腫瘤繼承性免疫治療

腫瘤繼承性免疫治療全球癌癥趨勢(shì)今后20

年全球新患人數(shù)每年1000萬(wàn)→1500萬(wàn)死亡人數(shù)每年600萬(wàn)→1000

萬(wàn)

18thInternationalCongressonAnti-Treatment,Paris,2007第2頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天中國(guó)癌癥趨勢(shì)

2000年發(fā)病約180-200萬(wàn)死亡140-150萬(wàn)0～64歲人口中，1/4死于癌癥

中國(guó)癌癥預(yù)防與控制規(guī)劃綱要（2004-2010）

第3頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥的三大常規(guī)治療１．手術(shù)---破冰船歷史悠久手術(shù)本身的兩面性：消除（降低）腫瘤負(fù)荷促進(jìn)轉(zhuǎn)移的傾向難以清除腫瘤微小轉(zhuǎn)移灶很多患者就診時(shí)已失去手術(shù)最佳時(shí)機(jī)第4頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥的三大常規(guī)治療２．化療---轟炸機(jī)腫瘤內(nèi)科治療的基石對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷缺乏選擇性損傷正常組織Goldie-Coldman假說(shuō)及“一級(jí)動(dòng)力學(xué)”理論：化療對(duì)數(shù)殺滅細(xì)胞，不可能徹底清除腫瘤細(xì)胞第5頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥的三大常規(guī)治療1898年發(fā)現(xiàn)鐳鐳用于治療腫瘤放療有效破壞或消滅癌細(xì)胞，甚至可以治愈部分腫瘤放療損傷機(jī)體正常細(xì)胞，降低機(jī)體免疫力

3．放療---太陽(yáng)能第6頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤治療的現(xiàn)狀靶向藥物靶向藥物腫瘤生物治療是進(jìn)一步提高療效的很有前景的方法第7頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天目前癌癥療效的總體評(píng)估

“近20年來(lái)，我國(guó)癌癥死亡率上升了29%，……癌癥治愈率(5年生存率)仍徘徊在20%-30%左右。其中肺癌僅10%，肝癌3%左右”。

--衛(wèi)生部2006年《中國(guó)慢性病報(bào)告》

“近30年來(lái)，晚期轉(zhuǎn)移腫瘤5年生存率基本上沒(méi)有改變。這主要是由我們目前腫瘤治療不當(dāng)和過(guò)度治療造成的?！?/p>

--程書(shū)鈞院士第8頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥治療的誤區(qū)

注重腫瘤本身，想盡辦法殺死腫瘤細(xì)胞體內(nèi)正常細(xì)胞被錯(cuò)殺為什么要長(zhǎng)腫瘤？

第9頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥認(rèn)識(shí)的誤區(qū)只有確切了解癌癥，才可能找到治愈的方法

重大突破通常來(lái)源于認(rèn)識(shí)上的巨大轉(zhuǎn)變細(xì)菌與感染的聯(lián)系得到證實(shí)后，才意識(shí)到要治愈此類(lèi)疾病便必須除去細(xì)菌。結(jié)果是促使抗生素的誕生，從而控制一系列的傳染病第10頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥治療的困境與未來(lái)術(shù)后1年復(fù)發(fā)率達(dá)60%死于腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的人超過(guò)80%徹底消滅癌細(xì)胞及體內(nèi)不再產(chǎn)生癌細(xì)胞的“根治”任務(wù)很可能落在生物治療身上第11頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥治療的生物療法腫瘤生物免疫療法成為最令人矚目、最鼓舞人心的焦點(diǎn)，將成為21世紀(jì)人類(lèi)攻克癌癥具有戰(zhàn)略意義的一個(gè)重要方面.

