.110219D5-諾氟沙星325.3307.21020注：

為定量離子。．ｃｏｍ標準．ｂｗｗ兔ｗ兔學ｚｆｘｗ下載T/SDYZXCP

001.2—2023．ｃｏｍ標準．ｂｗｗ兔ｗ兔學ｚｆｘｗ下載8.4.2 質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：a）

離子源：電噴霧離子源（ESI）；b）

掃描方式：正離子掃描；c）

檢測方式：多反應監(jiān)測（MRM）；d）

4

V；e）

℃；f）

脫溶劑溫度：250

℃；g）

℃；h）

霧化氣流速：

；i）

干燥氣流速：10.0

；j）

加熱氣流速：10.0

。6

種喹諾酮類藥物和

3

種氘代同位素標準品多反應監(jiān)測（MRM）離子對、錐孔電壓和碰撞能量見表

2。表2 離子對、錐孔電壓和碰撞能量表2 離子對、錐孔電壓和碰撞能量4相對離子豐度＞50＞20～＞10～≤10允許偏差±25±30±50下準．ｂｚｆｘｗ兔兔ｗｗｗ學．ｃｏｍ標載T/SDYZXCP

001.2—2023下準．ｂｚｆｘｗ兔兔ｗｗｗ學．ｃｏｍ標載6種喹諾酮類藥物和38.5 定性%系列溶液相對豐度一致，其允許偏差應符合表3的要求。表3 定性測定時相對離子豐度允許偏差

表3 定性測定時相對離子豐度允許偏差

×??……………….

(1)ω

=

×??………（2）30%樣液中喹諾酮類藥物的響應值應在標準曲線線性范圍內(nèi)。9 試驗數(shù)據(jù)處理試樣中待測物的含量以質(zhì)量分數(shù)計，數(shù)值以微克每千克（μg/kg）表示。多點校準按公式（1）計算；單點校準，按公式（2）計算：ω

=

式中：——試樣中待測物的含量，單位為微克每千克（）；C——由工作曲線查得的試樣中待測物的濃度，單位為納克每毫升（）；

——定容體積，單位為毫升（）；

——g）；1

000——單位換算；

——稀釋倍數(shù)。式中：——試樣中待測物的含量，單位為微克每千克（）；——試樣溶液中待測物的峰面積；——定容的體積，單位為毫升（）；——標準工作溶液中待測物對應內(nèi)標的峰面積；5學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

001.2—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載C——標準工作溶液中待測物的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（）；C——試樣溶液中待測物對應內(nèi)標的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（）；——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；——試樣溶液中待測物對應內(nèi)標的峰面積；——標準工作溶液中待測物的峰面積；C’——標準工作溶液中待測物對應內(nèi)標的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（）；1

000——單位換算；——稀釋倍數(shù)。測定結果用兩次平行測定的算術平均值表示，保留三位有效數(shù)字。10 檢測方法準確度、精密度10.1 準確度本方法在

2

μg/kg～100

μ

60%～120%。10.2 精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不超過該算術平均值的

20%。6序號化合物名稱英文名

登錄號分子式分子量純度%1諾氟沙星70458-96-716H18FN3O3319.33≥952氧氟沙星Ofloxacin82419-36-118H20FN3O4361.37≥953洛美沙星Lomefloxacin98079-51-717H19F2N3O3351.35≥954培氟沙星Pefloxacin70458-92-317H20FN3O3333.36≥955環(huán)丙沙星Ciprofloxacin85721-33-117H18FN3O3331.34≥956恩諾沙星Enrofloxacin93106-60-619H22FN3O3359.39≥957D8-環(huán)丙沙星Ciprofloxacin-d81130050-35-917H18D8FN3O3339.39≥958D5-恩諾沙星Enrofloxacin-d51173021-92-519H17D5FN3O3364.37≥959D5-諾氟沙星1015856-57-116H13D5FN3O3324.37≥95下準ｏｍ標．ｃ學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ載T/SDYZXCP

001.2—2023下準ｏｍ標．ｃ學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ載附 錄 A（規(guī)范性）6

種喹諾酮類藥物和

3

種氘代同位素標準品的中英文名稱、CAS

號、分子式、分子量和純度6

種喹諾酮類藥物和

3

種氘代同位素標準品的中英文名稱、CAS

號、分子式、分子量和純度見表A.1。表A.1表A.1 諾氟沙星/4.894洛美沙星/5.729ｘｗ．ｃ環(huán)丙沙星/5.272兔ｗｗｗ．ｂ恩諾沙星/6.125ｚｆ培氟沙星/5.159ｏｍ標學d8-環(huán)丙沙星/5.217d5-諾氟沙星/4.858兔準下載氧氟沙星/4.986T/SDYZXCP

001.2—2023諾氟沙星/4.894洛美沙星/5.729ｘｗ．ｃ環(huán)丙沙星/5.272兔ｗｗｗ．ｂ恩諾沙星/6.125ｚｆ培氟沙星/5.159ｏｍ標學d8-環(huán)丙沙星/5.217d5-諾氟沙星/4.858兔準下載氧氟沙星/4.986附 錄 B（資料性）6種喹諾酮類化合物和3種氘代同位素標準品多反應監(jiān)測（MRM）譜圖6種喹諾酮類化合物和3種氘代同位素標準品多反應監(jiān)測（MRM）譜圖見圖。2:362.20>318.20(+)2:362.20>261.10(+)9:332.10>231.00(+)2:362.20>318.20(+)2:362.20>261.10(+)9:332.10>231.00(+) 9:332.10>314.10(+)9:332.10>287.80(+) 14:325.30>307.20(+)4.25 4.755.00

4.25

4.50

4.75

5.00

5.25

5.50

5.754.5