培訓(xùn)包-脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)課件講解

作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫培訓(xùn)包一脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)靳改龍2019.2

作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫/甘薯生產(chǎn)技術(shù)生測(cè)產(chǎn)甘薯生產(chǎn)技術(shù)培訓(xùn)包培訓(xùn)包一脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)一、甘薯病毒病的危害及種類為甘薯生產(chǎn)者提供相應(yīng)的優(yōu)良品種種苗，在甘薯種植業(yè)、淀粉加工業(yè)、食品加工業(yè)、飼料加工業(yè)等產(chǎn)業(yè)都起著重要作用。隨著甘薯的規(guī)?；N植和其他甘薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展對(duì)原料需求量的增加，脫毒甘薯種苗業(yè)也必將會(huì)有一個(gè)較大的發(fā)展。由于甘薯在大田生產(chǎn)過程中易感染病毒病，影響產(chǎn)量和品質(zhì)，因此,為擴(kuò)大優(yōu)良品種的推廣應(yīng)用且保持各類甘薯優(yōu)良品種豐產(chǎn)性狀和優(yōu)良品質(zhì)，首先要從嚴(yán)掌握脫毒甘薯及其快繁技術(shù)。(一)甘薯病毒病的危害

甘薯病毒病又稱甘薯花葉病，是甘薯生產(chǎn)中逐漸發(fā)展危害較重的一大類病害。世界各甘薯產(chǎn)區(qū)普遍有甘薯病毒病的發(fā)生和危害。我國于20世紀(jì)50年代首次報(bào)道了甘薯病毒病的發(fā)生，以后陸續(xù)有甘薯病毒病發(fā)生和危害情況的報(bào)道。自80年代以來發(fā)生呈上升趨勢(shì)，目前在廣東、福建、江蘇、四川、北京、山東、河南、安徽等地均有發(fā)生，以江蘇、四川、山東等省市發(fā)生較重。近幾年來甘薯病毒病危害不斷加重，成為甘薯生產(chǎn)的主要病害之一。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)一、甘薯病毒病的危害及種類(一)甘薯病毒病的危害

由于甘薯為無性繁殖作物，感染病毒后，病毒在甘薯體內(nèi)代代相傳（薯塊、薯苗），病毒逐年積累，使甘薯嚴(yán)重退化，危害逐年加重，表現(xiàn)為結(jié)薯量少，薯塊小，牛蒡根增多，一般可減產(chǎn)20～50%。即使耐病毒品種感染病毒后產(chǎn)量也會(huì)減少20％以上。據(jù)山東、江蘇、安徽、北京等省市的調(diào)查，由病毒病造成的甘薯產(chǎn)量損失一般達(dá)20％～30％，嚴(yán)重的可在50％以上。按減產(chǎn)20%和平均每千克價(jià)值0.4元計(jì)算，則全國每年要損失2000萬噸鮮薯，折合人民幣80億元。1997～1998年河南省甘薯病毒病的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，甘薯病毒病的發(fā)生非常普遍，一般發(fā)病率達(dá)60％～90％，雖然不同品種間病情嚴(yán)重度存在差異，但(、(二）甘薯病毒的種類已報(bào)道的侵染甘薯的病毒約有20種，主要有甘薯羽狀斑駁病毒(SPFMV)、甘薯潛隱病毒(SPLV)、甘薯類花椰菜花葉病毒(SPCLV)、甘薯脈花葉病毒(SPVMV)、甘薯輕斑駁病毒(SPMMV)、甘薯黃矮病毒(SPYDV)、煙草花葉病毒(TMV)和黃瓜花葉病毒(CMV)等。我國甘薯上發(fā)生的病毒病主要為甘薯羽狀斑駁病毒(SPFMV)和甘薯潛隱病毒(SPLV)。煙草花葉病毒(TMV)也普遍存在，花椰菜花葉病毒(SPCLV)和輕斑駁病毒（SPMMV）也有發(fā)現(xiàn)，但出現(xiàn)的概率較小。目前病毒檢疫制度不太完善，因而對(duì)甘薯病毒主要種類加以識(shí)別有助于在種質(zhì)資源交換時(shí)及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制病毒人為擴(kuò)散傳播尚未發(fā)現(xiàn)抗病的品種，因此，甘薯病毒病已成為甘薯生產(chǎn)的主要限制因子之一。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)一、甘薯病毒病的危害及種類(二)甘薯病毒病的種類

（1）甘薯羽狀斑駁病毒(SPFMV)甘薯羽狀斑駁病毒是目前甘薯上較為普遍和明確的一種病毒，對(duì)甘薯的危害最重，分布最廣，全世界甘薯產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生，幾乎在所有種植的品種上都可發(fā)現(xiàn)。甘薯羽狀斑駁病毒可經(jīng)汁液摩擦、嫁接方式傳播，亦可由蚜蟲以非持久性方式傳播，但種傳的可能性非常低。此病毒主要侵染旋花科甘薯屬植物，番薯屬的某些種對(duì)其非常敏感。其癥狀是：葉片出現(xiàn)明脈、退綠葉斑、沿脈變色、皺縮、植株矮化、甘薯塊根褐裂等。（2）甘薯潛隱病毒(SPLV)

