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文檔簡介
專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題一微生物的試驗室培養(yǎng)入凝固劑瓊脂(是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑)后,制成瓊脂固·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等?!さ矗耗転槲⑸锏拇x提供氮元素的物質(zhì)。如N?、NH氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機氮源)等。只有固氮微生物才能運用N?。時需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細菌是無菌技術(shù)除了用來防止試驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)措施僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒措施常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于某些不耐高溫的液體)尚有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。②玻璃器皿、金屬用品等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。比較項理化原因的作用強度芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強烈能(1)措施環(huán)節(jié):計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的環(huán)節(jié):③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍不小于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)④等待平板冷卻凝固,大概需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么措施來估計培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物嗎?為何?(1)微生物接種的措施最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面持續(xù)劃線的操作。將匯集的菌種逐漸(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不一樣稀釋度的菌液分別涂(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使匯集在一起的微生物分散成單個細(5)平板劃線法操作環(huán)節(jié):⑤將試管通過火焰,并塞上棉塞。⑥左手將皿蓋打開一條縫隙.,右手將沾有菌種的接種環(huán)灼燒接種環(huán)嗎?為何?3.在作第二次以及其后的劃線操作時,為何總是從上一次劃(6)涂布平板操作的環(huán)節(jié):③將沾有少許酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻8~10s。想一想,第2步應(yīng)怎樣進行無菌操作?(1)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的措施。放入4℃的冰箱中保藏。后來每3~6個月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的(2)對于需要長期保留的菌種,可以采用甘油管藏的措施。(1)生物的營養(yǎng)(2)確定培養(yǎng)基制作與否合格的措施課題二土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)素分解成氨之后,才能被植物運用。土壤中的細菌之因此能分解尿素,是由于他們能合成(1)試驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有助于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等),同步克制或制止其他微(2)選擇性培養(yǎng)基(3)配制選擇培養(yǎng)基的根據(jù)不加入有機物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的(2)稀釋涂布平板法記錄樣品中活菌的數(shù)目的原理采用此措施的注意事項:1.一般選用菌落數(shù)在30~300之間的平板進行計數(shù)2.為了防止菌落蔓延,影響計數(shù),可在培養(yǎng)基中加入TTC3.本法僅限于形成菌落的微生物(1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富具有般選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30到300之間、適于計數(shù)的(3)微生物的培養(yǎng)與觀測不一樣種類的微生物,往往需要不一樣的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細菌30~37℃1~2天放線菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天每隔24小時記錄一次菌落數(shù)目,選用菌落數(shù)目穩(wěn)定期的記錄作為成果,這樣可以防止唯獨及培養(yǎng)時間),同種微生物體現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特性。形狀、大小、隆起程度、顏色。(1)怎樣從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)?V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(ml),M代表稀釋倍數(shù)課題三分解纖維素的微生物的分離(1)棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,木材、作物秸稈等也富含纖維素。(1)篩選措施:剛果紅染色法??梢酝ㄟ^顏色反應(yīng)直接對微生物進行篩選。(2)剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步與否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑(1)土壤采集選擇富含纖維素的環(huán)境。(2)剛果紅染色法分離纖維素分解菌的環(huán)節(jié)倒平板操作、制備菌.懸液、涂布平板(3)剛果紅染色法
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