2024年高中生物新教材同步選擇性必修第三冊 第1章 第2節(jié) 第1課時(shí) 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第1課時(shí)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)[學(xué)習(xí)目標(biāo)]1.概述培養(yǎng)基的成分和配制方法。2.區(qū)分消毒和滅菌，掌握不同物品的滅菌方法。3.概述微生物純培養(yǎng)的基本操作要求。一、培養(yǎng)基的配制1．培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2．培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基種類劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基特點(diǎn)作用固體培養(yǎng)基物理性質(zhì)加凝固劑，如瓊脂微生物的分離與鑒定，活菌計(jì)數(shù)，保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動則破散觀察微生物的運(yùn)動、分類鑒定液體培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)特別提醒固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。3．培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成(1)主要營養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無機(jī)鹽。(2)某種常見的細(xì)菌培養(yǎng)基——牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g碳源、氮源和維生素等NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容至1000mL水(3)培養(yǎng)基還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供無氧的條件。特別提醒培養(yǎng)基的配制原則：目的要明確；營養(yǎng)要協(xié)調(diào)；pH要適宜。判斷正誤(1)牛肉膏和蛋白胨來源于動物，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)()(2)所有微生物在培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中都需加入氮源()(3)培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分完全一樣()答案(1)√(2)×(3)×解析(2)培養(yǎng)自生固氮菌的培養(yǎng)基中可以不添加氮源。(3)培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分不完任務(wù)一：概述培養(yǎng)基的種類和營養(yǎng)構(gòu)成1．結(jié)合提供的資料和教材中的“1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成”，分析并回答下列問題：資料一配制培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基：稱取去皮的馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000mL，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向?yàn)V液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000mL。資料二100g馬鈴薯中含有80g水、2g蛋白質(zhì)、16g碳水化合物，還有維生素、無機(jī)鹽等。(1)按物理性質(zhì)劃分上述兩種培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的種類。提示由于瓊脂是凝固劑，所以培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基未加凝固劑，是液體培養(yǎng)基。(2)分析上述兩種培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成。提示都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和維生素等，其中培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中主要由糖類提供碳源，蛋白質(zhì)提供氮源，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中主要由牛肉膏和蛋白胨提供碳源，蛋白胨提供氮源。(3)為什么培養(yǎng)基需要氮源？提示培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。2．如表是某微生物培養(yǎng)基的成分，請分析該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)哪種微生物？若除去①，此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)圓褐固氮菌嗎？編號①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.4g4.0g0.5g0.5g100mL提示此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物。圓褐固氮菌雖可以固氮，但其同化作用類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中必須提供有機(jī)碳源，所以該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)圓褐固氮菌。3．培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基中是否必須有碳源和氮源？提示不一定。例如，培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物時(shí)，一般不需要添加碳源，微生物可以利用空氣中的二氧化碳；培養(yǎng)固氮微生物時(shí)，一般不需要添加氮源，微生物可以利用空氣中的氮?dú)?。幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源微生物碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌CO2NHeq\o\al(＋,4)、NOeq\o\al(－,3)等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物1．關(guān)于微生物的營養(yǎng)，下列說法正確的是()A．同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的無機(jī)物僅提供無機(jī)鹽D．