細(xì)胞治療Leukopak原材料采集和免疫細(xì)胞分離技術(shù)要求（征求意見稿）

1細(xì)胞治療Leukopak原材料采集和免疫細(xì)胞分離技術(shù)要求本文件適用于細(xì)胞治療Leukopak原材料采集和3.1注：在本文件中，特指使用從Leukopak中分離3.23.3在免疫細(xì)胞分離過程中，成功分離出的目標(biāo)免疫細(xì)胞數(shù)3.4分離后得到的免疫細(xì)胞中目標(biāo)細(xì)胞的占比，通常通過4基本要求24.1.2Leukopak原材料采集和免疫細(xì)胞分離機(jī)構(gòu)實驗室或廠房應(yīng)由具有潔凈實驗室設(shè)計建設(shè)資質(zhì)的胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》要求，取得相認(rèn)（OQ）和性能確認(rèn)(PQ)，使用后應(yīng)進(jìn)(SOP)，確保使用、運行、保養(yǎng)、維修記錄完整可追溯，對于關(guān)鍵工藝相關(guān)設(shè)備參數(shù)應(yīng)進(jìn)行實時監(jiān)測，4.3人員管理4.3.2Leukopak原材料采集和免疫細(xì)胞分離機(jī)構(gòu)技術(shù)人員應(yīng)具備的健4.3.5Leukopak原材料采集和免疫細(xì)胞分離機(jī)構(gòu)技術(shù)人員在獨立執(zhí)行所委派的工作之前應(yīng)進(jìn)行能力5.1.1.1向供體詳細(xì)說明采集過程和可能5.1.1.2根據(jù)需要，為供體提供適當(dāng)?shù)娘嬍澈托菹⒅?.1.2.1應(yīng)建立供者篩選標(biāo)準(zhǔn)，至少應(yīng)包括既往病史和家族病史的調(diào)查、傳染性疾病的結(jié)果、近期旅5.1.2.3記錄供體的基本信息，35.1.3.1準(zhǔn)備血液采集設(shè)備，并確保這些設(shè)備處于無菌狀態(tài)且符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。5.1.3.2檢查并校準(zhǔn)用于采集過程中可能使用到的所5.1.4.1采集人員應(yīng)接受專業(yè)培訓(xùn)，熟悉采集流程5.1.4.2采集人員應(yīng)穿戴符合要求的防護(hù)服裝，包5.1.5.1準(zhǔn)備必要的文件記錄表格，用于記錄采集過程中的關(guān)鍵信息，如供體信息、采集時間、采集5.1.6確保所有文件記錄符合相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的要求。5.2.1.1應(yīng)使用經(jīng)過驗證和批準(zhǔn)的采集設(shè)備，確保其性能和安全性。5.2.1.3所有與供體血液直接接觸的器具和耗材必須是無菌的，并在使用前進(jìn)行檢查。5.2.2.1采集過程中應(yīng)嚴(yán)格控制血液流速，避免對供體造成不適或損傷。5.2.2.2應(yīng)保持適當(dāng)?shù)膲毫?，以確保血液順暢流動，并防止凝血或溶血現(xiàn)象。5.2.3.1根據(jù)供體的身體狀況和5.2.4.1采集過程中應(yīng)使用適當(dāng)?shù)目鼓齽?，以防止血液凝固?.2.5.1在采集過程中應(yīng)持續(xù)監(jiān)測供體的生命5.2.5.2應(yīng)詳細(xì)記錄采集過程中的關(guān)鍵參數(shù)，如采集時5.2.6.1應(yīng)制定應(yīng)急處理預(yù)案，以應(yīng)對可能出現(xiàn)的異常情況5.2.6.2采集人員應(yīng)熟悉應(yīng)急處理流程，并能迅速采取措施以保障供體安Leukopak應(yīng)保存在適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸葪l件下，避免暴露于過高或過低的溫度。保存環(huán)境應(yīng)保持清45.3.6.1樣本運輸人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)并考核合格，對樣本運輸應(yīng)制定規(guī)范及應(yīng)急預(yù)案，并對樣本運5.3.6.2樣本運輸應(yīng)采用平穩(wěn)、安全、快速的運輸途徑，宜采用冷藏運輸車或?qū)Ｓ脴?biāo)本冷藏運輸箱運5.3.6.3運輸過程中應(yīng)防滲漏、防輻射、抗震動、耐壓、耐熱等，樣本包裝應(yīng)貼上唯一識別碼進(jìn)行標(biāo)5.3.6.4樣本運輸溫度應(yīng)維持在2℃~8℃,運輸時間應(yīng)經(jīng)過驗證。5.3.6.5運輸容器應(yīng)經(jīng)過驗證并定期進(jìn)行再驗證，確保其處于有效運行狀態(tài)。運輸箱內(nèi)應(yīng)配備溫度記6.1.1.2檢查并校準(zhǔn)所有將使用的儀器設(shè)備，確保其處于良好工作狀6.1.2.1準(zhǔn)備所有必需的試劑，如分離液、培養(yǎng)基6.1.2.2準(zhǔn)備充足的實驗耗材，如移液管、6.1.3.2確認(rèn)Leukopak6.1.4.1制定詳細(xì)的實驗操作計劃，包括實驗步驟、時間節(jié)點、預(yù)期結(jié)果等。