腺病毒介導(dǎo)的突變型人胰島素原基因轉(zhuǎn)染人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的開題報(bào)告

腺病毒介導(dǎo)的突變型人胰島素原基因轉(zhuǎn)染人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的開題報(bào)告一、研究背景糖尿病是一種代謝性疾病，全球約有4.64億人受到其影響。胰島素的生成、分泌及調(diào)控與糖尿病的發(fā)生息息相關(guān)，胰島素基因的突變會(huì)導(dǎo)致胰島素的生產(chǎn)減少或缺乏，從而引起糖尿病的發(fā)生。同時(shí)，干細(xì)胞治療因其具有自我復(fù)制和分化為多種細(xì)胞類型的潛能而備受關(guān)注。因此，將病變胰島素基因?qū)敫杉?xì)胞中成為一種治療糖尿病的可能手段。二、研究目的本研究旨在探究腺病毒（Adenovirus）介導(dǎo)的突變型人胰島素原基因（MT-INS）轉(zhuǎn)染人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs）的可行性及其對(duì)hUC-MSCs增殖、分化和胰島素相關(guān)基因表達(dá)的影響。三、研究方法1.腺病毒載體構(gòu)建：將MT-INS基因插入腺病毒載體中，構(gòu)建MT-INS腺病毒載體。2.hUC-MSCs培養(yǎng)：獲得hUC-MSCs，并進(jìn)行鑒定和培養(yǎng)。3.轉(zhuǎn)染：將MT-INS腺病毒載體轉(zhuǎn)染至hUC-MSCs中，測(cè)定轉(zhuǎn)染效率。4.增殖和分化實(shí)驗(yàn)：采用MTT法測(cè)定hUC-MSCs的增殖情況，采用傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)測(cè)定hUC-MSCs的胰島素相關(guān)基因表達(dá)情況。四、研究意義本研究將有助于：1.探究MT-INS基因轉(zhuǎn)染hUC-MSCs的可行性。2.分析MT-INS基因?qū)UC-MSCs的增殖、分化和胰島素相關(guān)基因表達(dá)的影響。3.為糖尿病干細(xì)胞治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。五、研究難點(diǎn)1.構(gòu)建可靠的MT-INS腺病毒載體。2.確定合適的MT-INS轉(zhuǎn)染條件。3.分析MT-INS基因?qū)UC-MSCs增殖、分化和胰島素相關(guān)基因表達(dá)的影響。六、研究預(yù)期結(jié)果1.成功構(gòu)建MT-INS腺病毒載體。2.成功轉(zhuǎn)染hUC-MSCs，并測(cè)定到一定的轉(zhuǎn)染效率。3.MT-INS基因能夠促進(jìn)hUC-MSCs增殖和分化，并提高胰島素相關(guān)基因的表達(dá)水平。七、研究進(jìn)展及計(jì)劃安排目前正在進(jìn)行MT-INS腺病毒載體的構(gòu)建和hUC-MSCs的培養(yǎng)，計(jì)劃在下一步進(jìn)行轉(zhuǎn)染和實(shí)驗(yàn)。具體時(shí)間安排如下：時(shí)間節(jié)點(diǎn)|研究?jī)?nèi)容2021年6月-7月|MT-INS腺病毒載體構(gòu)建、hUC-MSCs培養(yǎng)2021年7月-8月|MT-INS基因轉(zhuǎn)染、增殖和分化實(shí)驗(yàn)2021年8月-9月|胰島素相關(guān)基因表達(dá)分析及結(jié)果整理2021年9月-10月|論文撰寫和答辯準(zhǔn)備八、研究人員及分工姓名|工作內(nèi)容張三|MT-INS腺病毒載體構(gòu)建、實(shí)驗(yàn)方案制定李四|hUC-MSCs培養(yǎng)