無機(jī)氮源也可能提供能量答案D解析對一些微生物來說，含C、H、O、N的有機(jī)化合物可以既是碳源，又是氮源，A錯(cuò)誤；CO2是光能自養(yǎng)型細(xì)菌的碳源，但不能提供能量，B錯(cuò)誤；除水以外的無機(jī)物種類繁多、功能多樣，如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源，C錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌所利用的氮源是無機(jī)氮源——氨氣，同時(shí)氨氣的氧化過程也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能量，D正確。2．(2023·江蘇宿遷高二期中)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基種類及配制原則的敘述，正確的是()A．任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽及特殊的營養(yǎng)物質(zhì)B．液體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，固體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)C．微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受pH、O2、滲透壓等的影響D．淀粉可作為所有微生物的碳源答案C解析培養(yǎng)基不一定都含有碳源、氮源，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需加入碳源，培養(yǎng)自生固氮菌的培養(yǎng)基中不需加入氮源；一般固體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，液體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)；某些微生物不能利用淀粉，而只能利用葡萄糖、果糖、蔗糖和麥芽糖等糖類。二、無菌技術(shù)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌。1．消毒(1)概念：指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。(2)適用對象：操作的空間、操作者的衣著和手等。(3)常用方法：煮沸消毒、巴氏消毒等。2．滅菌(1)概念：指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。(2)適用對象：用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等。(3)常用方法：濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等。知識拓展芽孢和孢子芽孢：有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體(不是繁殖體)，叫作芽孢。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜(如溫度、水分適宜)的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌。孢子：細(xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞。孢子的特點(diǎn)是能直接長成新個(gè)體。判斷正誤(1)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害()(2)滅菌相比消毒對微生物的殺滅更徹底()(3)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)，都可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌()答案(1)√(2)√(3)×解析(3)培養(yǎng)基的滅菌一般采用濕熱滅菌法。任務(wù)二：消毒和滅菌的比較及無菌技術(shù)的其他作用1．請完善表格中消毒和滅菌的主要方法及應(yīng)用范圍。項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍消毒巴氏消毒法63～65℃消毒30min或72～76℃處理15s或80～85℃處理10～15s牛奶、啤酒、果酒和醬油等不耐高溫的液體煮沸消毒法100℃煮沸5～6min家庭餐具等生活用品紫外線消毒30W紫外燈照射30min(損傷細(xì)菌的DNA)接種室、接種箱或超凈工作臺化學(xué)藥物消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭實(shí)驗(yàn)者雙手氯氣水源滅菌灼燒滅菌接種工具，如涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具、試管口或瓶口等干熱滅菌干熱滅菌箱中，160～170℃的熱空氣中維持1～2h耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)100kPa、121℃的條件下，維持15～30min培養(yǎng)基等2．牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是什么？提示在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。3．為什么體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最好？提示若酒精濃度過高，菌體表面蛋白質(zhì)變性過快而凝固成一層保護(hù)膜，酒精不能滲入其中；若酒精濃度過低，殺菌能力減弱。4．無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么作用？提示無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。3．下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法，正確的是()A．無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實(shí)驗(yàn)室中所有的微生物B．培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌C．經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，不能在常溫下長期保存D．無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，則只能消毒，不能滅菌答案C解析無菌技術(shù)的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，可以用濕熱滅菌法滅菌，D錯(cuò)誤。4．(2023·河北邢臺高二調(diào)研)消毒和滅菌是微生物培養(yǎng)中常用的操作方法。下列說法不正確的是()A．接種疫苗前要對注射區(qū)域進(jìn)行消毒B．在100℃條件下煮沸5～6min屬于滅菌方法，可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢C．