WS-T 834-2024 剛地弓形蟲試驗臨床應用

WSWS/T834—2024ClinicalapplicationoftestsforToxoplasmaWS/T834—2024I——將安全預防措施更改為生物安全（見4，2013年版的6年版的4.1），在直接鏡檢中增加了概述（見6.2.1.1）、體液標本（見6.2檢測指標（見6.3.2）和抗體檢測方法（見6.3.3），刪除了剛地弓形蟲IgG抗體檢測2013年版的4.2.4）和剛地弓形蟲IgE抗體方法的選擇中增加概述（見6.4.1）、初篩實驗室（見6.4.2）和確證實驗室7.2)、實驗室內結果可比性（見7.3）和實驗室加了概述（見8.1），將確定抗體狀況更改為特殊人群發(fā)生感染的風險評估（見8.2，見2013將新生兒感染的診斷更改為先天性感染的診斷（見8.5，見2013年——在附錄A中新增檢驗程序性能驗證（見A.2刪除了試驗選擇（見2013年版的A.2）、假陽性WS/T834—20241剛地弓形蟲試驗臨床應用GB/T38576人類血液樣本采集與GB/T38735人類尿液樣本采集與WS/T573感染性疾病免疫測定程序及結果報告WS/T661靜脈血液標本采集指南CNAS-CL02-A001醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則的應用CNAS-GL037臨床化學定量檢驗程序性能驗CNAS-GL038臨床免疫學定性檢驗程序性能驗3.1剛地弓形蟲Toxoplasmagondii3.2身有核細胞內,形成包囊后可長期寄生于中樞神經系統(tǒng)或橫紋肌內,免疫功能正常情況下可不出現(xiàn)明顯WS/T834—202423.3免疫功能低下者或缺陷者易發(fā)病，為機會性人4生物安全險較高的直接鏡檢和組織培養(yǎng)等操作過程中，存在感染相關人員的風險，應嚴格按照《醫(yī)學實驗室安通?？稍?20℃以下冷凍保存180天。凍存標本如需多次使用，能分裝的應分裝，避免多次凍融。不同5.2直接鏡檢標本和組織活檢標本（腦組織、淋巴結、肺組織、骨髓、肝臟組織、脾臟組織等）。骨髓標本應使用EDTA5.3組織培養(yǎng)標本5.4核酸檢測標本WS/T834—202435.5血清學檢測標本6.1概述6.2病原學檢查將染液覆蓋涂片、印片或是切片表面，染色1min～3min，滴加WS/T834—20244血清或體液中的循環(huán)抗原比特異性抗體出現(xiàn)早，是篩查病原體存在的重要依據，可使用ELISA雙抗附錄A。目前國內尚無通過國家藥品監(jiān)督管理局注冊的弓形蟲抗原檢測試劑盒。如果實驗室自行研制檢為確定是否感染，可應用分子生物學技術如聚合靈敏度起著至關重要的作用。目前國內尚無通過國家藥品監(jiān)督管理局注冊的弓形蟲PCR試劑盒為靶基因，引物和探針相結合使用不僅可提高檢測的特異性和靈敏度，而且無需進行PCR擴增后的產物6.3抗體檢測WS/T834—20245血清學檢測弓形蟲抗體是目前臨床實驗室診斷弓形蟲感染的主要方法。IgM、IgG、IgA、IgE和IgG親和力檢測均有助于弓形蟲感染和弓形蟲病的診斷，檢測方法主要包括ELISA、化學發(fā)光免疫分析及免IgM：感染后第1周即可在血清中檢測到，被認為是急性弓形蟲病早期敏感的診斷指標期感染。定量IgG抗體4倍以上滴度或濃度增高可提示近期活動親和力檢測是區(qū)分既往和近期感染的另一指標。高IgG親和力提示感染至少發(fā)生在3個月～5個月之前，CLIA是目前弓形蟲IgG和IgM抗體測定的主流方法，其精密度、靈敏度和特異性均高于ELISA，可以WS/T834—20246ICT可定性檢測弓形蟲IgG和IgM抗體。將特異性抗原固定于硝酸纖維素膜的某一區(qū)6.4檢驗方法的選擇為弓形蟲病診斷較難，應將IgG、IgM和IgG親和力檢測結果提示可能近期感染的患者標本送至弓形蟲病目前國內尚無官方認可的弓形蟲病確證實驗室，此處確證實驗室特指除開展弓形蟲抗體IgG、IgM和IgG親和力檢測外，還同時開展弓形蟲病原學檢查的實驗室。