梅毒實驗檢查

梅毒的實驗室診斷12021精選ppt概述梅毒及其病原學(xué)特征梅毒流行狀況梅毒實驗室診斷暗視野顯微鏡檢查及臨床意義梅毒血清學(xué)檢查及臨床意義梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)知識要點與報告要求梅毒檢測試劑評估22021精選ppt梅毒及其病原學(xué)特征32021精選ppt梅毒syphilis梅毒是由梅毒螺旋體引起的全身性、慢性性傳播疾病臨床癥狀復(fù)雜,時隱時現(xiàn)傳染途徑:性傳播,垂直傳播,其它途徑42021精選ppt52021精選ppt梅毒螺旋體特征有6～12個規(guī)則的螺旋螺旋整齊，數(shù)目固定折光性強(qiáng)，較其他螺旋體亮運動緩慢而有規(guī)律，有三種運動方式圍繞其長軸旋轉(zhuǎn)運動伸縮其螺旋間距離移動彎曲扭動如蛇行62021精選ppt梅毒螺旋體特征人是梅毒螺旋體的唯一自然宿主梅毒螺旋體不能在體外培養(yǎng)繁殖最適生存溫度是37℃，離開人體很快死亡煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒劑如雙氧水、酒精等很容易將其殺滅72021精選ppt梅毒螺旋體致病性致病物質(zhì)：莢膜樣物質(zhì)、粘多糖酶所致疾病——梅毒后天梅毒－－經(jīng)性接觸傳染

臨床分期一期梅毒：外生殖器硬性下疳二期梅毒：全身梅毒疹三期梅毒：皮膚粘膜潰瘍、侵犯內(nèi)臟器官或組織

隱性梅毒：無任何梅毒性的癥狀和體征先天梅毒－－經(jīng)胎盤傳給胎兒

胎兒表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎出生后表現(xiàn)為鋸齒形牙、鞍形鼻等82021精選ppt梅毒的流行狀況92021精選ppt1995-2010年全國梅毒疫情趨勢（一期和二期梅毒真實反映梅毒疫情趨勢，其上升幅度在減?。?02021精選ppt梅毒監(jiān)測檢測工作進(jìn)展2010年報告梅毒385687例，死亡74例，報告發(fā)病率28.9/10萬，較2009年增長17.2%，居乙類法定傳染病發(fā)病第3位一期：105679例，占27.4%，增長10.9%

二期：64159例，占16.6%，增長4.4%

三期：2927例，占0.8%，增長24.3%

隱性：200756例，占52.1%，增長26.7%

胎傳：12166例，占3.2%，增長9.4%

一期與二期梅毒發(fā)病率：12.72/10萬，增長8.4%胎傳梅毒發(fā)病率：66.55/10萬活產(chǎn)數(shù)112021精選ppt2010年全國梅毒疫情地區(qū)分布發(fā)病率位于前5位：浙江：97.13/10萬廣西：82.58/10萬上海：75.93/10萬福建：58.23/10萬新疆：52.97/10萬122021精選ppt2010年全國梅毒疫情年齡與性別分布男女性別比：0.94︰115-39歲：女性多于男性40歲以上：男性多于女性132021精選ppt梅毒實驗室診斷142021精選ppt潰瘍滲出物血清或血漿①②152021精選ppt162021精選ppt標(biāo)本采集部位：皮膚或粘膜損害

有痂者去痂，先用無菌棉球或紗布蘸生理鹽水，將皮損拭凈，輕壓皮損至滲液（避免出血）。然后用載玻片印取滲液，立即檢查，未破潰者用手術(shù)刀刮破皮疹，取滲出液。淋巴結(jié)穿刺液

以無菌操作法用注射器吸取0.25-0.5ml生理鹽水，穿刺入淋巴結(jié)，再回吸2～3次，最后將吸取液涂玻片上，立即檢查。梅毒暗視野采樣172021精選ppt182021精選ppt暗視野顯微鏡檢查制片

