QBT 2394-1998 食品添加劑 乳酸鏈球菌素

本標(biāo)準(zhǔn)非等效采用美國食品用化學(xué)品法典(FCCN1996)有關(guān)部分。由于英國阿普林巴雷特公司(Aplin&.BarretLtd)是世界上首先生產(chǎn)乳酸鏈球菌素產(chǎn)品廠家，其質(zhì)量較好，技術(shù)較先進(jìn)，因此，鑒別及效價測定是參照FAO/WHO1969及營養(yǎng)會議報告集No.45A,也就是英國阿普林巴雷特公司現(xiàn)用的方法。本標(biāo)準(zhǔn)由國家輕工業(yè)局行業(yè)管理司提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國食品發(fā)酵標(biāo)準(zhǔn)化中心、衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所技術(shù)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江天臺制藥廠銀象分廠、中國食品發(fā)酵工業(yè)研究所、中科院微生物研究所負(fù)責(zé)起草。中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑乳酸鏈球菌素1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品添加劑——乳酸鏈球菌素的技術(shù)要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則及包裝、標(biāo)志、貯存、運(yùn)輸?shù)母黜椧?。本?biāo)準(zhǔn)適用于由乳酸鏈球菌經(jīng)微生物發(fā)酵提取而獲得的天然的乳酸鏈球菌素，在食品工業(yè)中作為防腐劑。2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB4789.2—1994食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定GB4789.3—1994食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測定GB4789.4—1994食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB/T5009.3--1985食品中水分測定方法GB5461--1992食用鹽GB/T8450--1987食品添加劑中砷的測定方法GB/T8451-1987食品添加劑中重金屬限量試驗(yàn)法相對分子量：33484技術(shù)要求4.1外觀：灰白略帶黃色粉末。4.2理化指標(biāo)：見表1。項目效價，(IU/mg)≥于燥失重，%≤3砷(以As計).%≤0.0003重金屬(以Pb計).%≤0.002氯化鈉.%≥4.3微生物指標(biāo)：見表2。國家輕工業(yè)局1998-08-17批準(zhǔn)1999-05-01實(shí)施QB2394-1998項目菌落總數(shù)，cfu/g大腸菌群，MPN/100g≤沙門氏菌25g中不得檢出5試驗(yàn)方法本標(biāo)準(zhǔn)所用的試劑和水，在沒有其他特殊要求時，均使用分析純試劑和蒸餾水或相當(dāng)純度的水。5.1鑒別a-胰凝乳蛋白酶對乳酸鏈球菌素具有專一性，在乳酸鏈球菌素中加人α-胰凝乳蛋白酶(根據(jù)酶活力而定),乳酸鏈球菌素活性立即消失。同時，乳酸鏈球菌素?zé)岱€(wěn)定性與其它蛋白相比具有特殊性，在pH值為2的乳酸鏈球菌素水懸液，121℃,30min,乳酸鏈球菌素活力保持不變。5.2效價的測定5.2.1試劑和溶液5.2.1.10.02mol/L鹽酸。5.2.1.21.5%的Tween(吐溫)-20。5.2.1.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備準(zhǔn)確稱取乳酸鏈球菌素標(biāo)準(zhǔn)樣品，懸浮于0.02mol/L鹽酸中，使?jié)舛葹?mg/mL,搖勻，用0.02mol/L鹽酸稀釋成300,600倍，即成高低劑量標(biāo)準(zhǔn)溶液。