37-39屆美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)（ASCO）

第7屆中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)臨床腫瘤學(xué)協(xié)作專(zhuān)業(yè)委員會(huì)（CSCO）

第12頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Strength(優(yōu)勢(shì))細(xì)胞免疫技術(shù)發(fā)展給成功的臨床治療帶來(lái)可能性?？茖W(xué)家和臨床專(zhuān)家全力發(fā)展此技術(shù)衛(wèi)生部醫(yī)政處也大力支持。己批準(zhǔn)此臨床技術(shù),并核準(zhǔn)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)Opportunity(機(jī)會(huì))目前各研究所及醫(yī)科大學(xué)各自為政地，并且各機(jī)構(gòu)只有少量臨床病例報(bào)道，因此給產(chǎn)業(yè)化，系統(tǒng)化發(fā)展帶來(lái)可能。腫瘤生物治療現(xiàn)狀

Weakness(劣勢(shì))部分各科臨床醫(yī)師對(duì)此技術(shù)認(rèn)知程度偏低廣大病人對(duì)此知識(shí)一無(wú)所知Threat(威脅)各單位技術(shù)力量大小不一，并參差不齊，易造成混亂，阻滯此技術(shù)的臨床健康發(fā)展。

第13頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天政府全力支持

----衛(wèi)生部文件國(guó)家發(fā)展改革委、衛(wèi)生部、國(guó)家中醫(yī)藥管理局關(guān)于印發(fā)《全國(guó)醫(yī)療服務(wù)價(jià)格項(xiàng)目規(guī)范》新增和修訂項(xiàng)目（2007年）的通知發(fā)改價(jià)格[2007]2193號(hào)新增項(xiàng)目

修訂項(xiàng)目

第56條

310800024

細(xì)胞因子活化殺傷（CIK）細(xì)胞輸注治療含藥物加無(wú)血清培養(yǎng)基、體外細(xì)胞培養(yǎng)；

包括樹(shù)突狀細(xì)胞治療(DC)次LAK細(xì)胞治療酌情加收

第14頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天政府全力支持

----衛(wèi)生部文件

醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法

衛(wèi)生部明確國(guó)家建立醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用準(zhǔn)入和管理制度，對(duì)醫(yī)療技術(shù)實(shí)行分類(lèi)、分級(jí)管理。

醫(yī)療技術(shù)分三類(lèi)管理衛(wèi)醫(yī)政發(fā)(2009)18號(hào)第15頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥治療的生物療法腫瘤免疫的概念起源于本世紀(jì)初1909年Ehrlich首先提出，免疫系統(tǒng)不僅負(fù)責(zé)防御微生物侵犯，而且清除機(jī)體內(nèi)改變了的宿主成分腫瘤生物免疫療法已成為腫瘤治療基礎(chǔ)和臨床研究的重要領(lǐng)域第16頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥生物治療的分類(lèi)---操作模式非細(xì)胞治療抗體、多肽/蛋白質(zhì)疫苗、基因疫苗、體內(nèi)基因治療等可以規(guī)?；a(chǎn)有嚴(yán)格、均一的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要由制藥公司開(kāi)發(fā)細(xì)胞治療采集患者自體細(xì)胞進(jìn)行制備，再回輸給患者無(wú)法規(guī)?；a(chǎn)更適于在醫(yī)療機(jī)構(gòu)開(kāi)展，完成從采集、制備到回輸?shù)娜^(guò)程第17頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天正常機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別和清除突變細(xì)胞：免疫監(jiān)視免疫逃逸的機(jī)理還不很清楚，但主要的機(jī)制與CD8+T細(xì)胞不能有效地清除腫瘤細(xì)胞有關(guān)第18頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤免疫治療的三種新途徑----針對(duì)腫瘤免疫逃逸增強(qiáng)免疫應(yīng)答間接作用如抑制血管生成直接抑制腫瘤生長(zhǎng)毒素放射性核素藥物細(xì)胞介導(dǎo)免疫治療過(guò)繼性免疫細(xì)胞治療供體淋巴細(xì)胞輸注腫瘤疫苗第19頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天限制腫瘤免疫應(yīng)答的因素第20頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫均衡與免疫逃逸淋巴細(xì)胞因素腫瘤細(xì)胞因素第21頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤過(guò)繼性免疫治療體外分離細(xì)胞APC（巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞）T淋巴細(xì)胞自然殺傷（NK）細(xì)胞離體培養(yǎng)、擴(kuò)增、活化細(xì)胞因子刺激抗原沖擊基因修飾自體或(同種異體)回輸誘發(fā)機(jī)體特異性抗腫瘤免疫第22頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)自然殺傷細(xì)胞型的淋巴細(xì)胞(NKT)腫瘤過(guò)繼性免疫治療第23頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹(shù)狀突細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤過(guò)繼性免疫治療第24頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞

lymphokine-activatedkillercells,LAK1980年，Rosenberg實(shí)驗(yàn)室首報(bào)荷瘤小鼠的脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞在含有IL-2的條件下，短期培養(yǎng)后可誘導(dǎo)出一種非特異性的殺傷細(xì)胞，能殺傷新鮮分離的實(shí)體瘤細(xì)胞和體外培養(yǎng)的多種腫瘤細(xì)胞目前尚未發(fā)現(xiàn)LAK細(xì)胞特有的表面標(biāo)志LAK細(xì)胞的前體細(xì)胞是NK細(xì)胞和T細(xì)胞。第25頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天LAK的臨床應(yīng)用1984年Rosenberg研究組首次應(yīng)用IL-2與LAK協(xié)同治療25例腎細(xì)胞癌、黑素瘤、肺癌、肝癌/結(jié)腸癌等患者LAK細(xì)胞0.6～18.4×1010IL-22.8×105～3.3×106U/kg11例腫瘤縮小超過(guò)50％，1例黑色素瘤完全消退第26頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天LAK的臨床應(yīng)用1988年用IL-2與LAK細(xì)胞協(xié)同治療222例16例轉(zhuǎn)移灶完全消退26例腫瘤消退50％以上對(duì)轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌、黑色素瘤、肝癌、結(jié)腸癌和非霍奇金淋巴瘤療效較顯著第27頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天LAK的臨床應(yīng)用乳腺癌、膀胱癌局部聯(lián)用IL-2也獲得明顯療效由于IL-2用量大，一些病例出現(xiàn)較大毒副反應(yīng)第28頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天異體LAK：采用抗原性較弱的5個(gè)月以?xún)?nèi)胎兒的脾細(xì)胞、肝細(xì)胞和胸腺細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后具有很強(qiáng)的LAK細(xì)胞活性出現(xiàn)早而持久，不易引起移植排斥反應(yīng)骨髓細(xì)胞用rhIL-2培養(yǎng)后有很強(qiáng)的LAK活性，比外周血來(lái)源者強(qiáng)而持久；胎兒臍血細(xì)胞經(jīng)IL-2誘導(dǎo)后，LAK活性也明顯強(qiáng)于成人。第29頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹(shù)狀突細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療第30頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞

tumorinfiltratinglymphocyte,TIL

1986年Rosenberg研究組首先報(bào)道從腫瘤局部分離出TIL，加入高劑量IL-2體外培養(yǎng)，殘存的腫瘤細(xì)胞7～13天全部死亡。從手術(shù)切下的腫瘤組織、腫瘤引流淋巴結(jié)、癌性胸腹水中獲得淋巴細(xì)胞，加IL-2培養(yǎng)后，其生長(zhǎng)、擴(kuò)增能力強(qiáng)于LAK細(xì)胞14例轉(zhuǎn)移性肺癌等晚期腫瘤患者,其中4例腫瘤縮小50％以上，副作用明顯低于IL-2/LAK療法。第31頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）治療轉(zhuǎn)移性黑色素瘤2002.Science第32頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天2007年，法國(guó)熱那亞大學(xué)細(xì)胞與基因治療中心對(duì)用TIL+IL-2治療過(guò)的Ⅲ期黑色素瘤進(jìn)行了長(zhǎng)期隨訪(fǎng)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療過(guò)的只有一個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者其復(fù)發(fā)率明顯低于對(duì)照組，總生存期也明顯長(zhǎng)于只用IL-2治療的患者。腫瘤侵潤(rùn)性淋巴細(xì)胞第33頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天