甘薯潛隱病毒最早在中國的臺(tái)灣省報(bào)道，曾被稱為甘薯病毒N，主要分布在亞洲薯區(qū)，甘薯潛隱病毒侵染甘薯不引起明顯癥狀，只產(chǎn)生輕度斑駁。蚜蟲和白粉虱不傳該病毒，病毒可由汁液摩擦傳毒。甘薯潛隱病毒的寄主范圍包括旋花科、藜科和茄科的多種植物脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)(二)甘薯病毒病的種類

（3）甘薯輕斑駁病毒(SPMMV)

甘薯輕斑駁病毒侵染甘薯在葉片上出現(xiàn)斑駁、葉脈退綠，造成植株矮化，生長不良。該病毒不蚜傳，不種傳，而以白粉虱為傳播介體。甘薯輕斑駁病毒可侵染14科中的45種植物，侵染煙草葉片出現(xiàn)明脈，皺縮。（4）甘薯病毒(SPVMV)甘薯脈花葉病毒引起甘薯葉片嚴(yán)重的明脈、花葉和矮化，新根減少。病毒可經(jīng)蚜蟲以非持久性方式傳播，甘薯脈花葉病毒具有和甘薯羽狀斑駁病毒普通株系同樣的寄主范圍，并產(chǎn)生同樣的癥狀（5）甘薯無病癥病毒(SPSV)甘薯無病癥病毒不以蚜蟲為傳播介體，可有汁液接種傳播。寄主范圍僅限于旋花科番薯屬，甘薯被侵染后外部無明顯癥狀脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)(二)甘薯病毒病的種類

（6）甘薯黃矮病毒(SPYDV)

受甘薯黃矮病毒侵染的甘薯葉片表現(xiàn)斑駁、退綠、植株矮化，在缺肥和低溫條件下癥狀表現(xiàn)更為突出，發(fā)病植株根系發(fā)育不良。甘薯黃矮病毒的傳播介體、病毒粒體形態(tài)與甘薯羽狀斑駁病毒相似。寄主范圍除旋花科外，還侵染藜科的一些植物。（7）甘薯凹脈病毒(SPSVV)甘薯凹脈病毒侵染可引起甘薯葉脈凹陷，導(dǎo)致巴西牽牛葉片黃化脆裂、植株矮化，由白粉虱傳播。（8）甘薯類花椰菜花葉病毒（SPCLV)

甘薯類花椰菜花葉病毒侵染巴西牽牛早期癥狀包括沿葉脈出現(xiàn)退綠斑點(diǎn)和脈間退綠斑，進(jìn)而發(fā)展成大面積退綠，最終導(dǎo)致植株枯萎和幼葉死亡。該病毒不蚜傳，粒體為典型的類花椰菜花葉病毒，但有些內(nèi)含體卻相似于聯(lián)體病毒組病毒誘導(dǎo)形成纖絲環(huán)狀內(nèi)含體。（9）分離自甘薯的其他病毒目前至少有3種寄主范圍廣泛的病毒從甘薯上分離出來，有煙草花葉病毒(TMV)、煙草條斑病毒(TSV)和黃瓜花葉病毒(CMV)。煙草條斑病毒和黃瓜花葉病毒已從和甘薯羽狀斑駁病毒復(fù)合感染的植株中分離出來脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)二、甘薯脫毒技術(shù)(一）甘薯脫毒的重大意義“脫毒甘薯”指的是通過組培技術(shù)得到的植株，并經(jīng)過嚴(yán)格的病毒檢測(cè)、確認(rèn)不帶有某些病毒的甘薯及其在無蚜蟲條件和無病源土壤繁育的后代。

