自身抗體的檢測在風(fēng)濕病中的診斷意義

關(guān)于自身抗體的檢測在風(fēng)濕病中的診斷意義第2頁,共41頁，2024年2月25日，星期天第3頁,共41頁，2024年2月25日，星期天風(fēng)濕病的概念

風(fēng)濕病是以皮膚、關(guān)節(jié)、血管及多系統(tǒng)損害為主或伴免疫功能異常的一類疾病。

風(fēng)濕病的發(fā)生多與自身免疫異常有關(guān)。第4頁,共41頁，2024年2月25日，星期天骨科呼吸腎內(nèi)消化風(fēng)濕病免疫學(xué)皮膚血液風(fēng)濕病的相關(guān)學(xué)科急診大量誤診病例第5頁,共41頁，2024年2月25日，星期天風(fēng)濕病的診斷臨床特征

癥狀：發(fā)熱、雷諾現(xiàn)象、晨僵等體征：關(guān)節(jié)腫脹、皮疹、肌無力等輔助檢查

自身抗體(ANA、dsDNA、RF、AnuA)

免疫球蛋白、補(bǔ)體及常規(guī)化驗影像學(xué)等概述第6頁,共41頁，2024年2月25日，星期天自身抗體和風(fēng)濕病的關(guān)系風(fēng)濕病的概念風(fēng)濕病是以皮膚、關(guān)節(jié)、血管及多系統(tǒng)損害為主或伴免疫功能異常的一類疾病。風(fēng)濕病的發(fā)生多與自身免疫異常有關(guān)。風(fēng)濕病為內(nèi)科的一類疑難雜癥，風(fēng)濕病的相關(guān)學(xué)科：腎內(nèi)科，皮膚科，呼吸科，血液科，骨科，消化科……促使風(fēng)濕科的形成

第7頁,共41頁，2024年2月25日，星期天

自身抗體的概念

(conceptionofautoantibodies)

由各種原因造成的機(jī)體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生針對自身組織、細(xì)胞及其成分的抗體，稱為自身抗體。自身抗體可以是生理性的，也可以是病理性的。正常人群中生理性的自身抗體的存在相當(dāng)普遍，其作用之一就是凈化體內(nèi)衰老及死亡的細(xì)胞。

生理性的自身抗體往往滴度很低，與相應(yīng)抗原的親和力弱，大多為IgM型，且受免疫抑制功能控制，含量低，一般不造成病理性的損害。

病理性的自身抗體滴度高，與相應(yīng)抗原的親和力強(qiáng)，大多為IgG型，體內(nèi)含量高，往往造成病理性的損害。第8頁,共41頁，2024年2月25日，星期天

自身抗體檢測的臨床意義

自身免疫性疾病患者中，有相當(dāng)一部份病人的血清或其它體液中可檢測到一種或多種高效價的自身抗體。自身抗體是自身免疫性疾病的重要標(biāo)志，每種疾病都伴有特征性的自身抗體譜。自身抗體的檢測能為自身免疫性疾病的診斷提供非常有價傎的依據(jù)。臨床疾病診斷、鑒別診斷----疾病標(biāo)記性抗體或特異性抗體。判斷疾病的活動性及預(yù)后，觀察療效，指導(dǎo)臨床治療。進(jìn)一步研究和闡明自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制。第9頁,共41頁，2024年2月25日，星期天國內(nèi)現(xiàn)狀自身抗體的測定不普遍欠規(guī)范對其意義了解尚少缺乏研究第10頁,共41頁，2024年2月25日，星期天

自身抗體種類繁多常見自身抗體：抗核抗體譜(ANAS)檢測抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測類風(fēng)濕因子和抗CCP抗體自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體檢測第11頁,共41頁，2024年2月25日，星期天常見的與自身抗體關(guān)系較大的風(fēng)濕病結(jié)締組織?。侯愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎RA

系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE

硬皮病SD

皮肌炎PM、DM

干燥綜合征SS

混合性結(jié)締組織病MCTD

血管炎AS第12頁,共41頁，2024年2月25日，星期天抗核抗體譜檢測抗核抗體(ANA)概念A(yù)NA：指抗細(xì)胞核成分（DNA，RNA，蛋白質(zhì)和酶）的抗體。ANA存在一個譜ANA新概念：抗核酸（Nucleicacid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗體的總稱。對ANA的理解已不再局限于核成分,它指的是抗細(xì)胞內(nèi)所有成分的自身抗體的總稱。靶抗原分布:細(xì)胞核--細(xì)胞核,細(xì)胞漿,細(xì)胞骨架,細(xì)胞分裂周期。第13頁,共41頁，2024年2月25日，星期天抗核抗體的分類1.抗DNA抗體抗雙鏈DNA(dsDNA)抗體抗單鏈DNA(ssDNA)抗體2.抗組蛋白抗體3.抗非組蛋白抗體

抗可溶性核抗原(ENA)抗體：Sm、U1RNPrRNP、SSA、SSB、Scl70、Jo-1、pM-1、PCNA、RANA、Ku、Mi-1、-2抗體、DNP抗體等。

抗著絲點抗體(ACA)4.抗核仁抗體:

抗5rRNA、核小體、U3nRNP、Nor-90抗體。5.抗其它細(xì)胞成分:

線粒體、中心體等。抗核抗體第14頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA分類根據(jù)細(xì)胞內(nèi)靶抗原的理化特性和分布：抗DNA（dsDNA,ssDNA)抗組蛋白（Histone)抗非組蛋白（抗可溶性核抗原抗體anti-extractablenuclearantigenantibodies,ENA和抗著絲點抗體ACA）抗核仁（Nucleolus）第15頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA的檢測通過兩級實驗完成

IIF法檢測總ANA-----”水平1測定”篩選實驗

dsDNA、抗ENA抗體------“水平2測定”特異性實驗對實驗結(jié)果進(jìn)一步確認(rèn)許多抗原不易純化，且許多抗體確切抗原至今未知，實際上只有一部份的ANA能進(jìn)行進(jìn)一步的特異性檢測，單獨的“水平2測定”將會漏掉某些ANA，故應(yīng)同時進(jìn)行“水平1測定”。第16頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA的篩選：間接免疫熒光法++抗原抗體（血清）抗原—抗體第二抗體第17頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA的篩選：間接免疫熒光法第18頁,共41頁，2024年2月25日，星期天熒光顯微鏡下ANA的染色型別均質(zhì)型：與抗組蛋白和抗DNA有關(guān)顆粒（斑點）型：與抗ENA有關(guān)周邊型：與抗dsDNA有關(guān)核仁型：4-6sRNA著絲點型：在SD及CREST中出現(xiàn)但大部份還須作進(jìn)一步的實驗來驗證確定是哪一種特異性抗體，哪一種自身免疫性疾病的可能性較大第19頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA：均質(zhì)型EUROIMMUN抗核抗體第20頁,共41頁，2024年2月25日，星期天小結(jié)ANA是診斷彌漫性結(jié)締組織病的重要依據(jù)。各種抗原在其分子量、結(jié)構(gòu)、功能上有所不同?？乖珼NA的轉(zhuǎn)錄、拼接、復(fù)制、翻譯等作用有關(guān)。研究ANA有利于對結(jié)締組織病發(fā)病機(jī)理的了解ANA滴度不一定與疾病活動性相平行，正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、腫瘤也可陽性第21頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA在各種自身免疫性疾病中的陽性率

自身免疫性疾病

ANA陽性率

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)