2007年南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬南京市鼓樓醫(yī)院腫瘤中心劉寶瑞等用快速制備自體腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞方法聯(lián)合白細(xì)胞介素2胸腔輸注治療癌性胸腔積液、2001年江西省萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院腫瘤科用TIL/LAK治療惡性漿膜腔積液38例等報(bào)道，他們發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)TIL治療后，患者生活質(zhì)量明顯提高,體力狀況得到恢復(fù)，有效患者隨訪(fǎng)中治療側(cè)胸腔未再出現(xiàn)胸腔積液或胸腔積液量增加,治療后除少數(shù)病例短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)可耐受的低熱及胸痛外,無(wú)一例出現(xiàn)其他不良反應(yīng)。腫瘤侵潤(rùn)性淋巴細(xì)胞第34頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹(shù)狀突細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療第35頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞Cytokine-inducedkillercell,CIK由

-IFN、TNFa、CD3單抗、IL-1、IL-2等在體外誘導(dǎo)并大量擴(kuò)增的具有殺傷腫瘤活性的細(xì)胞1991年斯坦福骨髓移植中心首先報(bào)道1994年Schmidt-wolf報(bào)道了體外大量增殖CIK細(xì)胞的方法。是目前國(guó)際上廣泛應(yīng)用的腫瘤免疫治療手段第36頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)第37頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天分2-3次靜脈回輸體內(nèi)采集病人外周血單個(gè)核細(xì)胞加入多種細(xì)胞因子培養(yǎng)擴(kuò)增、活化、誘導(dǎo)成為CIK細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用到達(dá)病變部位直接清除殘存腫瘤細(xì)胞調(diào)節(jié)和增強(qiáng)全身免疫機(jī)能防止腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移第38頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天CIK細(xì)胞的特點(diǎn)1）高增殖活性：培養(yǎng)第18-22天達(dá)頂峰；

CD3+CD56+細(xì)胞增加1000-6000倍；

28-30天達(dá)平臺(tái)期，細(xì)胞毒活性亦達(dá)峰值2）高細(xì)胞毒力

CIK細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞抑制指數(shù)為1.5-3.5，

LAK細(xì)胞為0.5-1.5；3）殺瘤譜廣泛：非MHC限制性第39頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天4）細(xì)胞來(lái)源豐富正?；蚧颊叩墓撬鑶蝹€(gè)核細(xì)胞或外周血單個(gè)核細(xì)胞、干細(xì)胞均可誘導(dǎo)獲得CIK細(xì)胞；5）對(duì)多耐藥性腫瘤細(xì)胞同樣敏感6）不受免疫抑制劑CSA、FK506影響7）抵抗腫瘤細(xì)胞誘發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL凋亡，細(xì)胞內(nèi)表達(dá)抗凋亡基因和保護(hù)基因8）對(duì)正常骨髓前體細(xì)胞毒性很小第40頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天256例各種中晚期腫瘤患者（乳腺癌、肺癌、腸癌、肝癌、胃癌、淋巴瘤等）1-4療程CIK治療部分緩解和輕度緩解為207例（80.86%）1年生存期為96.06%2年生存期為92.96%3年生存期為88.38%生存質(zhì)量卡氏評(píng)分提高率為88.28%無(wú)心、肝、腎不良反應(yīng)，僅數(shù)例有一過(guò)性發(fā)熱，24小時(shí)即正常國(guó)內(nèi)2003年報(bào)道第41頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天CIK細(xì)胞治療癌性胸、腹水136例癌性胸水61例完全消失57例顯著減少有效率86.8%83例癌性腹水26例完全消失44例顯著減少有效率84.3%第42頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天1999年，德國(guó)柏林Freie大學(xué)Schmidtwolf等人報(bào)告用自身CIK細(xì)胞治療10例腫瘤腫瘤患者，結(jié)果1例完全緩解，3例穩(wěn)定。2005年，美國(guó)斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)中心LeembuisT等人用自身CIK（1×109-1010）治療9例霍奇金氏淋巴瘤和非霍奇金氏淋巴瘤，結(jié)果2例部分緩解，2例穩(wěn)定，5例無(wú)反應(yīng)，無(wú)嚴(yán)重毒副作用。2007年，意大利卡利亞里骨髓移植中心用供者CIK細(xì)胞治療11例惡性血液疾病，結(jié)果病人能夠耐受治療，有助于控制疾病復(fù)發(fā)。CIK細(xì)胞治療第43頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤過(guò)繼性免疫治療第44頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天樹(shù)突狀細(xì)胞（dendriticcell,DC）應(yīng)用負(fù)載腫瘤抗原的樹(shù)突狀細(xì)胞激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生腫瘤特異性CTL有效地殺傷腫瘤細(xì)胞建立持久的抗腫瘤的特異性免疫應(yīng)答第45頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天

