細(xì)胞的原代培養(yǎng)-自助學(xué)習(xí)

細(xì)胞培

養(yǎng)細(xì)胞的原代培養(yǎng)自主查閱（課后）（1）什么是動(dòng)物細(xì)胞的原代培養(yǎng)？（2）什么是組織塊培養(yǎng)法？（3）組織塊培養(yǎng)法的基本流程如何？（4）什么是消化培養(yǎng)法？（5）消化培養(yǎng)法的基本流程如何？細(xì)胞培養(yǎng)什么是動(dòng)物細(xì)胞的原代培養(yǎng)？原代培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)，是從供體進(jìn)行細(xì)胞分離之后至第一次傳代之前的細(xì)胞培養(yǎng)階段。原代培養(yǎng)方法最基本和常用的有兩種：組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法細(xì)胞培養(yǎng)什么是組織塊培養(yǎng)法？組織塊培養(yǎng)法：將體內(nèi)取出的組織塊切割成一定大小的植塊后再接種進(jìn)行培養(yǎng)的方法。對(duì)于大多數(shù)動(dòng)物組織而言，在植塊培養(yǎng)1～3天后，即有細(xì)胞從植塊向外遷移，隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移，遷出的細(xì)胞會(huì)越來越多，而且遷出的細(xì)胞不斷分裂繁殖，逐漸漲滿支持物表面為什么組織塊培養(yǎng)法能用于培養(yǎng)細(xì)胞？細(xì)胞培養(yǎng)著裝細(xì)胞培養(yǎng)操作者進(jìn)入無菌室前先用肥皂洗凈雙手，然后用1‰

新潔爾滅浸泡消毒5分鐘細(xì)胞培養(yǎng)組織塊培養(yǎng)法基本流程如何？取材細(xì)胞培養(yǎng)接種組織塊細(xì)胞培養(yǎng)移入培養(yǎng)箱中（注意貼有組織塊的一面朝上）靜止2～3小時(shí)，然后將細(xì)胞培養(yǎng)瓶輕輕翻轉(zhuǎn)，繼續(xù)靜止培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)觀察24～48小時(shí)后若培養(yǎng)液變成黃色且混濁，表示已被污染；若培養(yǎng)液變成紫色，一般細(xì)胞生長(zhǎng)不好，則培養(yǎng)液pH過高；若培養(yǎng)液顯為橙黃、橘紅且清澈，一般顯示細(xì)胞生長(zhǎng)良好。在顯微鏡下觀察，若此時(shí)見細(xì)胞自組織邊緣長(zhǎng)出。繼續(xù)培養(yǎng)3～5日，再換部分或全部培養(yǎng)液，待多數(shù)組織塊的生長(zhǎng)暈相接，小心挑掉組織塊，繼續(xù)培養(yǎng)3～4天，細(xì)胞貼滿細(xì)胞培養(yǎng)瓶壁時(shí)便可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)什么是消化培養(yǎng)法？將體內(nèi)取出的組織塊制備成單細(xì)胞懸液后再接種進(jìn)行培養(yǎng)的方法。分散的細(xì)胞若屬于貼壁依賴型細(xì)胞,就能黏附、鋪展于培養(yǎng)器皿和載體表面生長(zhǎng)而形成細(xì)胞單層，所以這種培養(yǎng)方式又稱為單層細(xì)胞培養(yǎng)法。細(xì)胞培養(yǎng)消化培養(yǎng)法的基本流程如何？細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟較多，操作時(shí)要特別注意無菌操作防止消化過度,組織塊變得疏松，顏色略變白時(shí)，終止消化一個(gè)雞胚配成20-30

mL懸液接種到培養(yǎng)瓶中細(xì)胞培養(yǎng)如何進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)？血細(xì)胞計(jì)數(shù)板：人工計(jì)數(shù)自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：利用儀器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)血球計(jì)數(shù)板自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀細(xì)胞培養(yǎng)原液中細(xì)胞密度(細(xì)胞數(shù)／毫升)=(4大格細(xì)胞數(shù)之和／4)×104×稀釋倍數(shù)含有兩個(gè)室，每個(gè)室被劃分為9個(gè)方陣，其中4個(gè)方陣有16個(gè)小方格，為0.1

mm3 或1

x10–4ml。細(xì)胞培養(yǎng)若已知4個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)為160個(gè)，試計(jì)算原液中的