甘薯脫毒技術(shù)是生物技術(shù)、病毒學(xué)技術(shù)和良種繁育技術(shù)有機(jī)結(jié)合的產(chǎn)物。經(jīng)過脫毒一般可增產(chǎn)20％～30％，并對(duì)其外觀、商品性還有所改善。因此，選用脫毒甘薯良種是取得甘薯高產(chǎn)的前提。由于甘薯本身無性繁殖的特點(diǎn)，甘薯品種一旦感染病毒后，病毒即在體內(nèi)積累并通過薯塊代代相傳。病毒病不同于真菌和細(xì)菌病害，無法用殺菌劑和抗生素予以防治。雖然有些化學(xué)物質(zhì)如人工合成的藥劑以及某些提取的天然物質(zhì)能抑制病毒增殖，但由于病毒不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，它的核酸入侵寄主后，利用寄主的代謝功能復(fù)制自己，因此，它和寄主的依存關(guān)系更為密切，雖然很多藥劑能使病毒在體外失活，但施用于感染病毒的寄主以防治病毒病，亦對(duì)寄主具有嚴(yán)重的毒害作用。目前尚無有效的化學(xué)藥劑防治病毒病，生產(chǎn)中也缺少高抗或免疫的甘薯品種。防治甘薯病毒病最有效的途徑是培養(yǎng)、推廣脫毒甘薯，從根本上克服病毒病對(duì)甘薯生產(chǎn)造成的危害，關(guān)鍵是要獲得無病毒種苗。無病毒種苗是產(chǎn)生健康植株的前提和基礎(chǔ)，而且由于無病毒種苗投放生產(chǎn)后，又會(huì)逐漸感染病毒，因此，只有保證能源源不斷地為生產(chǎn)提供無病毒種苗，才能獲得甘薯的持續(xù)高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，充分發(fā)揮甘薯的生產(chǎn)潛力脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)二、甘薯脫毒技術(shù)（二）甘薯脫毒的原理早在20世紀(jì)40年代，就有研究發(fā)現(xiàn)病毒在植物體內(nèi)的分布是不均勻的，在染病的植株中，愈靠近莖尖病毒含量越低，頂端分生組織不帶病毒或僅有少量病毒，隨組織的老化，病毒含量增加。莖尖分生組織不帶毒或很少帶毒的可能原因是：在旺盛生長的分生組織細(xì)胞中，細(xì)胞的代謝活性很高，病毒的復(fù)制速度趕不上細(xì)胞的生長速度，另外，病毒在甘薯體內(nèi)主要通過維管束組織和胞間連絲途徑運(yùn)轉(zhuǎn)，而在莖尖分生組織中維管束尚未形成，胞間連絲的傳導(dǎo)速度低于莖尖的快速生長，這速度之差就形成了莖尖無病毒區(qū)。甘薯脫毒苗的培養(yǎng)是利用甘薯莖尖導(dǎo)管組織不健全，病毒顆粒不易通過，甘薯莖尖不帶或很少帶病毒的原理,削離莖尖培養(yǎng)甘薯莖尖苗,對(duì)莖尖進(jìn)行病毒檢測(cè),選出不帶病毒的莖尖進(jìn)行快速繁殖后在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用利用以上所述莖尖存在無病毒區(qū)的現(xiàn)象，結(jié)合細(xì)胞全能性理論，在無菌條件下切取甘薯莖尖進(jìn)行離體培養(yǎng)，即可得到不帶病毒的植株。1960年NielSen用莖尖培養(yǎng)成功獲得甘薯無病毒植株，此后，國內(nèi)外許多研究者在這方面做了大量卓有成效的工作。研究表明，莖尖離體培養(yǎng)可有效地去除甘薯體內(nèi)的病毒，目前甘薯莖尖分生組織脫毒技術(shù)已進(jìn)入實(shí)用階段。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)二、甘薯脫毒技術(shù)（三）甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)1.甘薯脫毒的準(zhǔn)備①器具條件除了高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、鑷子、解剖針、長柄刀片等植株組織培養(yǎng)所需的一般工具外，由于須剝離只帶1～2個(gè)葉原基的莖尖分生組織，大小只有0．1—0．3毫米，所以。還需要準(zhǔn)備1臺(tái)雙目解剖鏡。②培養(yǎng)基的配制甘薯莖尖分生組織培養(yǎng)目前常用的為MS培養(yǎng)基，由于在莖尖培養(yǎng)及試管微繁中需要經(jīng)常配制培養(yǎng)基，為方便起見，一般將培養(yǎng)基組分先配成比所需濃度高的母液，配制培養(yǎng)基時(shí)只要按比例量取即可。一般將大量元素[MS(一)]配制成10倍溶液，F(xiàn)e鹽[MS(二)]、微量元素[MS(三)]及維生素[MS(四)]配成100倍溶液，分別存放。具體配方如下：

MS(一)：

NH4N031650×10=16500毫克

KNO31900×10=19000毫克

CaCl2·2H20440×10=4400毫克

M克S04·7H20370×10=3700毫克

KH2P04170×10=1700毫克稱取以上藥品，順序溶解后定溶至1000毫升，即成MS(一)10倍母液，取量100毫/升。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)二、甘薯脫毒技術(shù)（三）甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)MS(二)：

FeS04·7H2027．8×100=2780毫克

Na2一EDTA37．3×100=3730毫克按以上重量稱取藥品分別溶解后，置火上煮20～30分鐘，以使Fe鹽充分絡(luò)合，呈黃亮溶液。冷卻后定容至1000毫升，為100倍Fe鹽母液，取量10毫升／升。

