樣品前處理方法-樣品濃縮(氮吹儀)-1

第第頁樣品前處理方法-樣品濃縮(氮吹儀)1.引言色譜分析樣品制備是一個重要和復(fù)雜的過程，因為色譜分析技術(shù)涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復(fù)雜多變。樣品物理形態(tài)范圍廣泛，對采用分析方法進行直接分析測定構(gòu)成的干擾因素多，所以需要選擇并實施科學有效的處理方法及其技術(shù)，達到分析測定或評價和調(diào)查的目的?，F(xiàn)代色譜儀器對一個樣品的分析測定所需要的時間越來越短，但是色譜分析樣品制備過程所用的時間卻仍然很長。據(jù)統(tǒng)計，在大部分的色譜分析實驗中，將一個原始樣品處理成可直接用于色譜儀器分析測定的樣品狀態(tài)，所消耗的時間只約占整個分析時間的60%-70%，而色譜儀器測定此分析樣品的時間只約占10%，其余的時間是用于此樣品測定結(jié)果的整理和報告等。2.樣品前處理過程2.1預(yù)處理對樣品進行粉碎、混勻和縮分等過程稱為預(yù)處理。固體樣品含水較低，粉碎過篩。含水量較高取食用部分切碎或先烘干后粉碎過篩。液體、漿體攪拌混合均勻互不相容的液體先分離再取樣特殊樣品根據(jù)實驗要求特殊處理2.2提取浸提針對固體樣品使待測組分轉(zhuǎn)移到提取液中萃取針對液體樣品，利用某組分在兩種互不相容的溶劑中的分配系數(shù)不同，從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，從而達到提取目的。2.3凈化去除雜質(zhì)的過程稱為凈化。萃取法適用于液體樣品，少量多次化學法通過使雜質(zhì)或待測物發(fā)生化學反應(yīng)而改變其溶解性，使其與原體系分離。層析法利用混合物中各組分的理化性質(zhì)(如溶解度、吸附能力、電荷、分子量、分子*性和親和力等)不同，使各組分在支持物上的移動速度不同，而集中分布在不同區(qū)域，借此將各組分分離。2.4濃縮樣品經(jīng)過提取凈化后，體積變大，待測物濃度降低，不利于檢測，所以濃縮的目的是減小樣品體積提高待測物濃度，常見方法如下：常壓濃縮適用于揮發(fā)性和沸點相對較低的組分，通過升高溫度，將溶劑由液態(tài)轉(zhuǎn)化成氣態(tài)被抽走或被通過冷凝器再次收集，從而達到濃縮目的。減壓濃縮通過抽真空，使容器內(nèi)產(chǎn)生負壓，在不改變物質(zhì)化學性質(zhì)的前提下降低物質(zhì)的沸點，使一些高溫下化學性質(zhì)不穩(wěn)定或沸點高的溶劑在低溫下由液態(tài)轉(zhuǎn)化成氣態(tài)被抽走或被通過冷凝器再次收集。冷凍干燥冷凍的同時減壓抽真空，使溶劑升華，適用于生物活性樣品。氮吹濃縮適用于體積小、易揮發(fā)的提取液。采用惰性氣體對加熱樣液進行吹掃，使待處理樣品迅速濃縮，達到快速分離純化的效果。該方法操作簡便，尤其可以同時處理多個樣品，大大縮短了檢測時間。被廣泛應(yīng)用于農(nóng)殘檢測，制藥行業(yè)和通用研究中的樣品批量處理。2.5氮氣漩渦吹掃技術(shù)該裝置采用氮氣旋渦旋轉(zhuǎn)吹掃技術(shù),樣品在yi定溫度下,通過氮氣吹掃,使待測物質(zhì)獲得良好富集效果。濃縮儀由微處理器控制,保證樣品的自動濃縮蒸發(fā)。氣體噴嘴吹出氮氣流在濃縮管內(nèi)形成螺旋狀氣流,減緩了氣流沖力,使溶劑均勻揮發(fā)且不飛濺。2.6氮吹濃縮影響因素適當增加溫度能提高目標物質(zhì)回收率。對于不同物質(zhì),可以通過設(shè)置濃縮儀的參數(shù)適當控制濃縮時溫度和壓力,縮短濃縮時間,以達到更好的回收率。2.6.1氮氣流壓力對回收率的影響旋渦氮吹濃縮儀氮氣流量改變是通過調(diào)節(jié)氮氣進口壓力實現(xiàn),管徑不變,流量與壓力成正比關(guān)系。氮氣流的壓力越大,氮氣流流量就越大。氮氣流撞到試管壁形成旋渦,溶劑接觸表面積和旋渦剪力越大,溶劑的蒸發(fā)越快,同時不停吹掃氮氣能避免溶劑與空氣發(fā)生化學反應(yīng)。2.6.2水浴溫度對氮氣流的影響濃縮管浸在水浴中,通過傳熱控制濃縮管內(nèi)溶液溫度。通常水浴溫度控制范圍從30℃到60℃。溫度設(shè)定根據(jù)濃縮管里溶劑的沸點和被分析物質(zhì)性質(zhì)而定。水浴溫度一般要低于溶劑沸點溫度,否則可能蒸發(fā)速度過快,回收率可能降低。