DC研究歷史美國(guó)學(xué)者Steinman及Cohn于1973年發(fā)現(xiàn)1992年Steinman建立了應(yīng)用GM-CSF從小鼠骨髓中大規(guī)模培養(yǎng)制備DC的方法此后建立并完善了多種培養(yǎng)擴(kuò)增DC的方法DC的研究得以深入第46頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天2009年，英國(guó)伯明翰英國(guó)癌癥研究臨床試驗(yàn)組的Palmer等人用肝癌細(xì)胞株溶胞產(chǎn)物致敏DC治療35例晚期肝癌病人部分緩解和病情穩(wěn)定者10例4例AFP明顯下降7例T細(xì)胞對(duì)AFP有免疫反應(yīng)DC細(xì)胞--近期研究第47頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天DC細(xì)胞的基本特征體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞顯著刺激初始型T細(xì)胞增殖機(jī)體免疫反應(yīng)的始動(dòng)者在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特的地位第48頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天DC對(duì)抗原的加工處理與提呈DC與T細(xì)胞接觸表面的MHC-肽復(fù)合物被T細(xì)胞識(shí)別將抗原信息傳遞給T細(xì)胞——抗原提呈第49頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天樹(shù)突狀細(xì)胞與T細(xì)胞的作用第50頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腦以外的全身各臟器皮膚、肝、脾、骨髓、淋巴器官和外周血中僅占人外周血單個(gè)核細(xì)胞的1％左右外周血中有很多DC前體細(xì)胞，在體外誘導(dǎo)成DCDC的組織分布第51頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天第52頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天第53頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤抗原致敏患者自身的樹(shù)突狀細(xì)胞制備成瘤苗(或細(xì)胞懸浮液)回輸患者DC細(xì)胞治療腫瘤的方案和途徑第54頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）治療流程圖

收集患者外周血單個(gè)模細(xì)胞PBMC抗原致敏的DC體外細(xì)胞因子刺激回輸給同一患者相關(guān)多肽致敏第55頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天樹(shù)突狀細(xì)胞（殺傷性T細(xì)胞）殺傷性T細(xì)胞機(jī)理第56頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹(shù)狀突細(xì)胞（DC）共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療第57頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)

共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)

樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)+細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)

DC和CIK是腫瘤免疫治療的兩部分DC識(shí)別病原,激活獲得性免疫系統(tǒng)CIK通過(guò)發(fā)揮自身細(xì)胞毒性與分泌細(xì)胞因子殺傷腫瘤細(xì)胞二者聯(lián)合確保有效和諧的免疫反應(yīng)之完成第58頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)大容量體外CIK細(xì)胞擴(kuò)增技術(shù)誘導(dǎo)CIK細(xì)胞按一定比例與DC細(xì)胞混合培養(yǎng)得到一種新的抗腫瘤免疫活性細(xì)胞群DC-CIK療法擁有更強(qiáng)的增殖能力及特異性識(shí)別﹑殺傷腫瘤細(xì)胞之特性共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)

