血型鑒定交叉配血中若干

關(guān)于血型鑒定交叉配血中若干衛(wèi)生部規(guī)定血型“正反“鑒定Rh“Ｄ”鑒定交叉配血能檢測出部分不完全抗體血型不規(guī)則抗體篩查試驗和定性鑒定標(biāo)本保存７天以上資料保存１０年第2頁,共44頁，2024年2月25日，星期天基礎(chǔ)概念抗原－是能與特異性抗體或免疫細(xì)胞在體內(nèi)、外發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)，并常?？梢鹛禺愋悦庖邞?yīng)答?？贵w－是指體內(nèi)免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，為對某種抗原引起反應(yīng)所形成，且能與該抗原或相近的抗原發(fā)生特異性反應(yīng)。不完全抗體－在生理鹽水中與相應(yīng)的紅細(xì)胞不產(chǎn)生可見反應(yīng)(不凝集),需通過其它介質(zhì)(膠體、酶、抗人球蛋白血清等）才能出現(xiàn)可見的抗體。不規(guī)則抗體是指抗A和抗B以外的血型抗體第3頁,共44頁，2024年2月25日，星期天基礎(chǔ)概念血型－早期僅指存在于紅細(xì)胞上表面抗原的差異，現(xiàn)在包刮白細(xì)胞、血小板表面抗原的差異。血型－可分ABO、RH、MNSs等血型系統(tǒng)，共有２9系統(tǒng)．共有400多種抗原。ＡＢＯ亞型：指雖然屬同一血型抗原，但結(jié)構(gòu)和性能上有一定差異．ＡＢＯ血型抗體：IgGIgMIgAIgDIgE天然IgM免疫IgG前兩者最多見。第4頁,共44頁，2024年2月25日，星期天基礎(chǔ)概念A(yù)BO血型系統(tǒng)：1900年卡爾蘭德斯坦那發(fā)現(xiàn)根據(jù)紅細(xì)胞上是否有A和B抗原將人類分四種血型。

A型：紅細(xì)胞含有A抗原，血清（漿）中有B抗體。B型：紅細(xì)胞含有B抗原，血清（漿）中有A抗體。AB型：紅細(xì)胞含有A、B抗原，血清（漿）中無AB抗體。O型：紅細(xì)胞上無A、B抗原，血清（漿）中有A、B抗體。第5頁,共44頁，2024年2月25日，星期天基礎(chǔ)概念血型物質(zhì)：每個人專有的血型抗原物質(zhì)。主要存在于紅細(xì)胞，廣泛存在于其他組織和體液中。兩種形式醇溶性水溶性意義鑒定血型鑒定抗體性質(zhì)可測臟器和組織血型

第6頁,共44頁，2024年2月25日，星期天

嘉興市第一醫(yī)院

（嘉興醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院）臨床輸血申請單

No：000000預(yù)定輸血日期：

年

月

日

時

肯定輸血

手術(shù)備用

酌情備用受血者姓名：

性別：（男/女）年齡：

病案號：

科別：

病區(qū)：

床號：

臨床診斷：

輸血目的：

繼往輸血史（有/無）孕

產(chǎn)

受血者屬地：（本市/外埠）

預(yù)定輸血成分（類型）：

預(yù)定輸血量：

受血者：ABO血型：

Rh(D)血型：

血紅蛋白：

，HCT：

，血小板：

ALT：

U/L，HBsAg：

，Anti-HCV：

Anti-HIV1/2：

，梅毒：

申請醫(yī)師簽名：

主治醫(yī)師審核簽名：

申請日期：

上/下午

時采血者簽名：

收樣本者（血庫）簽名：

注：請醫(yī)師逐項認(rèn)真準(zhǔn)確填寫，請于輸血日前送輸血科/血庫。

受血者姓名：

受血者姓名：

No：000000病案號：

病區(qū)：

床號

病案號：

病區(qū)：

床號：

血型：

No：000000血液類型：

申請量：

第7頁,共44頁，2024年2月25日，星期天ＡＢＯ血型鑒定衛(wèi)生部《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》規(guī)定：正反鑒定標(biāo)準(zhǔn)抗血清、標(biāo)準(zhǔn)血球、必須符合國家標(biāo)準(zhǔn)正鑒定-用已知標(biāo)準(zhǔn)ＡＢ抗血清定血球反鑒定-用已知標(biāo)準(zhǔn)ＡＢＯ血球定血漿或血清手工試管法（具體操作見操作規(guī)程)操作要點:取兩支小試管，各加被檢者2-5%紅細(xì)胞懸液200微升+分別用抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清在不同的管子中加2滴，用離心1000-1500轉(zhuǎn)/分，3分鐘后，在顯微鏡下看結(jié)果。

