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動(dòng)物細(xì)胞工程練習(xí)一、選擇題1.(多選)如圖為腎臟上皮細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖,下列敘述正確的是()A.甲→乙過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.丙過程指細(xì)胞在添加血清的合成培養(yǎng)基中原代培養(yǎng)C.丙和丁過程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象D.丁過程是傳代培養(yǎng)的細(xì)胞,細(xì)胞都能進(jìn)行無限增殖2.某研究小組對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行培養(yǎng),下列敘述正確的是()A.制備肝細(xì)胞懸浮液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織,再用胃蛋白酶處理B.肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸C.為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法,可推斷甲細(xì)胞比乙細(xì)胞增殖周期長(zhǎng)3.如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體,簡(jiǎn)稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是()A.雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D.同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞4.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞B.經(jīng)兩次篩選可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的細(xì)胞C.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱D.對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè)5.(多選)如圖是體細(xì)胞核移植的流程圖,下列說法正確的是()A.操作過程中需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到MⅡ期,用顯微操作儀將卵母細(xì)胞去核B.利用體細(xì)胞核移植技術(shù),可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜種繁育C.重新組合的細(xì)胞需用物理或化學(xué)方法激活,目的是使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程D.受體母牛需要用促性腺激素進(jìn)行同期發(fā)情處理6.“中中”和“華華”是兩只在我國(guó)出生的克隆獼猴,它們也是國(guó)際上首例利用體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物。如圖表示培育“中中”和“華華”的流程。下列相關(guān)敘述正確的是()A.圖示過程中利用的技術(shù)有核移植和干細(xì)胞移植技術(shù)等B.這兩只克隆獼猴是由同一受精卵發(fā)育而成的雙胞胎C.融合細(xì)胞的培養(yǎng)過程需要無菌、無毒的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)等條件D.利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度更大些7.治療性克隆對(duì)解決人類供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。流程圖如下,相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.個(gè)體A一般需通過注射促性腺激素實(shí)現(xiàn)超數(shù)排卵B.個(gè)體B體細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要提供95%空氣和5%CO2C.囊胚期胚胎需植入代孕母親子宮獲取胚胎干細(xì)胞D.獲得的組織器官移植給個(gè)體B一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)8.研究人員采用體細(xì)胞克隆技術(shù)培育克隆羊,其操作流程如圖所示。下列敘述正確的是()A.X不能直接發(fā)育為個(gè)體的原因是細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)不能表達(dá)B.重組細(xì)胞要進(jìn)行分裂和發(fā)育需經(jīng)振蕩或用滅活的病毒、PEG等激活C.早期胚胎在丙體內(nèi)能正常孕育是因?yàn)榕咛タ膳c母體建立正常的生理和組織聯(lián)系D.經(jīng)培育得到的丁羊,其細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)與甲完全相同9.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質(zhì)B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C.猴的核移植細(xì)胞通過胚胎工程已成功地培育出了克隆猴D.將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合,經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞10.(多選)小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞,制備流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.為獲得更多的囊胚,采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同,所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)11.(多選)如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是()A.可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)12.(多選)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是()A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因二、非選擇題13.胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,但這涉及倫理問題,因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用??茖W(xué)家通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞,獲得了類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞)。因?yàn)檎T導(dǎo)過程無須破壞胚胎,而且iPS細(xì)胞可來源于病人自身的體細(xì)胞,因此iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。如圖為iPS細(xì)胞的獲得及用其培育不同種細(xì)胞的示意圖(c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細(xì)胞的脫分化有關(guān))?;卮鹣铝袉栴}:(1)在對(duì)成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),常用胰蛋白酶處理使之分散成單個(gè)細(xì)胞,這說明細(xì)胞間的物質(zhì)為________,________(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶處理成纖維細(xì)胞,原因是_______________________________________________________________________________________________________________________。(2)在培養(yǎng)iPS細(xì)胞的過程中,培養(yǎng)基中應(yīng)含有細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是____________________________________________________________________________________________________。(3)過程③④為iPS細(xì)胞提供的條件不同,分化得到的細(xì)胞不同,可知細(xì)胞分化是________________________的結(jié)果。若iPS細(xì)胞來源于病人自身體細(xì)胞的誘導(dǎo),再將其分化出的細(xì)胞移入患者體內(nèi)的優(yōu)勢(shì)是________________________________________________________________________________________________。(4)如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為原始生殖細(xì)胞,該技術(shù)可能的應(yīng)用是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。答案:1.ABC甲剪碎腎臟組織塊→乙制成細(xì)胞懸液過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,分散成單個(gè)細(xì)胞,A正確;丙過程指細(xì)胞在添加血清的合成培養(yǎng)基中原代培養(yǎng),B正確;丙原代培養(yǎng)過程和丁傳代培養(yǎng)過程均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象,C正確;丁過程是傳代培養(yǎng)過程,該過程少部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生了變化,進(jìn)而無限繁殖,D錯(cuò)誤。