芳胺類(lèi)藥物分析-對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)

藥物分析藥分教研室陳九章胺類(lèi)藥物的檢測(cè)目錄CONTENTS酰胺類(lèi)苯甲酸酯類(lèi)苯乙胺類(lèi)132...第一節(jié)

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）化學(xué)結(jié)構(gòu)母核結(jié)構(gòu)：鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸普魯卡因胺典型藥物：（二）理化性質(zhì)1.溶解性

游離堿難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑。鹽酸鹽易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。2.芳香第一胺反應(yīng)

具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基，鹽酸丁卡因除外。3.水解性

含有酯鍵，易水解。4.弱堿性

含有叔氮原子，具弱堿性，苯佐卡因除外。5.光譜吸收特性

紫外吸收；紅外吸收。二、鹽酸普魯卡因及其制劑的檢驗(yàn)（一）性狀本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭。在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中幾乎不溶。鹽酸普魯卡因注射劑為無(wú)色的澄明液體。（二）鑒別1.水解反應(yīng)

取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10%氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。2.芳香第一胺反應(yīng)

取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，加與0.1mol/L亞硝酸鈉溶液等體積的1mol/L脲溶液，振搖1min，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，生成橙黃到猩紅色的沉淀。3.氯化物的反應(yīng)

取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀復(fù)生成。4.紅外光譜法

本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集397圖）一致。5.鹽酸普魯卡因注射劑鑒別在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。（三）檢查1.鹽酸普魯卡因

本品雜質(zhì)檢查除需檢查“溶液的澄清度”“干燥失重”“熾灼殘?jiān)薄拌F鹽”及“重金屬”等一般雜質(zhì)外，還應(yīng)檢查以下特殊雜質(zhì)：（1）酸度檢查：取本品0.40g，加水10ml溶解后，加甲基紅指示液1滴，如顯紅色，加氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.2ml，應(yīng)變?yōu)槌壬＃ㄈz查1.鹽酸普魯卡因

（2）對(duì)氨基苯甲酸的檢查：采用高效液相色譜法外標(biāo)法進(jìn)行檢查。2.鹽酸普魯卡因注射液

本品主要雜質(zhì)檢查項(xiàng)目有pH、有關(guān)物質(zhì)、滲透壓摩爾濃度、細(xì)菌內(nèi)毒素及注射劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（通則0102）?！坝嘘P(guān)物質(zhì)”檢查：采用高效液相色譜法進(jìn)行檢查。供試品溶液色譜圖中如有與對(duì)氨基苯甲酸峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)鹽酸普魯卡因標(biāo)示量的1.2%，其他雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液的主峰面積（1.0%）。（四）含量測(cè)定1.鹽酸普魯卡因原料藥的含量測(cè)定

（1）測(cè)定原理：鹽酸普魯卡因中因含有芳香第一胺，可在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，現(xiàn)行版《中國(guó)藥典》（2020年版）采用亞硝酸鈉法中的重氮化滴定法進(jìn)行含量測(cè)定，采用永停滴定法指示終點(diǎn)。

（2）測(cè)定方法：取本品約0.6g，精密稱(chēng)定，照永停滴定法（通則0701），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。本品按干燥品計(jì)算，含C13H20N2O2·HCl不得少于99.0％。（3）亞硝酸鈉滴定法的主要條件：重氮化反應(yīng)的速度受多種因素的影響，亞硝酸鈉滴定液及反應(yīng)生成的重氮鹽也不夠穩(wěn)定，因此在測(cè)定中應(yīng)注意以下主要條件。

①加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度：

由于NOBr的生成速度快，生成量比NOCl的量大得多，即：加入溴化鉀后，在供試液中可以提高NO+的濃度，從而加速了重氮化反應(yīng)。②加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng)：因胺類(lèi)藥物的鹽酸鹽較其硫酸鹽的溶解度大，反應(yīng)速度也較快，所以多采用鹽酸。按照化學(xué)反應(yīng)在式，1mol的芳胺需與2mol的鹽酸作用，但實(shí)際測(cè)定時(shí)往往加入過(guò)量的鹽酸，主要作用有加快重氮化反應(yīng)速度；重氮鹽在酸性溶液中更穩(wěn)定；防止生成偶氮氨基化合物，影響測(cè)定結(jié)果。

③滴定溫度為室溫（10～30℃）：溫度高，重氮化反應(yīng)速度快；但溫度太高，可使亞硝酸逸失，并使重氮鹽分解；溫度過(guò)低則反應(yīng)太慢，因此一般在室溫條件下進(jìn)行。

④滴定方式：先快后慢。若使用自動(dòng)永停終點(diǎn)儀，則直接將滴定管尖端和電極插入液面下，在磁力攪拌器攪拌下由儀器自動(dòng)滴定。⑤終點(diǎn)指示方法：亞硝酸鈉滴定法的終點(diǎn)指示方法有電位法、永停滴定法、外指示劑法和內(nèi)指示劑法等?！吨袊?guó)藥典》（2020年版）采用永停法指示亞硝酸鈉滴定法的終點(diǎn)。

（4）含量計(jì)算：

原料藥

2.鹽酸普魯卡因注射液的含量測(cè)定

本品為鹽酸普魯卡因加氯化鈉適量使成等滲的滅菌水溶液。含鹽酸普魯卡因（C13H20N2O2·HCl）應(yīng)為標(biāo)示量的95.0％～105.0％?！吨袊?guó)藥典》（2020年版）采用高效液相色譜法外標(biāo)法測(cè)定含量。（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含0.1%庚烷磺酸鈉的0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0）-甲醇（68∶32）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為290nm，理論板數(shù)按普魯卡因峰計(jì)算不低于2000。普魯卡因峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。（2）測(cè)定法：精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每1ml中含鹽酸普魯卡因0.02mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取10μl注入液相色