免疫缺陷動(dòng)物

免疫缺陷動(dòng)物免疫缺陷動(dòng)物第1頁免疫缺點(diǎn)動(dòng)物是指因?yàn)橄忍煨赃z傳突變或用人工方法造成一個(gè)或各種免疫系統(tǒng)組成成份缺點(diǎn)動(dòng)物，是一類帶有突變基因動(dòng)物。一、定義

免疫缺陷動(dòng)物第2頁二、分類免疫缺陷動(dòng)物第3頁三、裸小鼠免疫缺陷動(dòng)物第4頁

發(fā)覺與發(fā)展1962年英國(guó)格拉斯哥醫(yī)院Grist在非近交系小鼠中偶然發(fā)覺有個(gè)別小鼠無毛。1966年證實(shí)是因?yàn)榈?1對(duì)染色體基因突變所致。1968年P(guān)antelouris解剖發(fā)覺裸鼠失去了正常胸腺。1969年Rygaard首先將人結(jié)腸腺癌移植取得成功。

因?yàn)槁闶笤N抵抗力差，生育力低，壽命短，不能用于實(shí)際。和純系BALB/c，C3H，C57BL/6小鼠交配，不停選育，取得了三種近交系鼠新種。裸鼠自發(fā)覺以來，廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)、免疫學(xué)和病毒學(xué)等多個(gè)學(xué)科研究。免疫缺陷動(dòng)物第5頁生物學(xué)特征普通特點(diǎn)純合子突變裸鼠（nu/nu）主要表現(xiàn)為無毛以及胸腺缺點(diǎn)。雜合子小鼠（nu/+）各方面表現(xiàn)正常。體重小于同齡普通鼠，發(fā)育遲緩。必須養(yǎng)育在SPF環(huán)境中。繁殖方式：普通采取隱性純合子雄性與雜合子雌鼠交配（♂nu/nu×♀nu/+）。免疫缺陷動(dòng)物第6頁解剖生理特點(diǎn)胸腺殘留一些上皮樣細(xì)胞；淋巴組織胸腺依賴區(qū)淋巴細(xì)胞消失；外周血淋巴細(xì)胞降低。即使有原始T細(xì)胞，但缺乏成熟T細(xì)胞。T細(xì)胞輔助，抑制及殺傷功效不全。在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中無有絲分裂反應(yīng)，對(duì)刀豆素A或植物凝集素P亦無促分裂原應(yīng)答。無接觸敏感性，無移植排斥，無移植物抗宿主反應(yīng)。B細(xì)胞數(shù)量正常但功效有缺點(diǎn)，合成免疫球蛋白主要是IgM，只有少許IgG。粒細(xì)胞功效較低，NK細(xì)胞活性高。免疫缺陷動(dòng)物第7頁裸鼠應(yīng)用

1、腫瘤研究上應(yīng)用制作人類腫瘤移植瘤模型人類腫瘤移植于動(dòng)物歷史免疫排斥問題眼前房，腦內(nèi)，地鼠頰囊等免疫逃避部位免疫抑制劑、射線照射使用裸鼠作為人類腫瘤受體免疫缺陷動(dòng)物第8頁腫瘤移植瘤模型在腫瘤基礎(chǔ)研究中意義添加人為因子（致突變劑，癌基因，藥品等）觀察腫瘤病因及機(jī)理和治療。建立腫瘤細(xì)胞株，提供大量腫瘤組織供分析。腫瘤移植瘤模型在臨床腫瘤學(xué)中意義診療和預(yù)后。建立平行模型，明確診療和跟蹤預(yù)后。個(gè)體化療有效試驗(yàn)。對(duì)于晚期和復(fù)發(fā)腫瘤有主要意義。藥品有效標(biāo)準(zhǔn)。腫瘤不生長(zhǎng)；腫瘤生長(zhǎng)遲緩；腫瘤長(zhǎng)出后又消失；腫瘤無轉(zhuǎn)移；動(dòng)物壽命延長(zhǎng)。免疫缺陷動(dòng)物第9頁腫瘤移植瘤模型制作方法腫瘤組織塊或腫瘤細(xì)胞皮下移植腹腔內(nèi)或腎包膜下移植原位移植免疫缺陷動(dòng)物第10頁腫瘤組織惡性程度：惡性和轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)瘤成功率較高種類：細(xì)胞系成功率>活檢標(biāo)本起源：淋巴瘤、骨腫瘤等難獲成功部位：腫瘤塊外周部接種易成活裸鼠遺傳背景：胰腺癌接種BALB/c成功，NIH系則失敗性別：雌激素依賴性腫瘤接種雄鼠生長(zhǎng)慢鼠齡：4~6周齡動(dòng)物健康狀態(tài)影響移植瘤模型制作原因免疫缺陷動(dòng)物第11頁接種部位原位移植成功率高，移植腫瘤與人類原發(fā)瘤相同。有些腫瘤需要接種在特定部位（對(duì)雌激素依賴人乳腺癌MCF-7細(xì)胞系，接種乳腺脂肪墊才能活）。其它環(huán)境：細(xì)菌病毒能夠影響NK細(xì)胞活性；接種時(shí)間越早越好，注意無菌操作。免疫缺陷動(dòng)物第12頁2、放射治療試驗(yàn)中研究3、微生物學(xué)和免疫學(xué)方面應(yīng)用