MS(三)：

H3B036．2×100=620毫克

MnS04·4H2022．3×100=2230毫克

CoCl2·6H200．025×100=2．5毫克

CuS04·5H200．025×100=2．5毫克

ZnS04·7H208．6×100=860毫克

Na2Mo04·2H200．25×100=25毫克

KI0．83×100=83毫克分別溶解后定容至1000毫升，取量10毫升／升。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)二、甘薯脫毒技術(shù)（三）甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)Ms(四)：維生素B1O．1×100=10毫克維生素B60．5×100=50毫克煙酸0．5×100=50毫克甘氨酸2．0×100=200毫克溶解后定容至1000毫升，取量100毫升／升。肌醇可在配制培養(yǎng)基時(shí)加入，以免引起母液渾濁。母液配制好后，分別貼上標(biāo)簽，標(biāo)明母液號(hào)、倍數(shù)、取量及配制日期，置于冰箱備用。生長調(diào)節(jié)物質(zhì)也如上所述分別制成一定濃度的母液備用。配制培養(yǎng)基時(shí)，先稱取6克／升瓊脂粉加水溶解，并煮沸，以避免濃度不勻，然后按母液順序依次量取規(guī)定的量后加入已溶解的瓊脂中，最后加入30克／升蔗糖，定容至所配制體積。甘薯莖尖培養(yǎng)基pH值以5.8為宜，可用NaOH或HCl調(diào)節(jié)，然后用pH值試紙或酸度計(jì)進(jìn)行pH值測(cè)試。培養(yǎng)基趁熱分注后進(jìn)行高壓滅菌，一般保持7.84×104～10.78×104pa壓力，20分鐘既可達(dá)到滅菌效果，培養(yǎng)基也不受破壞。蒸餾水和器具消毒以30分鐘為宜。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)二、甘薯脫毒技術(shù)（三）甘薯莖尖培養(yǎng)脫毒技術(shù)③外植體取材與消毒甘薯外植體取自苗床、大田植株或人工控制條件下薯塊產(chǎn)生的幼芽均可，以生長健壯為宜，過弱不易剝?nèi)∏o尖，莖尖接種后也不易成活。外植體進(jìn)行消毒的原則是既要達(dá)到良好的消毒效果，又要將對(duì)外植體的毒害限制在最低限度，保持較高的成活率。具體方法如下：剪取2～3厘米芽段，去除較大葉片后，對(duì)頂芽進(jìn)行表面消毒。先將芽段置于燒杯中，加入少量洗衣粉、洗滌劑振蕩洗滌15分鐘，然后用清水沖洗干凈，置超凈工作臺(tái)備用。在超凈工作臺(tái)上，選用70％酒精浸泡30秒(酒精有很強(qiáng)的穿透力，切記時(shí)間不可過長)，然后用2％次氯酸鈉溶液浸10分鐘或0．1％氯化汞浸6分鐘，其間要不斷振蕩，最后用無菌水沖洗3～4遍。次氯酸鈉能分解產(chǎn)生具有殺菌作用的氯氣而揮發(fā)掉，相對(duì)比較安全，副作用?。宦然^難去除，且毒力很強(qiáng)，易對(duì)外植體產(chǎn)生毒害，處理時(shí)間不宜過長。在實(shí)際操作中，由于莖尖分生組織有彼此重疊的葉原基嚴(yán)密保護(hù)，消毒方法可視外植體的來源靈活掌握，如人工控制條件下薯塊產(chǎn)生的幼芽比從大田所取外植體雜菌污染機(jī)會(huì)要少，只要操作仔細(xì)，即可避免接種莖尖發(fā)生污染。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)(2)脫毒甘薯的生產(chǎn)脫毒甘薯的生產(chǎn)過程包括優(yōu)良品種篩選、莖尖苗培育、病毒檢測(cè)、優(yōu)良莖尖苗株系評(píng)選、高級(jí)脫毒試管苗速繁、原原種、原種和良種種薯及種苗的繁殖等8個(gè)環(huán)節(jié)，每個(gè)環(huán)節(jié)都有嚴(yán)格的要求，最終目的是保證各級(jí)種薯的質(zhì)量，充分發(fā)揮脫毒甘薯的增產(chǎn)潛力①選用優(yōu)良品種甘薯優(yōu)良品種很多，而且經(jīng)過脫毒后都能不同程度地提高產(chǎn)量、改善外觀品質(zhì)。但甘薯品種都有一定的區(qū)域適應(yīng)性和生產(chǎn)實(shí)用性，在進(jìn)行甘薯脫毒時(shí)一定要根據(jù)本地區(qū)氣候、土壤和栽培條件，選用適合本地區(qū)大面積栽培的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)品種或具有特殊用途的品種。②莖尖苗培育

在超凈工作臺(tái)上，把幼芽置于解剖鏡下，一手用一把短鑷子將其固定，另一手用解剖針剝離包被莖尖的葉片及葉原基，當(dāng)半透明狀的頂端分生組織充分暴露之后，用長柄手術(shù)刀片將帶l～2個(gè)葉原基，長0．1～0．3毫米莖尖切下，接種在附加1～2毫克／升6一BA的MS培養(yǎng)基上離體培養(yǎng)，26～28℃下光培養(yǎng)，莖尖膨大變綠后轉(zhuǎn)入無激素的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)成莖尖試管苗。待苗長至5～6片葉時(shí)移至營養(yǎng)缽內(nèi)進(jìn)行病毒檢測(cè)。一般來講，從剝莖尖到誘導(dǎo)出5～7片葉的莖尖苗至少要用60～90天。利用分生組織培養(yǎng)誘導(dǎo)甘薯莖尖苗是甘薯脫毒的技術(shù)關(guān)鍵。而且甘薯莖尖苗的培育需要有設(shè)備完善、儀器齊全的組織培養(yǎng)室，技術(shù)水平較高，投資較大，一般單位特別是基層單位不必要開展此項(xiàng)研究，可以從有條件的單位索取已經(jīng)鑒定確認(rèn)的脫毒試管苗或原原種進(jìn)行繁育。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)③病毒檢測(cè)莖尖分生組織培養(yǎng)得到的莖尖苗并不都是脫毒苗，只有部分苗不含病毒，是脫毒苗；莖尖苗必須經(jīng)過嚴(yán)格的病毒檢測(cè)確認(rèn)不帶病毒后，才是脫毒莖尖苗。莖尖苗的檢測(cè)一般首先采取目測(cè)法淘汰弱苗和顯癥苗，然后再用血清學(xué)方法或分子生物學(xué)方法進(jìn)行篩選。經(jīng)血清學(xué)或分子生物學(xué)方法檢測(cè)呈陰性的樣品再進(jìn)行指示植物嫁接檢測(cè)。病毒檢測(cè)方法詳見第三節(jié)。④優(yōu)良株系評(píng)選甘薯的芽變率比較高，莖尖分生組織培養(yǎng)再生的莖尖苗株系間在形態(tài)和產(chǎn)量方面往往存在較大差異。因此，經(jīng)病毒檢測(cè)確認(rèn)的脫毒苗必須進(jìn)行優(yōu)良株系評(píng)選，淘汰變異株系，保留優(yōu)良株系。株系評(píng)選的方法是：將脫毒苗株系每系5～10株栽種到防蟲網(wǎng)室內(nèi)，以同品種普通帶毒薯為對(duì)照，進(jìn)行形態(tài)、長勢(shì)、產(chǎn)量等多方面的觀察評(píng)定，選出若干既符合品種特性又高產(chǎn)的最優(yōu)株系，混合繁殖。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)三、脫毒甘薯繁育供種程序良種利用2年后增產(chǎn)效果就不再明顯，需要每2年更換1次新脫毒薯種。因此，必須根據(jù)當(dāng)?shù)厣a(chǎn)和經(jīng)濟(jì)條件，建立起脫毒甘薯繁育與供應(yīng)體系，以源源不斷地為生產(chǎn)提供優(yōu)良脫毒薯種，確保脫毒甘薯增產(chǎn)潛力的最大發(fā)揮。脫毒甘薯繁育、供應(yīng)體系見表8-2。表8-2脫毒甘薯繁育、供應(yīng)體系繁育供種體系職責(zé)范圍