第8頁,共44頁，2024年2月25日，星期天ＡＢＯ血型鑒定卡式微量凝膠法(具體操作見操作規(guī)程)

操作要點：被檢者1%紅細(xì)胞懸液，前四孔加50微升，后兩孔加血漿50微升，(前2孔是正定型，第3孔是D，第4孔是對照，第5、6是反定型）放專用的離心機(jī)離心5分鐘，沉底部的是陰性，在上層或中層算陽性。注意觀察：1、正反結(jié)果是否一致，2、D孔紅細(xì)胞是否沉降，在上層或中層結(jié)果是陽性,紅細(xì)胞沉底部陰性者（需進(jìn)一步用手工法，單克隆抗D試劑確定，操作方法：2-3%紅細(xì)胞懸液+2滴單克隆抗D試劑，放置37℃水域15分鐘，用1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘，在顯微鏡下看結(jié)果，凝集為陽性，無凝集為陰性。）

第9頁,共44頁，2024年2月25日，星期天ＡＢＯ血型鑒定及影響因素凝膠微柱法專用儀器試劑標(biāo)準(zhǔn)化微機(jī)化質(zhì)量控制正反定型結(jié)果不一致技術(shù)失誤假陰性假陽性血清問題被檢者紅細(xì)胞問題免球致敏遺傳或獲得性表面異常多凝集第10頁,共44頁，2024年2月25日，星期天血型鑒定影響因素