2.C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,而在這樣的環(huán)境中胃蛋白酶會(huì)變性失活,因此制備肝細(xì)胞懸液時(shí),先用剪刀剪碎肝組織,再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,A錯(cuò)誤;肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH,B錯(cuò)誤;為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素,C正確;腫瘤細(xì)胞具有無限增殖的特點(diǎn),用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法,可推斷乙細(xì)胞比甲細(xì)胞增殖周期長(zhǎng),D錯(cuò)誤。3.D根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測(cè),雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合,A正確;根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性,利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞,從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用,B正確;由于雙抗是在兩種不同的抗原刺激下,B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成的單抗解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備成的,因此,篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原來進(jìn)行抗原—抗體檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)雙抗的篩選,C正確;同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞,而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞,D錯(cuò)誤。4.D步驟①是向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原,多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞,A正確;第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,故經(jīng)兩次篩選可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的細(xì)胞,B正確;CO2可維持pH的穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱,C正確;根據(jù)單一變量原則可知,應(yīng)設(shè)置不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系為對(duì)照,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,沒有抗體抑制,CD47對(duì)巨噬細(xì)胞有抑制作用,對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè),D錯(cuò)誤。5.ABC從動(dòng)物卵巢中采集的卵母細(xì)胞,一般要在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂才能用于實(shí)驗(yàn),核移植時(shí)是將細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞,可用顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞的核,A正確;體細(xì)胞核移植技術(shù)在畜牧生產(chǎn)方面主要可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育,B正確;在核移植技術(shù)中,常選用處于減數(shù)分裂Ⅱ中期(MⅡ期)的去核的次級(jí)卵母細(xì)胞,作為受體細(xì)胞,再用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程,C正確;可用促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵,不能進(jìn)行同期發(fā)情處理,D錯(cuò)誤。6.C圖示過程包括核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù),沒有干細(xì)胞移植技術(shù),A錯(cuò)誤;這兩只克隆獼猴是通過核移植、胚胎移植產(chǎn)生的,沒有用到受精卵,B錯(cuò)誤;胚胎干細(xì)胞的全能性比體細(xì)胞的全能性高,所以利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度要小些,D錯(cuò)誤。7.C分析題圖可知,要從個(gè)體A獲得卵母細(xì)胞,為了獲得更多的卵母細(xì)胞,一般需通過注射促性腺激素實(shí)現(xiàn)超數(shù)排卵,A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要?dú)怏w環(huán)境,95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的pH),B正確;胚胎干細(xì)胞可以來自于囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),不需要植入代孕母親子宮就可以獲得胚胎干細(xì)胞,C錯(cuò)誤;分析題圖可知,B是供核的一方,克隆的組織和器官的絕大多數(shù)遺傳物質(zhì)和B相同,因此獲得的組織器官移植給個(gè)體B一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),D正確。8.CX不能直接發(fā)育為個(gè)體的原因是動(dòng)物體細(xì)胞表現(xiàn)全能性十分困難,A錯(cuò)誤;重組細(xì)胞要進(jìn)行分裂和發(fā)育需用物理或化學(xué)方法(如電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)激活,B錯(cuò)誤;經(jīng)培育得到的丁羊,其細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自甲,而細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)大部分來自乙,因此其細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)與甲不完全相同,D錯(cuò)誤。9.D我國(guó)利用核移植技術(shù)成功培養(yǎng)出克隆猴“中中”和“華華”,C正確;將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合,經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞,還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等,D錯(cuò)誤。10.ABC限制獲得更多早期胚胎的最大問題是沒有足夠的卵母細(xì)胞,所以應(yīng)該通過注射促性腺激素促進(jìn)雌鼠超數(shù)排卵,A錯(cuò)誤;細(xì)胞a和細(xì)胞b是由同一個(gè)受精卵分裂分化形成的,所以兩細(xì)胞的核基因應(yīng)該是相同的,由于基因的選擇性表達(dá),囊胚期細(xì)胞b已經(jīng)分化形成了滋養(yǎng)層細(xì)胞,所以全能性降低,B錯(cuò)誤;用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織一段時(shí)間,消化了細(xì)胞間的蛋白質(zhì),從而獲得分散的胚胎干細(xì)胞,C錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有氧氣和二氧化碳,一般將動(dòng)物細(xì)胞置于含95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),D正確。11.ACD動(dòng)物細(xì)胞融合可以用滅活的仙臺(tái)病毒進(jìn)行誘導(dǎo),或用PEG融合法、電融合法等,A正確;免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合產(chǎn)生的兩兩融合細(xì)胞有:免疫B細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞,據(jù)題干信息可知,骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上無法生長(zhǎng),因此骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上無法生長(zhǎng),而免疫B細(xì)胞自身融合細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞可以在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;融合后產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞并不是都能表達(dá)產(chǎn)生所需的單克隆抗體,需要進(jìn)一步篩選,C正確;動(dòng)物細(xì)胞融合依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,D正確。12.BC若a細(xì)

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