4、在遺傳學(xué)上研究和應(yīng)用

5、醫(yī)學(xué)其它領(lǐng)域應(yīng)用寄生蟲感染動(dòng)物模型，美洲錐蟲，卡氏肺囊蟲；皮膚（魚鱗?。?；免疫缺點(diǎn)模型（麻風(fēng)，結(jié)核）。免疫缺陷動(dòng)物第13頁四、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺點(diǎn)小鼠

（SeverCombinedImmunodeficientMice,SCIDmice）免疫缺陷動(dòng)物第14頁1983年Bosma首次匯報(bào),起源于C.B-17小鼠。因?yàn)榈?6對(duì)染色體隱性基因突變，純合突變?cè)斐闪馨图?xì)胞抗原受體基因VDJ區(qū)域重排重組酶活性異常，基因重排時(shí)斷裂無法正常連接，從而影響B(tài)、T細(xì)胞正常功效分化。1988年我國(guó)醫(yī)科院動(dòng)物所從美國(guó)Jackson試驗(yàn)室引進(jìn)；1992年中山大學(xué)從澳大利亞引進(jìn)。

發(fā)覺與發(fā)展免疫缺陷動(dòng)物第15頁普通特點(diǎn)外觀體重與普通小鼠相同。繁殖特點(diǎn)純合子兄妹交配。必須養(yǎng)育在SPF環(huán)境中，平均壽命1年以上。對(duì)鼠肝炎，巴氏桿菌、卡氏肺囊蟲極易感染，感染后易發(fā)病死亡。生物學(xué)特征免疫缺陷動(dòng)物第16頁組織解剖學(xué)特點(diǎn)脾臟、胸腺、淋巴結(jié)體積低于普通小鼠30%。淋巴組織缺乏淋巴細(xì)胞。胸腺殘留上皮樣細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，脾臟沒有脾小體，白髓缺點(diǎn)，紅髓正常。淋巴結(jié)由網(wǎng)狀細(xì)胞組成。外周血白細(xì)胞總數(shù)降低，淋巴細(xì)胞占10～20%,非淋巴性造血細(xì)胞如粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞正常。NK、LAK細(xì)胞正常。免疫缺陷動(dòng)物第17頁免疫功效特點(diǎn)沒有T、B細(xì)胞陽性標(biāo)志細(xì)胞，對(duì)外來抗原無細(xì)胞和體液免疫。NK、LAK細(xì)胞功效正?；蛟龈?；肥大細(xì)胞因缺乏T細(xì)胞因子而分化受阻。約2~23%SCID小鼠在青年期T、B細(xì)胞功效能夠恢復(fù)，稱為滲漏（Leaky），此時(shí)仍帶有SCID基因，淋巴細(xì)胞不受影響而發(fā)育成熟，原因不明。能夠用血清學(xué)和組織學(xué)方法診療。免疫缺陷動(dòng)物第18頁SCID小鼠應(yīng)用免疫學(xué)

用于自然防御細(xì)胞如NK、LAK、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞，及免疫輔助細(xì)胞分化和功效研究，也能夠研究這些細(xì)胞與輸入B、T細(xì)胞、淋巴因子相互作用。組織移植

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