異常基因亞型中弱抗原近期輸血呈混合外觀凝集嵌和體血型疾病因素導(dǎo)致抗原減弱白血病MDS血型特異物質(zhì)過高卵巢囊腫血型物質(zhì)高獲得性B

由革蘭陰性桿菌的作用紅C有類B多凝集、全凝集細(xì)菌感染

第11頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第12頁,共44頁，2024年2月25日，星期天血型鑒定影響因素血漿置換異常血漿蛋白不規(guī)則抗體存在低丙種球蛋白血癥不凝集弱凝集藥物等因素右旋糖酐激素青霉素年齡因素第13頁,共44頁，2024年2月25日，星期天ＡＢＯ血型鑒定正反定性不一致的解決辦法：重復(fù)試驗洗滌被測紅細(xì)胞換試劑或方法測用相關(guān)亞型試劑相關(guān)試驗加以鑒別吸收試驗放散試驗第14頁,共44頁，2024年2月25日，星期天Ｒh血型鑒定衛(wèi)生部要求：鑒定ＲhＤ陰陽性試管法抗Ｄ血清２滴＋被檢2-3％紅細(xì)胞懸液２滴混勻1500轉(zhuǎn)/分離心2分鐘凝集為陽性。陰性：要求37℃水浴15分鐘，離心檢測?？ㄊ侥z微柱弱D者：受血者劃定Ｒh陰性，供血者劃定Ｒh陽性。第15頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第16頁,共44頁，2024年2月25日，星期天抗人球蛋白試驗測定:不完全抗體卡式凝膠微柱法又分為間接法測患者血清中不完全抗體直接法測患者紅細(xì)胞上有無不完全抗體配受檢者1%紅細(xì)胞懸液，取50微升，加入到抗人球打蛋白卡中，放專用離心5分鐘，紅細(xì)胞在上層或中層是陽性。第17頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第18頁,共44頁，2024年2月25日，星期天不規(guī)則抗體篩查試驗和性質(zhì)鑒定200年，衛(wèi)生部《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》第十七條規(guī)定：交叉配血不合時，對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者。不規(guī)則抗體篩查試驗123標(biāo)準(zhǔn)抗原血型抗體性質(zhì)鑒定標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞譜1-10測定:是指抗A和抗B以外的血型抗體(完全抗體與不完全抗體)第19頁,共44頁，2024年2月25日，星期天血型不規(guī)則抗體的檢測卡式微量凝膠法（具體操作規(guī)程見操作卡）操作要點：取被檢者血清（血漿）每孔加50微升（共三孔），+標(biāo)準(zhǔn)不規(guī)則抗體篩查約1%紅細(xì)胞懸液50微升，放置專用37℃箱15分鐘，取出放專用離心機(jī)，離心5分鐘，紅細(xì)胞沉底部為陰性，在上層或中層是陽性。第20頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第21頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第22頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第23頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第24頁,共44頁，2024年2月25日，星期天交叉配血試驗受血者血清與供血者血球主側(cè)受血者血球與供血者血清次側(cè)卡式凝膠微柱法（抗球蛋白卡交叉配血卡）操作要點：血標(biāo)本離心3000轉(zhuǎn)/分，5分鐘，配檢者和供血者0.5-1%的紅細(xì)胞懸液，主孔（側(cè)）加受血者血漿（血清）50微升與加供血者血球50微升，次側(cè)（孔）加受血者血球50微升與供血者血漿（血清）50微升，放37℃專用箱15分鐘，取出，用專用離心機(jī)離心5分鐘，觀察結(jié)果：紅細(xì)胞在上層或中層為凝集（陽性），紅細(xì)胞兩孔紅細(xì)胞均沉底部為陰性，表示：供受者相容相合。第25頁,共44頁，2024年2月25日，星期天注意在交叉配血中，如發(fā)現(xiàn)某孔弱凝集（凝膠層中有拖帶），必需復(fù)檢，（包刮：供、受兩者血型鑒定，原方法、凝聚胺交叉配血法、）。確認(rèn)安全，才可發(fā)出。如，在卡式交叉配血中出現(xiàn)，次側(cè)不合，首先復(fù)檢受、供血者的血型，ABO和RHD血型相同，應(yīng)加做抗人球蛋白試驗，如患者陽性，與臨床聯(lián)系，說明，患者血球上有不完全抗體，建議臨床改輸洗滌紅細(xì)胞，并馬上向市血站約出洗滌紅細(xì)胞。如出現(xiàn)正反鑒定不一致，必須重新鑒定，并用手工試管法進(jìn)行正反血型鑒定，以試管法為準(zhǔn)，如仍然不一致，馬上反饋給主任處理。第26頁,共44頁，2024年2月25日，星期天交叉配血注意點標(biāo)本是關(guān)鍵核對采集操作規(guī)范決不放過疑點弱凝集溶血現(xiàn)象輸血基本原則：ABO、Rh“Ｄ”血型相同，配血相合可輸

標(biāo)本保存7天以上第27頁,共44頁，2024年2月25日，星期天例如卡式凝膠微柱法（博迅）第28頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第29頁,共44頁，2024年2月25日，星期天第30頁,共44頁，2024年2月25日，星期天凝聚胺原理紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，以避免其產(chǎn)生自發(fā)性聚集，當(dāng)紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)時，陽離子會被紅細(xì)胞的負(fù)電荷所吸引，此時紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞，而形成Zeta電位，Zeta電位決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。凝聚胺技術(shù)首先利用底離子溶液（LIM），降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云，以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清（血漿）中的抗體結(jié)合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一種高價陽離子多聚物，肝素中和劑，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞Zeta電位降低，縮短紅細(xì)胞之間的距離，使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。最后，加入懸浮液（Resuspending），Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）陽離子的作用，使正常的紅細(xì)胞非特異性凝聚散開，試驗結(jié)果為陰性，但如果紅細(xì)胞被應(yīng)的抗體致敏，則會被凝聚胺凝結(jié)，凝集就不會散開，試驗結(jié)果為陽性。第31頁,共44頁，2024年2月25日，星期天凝聚胺法1、取3支試管分別標(biāo)記（主、次、混）2、5%紅細(xì)胞制備：取25ul樣本壓積紅細(xì)胞懸浮于500ul生理鹽水中。3、主側(cè)：受血者血漿2滴+5%供血者紅細(xì)胞1滴。4、次側(cè)：供血者血漿2滴+5%受血者紅細(xì)胞1滴。5、將主側(cè)管和次側(cè)管所加的所有成分都加入混合管中。6、主側(cè)管、次側(cè)管、混合管中各加入低離子介質(zhì)溶液600ul,混合均勻，室溫放置1分鐘。7、再分別向3管中加入凝聚胺溶液2滴混合均勻，室溫放置15秒鐘。8、置離心機(jī)內(nèi)3400rpm/15秒，倒去上清液，使管底保留約0.1ml的液體。9、目測管內(nèi)有無紅細(xì)胞凝集塊，若沒有凝塊，則必須重做。10、向紅細(xì)胞已發(fā)生凝集的試管內(nèi)加入2滴復(fù)懸液，輕輕混勻，顯微鏡下觀察結(jié)果（紅細(xì)胞凝塊散開為陰性反應(yīng)，示血交叉配型相合；若紅細(xì)胞仍凝集成塊為陽性反應(yīng)，示血交叉配型不合。第32頁,共44頁，2024年2月25日，星期天可引起血清學(xué)問題的一些臨床疾病

