江蘇省新沂市高中生物第四章生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐4.1蛋白質(zhì)的分離與純化方法教案(選修1)

江蘇省新沂市高中生物第四章生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐4.1蛋白質(zhì)的分離與純化方法教案(選修1)PAGEPAGE4蛋白質(zhì)的分離與純化方法教學(xué)目標(biāo)：1、知識與技能：掌握蛋白質(zhì)的分離與純化方法，知道從生物材料中提取芳香油2、過程與方法：掌握蛋白質(zhì)的分離與純化三種方法的比較過程3、情感態(tài)度價(jià)值觀：培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)實(shí)驗(yàn)的觀點(diǎn)。教學(xué)重點(diǎn)：蛋白質(zhì)的分離與純化教學(xué)難點(diǎn)：蛋白質(zhì)的分離與純化，從生物材料中提取芳香油教學(xué)方法：自主、合作、探究學(xué)習(xí)。教具使用：無共案部分個案部分教學(xué)過程教師主導(dǎo)活動學(xué)生主體活動課前：布置學(xué)習(xí)目標(biāo)和預(yù)習(xí)提綱，要求學(xué)生完成預(yù)習(xí)任務(wù)，下發(fā)及收繳批改導(dǎo)學(xué)案（附導(dǎo)學(xué)案）學(xué)生進(jìn)行預(yù)習(xí)，完成導(dǎo)學(xué)案。課中：對上節(jié)課存在問題進(jìn)行點(diǎn)撥。新授：根據(jù)學(xué)生自學(xué)情況，引導(dǎo)學(xué)生分析主要的問題。強(qiáng)調(diào)以下幾點(diǎn)。【思維點(diǎn)撥】1．說明用透析法、離心沉降法和電泳等方法純化蛋白質(zhì)的原理和大致過程。2．影響電泳泳動速度的主要因素有哪些?這些因素是如何影響泳動速度的?3．“血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳”實(shí)驗(yàn)最關(guān)鍵的一步是什么?你能說出這一步的操作要求嗎?4．漂洗后的薄膜上可以看到幾條色帶?分別代表什么?5．植物芳香油提取的常用方法有哪些?這均帶負(fù)電荷移向正極。由于血清中各蛋白組分等電點(diǎn)不同而致表面凈電荷量不等，加之分子大小和形狀各異，因而電泳遷移率不同，彼此得以分離。電泳后，CAM經(jīng)染色和漂洗，可清晰呈現(xiàn)清蛋白、α1一球蛋白、α2一球蛋白、β球蛋白、γ一球蛋白5條區(qū)帶，比色即可計(jì)算出血清各蛋白組分的相對百分?jǐn)?shù)。布置學(xué)生課堂檢測，并重點(diǎn)提示。學(xué)生對上節(jié)存在問題進(jìn)行討論。學(xué)生自學(xué)基礎(chǔ)知識。學(xué)生根據(jù)導(dǎo)學(xué)案內(nèi)容討論并展示個人、小組成果。思考：蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法：抽提方法：純化主要是根據(jù)：常用的方法：醋酸纖維薄膜電泳的實(shí)驗(yàn)的基本步驟：色帶：學(xué)生完成課堂檢測課后：布置課外作業(yè)及下一節(jié)預(yù)習(xí)提綱。（見導(dǎo)學(xué)案）學(xué)生完成課外作業(yè)及下一節(jié)預(yù)習(xí)。板書設(shè)計(jì)生物成分的分離與測定技術(shù)蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法：抽提方法：純化主要是根據(jù)：常用的方法：醋酸纖維薄膜電泳的實(shí)驗(yàn)的基本步驟：色帶：教學(xué)札記三、其他補(bǔ)充教學(xué)資料（各位教師根據(jù)各班教學(xué)特點(diǎn)選擇補(bǔ)充資料，可另附紙）