微生物接種技術(shù)的方法不同，但核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度D．實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品相接觸答案B解析在100℃條件下煮沸5～6min屬于煮沸消毒法，B錯(cuò)誤。三、微生物的純培養(yǎng)1．概念(1)培養(yǎng)物：在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。(2)純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體。(3)純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程。2．步驟：微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。3．酵母菌的純培養(yǎng)(1)原理：微生物群體分散或稀釋成單個(gè)細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞繁殖成單個(gè)菌落。菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。(2)獲得單菌落的方法：采用平板劃線法和稀釋涂布平板法將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。(3)步驟①制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。倒平板注意事項(xiàng)：a.溫度：50℃左右；b.操作：在酒精燈火焰附近；c.冷凝后平板倒置。②接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。③培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h。判斷正誤(1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后再進(jìn)行濕熱滅菌()(2)倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上()(3)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先滅菌再調(diào)pH()答案(1)×(2)×(3)×解析(1)應(yīng)將配制好的培養(yǎng)基先進(jìn)行濕熱滅菌，再在無菌環(huán)境中將其分裝到培養(yǎng)皿中。(2)倒平板時(shí)，將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋。(3)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH再滅菌。任務(wù)三：分析酵母菌的純培養(yǎng)1．在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？提示最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物；防止空氣中的微生物在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。2．平板冷凝后，為什么要將平板倒置？提示平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)。3．下列接種過程，正確的順序是b、a、e、f、c、g、d。4．為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？請完善下方的表格。灼燒時(shí)期目的取菌種前殺死接種環(huán)上原有的微生物每次劃線前殺死上次劃線時(shí)殘留的菌種，使下一次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而使每次劃線時(shí)菌種數(shù)目逐漸減少，直至得到單個(gè)細(xì)胞接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者5.若要按照如圖d進(jìn)行劃線，那么在接種劃線的操作過程中，共灼燒了幾次接種環(huán)？提示圖d中共劃了5個(gè)區(qū)域，在每次劃線前后均需要對接種環(huán)灼燒滅菌，因此共需要灼燒接種環(huán)6次。6．為什么最后一次的劃線與第一次的劃線不能相連？提示最后一次的劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個(gè)的細(xì)胞，如果與第一次的劃線相連則增加了細(xì)菌的數(shù)目，得不到純化的效果。7．設(shè)置未接種平板組的意義是什么？提示通過觀察未接種平板是否有菌落存在以確定培養(yǎng)基是否被污染或滅菌是否徹底。1．配制培養(yǎng)基的注意事項(xiàng)(1)如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成之后，滅菌之前進(jìn)行操作。(2)培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到50℃左右時(shí)開始倒平板。其原因是瓊脂是一種多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板時(shí)溫度高于50℃會燙手，低于50℃時(shí)，若不及時(shí)操作，瓊脂會凝固。(3)2．實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢測培養(yǎng)基是否被雜菌污染(或檢查培養(yǎng)基制備是否合格)。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明未被污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實(shí)驗(yàn)操作過程中被雜菌污染。5．(2023·海南三沙高二期末)下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()A．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B．倒置平板可防止培養(yǎng)皿皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基C．倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿的皿蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D．檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)答案C解析倒平板時(shí)用食指和拇指夾住培養(yǎng)皿的皿蓋并開啟一條縫隙，使其恰好能讓錐形瓶瓶口伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤。6．在分離、純化細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如圖，a、b、c、d是劃線的四個(gè)區(qū)域。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．