第59頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天2008年中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所鄧笑偉等用不同來(lái)源的CIK和DC聯(lián)合治療21例中晚期肺癌，結(jié)果CR2例,PR7例,SD5例,PD7例,有效率為42.9%,臨床獲益率(CR+PR+SD)為66.7%，細(xì)胞回輸后主要不良反應(yīng)為一過(guò)性發(fā)熱。CIK-DC共培養(yǎng)細(xì)胞治療第60頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Barry等（匹茲堡大學(xué)腫瘤研究所2003年）15例轉(zhuǎn)移性乳腺癌回輸NK細(xì)胞4例完全緩解，耐受性良好，無(wú)毒副作用NK細(xì)胞第61頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Koehl等（德國(guó)法蘭克福大學(xué)醫(yī)院2004年）3例ALL干細(xì)胞移植病人NK細(xì)胞+IL-2治療患兒能充分耐受NK細(xì)胞第62頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Miller等（明尼阿波利大學(xué)腫瘤中心2005年）NK細(xì)胞聯(lián)合CTX+Fludarabine治療19例AML5例血液學(xué)完全緩解NK細(xì)胞第63頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Arai等（芝加哥Risb大學(xué)醫(yī)學(xué)中心2008年）同種異基因細(xì)胞系NK-92治療12例晚期腎癌和黑色素瘤病人1例完全緩解，1例穩(wěn)定，1例為混合反應(yīng)NK細(xì)胞第64頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Kobayashi等（東京女子醫(yī)學(xué)大學(xué)2007年）自身γδT細(xì)胞治療7例進(jìn)展期肺癌治療后患者γδT細(xì)胞明顯增多無(wú)明顯毒副作用。γδT

細(xì)胞第65頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Bennouna等（2008年，法國(guó)）自身γδT細(xì)胞（8×109）+IL-210例轉(zhuǎn)移性腎癌患者6例患者治療后25.7周內(nèi)病情穩(wěn)定僅出現(xiàn)感冒樣癥狀γδT

細(xì)胞第66頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Okai等（澳大利亞昆土蘭州醫(yī)學(xué)研究所2002年）α半乳糖神經(jīng)酰胺（α-galcer）荷載DC4例癌轉(zhuǎn)移患者治療后病人NKT細(xì)胞明顯增多患者未出現(xiàn)不良反應(yīng)NKT細(xì)胞

第67頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天Shikawa等（神奈川縣千葉大學(xué)醫(yī)院2005年）α-galcer荷載DC9例復(fù)發(fā)性非小細(xì)胞肺癌治療后5例病情穩(wěn)定未出現(xiàn)不良反應(yīng)NKT細(xì)胞

第68頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天2008年，千葉大學(xué)醫(yī)院α-galcer荷載DC9例頭部腫瘤1例部分緩解4例穩(wěn)定NKT細(xì)胞

第69頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天DC-CIK免疫治療聯(lián)合常規(guī)治療方法治療時(shí)機(jī)與方案聯(lián)合治療意義術(shù)后聯(lián)合DC-CIK1.快速恢復(fù)手術(shù)造成的免疫損傷；2.特異清除術(shù)后殘余腫瘤細(xì)胞；防治轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)3.增強(qiáng)放療敏感性，減少放療毒副作用；4.抵抗化療藥物的免疫抑制作用；5.增強(qiáng)對(duì)化療藥物敏感性；6.支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；放療聯(lián)合DC-CIK化療聯(lián)合DC-CIK常規(guī)治療無(wú)效支持療法第70頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天DC-CIK治療與常規(guī)治療方法比較