省級(jí)脫毒與檢測(cè)中心

1．篩選品種2．莖尖組織培養(yǎng)誘導(dǎo)莖尖苗3．病毒檢測(cè)與種苗質(zhì)量鑒定4．優(yōu)良脫毒莖尖苗株系的篩選5．高級(jí)脫毒試管苗速繁與供應(yīng)6．部分原原種繁殖與供應(yīng)7．技術(shù)培訓(xùn)與指導(dǎo)

市(縣)級(jí)種薯繁育基地

1．設(shè)置防蟲溫網(wǎng)室，建立原原種繁殖基地2．引進(jìn)高級(jí)脫毒苗快繁3．原原種生產(chǎn)、貯存與供應(yīng)4．原種病毒檢測(cè)與質(zhì)量監(jiān)督5．技術(shù)培訓(xùn)、指導(dǎo)

縣(鄉(xiāng))級(jí)種薯供應(yīng)基地

1．設(shè)置隔離區(qū)，建立原種繁殖基地2．引進(jìn)原原種育苗、速繁3．原種生產(chǎn)和供應(yīng)4．良種種薯管理與質(zhì)量監(jiān)督5．技術(shù)指導(dǎo)、培訓(xùn)

鄉(xiāng)(村)級(jí)種薯供應(yīng)基地

1．選擇無病留種田，建立良種基地2．良種生產(chǎn)、供應(yīng)3．脫毒甘薯栽培技術(shù)指導(dǎo)脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)三、脫毒甘薯繁育供種程序脫毒薯繁育供應(yīng)體系中莖尖培養(yǎng)、病毒檢測(cè)以及脫毒試管苗切段快繁技術(shù)比較復(fù)雜，需要有比較完備的組織培養(yǎng)室、病毒檢測(cè)室，以及從事組織培養(yǎng)、病毒檢測(cè)的專門技術(shù)人員和儀器設(shè)備，需要比較大的投資，而且技術(shù)含量比較高，不適合在地、市級(jí)以下單位進(jìn)行，最好集中資金和人員建立一個(gè)省級(jí)脫毒與病毒檢測(cè)基地；原原種的繁育需要投資修建加蓋40目防蟲網(wǎng)的溫網(wǎng)棚，投資不算太大，可以在地區(qū)、市或條件較好的縣級(jí)單位進(jìn)行；原種和良種的繁育需要有500米的空間隔離帶(即500米內(nèi)無帶毒薯種植)和無病田塊，投資少、風(fēng)險(xiǎn)小、效益大，適合在縣、鄉(xiāng)、村級(jí)單位進(jìn)行。一般情況下，春季(4月上旬)引種1000棵高級(jí)脫毒試管苗種采苗圃，到夏季(6月下旬)可利用防蟲網(wǎng)棚繁殖原原種，每666．7平方米收獲原原種種薯l000～l500千克；第二年早春用原原種種薯育苗、速繁，在隔離條件下能繁殖100×666．7平方米原種，收獲原種種薯100～200噸；第三年可繁殖5000×666．7平方米良種；第四年可以供應(yīng)105×666．7平方米大田生產(chǎn)用薯種。各地可以參考這一比例，再根據(jù)當(dāng)?shù)馗适碛缗c生產(chǎn)的技術(shù)水平加以適當(dāng)調(diào)整，以滿足當(dāng)?shù)厣a(chǎn)對(duì)脫毒甘薯種薯的需要。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)三、脫毒甘薯繁育供種程序在脫毒甘薯的擴(kuò)繁過程中特別要注意防止病毒再侵染。具體措施有，加蓋40目防蟲網(wǎng)棚、500米以上空間隔離、定期噴灑殺蚜蟲藥劑等。另外，繁育原原種和原種最好在3年以上未種過甘薯的生茬地，切勿在重病地(根腐病、線蟲病等)生產(chǎn)種薯。四、脫毒甘薯的增產(chǎn)效果甘薯經(jīng)過脫毒以后，春、夏薯均表現(xiàn)返苗快,莖葉長勢(shì)強(qiáng),封壟早,明顯改善了營養(yǎng)生長狀況。而且,脫毒薯塊根膨大早、膨大快,薯塊整齊,薯身光滑,皮色鮮艷,單株塊根增多,提高了產(chǎn)量和商品率,改善了產(chǎn)量構(gòu)成性狀,產(chǎn)量、外觀品質(zhì)和萌芽性等。甘薯脫毒比非脫毒明顯增產(chǎn)，品種間差異極為明顯。而且黑痣病也有防治效果。根據(jù)江蘇、山東、河南、安徽等省的試驗(yàn)結(jié)果，所有甘薯品種經(jīng)過脫毒后都表現(xiàn)出不同程度的增產(chǎn)。