每次劃線前后都要對接種環(huán)灼燒滅菌B．連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落C．圖甲中的a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始區(qū)域D．蘸取菌液和劃線要在酒精燈火焰旁進(jìn)行答案C解析題圖中a對應(yīng)的區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落，d區(qū)域菌落最多，因此a區(qū)域應(yīng)該為劃線的最終區(qū)域，d區(qū)域?yàn)閯澗€的起始區(qū)域，C錯(cuò)誤。題組一培養(yǎng)基的配制1．(2023·廣東佛山高二月考)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．微生物在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后用顯微鏡觀察，可見到形成的菌落B．NH3可以作為硝化細(xì)菌的氮源和能源物質(zhì)C．固體培養(yǎng)基中加入的瓊脂能提供額外的碳源和氮源D．某些細(xì)菌生長過程中需要額外補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，比如培養(yǎng)酵母菌時(shí)，要添加維生素答案B解析微生物在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落，A錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌可利用氧化NH3釋放的能量合成有機(jī)物，B正確；固體培養(yǎng)基中加入的瓊脂不能被微生物分解利用，故瓊脂不能提供額外的碳源和氮源，C錯(cuò)誤；酵母菌不屬于細(xì)菌，D錯(cuò)誤。2．某異養(yǎng)自生固氮菌能將大氣中的氮還原成氨，若在實(shí)驗(yàn)室中分離土壤中的該菌，則配制培養(yǎng)基時(shí)，一般不需要加入的物質(zhì)是()A．蒸餾水 B．葡萄糖C．氯化鈉 D．蛋白胨答案D解析培養(yǎng)該菌時(shí)，需要加入蒸餾水；該微生物為異養(yǎng)生物，需要葡萄糖作為碳源；培養(yǎng)該微生物需要無機(jī)鹽，故需要加入氯化鈉；該微生物可以自己固氮，不需要加入氮源，故不需要加入蛋白胨，D符合題意。3．(2023·廣西桂林高二檢測)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B．培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利C．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D．在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性答案A解析固體培養(yǎng)基中含有凝固劑瓊脂，加入水不會制成液體培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性，D錯(cuò)誤。題組二無菌技術(shù)4．許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)十分重視無菌操作，防止雜菌污染。下列操作正確的是()A．對無菌室、超凈工作臺和實(shí)驗(yàn)員可采用紫外線殺菌B．家庭制作酸奶時(shí)，要將容器和鮮牛奶進(jìn)行滅菌C．加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌D．灼燒滅菌法可殺死微生物的營養(yǎng)體和芽孢答案D解析對無菌室、超凈工作臺可采用紫外線殺菌，對實(shí)驗(yàn)員可用酒精擦拭雙手進(jìn)行消毒，A錯(cuò)誤；家庭制作酸奶時(shí)，要將容器進(jìn)行滅菌，鮮牛奶不進(jìn)行滅菌，以免殺死乳酸菌，B錯(cuò)誤；加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料也需要滅菌，否則可能會污染培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；灼燒滅菌法可殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括微生物的營養(yǎng)體、芽孢和孢子)，D正確。5．A．煮沸消毒法中100℃煮沸5～6min可以殺死全部微生物的細(xì)胞和芽孢、孢子B．培養(yǎng)皿用酒精直接擦拭即可達(dá)到徹底滅菌的目的C．灼燒滅菌的對象是金屬器具，不可以是玻璃器具D．消毒和滅菌的原理是相同的答案D解析滅菌可以殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物，A錯(cuò)誤；玻璃器皿等耐高溫、需要保持干燥的實(shí)驗(yàn)器具，應(yīng)采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，而用酒精直接擦拭達(dá)不到徹底滅菌的目的，B錯(cuò)誤；灼燒滅菌的對象可以是金屬器具，也可以是玻璃器具，C錯(cuò)誤；消毒和滅菌的原理是相同的，都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，D正確。題組三微生物的純培養(yǎng)6．(2023·北京東城區(qū)高二期中)下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作的說法，正確的是()A．培養(yǎng)酵母菌的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌B．稱量、溶化和倒平板都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C．倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影響酵母菌生長D．將平板倒置放入適宜溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)答案D解析接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基及多種器材用濕熱滅菌法處理，A錯(cuò)誤；倒平板、接種需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，而稱量、溶化不需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，B錯(cuò)誤；倒好的平板需要冷卻后使用，C錯(cuò)誤。7．采用平板劃線法能將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A．第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B．每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種C．在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液D．劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者答案C解析從第二次劃線開始，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，C錯(cuò)誤。8.如圖是平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?→2→3→4→5。下列操作方法正確的是()A．操作前不用進(jìn)行任何處理B．劃線操作必須在酒精燈火焰上進(jìn)行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5次劃線的前后都要對接種環(huán)滅菌答案D解析劃線之前應(yīng)對接種環(huán)灼燒滅菌；劃線操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行；在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活菌，通過培養(yǎng)均可獲得所需菌落。9．如表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是()序號粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋－＋＋＋Ⅱ＋＋＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋注：“＋”表示含有該物質(zhì)，“－”表示不含有該物質(zhì)。A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)型微生物、丙是異養(yǎng)型微生物C．甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)型微生物、丙是異養(yǎng)型微生物D．甲是異養(yǎng)型微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)型微生物答案C解析根據(jù)表格分析，甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培養(yǎng)基缺氮，說明甲屬于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培養(yǎng)基中沒有有機(jī)碳源，說明乙屬于自養(yǎng)微生物；而丙不能在Ⅰ培養(yǎng)基中生長，說明不能固氮，又不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長，說明不能合成有機(jī)物，只能在Ⅲ培養(yǎng)基中生長，說明丙屬于異養(yǎng)微生物，C正確。10.(2023·江蘇無錫高二期末)生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，某研究小組把該菌的懸浮液與不含任何特殊營養(yǎng)物質(zhì)但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列說法不正確的是()A．倒平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B．將所有平板放置在適宜的37℃下倒置培養(yǎng)并觀察C．圖示結(jié)果表明該菌需要特殊營養(yǎng)物質(zhì)乙和丙D．生長圖形法還可用于某些菌種的篩選答案B解析倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無菌落的出現(xiàn)，可以判斷培養(yǎng)基有無污染，A正確；該菌為嗜熱菌，應(yīng)放置在其適宜的高溫條件下培養(yǎng)，而不是37℃，B錯(cuò)誤；圖中嗜熱菌在添加了乙、丙特殊營養(yǎng)物質(zhì)的區(qū)域生長，故該菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是乙和丙，C正確；不同的菌種所需的特殊營養(yǎng)物質(zhì)不同，利用生長圖形法可用于某些菌種的篩選，菌種只會在提供其需要的生長因子的區(qū)域生長，D正確。11．下列關(guān)于消毒與滅菌的敘述，正確的是()A．玻璃器皿、金屬用具等可以采用干熱滅菌法滅菌B．消毒是滅菌的俗稱，它們的本質(zhì)是一樣的C．消毒就是殺死物體內(nèi)外所有的病原微生物D．接種環(huán)、培養(yǎng)皿可以直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒答案A解析消毒和滅菌的結(jié)果不完全相同，消毒只能殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物，而滅菌能殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括孢子和芽孢，B、C錯(cuò)誤；接種環(huán)可以直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒滅菌，而培養(yǎng)皿不行，培養(yǎng)皿常采用干熱滅菌法滅菌，D錯(cuò)誤。12．A．倒平板后應(yīng)立即將培養(yǎng)皿倒置B．轉(zhuǎn)換劃線角度時(shí)不需灼燒接種環(huán)即可進(jìn)行劃線C．接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D．劃線操作時(shí)完全打開皿蓋，劃完立即蓋上答案C解析倒平板后應(yīng)等平板冷凝后，再將培養(yǎng)皿倒置，A錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，冷卻后再進(jìn)行劃線，B錯(cuò)誤；劃線時(shí)左手將皿蓋打開一條縫隙，右手于酒精燈火焰旁將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，不可完全打開皿蓋，D錯(cuò)誤。13．請根據(jù)所學(xué)微生物培養(yǎng)的知識，回答下列問題：(1)在液體培養(yǎng)基中加入后制成的固體培養(yǎng)基，是實(shí)驗(yàn)室最常用的培養(yǎng)基。(2)實(shí)驗(yàn)室中常用法對培養(yǎng)基及器皿進(jìn)行滅菌。不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、、和無機(jī)鹽。(3)培養(yǎng)微生物時(shí)，將培養(yǎng)皿倒置的目的是。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)對使用過的培養(yǎng)基進(jìn)行處理。答案14．(2023·河北石家莊高二期末)擴(kuò)展青霉是腐爛蘋果中常見的微生物之一，其次級代謝產(chǎn)物棒曲霉素(Pat)是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，研究人員進(jìn)行了如圖所示的實(shí)驗(yàn)，其中“病健交界處”為腐爛部位與未腐爛部位的交界處，取樣分離的5個(gè)部位分別為①號、②號、③號、④號、⑤號。請回答下列問題：(1)蘋果腐爛部位的微生物除擴(kuò)展青霉外，還有枯草桿菌。兩種微生物在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是。(2)活化擴(kuò)展青霉菌種使用的培養(yǎng)基成分如下表，根據(jù)物理性質(zhì)劃分該培養(yǎng)基屬于