該類實驗室通常至少應開展弓形蟲血清7.1概述樣品可以獲取，因此本部分主要規(guī)定弓形蟲7.2室內質控實驗室應常規(guī)開展弓形蟲檢測項目的室內質控。每檢測日或分析批使用陰性、弱陽性和/或陽性外7.3實驗室內結果可比性77.4實驗室間結果比對結果不一致時應分析不一致的原因，必要時，采取有效的糾正措施。應保留參加能力驗證/8.2特殊人群發(fā)生感染的風險評估篩查血清中的弓形蟲IgG抗體，選擇ELISA或CLIA等靈敏度高的試驗即可。IgG抗體陰性一般提示未——育齡婦女妊娠前：免疫力正常的婦女弓形蟲IgG抗體陽性提示有免疫力，將感染垂直傳播給胎——首次HIV陽性確診后：弓形蟲IgG抗體陽性且CD4+T淋巴細胞計數(shù)＜100/μL,提示存在需要治療——器官移植供者捐贈前：供者弓形蟲IgG抗體陽性提示受者存在器官移植發(fā)生弓8.3急性獲得性感染的診斷WS/T834—20248---±不確定：重新采集標本檢測IgM；如果結果仍是±,應3周內重新采集標本檢測。-+±-不確定：重新采集標本檢測IgG；如果結果仍是±,應3周內重新采集標本檢測。±±±++-+±不確定：重新采集標本檢測IgM；如果結果仍是±,應3周內重新采集標本檢測。++8.4妊娠及孕前感染診斷所有孕婦應盡早（妊娠前3個月最為理想）進行弓形體抗體IgG和IgM的篩查試驗。妊娠期感染診斷和采取及時的治療十分重要。疑似母體感染孕婦應轉至有胎兒醫(yī)學的產前診斷機構進行診治。妊娠后第1次檢測弓形體抗體IgG和IgM，如果在妊娠的較早階段（4周～12周）IgG抗體陽性、IgM8.5先天性感染的診斷WS/T834—20249或10天后復測弓形蟲IgA仍為陽性，提示先天性弓形蟲感染?？梢芍袠猩窠浵到y(tǒng)感染時，采集腦脊液進8.6眼部感染的診斷呈升高趨勢，因此弓形蟲IgM抗體陰性不能排除眼部弓8.7免疫功能低下者感染的診斷組織、胎盤等部位中的蟲體進行直接鏡檢、分離培養(yǎng)或核酸檢測來確所有艾滋病病毒感染者確診后應立即檢測弓形蟲IgG抗體以發(fā)現(xiàn)潛伏感染。大多數(shù)弓形蟲腦炎的艾WS/T834—2024A.1試劑盒目前屬于體外診斷試劑第三類產品的弓形蟲抗體IgG、IgM和IgG親和力測定試劑盒A.2檢驗程序性能驗證WS/T834—2024B.1.1B1基因序列（基因序列號AF1gaattcgttcgacagaaagggagcaagagttgggactaaatcgaagctgagatgctcaaagtcgaccgcgagatagaagggctgactcgaaccagatgtgctaaaggcgtcattgctgttctgtcctatcgcaacggagttcttcccagacgtggatggttccgcctccttcgtccgtcgtaatatcaggccttctgttctgttcgctgtctgtctagggcacccttactgcaagagagaggtcatatcgtcccatgaagtcgaccacctgtttcctctcttcactgtcacgtacgacatcgcattcaagggaagagatctctcgttcgtgtattcgagacaagagaggtccgcccccacaagacggctgaagaatgcaacattcttgtgctgcctcctctcatgccagaagaagggtacgtgttgcatcataacaagagctgtatttcccgctggcaaatacaggtgaaatgtacctccagaactagtatcgtgcggcaatgtgccacctcgcctcttgggagaaaaagaggaagagacgctgccgctgttttgcaaatgaaaagtttcgcagtacaccaggagttggattttgtagagcgtctctcttcaagcagcgtattgtcgagtagatcagaaaggaactgccatgagtataagaaaaaaatgtgggaatgaaagagacgctaatgtgtttgcataggttgcagtcactgacgagctcccctctaaaagtgaaattcatgagtatctgtgcaactttggtgtattcgcagattggtcgcctgcaatcgatagttgaccacgaacgcaacaggagaagaagatcgtgaaagaatacgagaagaggtacacagagatagaagtcgctgcggagacagcgaagactgcggaactcccgtcgcaccagcagcagaggagtgccgggcaagaaaatgagatgcctagaggagacacagcgtgttatgaacaaatcgtttcgcgaagaggagggaacatattatatacagaagaagaacaagagacgtgccgcatgtcgctaagccatcggaagggataaatggcacagtatcacattacagttccgttgattcgtctgatggtgacgaaaggggaagaatagttgtcgcaccaaaactggttattttgaagaagacgagagatggagtgaaccaccaaaaatcggagaaaatcgatggtgtcacgttttttgtcagacttcttccagcaacttctgcctttgttcttttagcctcaatagcaggatgacgcctccctcctatctttcagccaacccagcaaacaactctctgtagagtaacaaagagaaggcaaaacgcgccatcacgaacactcgcagagatgatacagagacgtgtcatcaggtggtcgcttaattttctgtatatagcatttttagaatgcacctttcggacctcaacaaccgtgcaaaaggatcgccacctggtcaagcgtcaaaacgaactatctgtatatctctcaaggaggactggcaacctggtgtcgacaacagaacagctgcagtccggaagccatgaggcactccaacgggcgagtagcacctgaggagatacaaactgctaaacggtccgggtgaaacaatagagagtagtcgccgctactgcccagttgtcatgccatcgacgtagacccagaaatgaggcgagaaattaatattgttagtaaagcattctccggtcgagaggctaaaccacaaaagtgcaaaccatgcgcagccatcagcttaacaaaagcagttggtgatggttgcctcgtctgaaaatggattacttcatcaacgagcccaccacgcagaatcatgctttcccagtgctaaagcgtttctaaagtagccgcggaatgctaaggggatcgcctacgtagcacatgttgtgcctcaccccccagctcgtgcgctcattctcctttcgtgcgcg探針序列5'-CAACAACTGCTCTAGCG-3'（5'端標記熒光發(fā)光基團如6-carboxyfluorescein，3'端標記熒光WS/T834—2024ctgcagggaggaagacgaaagttgtttttttatttttttttctttttgtttttctgatttttgttttttttgatgcgtctgtcgggatgagaccgcggagccgaagtgcgttttctttttttgacttttttttgttttttcacaggcaagctcgcctgtgctttttcctggagggtggaaaaagagacaccggaatgcgatccagacgagacgacgctttcctcgtggtgatggcggagagaattgaagagtggagaagagggcgagggagacagagtcggaggcttggacgaagggaggaggaggggtaggagaggaatccagatgcactgtgtctgcaB.2.2AF146527靶序列擴增反應體系（正向引物序列5'-GCTCCTCCAGCCGTCTTG-3'，反向引物序列5'-TCCTCACCCTCGCCTTCAT-3'，TaqMan探針序列5'-AGGAGAGATATCAGGACTGTA-3'（5'端標記熒光發(fā)光基團如6-carboxyfluores