5.2.1.4培養(yǎng)基為S?,其配方為：胰蛋白胨酵母膏葡萄糖0.5%氯化鈉磷酸氫二鈉5.2.1.5菌株懸浮液的制備用接種環(huán)取一環(huán)已培養(yǎng)好的檢測菌(黃色微球菌，NCIB8166)放于6mL滅菌生理鹽水中，充分震5.2.2測定步驟5.2.2.1樣品溶液的配制稱取一定量的樣品，用0.02mol/L鹽酸溶解后，稀釋成高低劑量樣品溶液，具乳酸鏈球菌素含量，按估計單位高、低劑量與標(biāo)準(zhǔn)品溶液大致相當(dāng)。5.2.2.2平板的制備將S?培養(yǎng)基冷卻至約70℃,加入1.5%Tween-20充分混勻，待冷卻至50℃。加6mL菌株懸浮液，混勻后小心倒入已水平放置的平板上。待凝固后，放置無菌室內(nèi)約1h,置4℃冰箱存放至次日使用。使用前用打孔器在平板上打出所需的孔數(shù)，小心棄去孔中瓊脂塊。5.2.2.3滴加溶液用取樣器向瓊脂孔滴加等量的高、低劑量標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液。5.2.2.4恒溫培養(yǎng)滴加樣品溶液后，水平移入30℃恒溫箱中培養(yǎng)20h～24h。5.2.2.5測量與計算用卡尺測量抑菌圈直徑，取其平均值，按下式計算：Xsn-高劑量樣品溶液所致的抑菌圍直徑，mm;Xsn——低劑量樣品溶液所致的抑菌圈直徑，mm;Xm-高劑量標(biāo)準(zhǔn)溶液所致的抑菌圈直徑，mm;Xm.——低劑量標(biāo)準(zhǔn)溶液所致的抑菌圈直徑，mm;K—高劑量倍數(shù)與低劑量倍數(shù)的比值。若樣品估計值不在測定值的90%～110%范圍內(nèi)，應(yīng)從新估計樣品效價，重測。5.3干燥失重的測定按GB/T5009.3測定。5.4砷的測定按GB/T8450測定。5.5重金屬的測定按GB/T8451測定。5.6氯化鈉的測定稱取樣品5.00g～10.00g于坩堝中，小火炭化至內(nèi)容物易壓碎為止。用水將炭化物移入100ml容量瓶中，加水至刻度。將上述稀釋液過濾，吸取濾液25mL于三角瓶中，加入酚酞指示劑(3～4)滴，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液滴定至淡粉紅色。5.7菌落總數(shù)的測定按GB4789.2測定。5.8大腸菌群的測定按GB4789.3測定。5.9沙門氏菌的檢驗(yàn)按GB4789.4檢驗(yàn)。6檢驗(yàn)規(guī)則6.1本產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)廠質(zhì)量檢驗(yàn)部門，按本標(biāo)準(zhǔn)要求檢驗(yàn)合格，并附上合格證后方可包裝入庫或出廠。6.2以一次投料生產(chǎn)的產(chǎn)品為一批。6.3以每批桶(包)數(shù)隨機(jī)取樣，按2%抽樣，采用四角加中間五點(diǎn)取樣，經(jīng)混合縮分后裝于干燥清潔避6.4本產(chǎn)品效價、水分、砷、重金屬為必檢項目。氯化鈉、菌落總數(shù)、大腸菌群、沙門氏菌為型式檢驗(yàn)項目，半年檢查一次。如果檢驗(yàn)中有一項指標(biāo)不符合標(biāo)準(zhǔn)要求，則可按上述再取一倍量的同批樣品重新作全項目檢驗(yàn)，如檢驗(yàn)結(jié)果仍有一項不合格，則該批產(chǎn)品判為不合格。6.5使用單位可按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的技術(shù)要求、試驗(yàn)方法和檢驗(yàn)規(guī)則對所收到的產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)其指標(biāo)是否符合本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。6.6當(dāng)供需雙方對產(chǎn)品質(zhì)量發(fā)生異議需要仲裁時，仲裁機(jī)構(gòu)由雙方協(xié)商選定。仲裁時應(yīng)按照本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行仲裁分析。7.1標(biāo)志7.2包裝產(chǎn)品包裝可分為大包裝和小包裝，也可根據(jù)用戶要求進(jìn)行包裝。小包裝量分別為100g/瓶和1000g/瓶，包裝材料為聚丙烯瓶或棕色玻璃瓶，瓶口應(yīng)密