高二生物生物成分的分離與測定技術(shù)導(dǎo)學(xué)案使用時間：編制人：一、學(xué)習(xí)目標(biāo)：知道蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法，蛋白質(zhì)抽提方法，掌握蛋白質(zhì)的分離與純化方法。二、知識構(gòu)成：1．蛋白質(zhì)的分離常用的細(xì)胞破碎的方法有：根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性，分別可選擇哪些抽提方法？、、蛋白質(zhì)的純化主要是根據(jù)之間以及之間在、、、等方面存在的差異進(jìn)行的。常用的方法包括、、等。2．用電泳分離純化蛋白質(zhì)時，泳動速度主要取決于，即。此外，、等因素對泳動速度也有影響。3．血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳的實(shí)驗(yàn)的基本步驟包括：、、、、、、、、、。4．浸泡醋酸纖維薄膜前，用筆做記號是在(填“光澤面”或“非光澤面”)；點(diǎn)樣是在(填“光澤面”或“非光澤面”)；平懸薄膜時，(填“光澤面”或“非光澤面”)朝上。5．經(jīng)電泳后，可以在薄膜上看到條色帶，它們分別是、、、、。'6．植物芳香油的提取方法有和等。三、學(xué)法和自檢：本節(jié)內(nèi)容主要通過看書、分析蛋白質(zhì)的提取、分離、純化的不同方法。動手試一試：1]鹽析法分離蛋白質(zhì)的原理是()A．破壞蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)B．破壞蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)C．破壞蛋白質(zhì)水化膜而改變?nèi)芙舛菵．使蛋白質(zhì)發(fā)生變性沉淀2]利用透析法將蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分離的原理是()利用蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性B．利用蛋白質(zhì)分子的水溶性C．利用蛋白質(zhì)分子的膠體性D．利用蛋白質(zhì)分子所帶電荷3]．下列關(guān)于血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實(shí)驗(yàn)的說法不正確的是()A．實(shí)驗(yàn)所用的巴比妥緩沖液的pH為8．6B．點(diǎn)樣是在薄膜的光澤面上進(jìn)行的C．實(shí)驗(yàn)后可以得到五條色帶D．整個實(shí)驗(yàn)最關(guān)鍵的步驟是點(diǎn)樣4]．有一混合蛋白質(zhì)溶液，各種蛋白質(zhì)的pH分別為4．5、5．2、6．6、7．2，電泳時欲使其中三種泳向正極，則緩沖液的pH應(yīng)該是()A．2．0B．5．0C．6．0D．7．0

課題生物成分的分離與測定技術(shù)四、達(dá)標(biāo)檢測1．(多選)在蛋白質(zhì)粗提取時，破碎細(xì)胞的方法有()A．研磨法B．超聲波法C．酶解法D．機(jī)械破碎2．分離水溶性蛋白質(zhì)所選用的提取溶劑是()A．酸性溶液B．堿性溶液C．中性緩沖液D．有機(jī)溶劑3．(多選)純化蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)不同蛋白質(zhì)之間以及蛋白質(zhì)與其他分子之間在哪些等方面存在的差異進(jìn)行的()A．分子大，B．溶解度C．所帶電荷的多少D．吸附性質(zhì)4．某蛋白質(zhì)等電點(diǎn)為7．5，在pH6．O的緩沖液中進(jìn)行自由界面電泳，其泳動方向?yàn)?)A．向負(fù)極移動B．向正極移動C．不運(yùn)動D．同時向正極和負(fù)極移動5．在pH5．12時進(jìn)行電泳，哪種蛋白質(zhì)既不向正極移動也不向負(fù)極移動()A．血紅蛋白：pI(等電點(diǎn))一7．07B．魚精蛋白：pI一12．20C．a(chǎn)1一球蛋白：pI一5．06D．B一球蛋白：pl=5．126．血清蛋白電泳時通常用pH8．6的緩沖液，此時各種蛋白質(zhì)所帶的電荷為()A．清蛋白帶正電荷，其他蛋白帶負(fù)電荷B．清蛋白帶負(fù)電荷，其他蛋白帶正電荷C．各種蛋白均帶正電荷D．各種蛋白均帶負(fù)電荷7．(多選)支持物電泳常采用的支持物有()A．濾紙B．醋酸纖維薄膜C．大分子凝膠D．纖維素五、學(xué)習(xí)小結(jié)和課外作業(yè)：1、學(xué)習(xí)小結(jié)：2、上本作業(yè)：列舉蛋白質(zhì)粗提取時次報(bào)的破碎、蛋白質(zhì)的抽提、純化方法。3、課本：64頁123454、補(bǔ)充練習(xí)：8．請根據(jù)血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實(shí)驗(yàn)回答下列問題：(1)實(shí)驗(yàn)所用的主要試劑有：(2)實(shí)驗(yàn)所用的緩沖液的pH為，因?yàn)椤?3)點(diǎn)樣應(yīng)點(diǎn)在薄膜的面，方法是用在血清中蘸一下，在離薄膜一端cm處輕輕按下，隨即提起。(4)實(shí)施電泳時，所用電壓為，膜寬電流強(qiáng)度，時間。(5)實(shí)驗(yàn)結(jié)果時，薄膜上呈條色帶，分別代表。9．選擇正確答案的序號。、清蛋白一球蛋白、一球蛋白、一球蛋白、球蛋白A．清蛋白B．α1一球蛋白C．α2--球蛋白D．β一球蛋白E．γ一球蛋白(1)在正常人血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中泳動最快的是()(2)在正常人血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中泳動最慢的是()(3)在正常人血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中區(qū)帶最深的是()(4)在正常人血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳圖譜中區(qū)帶最淺的是()(5)正常人血清中的各種蛋白質(zhì)，在pH8．6的緩沖液中負(fù)電性最強(qiáng)的是()(6)正常人血清中的各種蛋白質(zhì)，在pH8．6的緩