廣東省北京師范大學(xué)東莞石竹附屬學(xué)校2017-2018學(xué)年高二下學(xué)期4月測(cè)試生物試題

2017——2018學(xué)年度第二學(xué)期高二年級(jí)第一次月考考試生物試卷一、選擇題。（總分60分，每題2分）1.關(guān)于基因工程下列說(shuō)法正確的有（）①重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和載體②基因工程是在DNA上進(jìn)行的分子水平的設(shè)計(jì)施工③限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列④只要目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞就能成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)⑤所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列⑥限制酶只用于切割獲取目的基因⑦質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體A.2項(xiàng)B.3項(xiàng)C.4項(xiàng)D.5項(xiàng)2.下列關(guān)于cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的說(shuō)法中，正確的是（）A.同一物種的cDNA文庫(kù)只有1種B.某真核生物的cDNA文庫(kù)中的某基因一定比基因組文庫(kù)中的該基因短C.可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)D.只有cDNA文庫(kù)的基因可實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流3.用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是（）A.過(guò)程①需使用Taq聚合酶B.過(guò)程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C.過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D.過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否己導(dǎo)入受體細(xì)胞4.下圖為四種限制酶BamHⅠ，ECORⅠ，HindⅢ以及BglⅡ的識(shí)別序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)？其正確的末端互補(bǔ)序列是()A.BamHⅠ和ECORⅠ、末端互補(bǔ)序列－AATT－B.BamHⅠ和HindⅢ、末端互補(bǔ)序列－GATC－C.ECORⅠ和HindⅢ、末端互補(bǔ)序列－AATT－D.BamHⅠ和BglⅡ、末端互補(bǔ)序列－GATC－5.下圖是某質(zhì)粒示意圖，其中ori為質(zhì)粒復(fù)制所必需的核苷酸序列，amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示目的基因插入位點(diǎn)。受體大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)原來(lái)不含有這兩種抗生素抗性基因。下列有關(guān)敘述正確的是()A.amp和tet是一對(duì)等位基因，常作為基因工程的標(biāo)記基因B.ori是重組質(zhì)粒得以順利導(dǎo)入受體細(xì)胞所必需的C.將重組質(zhì)粒2、4導(dǎo)入不同大腸桿菌，大腸桿菌都不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上分裂生長(zhǎng)D.將重組質(zhì)粒1、3導(dǎo)入不同大腸桿菌，大腸桿菌都不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上分裂、生長(zhǎng)6.圖1為某種質(zhì)粒簡(jiǎn)圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRⅠB.如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有1個(gè)C.為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理D.一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)7.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述中，正確的是()A.科學(xué)家可以利用一些調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因來(lái)提高作物的抗病和抗干旱能力B.由于抗蟲(chóng)棉可以抵抗所有危害棉花植株的害蟲(chóng)，所以得到推廣C.科學(xué)家往往將必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胫参镏?，以提高農(nóng)作物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值D.引起植物生病的病原微生物主要是病毒8.據(jù)圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是()A.限制性內(nèi)切酶可以切斷a處，DNA連接酶可以連接a處B.DNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開(kāi)D.連接c處的酶可以為DNA連接酶9.下圖示“番茄—馬鈴薯”雜種植株的培育過(guò)程,其中①～⑤表示過(guò)程，字母表示細(xì)胞、組織或植株。下列說(shuō)法正確的是（）A.①過(guò)程需在低滲溶液中用相應(yīng)的酶處理B.e是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞C.可根據(jù)質(zhì)壁分離現(xiàn)象鑒別雜種細(xì)胞的細(xì)胞壁是否再生D.過(guò)程③完成的標(biāo)志是兩個(gè)細(xì)胞核完全融合10.以下為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖，其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞，所含有的染色體組分別是AA和BB。據(jù)圖分析不正確的是（）A.圖中①過(guò)程發(fā)生的化學(xué)變化是纖維素和果膠水解B.經(jīng)過(guò)②和③過(guò)程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型C.過(guò)程②一般使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑D.過(guò)程④產(chǎn)生的細(xì)胞是具有分生能力的薄壁細(xì)胞11．下圖是“白菜一甘藍(lán)”雜種植株的培育過(guò)程。下列說(shuō)法正確的是A.