洗滌用品中烷基酚聚氧乙烯醚的測定 高效液相色譜法

洗滌用品中烷基酚聚氧乙烯醚的測定高效液相色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了洗滌用品中烷基酚聚氧乙烯醚含量的高效液相色譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于洗滌用品中烷基酚聚氧乙烯醚含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語和定義烷基酚聚氧乙烯醚（APEO）alkylphenolpolyethoxylates烷基酚聚氧乙烯醚的分子結(jié)構(gòu)式為R-C6H4-(OC2H4)nOH；烷基酚聚氧乙烯醚是聚氧乙烯型非離子表面活性劑，這類物質(zhì)常用的成分為辛基酚聚氧乙烯醚[R:-C8H17，簡稱OPnEO]和壬基酚聚氧乙烯醚[R:-C9H17，簡稱NPnEO]。4原理試樣經(jīng)甲醇提取，超聲過濾后，用高效液相色譜測定辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚，保留時間和紫外光譜圖定性，外標(biāo)法定量。5試劑除另有規(guī)定外，本實(shí)驗(yàn)用水均為GB/T6682中規(guī)定的一級水。5.1辛基酚聚氧乙烯醚對照品（9002-93-1）：純度≥99.5%。5.2壬基酚聚氧乙烯醚對照品（9016-45-9）：純度≥99%。5.3甲醇：色譜純。5.4標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（10mg/mL分別準(zhǔn)確稱取辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚對照品約100mg（精確至0.01mg）于10mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度，搖勻，-20℃存放。20.0μg/mL、100.0μg/mL、200.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。6儀器和設(shè)備6.1高效液相色譜儀：配二極管陣列檢測器。6.2分析天平：感量為0.1mg、0.01mg。6.3離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于10000r/min。6.4渦旋振蕩器。6.5超聲波清洗器。7分析步驟7.1試樣處理稱取約2g樣品（精確至0.0001g）至10mL具塞比色管中，加甲醇至刻度，渦旋振蕩器混勻后超聲15min，混勻，靜置至室溫（必要時取適量于8000r/min離心5min），經(jīng)0.22μm過濾膜過濾后待測。7.2參考色譜條件a)色譜柱：C18（250mm×4.6mm，5μm），或等效色譜柱；b)流動相：甲醇+水（80+20，v/v）；c)流速：1.0mL/min；d)檢測波長：224nm；e)柱溫：35℃;f)進(jìn)樣量：20μL。7.3測定7.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（5.5）注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定標(biāo)準(zhǔn)溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖參見附錄A中的圖A.1。7.3.2樣品測定將按7.1處理好的待測試樣溶液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定試樣溶液，記錄色譜圖，根據(jù)保留時間和紫外吸收光譜圖定性，紫外吸收光譜圖參見附錄A中的圖A.2。采用外標(biāo)法定量。試樣溶液中OPnEO和NPnEO的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)。8計(jì)算結(jié)果試樣中烷基酚聚氧乙烯醚含量X按公式（1）計(jì)算：式中：X——c——V——f——m——X=10-4........................................................................(1)試樣中OPnEO和壬NPnEO的含量，%；試樣溶液中OPnEO和NPnEO濃度，μg/mL；定容體積，mL；稀釋倍數(shù)，不稀釋時為1；試樣質(zhì)量，g。9檢出限和定量限辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚檢出限均為5mg/kg，定量限均為15mg/kg。10回收率與精密度方法的回收率為94.8~102.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.50~2.76%。11允許差在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。（資料性附錄）標(biāo)準(zhǔn)溶液高效液相色譜圖及紫外吸收光譜圖圖A.1辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖220240260280300320340360380nm圖A.2辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚紫外吸收光譜圖（資料性附錄）烷基酚聚氧乙烯醚高效液相/質(zhì)譜確證方法必要時，可采用液相色譜/質(zhì)譜法確證結(jié)果，以檢查洗滌劑中是否有其他組分干擾烷基酚聚氧乙烯醚的測定。在相同的液相色譜－質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)條件下，如果樣品中色譜峰的保留時間和紫外吸收光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對應(yīng)成分一致，所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與相當(dāng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的離子相對豐度比的差不超過表1規(guī)定范圍，則可以判定樣品中存在對應(yīng)的測定成分。表1結(jié)果確證時相對離子豐度比的最大允許偏差相對離子豐度（k）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%B.1參考色譜條件a）色譜柱：BEHC18（100mm×2.1mm，1.7μm），或等效色譜柱；b）流動相：梯度洗脫，洗脫程序見表2；c）流速：0.3mL/min；d）柱溫：35℃;e）進(jìn)樣量：5μL。表2洗脫程序時間/min10mmol乙酸銨溶液/%0.0020.0098225.0098226.0030.00B.2參考質(zhì)譜譜條件:a)離子化方式：電噴霧離子化；b)電離模式：正離子模式；c)噴霧電壓：3000V；d)鞘氣：50Arb；e)輔助氣：20Arb；f)反吹氣：0Arb；g)蒸發(fā)溫度：350℃;h)離子傳輸管溫度：325℃;i)質(zhì)量掃描范圍：100m/z~12