活動期95%-100%

非活動期80%-100%

藥物誘導(dǎo)性紅斑狼瘡(DLE)100%

混合結(jié)締組織病(MCTD)100%

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)20%-40%

進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥(PSS)85%-95%

多發(fā)性肌炎及皮肌炎(PM/DM)30%-50%

干燥綜合癥(SS)70%-80%

慢性活動性肝炎(CAH)30%-40%

潰瘍性結(jié)腸炎(UC)26%第22頁,共41頁，2024年2月25日，星期天抗可溶性核抗原(ENA)抗體檢測

抗雙鏈ＤＮＡ檢測（抗dsDNA）抗可溶性核抗原(ENA)抗體：Sm、U1RNP

、SSA、SSB、Scl－70、

Jo-1、rRNP、pM-1、PCNA、RANA、Ku、Mi-1、-2抗體、DNP抗體等第23頁,共41頁，2024年2月25日，星期天幾種ENA的由來及同義詞Sm：病人名：SmithRNP:u1RNP或nRNPNuclearRibonucleoproteinSSA:ROSjogren’ssyndromeASSB:La,Ha,Sjogren’ssyndromeBJo-1:病人JohnScL-70:Scleroderma第24頁,共41頁，2024年2月25日，星期天小結(jié)抗Sm:是SLE標(biāo)記抗體，幫助前瞻性和回顧性診斷。對早期、不典型的SLE診斷意義大。經(jīng)治療緩解后SLE回顧性診斷?？箄1RNP(nRNP)

在多種結(jié)締組織病中存在，高效價的抗u1RNP抗體，且無其它特異性的ANA，是診斷混合結(jié)締組織病的重要血清學(xué)依據(jù)。nRNP抗原與rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核內(nèi)，而rRNP是主要在胞漿內(nèi)的磷酸蛋白，抗rRNP抗體與SLE有關(guān)，尤其有精神神經(jīng)癥狀的SLE陽性率較高。第25頁,共41頁，2024年2月25日，星期天小結(jié)

抗SSA和抗SSB常見于干燥綜合征（Sjogren’sSyndrome，SS）也見于SLE

，兩者同時出現(xiàn)

與干燥綜合征相關(guān)性大。有研究發(fā)現(xiàn)SSA可造成新生兒狼瘡和先天性心臟傳導(dǎo)阻滯

抗ScL-70:硬皮病SD的標(biāo)記抗體但特異性不高

抗著絲點抗體（ACA，Centromere）與雷諾現(xiàn)象和CREST綜合征有關(guān)，但并非CREST綜合征(Calcinosis,Raynaud’sphenomena,EsophagealDysmotility,Telangiectasia)的標(biāo)記抗體，在干燥綜合征，某些慢性肝病中亦可陽性第26頁,共41頁，2024年2月25日，星期天抗Jo-1是PM/DM的標(biāo)記抗體但特異性不高，抗Jo-1陽性的肌炎患者，伴關(guān)節(jié)炎、“技工手”、雷諾癥、肺間質(zhì)變等稱合成酶抗體綜合征?？菇M蛋白抗體與多種結(jié)締組織病

有關(guān)，有助于藥物性狼瘡的診斷

抗核仁型抗體常與SD有關(guān)小結(jié)第27頁,共41頁，2024年2月25日，星期天

抗雙鏈DNA抗體臨床意義為系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)血清學(xué)特異性抗體，SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。SLE患者中陽性率為30-40%左右?？贵w滴度的變化與SLE疾病活動程度相關(guān)，可用于SLE疾病活動期判斷和藥物療效觀察。陽性的病人90%以上處在疾病的活動期。參與SLE發(fā)病機(jī)理：介導(dǎo)的免疫復(fù)合物病---狼瘡腎炎所致的血管炎---典型的喋形紅斑非SLE和正常人抗ds-DNA多為陰性，有時其它結(jié)締組織病患者可為陽性，如SS、DIL、MCTD，但陽性率低，含量也低，而且此類病人一般是SLE重疊綜合征。抗ss-DNA

可存在多種自身免疫性疾病中，也可存在于一些非自身免疫性疾病中，對疾病診斷缺乏特異性，臨床上實用價傎不大。第28頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANA檢測的意義有助于疾病的診斷，如抗Sm是SLE標(biāo)記抗體；抗ScL-70是SD的標(biāo)記抗體，抗Jo-1是PM/DM的標(biāo)記抗體觀察疾病活動度和治療反應(yīng)，如抗dsDNA研究發(fā)病機(jī)理第29頁,共41頁，2024年2月25日，星期天類風(fēng)濕因子