江蘇徐州甘薯研究中心、山東省農(nóng)科院作物所多年、多點(diǎn)、多品種生產(chǎn)力鑒定結(jié)果：脫毒甘薯不同地點(diǎn)、年份、品種均表現(xiàn)增產(chǎn)，甘薯脫毒后，干物質(zhì)含量，抗病性是較穩(wěn)定的遺傳性狀，因其主要受遺傳因素的影響，受病毒感染影響較小，則無明顯變化。但增產(chǎn)效果因不同品種、不同種薯級(jí)別、不同地區(qū)而有很大差別增產(chǎn)輻麥為14.95％～91.61％。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)四、脫毒甘薯的增產(chǎn)效果根據(jù)山東省9個(gè)點(diǎn)7個(gè)品種的試驗(yàn)結(jié)果，徐薯18平均增產(chǎn)36．9％；魯薯7號(hào)增產(chǎn)35．9％；北京553增產(chǎn)57．5％；魯薯8號(hào)鮮薯增產(chǎn)38．3％；濟(jì)薯12增產(chǎn)42．6％；各品種各點(diǎn)平均增產(chǎn)42．9％。河南省1998年在11個(gè)市、縣進(jìn)行了徐薯18和北京553脫毒甘薯與未脫毒甘薯的產(chǎn)量對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果：脫毒甘薯在各點(diǎn)均表現(xiàn)顯著增產(chǎn)。每666．7平方米鮮薯280．3～1760千克，增產(chǎn)幅度為22．3％～93．6％。11個(gè)點(diǎn)平均666．7平方米鮮薯747．7千克，增產(chǎn)39．00％，耐病毒能力不同的品種經(jīng)脫毒后增產(chǎn)效果有明顯不同。較耐病毒病的品種脫毒后增產(chǎn)幅度較小，而重感病毒病的品種脫毒后增產(chǎn)幅度很大。如徐薯18為較耐病毒病的品種，脫毒后增產(chǎn)16．9％～40％；重感病毒病的新大紫和群力2號(hào)脫毒后增產(chǎn)幅度分別達(dá)到46．1％～224％和42．3％～96．4％。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)五、脫毒甘薯的檢測(cè)由于甘薯脫毒苗在繁育過程中極易受到病毒的再侵染，因此，在繁種過程中，除根據(jù)不同級(jí)別種薯的繁種要求采取防治蚜蟲等必要措施外，還應(yīng)加強(qiáng)病毒的檢測(cè)，及時(shí)淘汰感病種薯以保證脫毒種薯的質(zhì)量。根據(jù)不同級(jí)別種薯對(duì)病毒感染率的要求，可采取不同的病毒檢測(cè)方法。

(一)莖尖苗的檢測(cè)莖尖苗的檢測(cè)可首先采取目測(cè)法。由于脫毒莖尖苗和帶毒莖尖苗在形態(tài)、長勢(shì)上有明顯差異，前者生長快、葉片平展、植株較健壯；后者長勢(shì)弱，葉片上常出現(xiàn)花葉、明脈、卷葉、皺縮、黃花和退綠斑等癥狀，因此，可先用目測(cè)法淘汰弱苗和顯癥苗。然后，再用血清學(xué)方法或分子生物學(xué)方法進(jìn)行篩選，經(jīng)血清學(xué)或分子生物學(xué)方法檢測(cè)呈陰性的樣品再進(jìn)行嫁接。每個(gè)莖尖苗一般嫁接3～5株，有1株發(fā)病即認(rèn)為該樣帶毒，對(duì)于都不發(fā)病的樣品應(yīng)再重復(fù)嫁接1次。

(二)原原種田的檢測(cè)脫毒原原種的繁殖一般在防蟲網(wǎng)室內(nèi)進(jìn)行，原原種田病毒的檢測(cè)方法是：首先在原原種田種植若干株巴西牽牛，定期觀察巴西牽牛是否顯癥，以判斷是否有蚜蟲傳毒；對(duì)原原種田還要進(jìn)行定期普查，及時(shí)淘汰顯癥株和變異株；另外，對(duì)原原種田要定期取樣，用血清學(xué)方法或嫁接指示植物的方法進(jìn)行檢測(cè)，以判斷原原種田病毒的感染情況，對(duì)于病毒感染率超標(biāo)的繁種田要降級(jí)使用。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)五、脫毒甘薯的檢測(cè)(三)原種田的檢測(cè)脫毒原種的繁殖要在有一定隔離區(qū)的地方進(jìn)行，即周圍500米內(nèi)不能種植非脫毒薯。原種田的病毒檢測(cè)以目測(cè)法和田問種植巴西牽牛為主，必要時(shí)田間取樣用血清學(xué)方法檢測(cè)病毒的感染率。