但是溫度設(shè)置過低,會導(dǎo)致濃縮時間過長,長時間氮氣吹掃也會導(dǎo)致待測物質(zhì)揮發(fā)。在設(shè)置水浴溫度時應(yīng)充分考慮溶劑的沸點和揮發(fā)性。溫度高,能縮短濃縮時間,避免目標物質(zhì)與空氣長時間接觸,減少目標物質(zhì)揮發(fā),但過高溫度會導(dǎo)致溶劑沸騰,從而降低回收率。2.7氮吹儀氮吹儀主要用于氮吹濃縮步驟，基本原理是與氮氣瓶鏈接，通過減壓閥將氮氣通入到氮吹儀的通氣板中，然后通過通氣板上的氮吹針對樣品進行吹掃達到濃縮目的，并在試管底部進行加熱用來加速溶劑的揮發(fā)。蔬菜中26種農(nóng)藥殘留前處理及檢測方法文中建立蔬菜中26種有機磷、有機氯和菊酯等三大類農(nóng)藥殘留的固相萃取-毛細管氣相色譜的快速檢測方法。1試樣的制備1.1提取樣品用組織搗碎機制成勻漿狀,準確稱取20g試樣,加入50mL乙腈,在勻漿機中高速勻漿1min后濾紙過濾,濾液收集到裝有5～10g氯化鈉的100mL具塞量筒中,收集濾液,蓋上塞子,劇烈震蕩1min,在室溫下靜置30min,使乙腈相和水相清晰分層。1.2樣品凈化1.2.1有機磷類農(nóng)藥凈化從100mL具塞量筒中吸取5.0mL乙腈溶液,放入10mL刻度試管中,于氮吹儀上濃縮至近干(水浴50℃)。移取2.0mL丙酮于刻度離心管中,在旋渦混合器上混勻后,供氣相色譜分析。1.1.2有機氯和菊酯類農(nóng)藥凈化從100mL具塞量筒中吸取10.0mL乙腈溶液,放入10mL刻度試管中,于氮吹儀上濃縮至近干(水浴50℃)，移取2.0mL正己烷溶解殘渣,在旋渦混合器上混勻待凈化。將Florisil柱依次用5.0mL丙酮/正己烷(10:90,v/v)5.0mL正己烷預(yù)洗條件化,當溶劑液面到達柱吸附層表面時立即加入樣品溶液,用10mL刻度離心管收集洗脫液,用5mL丙酮:正己烷(10:90,v/v)洗滌刻度離心管后過Floris柱,并重復(fù)一次。將離心管置于氮吹儀上,水浴溫度50℃,氮吹蒸發(fā)至小于4.0mL,用正己烷準確定容至4.0mL。在旋渦混合器上混勻后,供氣相色譜分析。動物源食品中激素多殘留前處理方法(GB/T21981-2023)1引言根據(jù)相關(guān)報道，一些奶廠可能會經(jīng)受不住利益的在奶牛生病的情況或不孕的情況下，盲目的為了提高奶牛產(chǎn)奶量，會使用抗生素和激素等禁止的藥品。嬰幼兒食用含有激素的奶粉后可能產(chǎn)生性早熟現(xiàn)象，對嬰幼兒身體產(chǎn)生嚴重傷害。衛(wèi)生部委托北京市疾病預(yù)防控制中心、中國檢驗檢疫科學院等檢測機構(gòu)，采用國際通行的檢測方法(《動物源食品中激素多殘留檢測方法液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜法》GB/T21981-2023)對多種奶粉進行檢測，結(jié)果激素含量并未超標，但人們卻對嬰幼兒的健康保障陷入深思，有很多家長已經(jīng)成了驚弓之鳥不知道該買什么樣的奶粉才能讓自己的孩子健康成長，所以建立相關(guān)激素的簡易檢測方法是一件既有經(jīng)濟效益又會給人類造福的事情。2試樣的制備2.1動物肌肉、肝臟、蝦從所取全部樣品中取出有代表性樣品約500g，剔除筋膜，蝦去除頭和殼。用組織搗碎機充分搗碎均勻，均分成兩份，分別裝入潔凈容器中，密封，并標明標記，于-18℃以下冷凍存放。2.2牛奶從所取全部樣品中取出有代表性樣品約500g，充分搖勻，均分成兩份，分別裝入潔凈容器中，密封，并標明標記，于0℃4℃以下冷藏存放。2.3雞蛋從所取全部樣品中取出有代表性樣品約500g，去殼后用組織搗碎機充分攪拌均勻，均分成兩份，分別裝入潔凈容器中，密封，并標明標記，于0℃4℃以下冷藏存放。注：制樣操作過程中應(yīng)防止樣品被污染或其中的殘留物發(fā)生變化。3樣品提取凈化3.1提取稱取5g試樣(J確至0.01g)于50mL具塞塑料離心管中，準確加入內(nèi)標溶液(4.15)100L和10mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，漩渦混勻，再加入-葡萄糖醛酸酶溶液100L于371℃振蕩酶解12h。取出冷卻至室溫，加入25mL甲醇超聲提取30min，0℃～4℃下10000r/min離心10min，將上清液轉(zhuǎn)入潔凈燒杯，加水100mL，混勻后待凈化。3.2凈化提取液以