如何評價類風(fēng)濕因子是診斷RA的標(biāo)準(zhǔn)之一，不是唯一標(biāo)準(zhǔn)，并非RA特有作為血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)正常人2%陽性，老年人可達(dá)5%陽性RF與其他蛋白、半抗原有交叉反應(yīng)多種結(jié)締組織?。⊿LE，SD，SS，PM/DM）感染疾病（SBE，TB，hepatitis）,肝硬化，彌漫性肺纖維化，結(jié)節(jié)病等均可陽性病后半年才產(chǎn)生，有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)者，滴度高。持續(xù)高滴度RF預(yù)示疾病嚴(yán)重，預(yù)后差第30頁,共41頁，2024年2月25日，星期天多種自身抗體聯(lián)合檢測提高RA診斷準(zhǔn)確性抗核周因子-(APF)抗角蛋白抗體-（AKA）抗

Sa抗

體抗RA33/36抗體抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)抗體：對RA診斷高度敏感和特異，對RA的早期診斷和預(yù)后評估都很有意義第31頁,共41頁，2024年2月25日，星期天抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)抗體

1998年證實抗filaggrin相關(guān)抗體識別的主要抗原決定簇成分是瓜氨酸2000年合成環(huán)瓜氨酸肽（CCP），并將抗CCP抗體用于RA檢測ELISA法檢測對RA診斷高度敏感和特異陽性者骨破壞較陰性者嚴(yán)重對RA的早期診斷和預(yù)后評估都很有意義第32頁,共41頁，2024年2月25日，星期天抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體ANCA

antineutrophilcytoplasmicantibodies

ANCA代表一族抗中性粒細(xì)胞胞漿成分的抗體譜。靶抗原：中性蛋白酶3（PR3），髓過氧化物酶（MPO），殺菌/通透性增高蛋白（BPI），絲氨酸蛋白酶，人白細(xì)胞彈性蛋白酶（HLE），乳鐵蛋白（LF），組織蛋白酶G，β葡萄糖醛酸酶，溶菌酶。根據(jù)ANCA檢測出的熒光染色模型可分為：胞漿型ANCA－C－ANCA，主要靶抗原為PR3核周型ANCA－P－ANCA，主要靶抗原為MPO

第33頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANCA對系統(tǒng)性血管炎的診斷意義系統(tǒng)性血管炎（SystemicVasculitis）是一組以血管的炎癥與壞死為主要病理改變的炎性疾病。臨床表現(xiàn)因受累血管的類型、大小、部位及病理特點不同而表現(xiàn)各異。其常累及全身多個系統(tǒng)，引起多系統(tǒng)多臟器功能障礙，但也可局限于某一臟器。系統(tǒng)性血管炎常累及的部位為皮膚、腎臟、肺、神經(jīng)系統(tǒng)等。本組疾病臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，變化多端，大多數(shù)屬疑難雜癥。第34頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANCA相關(guān)血管炎韋格納肉芽腫（Wegener‘sgranulomatosis，WG）－主要出現(xiàn)cANCA，有診斷意義變應(yīng)性肉芽腫性血管炎（Churg-Strausssyndrome，CSS）－出現(xiàn)cANCA

和pANCA顯微鏡下多血管炎(microscopicpolyangiitis)－出現(xiàn)cANCA

和pANCA特發(fā)性壞死性新月體腎小球腎炎－主要出現(xiàn)

pANCA第35頁,共41頁，2024年2月25日，星期天ANCAPR3-ANCA和MPO-ANCA只能在幾種系統(tǒng)性血管炎檢出，包括三種小血管炎和腎血管炎：特發(fā)性壞死性新月體腎小球腎炎。對于這些疾病，ANCA的敏感性波動于50%～90%。一項