生物化學(xué)檢驗的基本知識

關(guān)于生物化學(xué)檢驗的基本知識一、生物化學(xué)檢驗的概念以研究人在健康和疾病時體內(nèi)的生物化學(xué)過程為目的，為疾病的診斷、治療和預(yù)防提供信息的一門學(xué)科。第一章緒論應(yīng)用一定的分析方法，測定體液或組織的各種化學(xué)成分，第2頁,共43頁，2024年2月25日，星期天*20世紀(jì)50年代，自動化分析儀的問世，使分析的速度和數(shù)量大大地提高二、發(fā)展史*19世紀(jì)，用費林反應(yīng)測定尿糖來對糖尿病進行診斷*20世紀(jì)初，主要利用比色法和光度法對肌酐等血液和尿液成分進行分析。*20世紀(jì)中期，一些新的技術(shù)應(yīng)用于生化檢驗，如離心、層析、電泳、免疫分析技術(shù)等等。第3頁,共43頁，2024年2月25日，星期天離心機電泳儀層析儀光電比色計第4頁,共43頁，2024年2月25日，星期天全自動生化分析儀第5頁,共43頁，2024年2月25日，星期天*現(xiàn)代生物化學(xué)檢驗的特點1、檢測分析自動化2、試劑標(biāo)準(zhǔn)化和商品化3、質(zhì)量管理體系標(biāo)準(zhǔn)化4、ISO15189認可(醫(yī)學(xué)檢驗實驗室質(zhì)量和能力認可準(zhǔn)則）5、參與臨床診斷和治療*發(fā)展趨勢快速、微量、準(zhǔn)確分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用床邊檢測第6頁,共43頁，2024年2月25日，星期天三、研究內(nèi)容1、光譜分析技術(shù)2、電泳技術(shù)3、層析技術(shù)4、離心技術(shù)5、酶學(xué)分析技術(shù)6、儀器分析技術(shù)第7頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第二章臨床生化檢驗基本知識本章內(nèi)容概要：*申請方式與報告*質(zhì)量管理要素*實驗室信息管理系統(tǒng)第8頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)生化檢驗的申請方式與報告一、單項檢驗與組合檢驗1、單項檢驗——血糖測定、血清淀粉酶測定2、組合檢驗隨機組合——血糖測定+膽固醇測定+甘油固定組合——肝功能系列、腎功能系列、血脂系列、心肌酶譜系列等等三酯測定第9頁,共43頁，2024年2月25日，星期天二、報告單發(fā)放形式1、急診檢驗——小于2小時2、常規(guī)檢驗——3~4小時~2天3、特殊檢驗——一周或更長時間4、危急值報告危急值概念：

是指某些檢測結(jié)果出現(xiàn)了可能會危及患者生命的極限值報告形式：打電話立即報告第10頁,共43頁，2024年2月25日，星期天部分臨床生化危急值1、血鉀：<3mmol/L，>5.5mmol/L2、血糖：<2.5mmol/L，>15.0mmol/L3、血肌酐：>450umol/L第11頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)生化檢驗質(zhì)量管理要素一、生化檢驗流程醫(yī)生申請——患者準(zhǔn)備——標(biāo)本采集——標(biāo)本標(biāo)志——標(biāo)本運輸標(biāo)本處理——標(biāo)本檢測——報告單發(fā)放——標(biāo)本存儲與復(fù)檢——質(zhì)量信息反饋第12頁,共43頁，2024年2月25日，星期天一、生化檢驗流程醫(yī)生申請——患者準(zhǔn)備——標(biāo)本采集——標(biāo)本標(biāo)志——標(biāo)本運輸收檢檢驗前階段（差錯占60%）針對性敏感性和特異性報告時間經(jīng)濟負擔(dān)第13頁,共43頁，2024年2月25日，星期天一、生化檢驗流程醫(yī)生申請——患者準(zhǔn)備——標(biāo)本采集——標(biāo)本標(biāo)志——標(biāo)本運輸收檢檢驗前階段采血體位（一般原則坐位、特殊可臥位）飲食的影響（一般原則空腹）藥物的影響（一般原則停藥、說明用藥情況）避免劇烈運動（G、Alb、K+、ALT增加）采血時間（一般原則為上午、個別激素例外）第14頁,共43頁，2024年2月25日，星期天一、生化檢驗流程醫(yī)生申請——患者準(zhǔn)備——標(biāo)本采集——標(biāo)本標(biāo)志——標(biāo)本運輸收檢檢驗前階段防止溶血抗凝標(biāo)本避免凝血安靜、坐位（臥位）避免污染輸液時血液采集防腐保存第15頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第16頁,共43頁，2024年2月25日，星期天血液標(biāo)本的采集

血液標(biāo)本毛細血管血：手指或耳垂，用于需血量少的檢驗，也主

要用于兒童。靜脈血：是最常用的標(biāo)本，靜脈穿刺是最常用的采血方法動脈血：血氣分析多使用（Ｐ０２，ＰＣＯ２，pＨ）第17頁,共43頁，2024年2月25日，星期天真空采血法優(yōu)點:1、在完全封閉狀態(tài)下采血,避免血液外溢,有利運輸與保存。

2、標(biāo)準(zhǔn)真空采血管采用國際通用的頭蓋和標(biāo)簽顏色顯示采血管內(nèi)添加劑種類和試驗用途?？筛鶕?jù)需要選擇相應(yīng)的盛血試管。第18頁,共43頁，2024年2月25日，星期天２、注意事項（1）防止溶血（2）避免充血和血液濃縮（3）輸液時的血液采集（4）采血的體位（5）采血時避免注入空氣