(四)良種田的檢測(cè)良種田的病毒檢測(cè)以目測(cè)法為主，就是要定期對(duì)良種田的發(fā)病率進(jìn)行調(diào)查，必要時(shí)也可抽樣用血清學(xué)方法檢測(cè)，當(dāng)發(fā)病率超過一定標(biāo)準(zhǔn)時(shí)就不能再作為種薯使用。(五)不同級(jí)別脫毒苗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)不同級(jí)別脫毒苗對(duì)病毒感染率的不同要求，初步制定以下判斷標(biāo)準(zhǔn)(表8-3)，病毒感染率超過一定標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)降級(jí)使用。表8-3甘薯脫毒苗病毒檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)(試行)種苗級(jí)別檢測(cè)方法取樣方法檢樣數(shù)量重復(fù)次數(shù)判斷依據(jù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)備注各級(jí)脫毒種帶病毒率最大限量試管苗(R0代苗)a．血清法b．指示植物法試管苗。3株/株系2a．血清學(xué)檢測(cè)陰性b．嫁接所有重復(fù)均不顯癥顯癥率為O－原原種苗a目測(cè)法b血清法c指示植物法5點(diǎn)樣取樣a目測(cè)普查b．50株／667平米c.100株／667平方米2嫁接不顯癥或血清反應(yīng)陰性目測(cè)顯癥率為0血清及指示植物陽性率小于0.1％顯癥率者0.1％可降級(jí)為原種使用原種苗a．目測(cè)法b．血清法c．指示植物法5點(diǎn)樣方取樣a．多點(diǎn)普查b．100株／667平方米c．50株／667平方米2嫁接不顯癥或血清反應(yīng)陰性目測(cè)顯癥率小于0.1％血清及指示植物陽性率小于1％顯癥率大于10％者可降級(jí)為良種使用良種苗a．目測(cè)法b．血清法隨機(jī)多點(diǎn)取樣100株／點(diǎn)3-5依癥狀判斷目測(cè)顯癥率小于1％顯癥率大于20％者可降級(jí)為二級(jí)以下良種使用

脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)六、脫毒甘薯快繁技術(shù)

根據(jù)各地實(shí)踐及河南科技大學(xué)、山東省農(nóng)科院、江蘇徐州甘薯研究中心、河南省農(nóng)科院、河南省種子管理站聯(lián)合起草的甘薯四級(jí)種子（甘薯育種家種子、原原種、原種和良種）生產(chǎn)技術(shù)操作規(guī)程內(nèi)容，將脫毒甘薯四級(jí)快繁技術(shù)介紹如下：

（一）高級(jí)脫毒試管苗快繁1.高級(jí)脫毒試管苗室內(nèi)快繁脫毒苗試管快繁具有繁殖速度快、避免病毒再侵染、繼代繁殖成活率高和不受季節(jié)、氣候和空間限制等優(yōu)點(diǎn)，可以進(jìn)行工廠化生產(chǎn)。目前脫毒苗室內(nèi)快繁方法有2種：一是液體振蕩培養(yǎng)，將單莖節(jié)置于液體培養(yǎng)基中，進(jìn)行80轉(zhuǎn)／分振動(dòng)；另一種為固體培養(yǎng)。前者優(yōu)點(diǎn)是繁殖迅速，15～20天可得到20個(gè)節(jié)左右的薯苗，但因需配備搖床，成本較高，因此一般多采甩固體培養(yǎng)。莖尖苗試管切段快繁：在無菌條件下,將待繁的脫毒莖尖苗一葉一節(jié)切段,扦插于不加任何激素的1／2MS培養(yǎng)基中,2天后,45%的切段萌根,30天左右長成5-7片葉的幼苗。切段位置對(duì)成苗無影響,但切段上無葉片或葉柄的切段,很難成苗。脫毒苗室內(nèi)快繁時(shí)應(yīng)注意，只有保持充足的光照和適宜的溫度條件，才能提高繁殖速度和薯苗質(zhì)量脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)六、脫毒甘薯快繁技術(shù)

（一）高級(jí)脫毒試管苗快繁2.高級(jí)脫毒苗田間快繁(1).防蚜塑料大棚速繁在3月中旬將5～7片葉的脫毒試管苗打開瓶口，室溫下加光照煉苗5～7天。栽前頭天下午在棚內(nèi)苗圃上撒上用100克40％樂果乳油加水2．5～5千克稀釋后與15～25千克干餌料拌成的毒餌，以消滅地下害蟲。然后按5厘米×5厘米株距栽種在覆蓋防蟲網(wǎng)的塑料大棚內(nèi)，澆足水后加蓋一層小弓棚，把溫度控制在25℃左右。待苗長至15～20厘米時(shí)剪下蔓頭繼續(xù)栽種、快繁。采用這種雙膜育苗方法繁殖系數(shù)可以達(dá)到100倍以上。但要注意小水勤澆，通風(fēng)透氣，保證溫度既不能低于10℃，也不能高于30℃。(2)防蚜網(wǎng)棚速繁即在4月下旬或5月初將經(jīng)過鍛煉的5～7片葉的脫毒試管苗，按每666．7平方米10000株的密度栽種在防蚜蟲大棚內(nèi)，勤施肥水，待苗長至15厘米左右時(shí)摘心，促進(jìn)分枝。以后待分枝苗長至5片葉時(shí)繼續(xù)剪苗栽種速繁，或直接用于繁殖原原種。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)六、脫毒甘薯快繁技術(shù)