標(biāo)本置于載玻片上，加一滴生理鹽水，蓋上蓋玻片，在暗室中于暗視野顯微鏡上油鏡觀察觀察先用低倍鏡，再轉(zhuǎn)至高倍鏡梅毒螺旋體在暗背景上呈白色發(fā)光，螺旋整齊，運動規(guī)律（旋轉(zhuǎn)、伸縮或蛇行運動）192021精選ppt202021精選ppt暗視野顯微鏡檢查結(jié)果解釋—陽性暗視野顯微鏡查陽性，臨床上可確診梅毒特別對一期梅毒硬下疳，腫大淋巴結(jié)，二期梅毒皮膚粘膜損害的診斷有重要價值，尤其使用于早期梅毒血清學(xué)陰性時212021精選ppt暗視野顯微鏡檢查結(jié)果解釋—陰性陰性結(jié)果不能排除梅毒螺旋體數(shù)量不足已用過抗生素或某些外用藥損害接近自然消退損害不是梅毒檢驗人員技術(shù)222021精選ppt暗視野顯微鏡檢查特點該方法具有快速、方便、可靠的特點，已被WHO確定為性病實驗室必備項目之一口腔中含有其他密螺旋體，與梅毒螺旋體不易區(qū)別，暗視野顯微鏡查不推薦于口腔皮損材料232021精選ppt梅毒血清學(xué)檢查抗體的產(chǎn)生（4周－10周左右）在組織破壞過程中可釋放一種具有抗原性的類脂質(zhì)（心磷脂），能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)非特異性的抗體，也稱反應(yīng)素。機(jī)體產(chǎn)生針對梅毒螺旋體的特異性抗螺旋體抗體，持續(xù)存在終身?？贵w無保護(hù)免疫力，不足以防止感染和阻止病情進(jìn)展242021精選ppt梅毒血清學(xué)檢查血清學(xué)方法是診斷各期梅毒的主要方法，包括：非特異性血清學(xué)試驗（非梅毒螺旋體抗原血清試驗）

用于初篩試驗、療效觀察。特異性血清學(xué)試驗（梅毒螺旋體抗原血清試驗）

用于確證試驗，對療效觀察意義不大。局限性：非常早期的梅毒可能出現(xiàn)陰性，還需做病原體檢查。252021精選ppt非梅毒螺旋體抗原血清試驗已知抗原：心磷脂、卵磷脂及膽固醇檢測成分：血清梅毒反應(yīng)素方法：性病研究實驗室玻片試驗（VDRL）血清不需加熱的反應(yīng)素玻片試驗（USR）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗（RPR）甲苯胺紅血清不需加熱試驗（TRUST）262021精選pptRPR/TRUST原理:RPR:以黑色的炭顆粒作為指示標(biāo)記物TRUST:以紅色的甲苯胺紅顆粒作為指示標(biāo)記物檢測成分：血清梅毒反應(yīng)素272021精選pptRPR/TRUST定性試驗在紙卡圓圈中加入50μL待檢血清，涂滿整個圓圈使用滴管和專用針頭，加1滴混勻的抗原懸液旋轉(zhuǎn)100rpm，8min立即判斷結(jié)果282021精選pptRPR/TRUST結(jié)果判斷陽性：在圓圈中見不規(guī)則大小黑色/紅色凝集塊陰性：在圓圈中無黑色/紅色凝集塊，僅見黑色/紅色顆粒集于中央一點或均勻分散。292021精選ppt非梅毒螺旋體抗原血清試驗的優(yōu)缺點：優(yōu)點：*敏感性特異性好

*不需要昂貴設(shè)備，簡單易行*適用于大量人群的血清篩查*有效治療后血清滴度可下降并陰轉(zhuǎn)，故可作療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)。*20分鐘可獲得實驗結(jié)果。*試劑與方法均已標(biāo)化，各實驗室間結(jié)果可比較。*試驗可被內(nèi)部質(zhì)控和外部質(zhì)控監(jiān)控進(jìn)行。缺點：*敏感性和特異性低于螺旋體抗原試驗，BFP反應(yīng)和前帶現(xiàn)象渾濁（定性）302021精選pptRPR/TRUST定量試驗待檢血清用等滲鹽水在紙卡圓圈中作梯度稀釋：原血清，1:2，1:4，1:8，1:16，1:32……按定性試驗步驟操作，以出現(xiàn)陽性反應(yīng)的最高稀釋度報告結(jié)果312021精選ppt（倍比稀釋）322021精選pptRPR/TRUST注意事項：實驗環(huán)境溫度應(yīng)為：23-29℃抗原應(yīng)保存于4℃冰箱，實驗前應(yīng)恢復(fù)到室溫?？乖瓚?yīng)防止凍結(jié)。血液標(biāo)本實驗前應(yīng)恢復(fù)到室溫，并在24小時內(nèi)完成檢測。試驗完畢應(yīng)立即觀察結(jié)果。332021精選pptRPR/TRUST假陰性有25%-40%的未治梅毒在晚期隱性期可自然逆轉(zhuǎn)為陰性，約30%的心血管和神經(jīng)梅毒呈陰性前帶現(xiàn)象：抗原抗體量比例不適，抑制陽性反應(yīng)。一般易發(fā)生在滴度在1：500以上的標(biāo)本中。1%的II期梅毒會出現(xiàn)前帶現(xiàn)象操作人員應(yīng)注意實驗的溫度，試劑盒從冰箱取出后應(yīng)恢復(fù)至室溫，室溫過低（〈10℃）可能出現(xiàn)假陰性或結(jié)果不準(zhǔn)確（即使出陽性結(jié)果，試驗滴度也不準(zhǔn)）。342021精選pptRPR/TRUST生物學(xué)假陽性：急性或慢性傳染?。猴L(fēng)疹、麻疹、水痘、瘧疾、上呼吸道感染、病毒性肝炎，活動性肺結(jié)核、麻風(fēng)，肺炎球菌性肺炎等；②其它疾?。篠LE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)心病、DLE、肝硬化、慢性腎炎、系統(tǒng)性硬化癥、自身免疫性溶血性貧血等；③身體狀況改變：麻醉劑成癮、妊娠、年老等一般假陽性血清抗體滴度<1：8應(yīng)排除技術(shù)性、生理性和生物學(xué)假陽性，并用特異性試驗來證實352021精選ppt梅毒螺旋體抗原血清試驗已知抗原：梅毒螺旋體抗原檢測成分：抗梅毒螺旋體抗體方法：