6.1.4.2準(zhǔn)備實驗記錄本，用于記錄實驗過程中的關(guān)鍵數(shù)據(jù)和觀察結(jié)6.1.6.2確保預(yù)處理過程符合操作規(guī)程，避免對樣品造成不必要的損6.2分離過程的技術(shù)要求56.2.1.1確保所有相關(guān)儀器、試劑和材料已經(jīng)準(zhǔn)備6.2.1.2實驗人員應(yīng)進(jìn)行充分的個人防護(hù)，包6.2.2.1將Leukopak原6.2.3.1采用密度梯度離心法或其他適當(dāng)?shù)募?xì)胞分離技術(shù)進(jìn)行免疫細(xì)胞的分離。若使用Ficoll等分6.2.3.2在分離過程中，應(yīng)控制離心速度6.2.4.1分離后的細(xì)胞應(yīng)進(jìn)行洗6.2.4.2使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或緩沖液進(jìn)行洗滌，并確保洗滌過程中細(xì)胞的損失最小化。6.2.5.1對分離后的免疫細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，以確定細(xì)胞的6.2.5.2使用適當(dāng)?shù)娜旧椒ǎㄈ缗_盼藍(lán)染色）檢6.3記錄與質(zhì)量控制6.3.1.1詳細(xì)記錄分離過程中的所有關(guān)鍵步驟和參數(shù)，包括離心速度、時間、細(xì)胞計數(shù)和活性檢測結(jié)6.3.1.2定期對分離過程進(jìn)行質(zhì)量控制檢查，以確保分離效果的一致性和可靠性。6.3.2.1在分離過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守實驗室安全規(guī)范，避免交叉污染和生物安全風(fēng)險。6.3.2.2分離完成后，及時清理實驗臺面和儀器設(shè)備，確保實驗室的整潔和衛(wèi)生。6.4.1.1使用細(xì)胞計數(shù)器或流式細(xì)胞儀等設(shè)備，對分離后的免疫細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù)，以確定獲得的細(xì)6.4.1.2評估分離過程中細(xì)胞的損失情況，計算細(xì)胞回Bromide）法或其他細(xì)胞活性檢測方法，評估分離后免疫細(xì)胞的活性。6.4.2.2記錄活性細(xì)胞的比例，確保細(xì)胞活性滿足后續(xù)實驗或治療要6.4.3.1利用流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光染色等技術(shù)手段，對分離后的免疫細(xì)胞進(jìn)行表型分析，確定目標(biāo)），根據(jù)需要，對分離后的免疫細(xì)胞進(jìn)行功能檢測，如細(xì)胞增66.4.7.1若分離后的細(xì)胞質(zhì)量不符合預(yù)定要求，應(yīng)分析原因并采取相應(yīng)措施，如重新分離、改進(jìn)分離6.4.7.2對于不符合要求的細(xì)胞7.1.3細(xì)胞分離、處理、檢測等所使用的設(shè)備應(yīng)符合設(shè)備管理要求（標(biāo)識清晰正確，在合格計量校驗）；7.1.5細(xì)胞在分離、處理及檢測等過7.1.6細(xì)胞制備、檢測所用物料應(yīng)經(jīng)確認(rèn)來自合格供應(yīng)商，關(guān)鍵物料均應(yīng)經(jīng)抽樣檢測并確認(rèn)其質(zhì)量合格。試劑及耗材的有效期應(yīng)在規(guī)定期限內(nèi)，批號應(yīng)按照要求記錄下來以便具有可追溯性。7.1.7分離后獲得的免疫細(xì)胞應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，包括細(xì)胞特性分析、理化特性分析、純度和雜7.1.8細(xì)胞分離、處理、檢測和過程7.1.9樣本在采集、運輸、制備、分離過程中不存在任何重大偏差；若有偏差發(fā)生，均應(yīng)通過合適的7.2安全防護(hù)措施7.2.2.1實驗室應(yīng)具備良好的通風(fēng)系統(tǒng)，以確保空氣流通并減少有害氣體的7.2.2.2實驗室應(yīng)安裝紫外線燈或其他消毒設(shè)7.2.3.1細(xì)胞操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，以減少與外界的接觸，從而降低污染7.2.3.2生物安全柜應(yīng)定期進(jìn)行檢測和維護(hù)，確保其正常工作并達(dá)到預(yù)期的防護(hù)77.2.4.1所用化學(xué)品和生物材料7.2.4.2使用化學(xué)品時，應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)裝備，并遵循化學(xué)品的安全操作7.2.5.