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)己經(jīng)能使雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀B.愈傷組織的代謝類型是自養(yǎng)需氧型C.上述過(guò)程中包含著有絲分裂，細(xì)胞分化和減數(shù)分裂等過(guò)程D.“白菜一甘藍(lán)”雜種植株產(chǎn)生的變異屬于染色體變異12．下圖表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是（）A.②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，不含有有機(jī)物B.③試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂C.調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官D.⑤植株根尖細(xì)胞的全能性比①植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)13．采用基因工程方法培育抗蟲(chóng)棉，下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是()①將毒素蛋白質(zhì)注射到棉花受精卵中；②將編碼毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中；③將編碼毒素蛋白質(zhì)的DNA序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞再進(jìn)行組織培養(yǎng)；④將編碼毒素蛋白質(zhì)的DNA序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的受精卵A.①② B.②③ C.③④ D.①④14．在下列過(guò)程中，需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是（）①利用秋水仙素處理萌發(fā)的四倍體小黑麥種子或幼苗獲得八倍體植株②利用紫草細(xì)胞獲得治療燙傷的紫草素③利用莖尖大量繁殖三倍體無(wú)子西瓜④利用細(xì)胞工程培養(yǎng)“番茄—馬鈴薯”雜種植株⑤培育轉(zhuǎn)基因“向日葵豆”植株A.①②③B.③④⑤C.①②④⑤D.②③④⑤15．花粉植株是體細(xì)胞遺傳研究和突變育種的理想材料。下面是培育四季柑桔(2N=18)花粉植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.花粉植株培育的原理是花粉粒細(xì)胞具有全能性，其技術(shù)是植物組織培養(yǎng)B.過(guò)程③是細(xì)胞再分化，其根本原因是基因選擇性表達(dá)C.四種培養(yǎng)基均屬于固體培養(yǎng)基，其中所含植物激素的種類和比例有差異D.觀察處于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖細(xì)胞，可觀察到18條染色體16．如圖為某種質(zhì)粒的簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，P為轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)部位。已知目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，受體細(xì)胞為無(wú)任何抗藥性的原核細(xì)胞。下列有關(guān)敘述正確的是()A.將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種B.DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來(lái)形成一個(gè)重組質(zhì)粒，該過(guò)程形成兩個(gè)磷酸二酯鍵C.為了防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自身環(huán)化，酶切時(shí)可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠD.能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的受體細(xì)胞表明該目的基因已成功導(dǎo)入該細(xì)胞17．下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示。據(jù)此回答不正確的是（）

脫分化

再分化

①——→②——→③——→④A①表示離體的植物器官、組織或細(xì)胞，它能被培養(yǎng)成為植株理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。B②表示愈傷組織，它與①相比分化程度低，全能性低。C若想制作人工種子，應(yīng)選用③。若利用此項(xiàng)技術(shù)制造治療燙傷、割傷的藥物紫草素，培養(yǎng)將進(jìn)行到②D若①是胡蘿卜根尖細(xì)胞，則培養(yǎng)成的④的葉片的顏色是綠色，這說(shuō)明根尖細(xì)胞含有與葉綠體形成相關(guān)的基因．18．一環(huán)狀DNA分子，設(shè)其長(zhǎng)度為1，已知某種限制性核酸內(nèi)切酶在該分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)，如圖中A、B、C三處。如果該DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會(huì)產(chǎn)生0.2、0.3、0.5三種不同長(zhǎng)度的DNA片段?，F(xiàn)有多個(gè)上述DNA分子，若在每個(gè)分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷；則從理論上講，經(jīng)該酶切后，這些DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的線狀DNA的種類數(shù)是

A.4B.6C.7D.819．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是A.cDNA文庫(kù)中的基因可以進(jìn)行物種間的基因交流B.轉(zhuǎn)基因棉花是否具抗蟲(chóng)特性可通過(guò)檢測(cè)棉花對(duì)某種害蟲(chóng)的抗性來(lái)確定C.外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的起始密碼和終止密碼之間才能進(jìn)行表達(dá)D.抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)基因可通過(guò)花粉傳遞至近緣作物，從而造成基因污染20.下圖為人工種子示意圖，下列與其培育生產(chǎn)過(guò)程有關(guān)的敘述中不正確的是A.人工種子一般用離體的植物細(xì)胞通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得B.胚狀體是由未分化的且有分裂能力的細(xì)胞構(gòu)成C.同一批次的人工種子一般具有相同的基因型D.胚狀體是由愈傷組織分化而成，離體細(xì)胞只有形成愈傷組織才能表現(xiàn)出全能性21．下列說(shuō)法正確的是()A．