（一）高級(jí)脫毒試管苗快繁2.高級(jí)脫毒苗田間快繁(3)防蚜冬暖大棚越冬快繁9月底10月初將脫毒試管苗移栽在外加40目防蟲網(wǎng)的冬暖式大棚內(nèi)。11月上旬蓋塑料膜，12月上、中旬加蓋草簾子，使棚內(nèi)溫度保持在10～30℃。注意及時(shí)防治蚜蟲。到4月中、下旬采苗移至苗圃進(jìn)行擴(kuò)繁。這種方法脫毒苗在外暴露時(shí)間過長，重新感染病毒的機(jī)會(huì)較大，一般用的較少。甘薯病毒主要靠桃蚜、棉蚜和蘿卜蚜以非持久方式進(jìn)行傳播。因此，無論采用何種速繁方法，都要切記采取隔離措施(40目防蚜網(wǎng)、500米以內(nèi)無普通帶毒甘薯空間隔離等)和定期噴灑防治蚜蟲的藥劑來防止蚜蟲傳毒再侵染。選地、整地、隔離、栽植、管理、鑒定去雜、檢驗(yàn)、收獲、包裝、運(yùn)輸、貯藏同原原種快繁。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)六、脫毒甘薯快繁技術(shù)

(二)原原種快繁脫毒原原種具有該品種典型性，遺傳性穩(wěn)定，純度99.9%，不帶病毒和其它病蟲害，薯塊整齊度不低于90%，不完整薯塊率低于1%，雜質(zhì)低于2%。產(chǎn)量及其它主要性狀與育種家種子相同。原原種生產(chǎn)由育種者負(fù)責(zé)。在育種單位甘薯脫毒專業(yè)試驗(yàn)場或特約原種場生產(chǎn)原原種。將育種家種子單株栽植，分株鑒定去雜，混合收獲生產(chǎn)原原種。原原種經(jīng)過一次繁殖可生產(chǎn)原種。1.選地、整地選擇地勢(shì)較高平坦，地力均勻、肥力較好，排灌方便，無病蟲害，3年以上未種過甘薯的輪作地。合理施肥（以清潔腐熟的有機(jī)肥和比例協(xié)調(diào)的氮、磷、鉀復(fù)合肥做基肥），精細(xì)整地。2.隔離原原種圃應(yīng)附設(shè)防蟲溫、網(wǎng)室，隔離繁殖。田間操作人員進(jìn)入種子圃應(yīng)更換工作衣和鞋具。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)六、脫毒甘薯快繁技術(shù)

(二)原原種快繁3.栽植將高級(jí)脫毒甘薯試管苗在防蟲溫網(wǎng)室內(nèi)建立采苗圃擴(kuò)大繁殖，在防蟲溫、網(wǎng)室內(nèi)做夏薯栽植，采用畦栽，畦寬1.2米，每畦6行，株距15厘米，密度22200株/667平方米。并多次剪苗栽植以擴(kuò)大繁殖。在附有防蟲網(wǎng)的原原種圃內(nèi)做夏薯（南方做秋薯）栽植，生產(chǎn)原原種。采用垅栽。北方夏薯宜早，垅距67厘米左右，垅高20-25厘米，每垅1行，株距28～33厘米，密度3000～3500株/667平方米；多雨及南方薯區(qū)，夏（秋）薯宜早，采用高垅雙行栽培，垅距1.0～1.2米，垅高30厘米左右，垅面寬60厘米左右，單垅雙行錯(cuò)栽，1米垅株距33～38厘米，1.2米垅株距28-31厘米，密度3500～4000株/667平方米。4.管理、鑒定去雜各項(xiàng)栽培管理措施合理、及時(shí)、精細(xì)一致，并定期殺滅蚜蟲。在防蟲網(wǎng)室內(nèi)生產(chǎn)種薯，因光照強(qiáng)度較弱，肥力較好，莖葉易徒長，注意在封垅前后進(jìn)行兩次化控，后期噴施1～2次0.2%磷酸二氫鉀50～60千克/667平方米。按典型性和整齊度進(jìn)行分株鑒定，發(fā)現(xiàn)雜株和非典型株，應(yīng)連根拔除，妥善處理。脫毒甘薯高產(chǎn)栽培技術(shù)作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫甘薯生產(chǎn)技術(shù)六、脫毒甘薯快繁技術(shù)

(二)原原種快繁5.檢驗(yàn)、收獲在成熟前和收獲后，按原原種子標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行田間和室內(nèi)檢驗(yàn)。當(dāng)?shù)叵?0厘米溫度穩(wěn)定在15℃左右時(shí)，適時(shí)收獲。剔除病、爛和無種用價(jià)值的塊根。單收單貯，并做到輕挖、輕裝、輕運(yùn)，妥善貯藏。6.包裝、運(yùn)輸收獲的原原種種薯裝入清潔的周轉(zhuǎn)箱