1.熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）

2.梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）

3.梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）

4.梅毒螺旋體ELISA試驗5.快速試驗362021精選pptTPPA原理：用整菌和其片斷做抗原致敏的明膠顆粒，此致敏顆粒與人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應(yīng)敏感性和特異性均高敏感性：一期梅毒：70%-100%，二期梅毒：100%

三期梅毒95%-98%特異性：94%-100%容許做梅毒的精確診斷372021精選pptTPPA原理示意圖明膠顆粒抗原382021精選pptTPPA材料U型板、微量加樣器（25ul）、振蕩器TPPA試劑盒(溶解液，樣本稀釋液,致敏顆粒,非致敏顆粒,質(zhì)控血清,專用滴管）392021精選pptTPPA方法從4℃冰箱取出試劑盒,恢復(fù)至室溫（15-30℃）后使用按說明書進(jìn)行樣本稀釋用專用滴管,第三孔加1滴(25ul)非致敏顆粒,第四孔加1滴(25ul)致敏顆粒在振蕩器上振蕩30s鐘混合后,室溫靜置2小時后觀察結(jié)果402021精選ppt方法412021精選pptTPPA結(jié)果判斷陰性(－):顆粒沉積在孔底,周邊平滑,或形成致密圓圈

可疑反應(yīng)(±):明膠顆粒沉積在孔底,中央形成致密小環(huán),

周邊平滑陽性(+/++):內(nèi)有清晰的寬環(huán)且外緣粗糙強(qiáng)陽性(+++/

++++):孔內(nèi)凝聚顆粒形成均一的膜覆蓋在整

個孔底者孔內(nèi)樣品與致敏和非致敏顆粒均產(chǎn)生凝集者,則需作重吸收試驗后進(jìn)一步檢測422021精選pptP432021精選pptTPPA442021精選pptTPPA452021精選pptTPPA注意事項①專用滴管應(yīng)標(biāo)明不能混用，不能用來稀釋血清。②未致敏孔不發(fā)生凝集，否則試驗無效。如果標(biāo)本與非致敏和致敏顆粒均產(chǎn)生凝集，需作重吸收試驗。③反應(yīng)板要清潔干凈，孔內(nèi)無異物。④試劑保存于2~10℃，不可凍結(jié)，不同批號試劑間不可混用462021精選ppt其它常用確證方法梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）快速檢測試劑472021精選ppt梅毒血清學(xué)檢查臨床意義非特異性血清學(xué)試驗陽性可能表示：現(xiàn)癥感染、接受或未接受過治療的近期感染可用于療效觀察、判愈、判定復(fù)發(fā)及再感染