治療種類(lèi)特點(diǎn)DC-CIK免疫治療增強(qiáng)機(jī)體免疫功能增強(qiáng)放、化療的敏感性清除微小病灶和殘余腫瘤細(xì)胞無(wú)明顯毒副作用手術(shù)局部快速切除腫瘤組織；見(jiàn)效快；微小病灶或轉(zhuǎn)移病灶；放療局部減少腫瘤負(fù)荷；見(jiàn)效快；不敏感細(xì)胞，復(fù)發(fā)根源；造成免疫損傷；化療全身減輕腫瘤負(fù)荷；見(jiàn)效快；不敏感細(xì)胞，復(fù)發(fā)根源；毒副作用大，造成免疫損傷；第71頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天CD3AK細(xì)胞：免疫原性較強(qiáng)的腫瘤（具有T細(xì)胞受體（TCR）除外）CIK細(xì)胞：各種腫瘤，對(duì)低表達(dá)MHCⅠⅡ分子更有效γδT細(xì)胞：各種腫瘤，對(duì)呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)以及部分血液惡性疾病療效好樹(shù)突狀細(xì)胞：成熟DC可與各種細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用，增強(qiáng)抗腫瘤免疫效果樹(shù)突狀細(xì)胞疫苗：可以預(yù)防和治療相應(yīng)的各種腫瘤NKT細(xì)胞：對(duì)消化系統(tǒng)尤其是肝癌和呼吸系統(tǒng)腫瘤以及頭頸部腫瘤效果好NK細(xì)胞：對(duì)不表達(dá)MHC分子的腫瘤效果好巨噬細(xì)胞：Ⅰ型MФ具有一定的抗腫瘤作用，可一其他免疫細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用免疫細(xì)胞和細(xì)胞群抗癌譜第72頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫聯(lián)合治療CIK細(xì)胞DC-CIK共培養(yǎng)細(xì)胞DC聯(lián)合CIK細(xì)胞CD3AK細(xì)胞DC疫苗聯(lián)合CIK、CD3AK細(xì)胞共刺激T細(xì)胞巨噬細(xì)胞聯(lián)合CIK細(xì)胞腫瘤特異性T細(xì)胞聯(lián)合NK、γδT細(xì)胞、NKT細(xì)胞……第73頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所細(xì)胞培養(yǎng)場(chǎng)所條件:符合GMP要求按照《品質(zhì)管理架構(gòu)》之模式管理。

GTP細(xì)胞培養(yǎng)/治療流程實(shí)驗(yàn)室管理流程生物安全實(shí)驗(yàn)流程消毒程序與周期流程維護(hù)和性能驗(yàn)證程序

設(shè)備3Q品質(zhì)驗(yàn)證設(shè)備清潔和維護(hù)保養(yǎng)試劑、耗材的外購(gòu)品質(zhì)檢測(cè)流程最終細(xì)胞產(chǎn)品檢測(cè)流程:

用常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)菌和真菌培養(yǎng)試驗(yàn)用鱟試劑法進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)用功能性殺瘤實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行殺傷活性檢測(cè)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行表面標(biāo)記檢測(cè)用常規(guī)方法檢測(cè)細(xì)胞總數(shù)、細(xì)胞存活率、特定生物活性效價(jià)第74頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天各種細(xì)胞回輸方法培養(yǎng)細(xì)胞收集于離心瓶。2500rpm×8min，20℃

進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、檢查內(nèi)毒素、細(xì)胞表型，將細(xì)胞重懸于自身血漿中，按照不同的細(xì)胞選擇不同的回輸方法。留樣封存。0.9％注射用生理鹽水2000rpm×8min×2次，20℃核對(duì)好病人姓名、性別、年齡、住院號(hào)、細(xì)胞數(shù)、無(wú)菌結(jié)果、病區(qū)及治療項(xiàng)目第75頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天CIK細(xì)胞制備培養(yǎng)

用血液保養(yǎng)袋采集200ML外周血2000g×15min，20℃

75cm2培養(yǎng)瓶CIK培養(yǎng)液（含IFN-γ）第2天加混合細(xì)胞因子PMNC層CIK培養(yǎng)隔天擴(kuò)瓶培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)細(xì)胞收集、離心、洗滌回輸?shù)?天擴(kuò)瓶后抽樣送檢（細(xì)菌培養(yǎng)和表型分析）第3天擴(kuò)瓶培養(yǎng)留血漿50ML備用分離出6ml富含白細(xì)胞的血液淋巴細(xì)胞分離液第76頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天第10天培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)DC細(xì)胞收集、離心、洗滌和回輸?shù)?天補(bǔ)充含半量細(xì)胞因子的培養(yǎng)基，并加腫瘤抗原第6天補(bǔ)充培養(yǎng)基，加TNF-