DAT陽性類風(fēng)關(guān)多凝集現(xiàn)象細(xì)菌感染A/B抗原表達(dá)減弱白血病ABO異常卵巢囊腫獲得性B抗原細(xì)菌感染、結(jié)腸癌、腸梗阻Kell血型系統(tǒng)抗原抑制慢性肉芽腫病溶血PNH、紅細(xì)胞酶缺乏、過度加熱溫性自身抗體癌、HLE冷性自身抗體冷凝集素疾病、淋巴瘤、梅毒、病毒感染第33頁,共44頁，2024年2月25日，星期天可引起血清學(xué)問題的一些臨床疾病串錢狀凝集多發(fā)性骨髓瘤ABO同種抗體缺乏或減弱低（無）丙種球蛋白血癥免疫性ABO抗體新生兒、妊辰自身（同種）抗N血液透析病人

HLA抗體經(jīng)產(chǎn)婦、移植病人、多次輸血者ABO同種抗體的缺乏或減弱<3歲新生兒

﹥70歲老年人第34頁,共44頁，2024年2月25日，星期天藥物的使用與血型血清學(xué)疑難問題

假凝集血漿擴(kuò)張劑串錢狀凝集右旋糖酐混合外觀紅細(xì)胞輸異型紅細(xì)胞、骨髓（最近或過去）獲得額外抗原同上DAT陽性輸注/注射免疫球蛋白意外的同種抗體輸注含同種抗體的血漿、

輸注過免疫球蛋白

以往輸紅細(xì)胞免疫意外的ABO同種抗體輸注冷沉淀、

因子Ⅷ濃縮劑、血小板第35頁,共44頁，2024年2月25日，星期天血漿發(fā)血漿注意1、無血型的，必須進(jìn)行正反血型鑒定并且需復(fù)檢血型確認(rèn)。同型發(fā)血漿。2、患者紅細(xì)胞上有不完全抗體存在，一般情況下，不發(fā)血漿。如患者確實需要血漿，需用凝聚胺交叉配血后，相合、相容可發(fā)。3、因市血站給我院是少漿血和血漿是1：1供給，故血漿緊缺，一般情況下，單要血漿，我們只能供給1-2包，除臨床說明患者病情危急，我們盡量滿足臨床。第36頁,共44頁，2024年2月25日，星期天血小板收到血小板輸血單，無血型的，必須進(jìn)行正反血型鑒定并且需復(fù)檢血型確認(rèn)。馬上向是血站要或預(yù)約好，并且在單子上注明，已約、幾月幾日。發(fā)機(jī)采血小板與血漿一樣，只要同型輸注。如手工血小板必須進(jìn)行交叉配血，相合、相容才可發(fā)血小板。第37頁,共44頁，2024年2月25日，星期天住院收費(fèi)程序選擇“住院病人信息管理系統(tǒng)”選擇“住院部工作系統(tǒng)” 用戶部門選擇“血庫”，用自己的帳號登陸選擇“醫(yī)技科室自己記帳”選擇“檢查治療記帳輸入”輸入病人的病區(qū)和床號，在“助記碼”一欄輸入要收費(fèi)的