（6）其他影響因素第19頁,共43頁，2024年2月25日，星期天（二）動脈采血法１、部位：肱動脈、股動脈、橈動脈都可以作為采血點，但多選擇肱動脈和橈動脈２、步驟：觸摸消毒固定針頭成90°角穿刺血液注入容器第20頁,共43頁，2024年2月25日，星期天生化檢驗常用抗凝劑：1、肝素：含有硫酸基團的粘多糖常用于血氣分析和部分生化項目的測定，使用1.0g／L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液2、氟化鈉+草酸鉀：常用于血糖測定，草酸鉀可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大，抗凝作用強。氟離子能結(jié)合鈣而抗凝，但抗凝效果較弱。氟離子可抑制糖酵解中的烯醇化酶，防止糖酵解。第21頁,共43頁，2024年2月25日，星期天防腐劑1、濃鹽酸——激素及代謝產(chǎn)物測定2、甲苯——生化項目測定3、冰醋酸——激素測定4、麝香草酚——電解質(zhì)等生化項目測定尿液標(biāo)本隨機新鮮尿定時尿24小時尿晨尿餐后2小時尿第22頁,共43頁，2024年2月25日，星期天一、生化檢驗流程醫(yī)生申請——患者準(zhǔn)備——標(biāo)本采集——標(biāo)本標(biāo)志——標(biāo)本運輸收檢

檢驗前階段唯一性室溫、冷藏、冷凍。不合格標(biāo)本拒收第23頁,共43頁，2024年2月25日，星期天不合格標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)1、患者信息不全3、抗凝不當(dāng)，標(biāo)本凝固2、標(biāo)簽不清或無標(biāo)識6、標(biāo)本量過少5、容器破損4、標(biāo)本溶血7、標(biāo)本容器使用錯誤第24頁,共43頁，2024年2月25日，星期天一、生化檢驗流程收檢——標(biāo)本處理——標(biāo)本檢測檢驗中階段不能及時分離的血液標(biāo)本：室溫或37℃水浴分離后來不及檢測標(biāo)本：4℃冰箱（LDH例外）第25頁,共43頁，2024年2月25日，星期天一、生化檢驗流程報告單發(fā)放——標(biāo)本存儲與復(fù)檢——質(zhì)量信息反饋檢驗后階段一般原則在2℃~8℃保存一周第26頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)實驗室信息管理系統(tǒng)一、實驗室信息管理系統(tǒng)（LIS）概述二、實驗室信息管理系統(tǒng)的完善與維護第27頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)實驗用純水一、純水的制備方法1、蒸餾法2、離子交換法3、電滲透法4、炭吸附法5、超濾膜法按蒸餾次數(shù)可分為一次、二次和多次蒸餾法。

6、混合純化系統(tǒng)第28頁,共43頁，2024年2月25日，星期天二、水的純度檢查1、電阻率2、可溶性硅檢驗3、細菌菌落計數(shù)三、實驗用純水標(biāo)準(zhǔn)及用途中國實驗室用水國家標(biāo)準(zhǔn)GB6682-2000CAP標(biāo)準(zhǔn)（美國臨床病理學(xué)會）NCCLS標(biāo)準(zhǔn)（美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會）第29頁,共43頁，2024年2月25日，星期天名

稱

一

級

二

級

三

級

PH值范圍（25℃）

---

-

--

5.0-7.5

電導(dǎo)率（25℃）,mS/m

≤

0.01

0.10

0.50

比電阻（MΩ.cm.25℃）≥

10

1

0.2

可氧化物質(zhì)[以（0）計]，mg/L

---

0.08

0.40

<吸光度（254nm,1cm光程）≤

0.001

0.01

----

蒸發(fā)殘渣（105±2℃），mg/L≤

-----

1.0

2.0

可溶性硅[以（sio2）計]，mg/L<

0.01

0.02

----

中國實驗室用水國家標(biāo)準(zhǔn)GB6682-2000第30頁,共43頁，2024年2月25日，星期天實驗用純水的應(yīng)用Ⅰ級：用于有嚴格要求的分析實驗，如酶活性測定、電解質(zhì)測定、液相色譜分析用水。Ⅱ級：用于一般實驗室定量分析、玻璃器皿洗滌。Ⅲ級：用于一般實驗室定性分析、玻璃器皿洗滌。第31頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第五節(jié)實驗室常用玻璃儀器的使用一、常用玻璃儀器的使用1、吸量管規(guī)格分類（完全流出式、不完全流出式）選擇原則使用方法注意事項2、自動加樣器分類（固定式、可調(diào)式）使用方法注意事項第32頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第33頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第34頁,共43頁，2024年2月25日，星期天注意事項吸量管保持垂直視線與液面應(yīng)保持水平盡量不使用管尖部分液體注意分辨“吹”與“不吹”使用方法左手持洗耳球，右手持吸管插入溶液1~2cm用洗耳球?qū)⒁后w吸至“0”刻度線以上用食指控制流速擦去管外余液控制液面至“0”刻度線控制流速至所需刻度余液放回試劑瓶第35頁,共43頁，2024年2月25日，星期天微量可調(diào)式移液器的使用第36頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第37頁,共43頁，2024年2月25日，星期天移液頭第38頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第39頁,共43頁，2024年2月25日，星期天第一檔第二檔第40頁,共43頁，2024年2月25日，星期天使用方法調(diào)節(jié)旋鈕至所需體積套上移液頭，旋緊按下大拇指至第一檔將移液頭插入溶液內(nèi)1~2mm，松開大拇指。排放時，將大拇指按下，至第一檔后，繼續(xù)至第二檔以排空按移液頭排放