，抽樣送檢（細(xì)菌培養(yǎng)和表型分析）75cm2培養(yǎng)瓶1640培養(yǎng)液2000g×15min，20℃

留血漿50ML備用分離出6ml富含白細(xì)胞的血液淋巴細(xì)胞分離液PMNC層用血液保養(yǎng)袋采集200ML外周血細(xì)胞貼壁120min貼壁細(xì)胞進(jìn)行DC細(xì)胞培養(yǎng)方案懸浮細(xì)胞進(jìn)行CIK培養(yǎng)方案樹(shù)突狀細(xì)胞制備流程第77頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天癌癥生物治療的優(yōu)點(diǎn)1）應(yīng)用范圍廣幾乎可以應(yīng)用于所有腫瘤患者。

2）對(duì)原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤均有明顯療效

3）對(duì)于手術(shù)后的惡性腫瘤患者的殘存腫瘤細(xì)胞的清除預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)有著比化療更明顯的作用。

4）副作用小，目前僅發(fā)現(xiàn)有發(fā)燒類(lèi)似感冒的副作用。

5）不損傷正常組織并能提高機(jī)體免疫力和改善身體狀況的作用。生物治療具有無(wú)創(chuàng)傷無(wú)痛苦安全無(wú)副作用等特點(diǎn)，是未來(lái)腫瘤治療的重要發(fā)展方向。特異性強(qiáng)適應(yīng)癥廣延長(zhǎng)生命性強(qiáng)抗復(fù)發(fā)性強(qiáng)安全性好(副作用低幾乎沒(méi)有)合適的費(fèi)用第78頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天適應(yīng)癥

主要用于惡性黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、膀胱癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌、乳腺癌、宮頸癌、各種肺癌、喉癌、鼻咽癌、胰腺癌、肝癌、胃癌等實(shí)體瘤手術(shù)后防止復(fù)發(fā)；也可以用于多發(fā)性骨髓瘤、B細(xì)胞淋巴瘤和白血病等血液系統(tǒng)惡性腫瘤緩解期進(jìn)一步預(yù)防復(fù)發(fā)；還可以用于上述實(shí)體瘤緩解期進(jìn)一步鞏固治療或上述晚期腫瘤配合放化療、介入治療、熱療等方法，達(dá)到延長(zhǎng)生存期、提高生活質(zhì)量和控制腫瘤進(jìn)展的目的。第79頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天適應(yīng)癥A、適合免疫治療者：①年齡大于16歲；②病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診為腫瘤患者③生活自理，卡氏體力狀況評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)60分以上；④預(yù)計(jì)生存期至少大于6個(gè)月；⑤簽署知情同意書(shū)；⑥放化療結(jié)束一個(gè)月以上的；⑦如若可以接受手術(shù)治療或其它方式能夠獲得一定數(shù)量的腫瘤組織件或細(xì)胞的患者最佳。第80頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天不適合癥不適合免疫治療者：①懷孕或哺乳期婦女；②器官功能衰竭者：心臟：IV級(jí)以上；肝臟：達(dá)到國(guó)內(nèi)肝功能分級(jí)C級(jí)以上；腎臟：腎功能衰竭及尿毒癥期以上；肺：出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸衰竭癥狀，并累及到其他臟器，如肝、腎功能；腦：腦轉(zhuǎn)移并伴意識(shí)障礙者；③臟器移植者；④長(zhǎng)期使用免疫抑制藥物或正在使用的自身免疫性疾病患者；⑤精神疾病者，發(fā)生急性肝炎或其他急性感染病活動(dòng)期；⑥對(duì)本治療中所用生物試劑過(guò)敏者。治療者中途撤出者：①病情惡化；②患者產(chǎn)生無(wú)法忍受的副作用;③患者要求退出治療。第81頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天禁忌癥:

病人生命體征己出現(xiàn)衰竭的現(xiàn)象病人處于懷孕期和哺乳期病人明確診斷肉瘤(除惡性黑色素瘤)病人明確診斷軟骨瘤病人明確診斷原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤第82頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤臨床分期及治療原則:

第83頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤臨床分期及治療原則:

第84頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤臨床分期及治療原則:

第85頁(yè),共93頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）常規(guī)檢查評(píng)估影像學(xué)檢查（磁共振、CT、petCT、彩色多普勒等根據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)腫瘤志物檢測(cè)病人體力狀況（WHO、五分法、KPS、百分法）參考實(shí)體腫瘤療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)（REIST1.1