早期梅毒患者經(jīng)充分治療后，滴度逐漸下降，半年到2年大部分非特異性血清學(xué)試驗陰轉(zhuǎn)可能有生物學(xué)假陽性(滴度常<1:8）適用于人群篩查、產(chǎn)前檢查及健康體檢482021精選ppt梅毒血清學(xué)檢查臨床意義特異性血清學(xué)試驗陽性結(jié)果表示現(xiàn)癥感染接受或末接受過治療的近期感染既往曾經(jīng)感染特異性血清學(xué)試驗因其敏感性高，特異性強(qiáng)，可作為證實試驗及排除假陽性。特別是隱性梅毒及一些非梅毒螺旋體抗原血清試驗陰性而又懷疑為梅毒的患者。在多數(shù)情況下，一旦感染了梅毒，特異性血清學(xué)試驗抗體陽性可保持?jǐn)?shù)年，甚至終生陽性，故定性的特異性血清學(xué)試驗不能用于觀察療效、判斷復(fù)發(fā)及再感染。492021精選ppt梅毒血清學(xué)檢查臨床意義梅毒感染的較早期，機(jī)體尚未產(chǎn)生抗體，非特異性血清學(xué)試驗和特異性血清學(xué)試驗均可陰性，需追蹤觀察。502021精選ppt試驗結(jié)果RPR+,TPPA-RPR+,TPPA+RPR-,

TPPA+RPR-,

TPPA-

RPR假陽性現(xiàn)癥梅毒，治愈的晚期梅毒極早期梅毒，治愈的早期梅毒排除梅毒感染意義極早期梅毒（尚無任何抗梅毒抗體產(chǎn)生）512021精選ppt

先天梅毒的實驗室診斷先天梅毒的實驗室診斷早期先天梅毒暗視野：胎盤、臍帶、鼻分泌物、皮膚黏膜血清學(xué)檢查√晚期先天梅毒血清學(xué)檢查√522021精選ppt先天梅毒的實驗室診斷

先天梅毒（胎傳梅毒）是胎兒在母體內(nèi)通過血液途徑感染所致，胎傳梅毒不發(fā)生硬下疳，常有較嚴(yán)重的內(nèi)臟損害，病死率高。目前推薦使用19s-IgM-TPPA（TPHA）試驗方法來診斷先天梅毒，有成品的分離系統(tǒng)出售，分離出來的19s-IgM即可進(jìn)行TPPA（TPHA）試驗或FTA-ABS等試驗。532021精選ppt542021精選ppt552021精選ppt孕產(chǎn)婦梅毒檢測及服務(wù)流程

陽性陰性陽性陰性陽性陰性陽性出現(xiàn)1次3次檢測均為陰性562021精選ppt梅毒感染孕產(chǎn)婦所生兒童的隨訪與先天梅毒感染狀態(tài)監(jiān)測

陰性陽性陰性陽性572021精選ppt神經(jīng)梅毒的實驗診斷

不正規(guī)的治療可導(dǎo)致梅毒復(fù)發(fā)和擴(kuò)大感染，還可促使晚期損害提前發(fā)生，也可使一般要在10年~15年后才發(fā)生的神經(jīng)血管梅毒提前至數(shù)年內(nèi)發(fā)生。對所有原因不明的神經(jīng)系統(tǒng)異常的梅毒病人，病程一年以上特別是青霉素過敏的患者、復(fù)發(fā)者、晚期梅毒患者等進(jìn)行腦脊液檢查。

CSF檢查：主要采用VDRL抗原試驗，此試驗對神經(jīng)梅毒是特異的，陽性可作神經(jīng)梅毒的診斷。582021精選ppt梅毒治療后隨訪及治愈標(biāo)準(zhǔn)

梅毒經(jīng)充分治療后，應(yīng)隨訪2－3年。第一年每3個月復(fù)查一次，以后每半年復(fù)查一次，包括臨床和血清（非螺旋體抗原試驗）。如在治療后6個月內(nèi)血清滴度未有4倍（即2個稀釋度）下降，應(yīng)視為治療失敗，或再感染，除需加倍重新治療外，還應(yīng)考慮是否需要作腦脊液檢查，以觀察神經(jīng)系統(tǒng)有無梅毒感染。一期梅毒在1年以內(nèi)、二期梅毒在2年以內(nèi)多數(shù)病人可轉(zhuǎn)陰。少數(shù)晚期梅毒血清可持續(xù)在低滴度（RPR或TRUST≤1：8)上（隨訪3年以上并排除神經(jīng)梅毒及心血管梅毒）可判為血清固定。神經(jīng)梅毒要隨訪腦脊液，每半年一次，直至腦脊液完全轉(zhuǎn)為正常。592021精選ppt梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)知識要點與報告要求602021精選ppt梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)知識要點

梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)衛(wèi)生部衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)》(WS273－2007)。梅毒診斷分為一期、二期、三期、隱性和胎傳梅毒。梅毒診斷原則應(yīng)根據(jù)流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)及實驗室檢查等進(jìn)行綜合分析。

612021精選ppt梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)知識要點

622021精選ppt梅毒病例的記錄報告要求梅毒病例的記錄與報告應(yīng)按一期、二期、三期、隱性和胎傳