DNA連接酶可使目的基因與載體的黏性末端形成氫鍵，實(shí)現(xiàn)黏性末端的黏合，形成重組DNAB．限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)是DNA中磷酸和堿基之間的磷酸二酯鍵C．T4DNA連接酶既可以連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端又可以連接雙鏈DNA片段的平末端D．去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，便于植物雜交育種22．下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法錯(cuò)誤的有（）項(xiàng)①蛋白質(zhì)工程無(wú)需構(gòu)建基因表達(dá)載體②通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)有的仍是天然的蛋白質(zhì)③蛋白質(zhì)工程需要用到限制酶和DNA連接酶④蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上改造蛋白質(zhì)的1B.2C.3D.423.某種微生物合成的蛋白酶與人體消化液中的蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是其熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。現(xiàn)要將此酶開(kāi)發(fā)成一種片劑，臨床治療食物消化不良，最佳方案是()A．替換此酶中的少數(shù)氨基酸，以改善其功能B．將此酶與人蛋白酶進(jìn)行拼接，形成新的蛋白酶C．重新設(shè)計(jì)與創(chuàng)造一種蛋白酶D．減少此酶在片劑中的含量24．以下為形成cDNA過(guò)程和PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖。據(jù)圖分析，下列說(shuō)法正確的是（）A．催化①過(guò)程的酶是RNA聚合酶B．④過(guò)程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C．由于cDNA上不含啟動(dòng)子和終止子，所以cDNA文庫(kù)屬于部分基因文庫(kù)D．如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的40%，則一個(gè)雙鏈DNA中，A與U之和也占該DNA堿基含量的40%25．α1-抗胰蛋白酶缺乏癥是北美常見(jiàn)的一種單基因遺傳病，患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴(yán)重者甚至死亡。利用基因工程技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫眩罱K培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人α1-抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更容易獲得這種酶。下列關(guān)于該過(guò)程的敘述中錯(cuò)誤的是（）A.載體上綠色熒光蛋白基因（GFP）的作用是便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞B.將目的基因?qū)胙虬螂准?xì)胞中，將會(huì)更加容易得到α1-抗胰蛋白酶C.培養(yǎng)出的轉(zhuǎn)基因羊的所有細(xì)胞中都含有該目的基因，故該羊有性生殖產(chǎn)生的后代也都能產(chǎn)生α1-抗胰蛋白酶D.目的基因與載體重組過(guò)程需要DNA連接酶的催化作用26.下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是①利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因②從基因文庫(kù)中獲取目的基因③反轉(zhuǎn)錄法④通過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成目的基因A.①②③④B.①②③C.①③D.②③④27．下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，不正確的是（）A.①→②利用兩種不同限制酶處理，能避免抗蟲(chóng)基因的DNA片段自身環(huán)化B.②→③可用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中C.③→④用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，重組Ti質(zhì)粒整合到植物細(xì)胞的染色體上D.④→⑤用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，具有抗蟲(chóng)性狀的植株產(chǎn)生了可遺傳變異28．圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，amp表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是（）A.圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒C.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNAD.導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)29．下圖表示利用植物細(xì)胞工程對(duì)棉花進(jìn)行改良的過(guò)程，①②③④表示實(shí)驗(yàn)過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答，下列說(shuō)法正確的是A.外源基因能夠?qū)氩⒋罅繌?fù)制的物質(zhì)基礎(chǔ)是自然界共用一套密碼子B.②過(guò)程能定向改變?cè)|(zhì)體的遺傳特性C.③過(guò)程只能通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)技術(shù)才能實(shí)現(xiàn)D.基因工程技術(shù)與花藥離體培養(yǎng)技術(shù)相結(jié)合可快速獲得純合棉花植株30.如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖，以下敘述錯(cuò)誤的是（）A.②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種酶參與B.圖示此過(guò)程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)最好采用顯微注射法C.抗蟲(chóng)基因整合到受體細(xì)胞核DNA上需借助于Ti質(zhì)粒中的TDNAD.細(xì)胞④的染色體上含有抗蟲(chóng)基因，植株⑤也不一定會(huì)表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀二、填空題（總分40分，每題10分）31．（10分,每空1分）研究人員利用PCR技術(shù)擴(kuò)增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的轉(zhuǎn)基因酵母菌。請(qǐng)結(jié)合下圖回答：（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因原理_____________________。該過(guò)程與細(xì)胞中DNA復(fù)制過(guò)程相比，該過(guò)程不需要酶。③是在(填“酶的名稱”)作用下進(jìn)行延伸的。（2）左圖中引物為單鏈DNA片段，它是根據(jù)___________________的脫氧核苷酸序列合成的。從理論上推測(cè)，第2輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為_(kāi)_______。（3）右圖所示的基因表達(dá)載體中的URA3基因能編碼乳清苷5磷酸脫羧酶，該酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5磷酸脫羧酶，就無(wú)法生長(zhǎng)，除非在培養(yǎng)基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作為_(kāi)_________基因來(lái)篩選轉(zhuǎn)化成功的酵母菌，要選擇_______________的酵母菌作為受體細(xì)胞，所使用培養(yǎng)基___________（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。（4）奶酪生產(chǎn)中的凝乳酶是一種分泌蛋白。工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，________（能/否）選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞表達(dá)出凝乳酶？原因是______________________。32．（10分，每空1分）圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）基因工程的“四步曲”中，_________是基因工程的核心步驟，________的階段沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。（2）如圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由______連接．若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是______末端，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為_(kāi)___________________。（3）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從隱性純合子分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有__________種不同DNA片段。為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，需要通過(guò)__________技術(shù)擴(kuò)增目的基因，以獲得大量的目的基因。（4）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是__________。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含質(zhì)粒的大腸桿菌，一般先用添加__________的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng).（5）經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是______．33．（10分,每空1分）雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細(xì)胞因子，廣泛用于動(dòng)物領(lǐng)域的抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體，通過(guò)農(nóng)桿菌導(dǎo)入煙草，以獲得抗病毒煙草。下圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細(xì)胞的流程，①～④表示相關(guān)的操作，兩種限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是G↓AATTC和G↓GATCC，如表所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）步驟①中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，需要設(shè)計(jì)引物序列，科研人員還在兩種引物的一端分別加上了__________和___________序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種限制酶，選擇的原則是_________。A．Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)B．目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)C．酶切后，目的基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同D．酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列相同步驟②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有___________，其中啟動(dòng)子的作用是是_________識(shí)別和結(jié)合的部位。步驟③中需先用Ca2+處理農(nóng)桿菌，使其成為_(kāi)________細(xì)胞，以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞，這種介導(dǎo)方法叫_______?？蒲腥藛T提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后，先通過(guò)________獲得DNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增，若最終未能檢測(cè)出干擾素基因，其可能原因是___________。（4）治療中發(fā)現(xiàn)，用于口服的雞干擾素在胃中會(huì)受到一定程度的破壞影響其功效，需要利用_________技術(shù)加以改造，以達(dá)到滿意效果．34．（10分,每空1分）白菜、甘藍(lán)均為二倍體，體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18。“白菜一甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培肓出來(lái)的蔬菜新品種，它具有生長(zhǎng)期短、耐熱性強(qiáng)和易于儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。如圖是“白菜一甘藍(lán)”的雜交過(guò)程示意圖，回答以下問(wèn)題：（1）為了得到原生質(zhì)體需先用____