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文檔簡介
江蘇常州教學研究合作聯(lián)盟新高考生物二模試卷注意事項:1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時,選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點涂黑;如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動,先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列關(guān)于利用胚胎工程技術(shù)培育試管牛的敘述,正確的是()A.胚胎移植可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的無性繁殖潛力B.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應(yīng)C.通過注射促性腺激素等方法對良種母牛作超排卵處理D.通過假陰道法、電刺激法等方法對精子進行獲能處理2.人體的細胞結(jié)構(gòu)與功能存在密切的聯(lián)系,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.成熟紅細胞產(chǎn)生的ATP不可用于血紅蛋白的合成與加工B.選擇透過性的基礎(chǔ)是細胞膜上的載體蛋白和磷脂分子具有特異性C.溶酶體有多種水解酶,溶酶體膜破裂后會造成細胞結(jié)構(gòu)的破壞D.胰島B細胞能分泌胰島素,與該細胞內(nèi)的胰島素基因選擇性表達有關(guān)3.下列有關(guān)實驗的敘述,正確的是A.提取菠菜綠葉中色素的原理:不同色素在層析液中的溶解度不同B.利用雞血細胞提取DNA時,需用0.14mol/L的NaCl溶液將DNA溶解C.用龍膽紫溶液染色,可觀察低溫誘導(dǎo)后的洋蔥鱗片葉表皮細胞的染色體數(shù)目D.根據(jù)C02通入溴麝香草酚藍水溶液后的變色速度,可判斷酵母菌的呼吸方式4.衰老人體通常會出現(xiàn)白發(fā)、老年斑、細胞數(shù)目減少等特征。敘述正確的是()A.人體衰老是因為體內(nèi)大多數(shù)細胞的基因發(fā)生突變B.老年人骨折后愈合得很慢,與成骨細胞的衰老有關(guān)C.細胞中的酪氨酸酶活性升高會導(dǎo)致老年人的頭發(fā)變白D.老年斑的形成是因為黑色素隨皮膚細胞衰老而逐漸積累5.果酒的工業(yè)化釀造可在圖示的發(fā)酵罐中進行。下列敘述錯誤的是()A.夏季生產(chǎn)果酒時,常需對罐體進行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣流速不宜太大C.發(fā)酵過程中需定時關(guān)注壓力變化以保證安全生產(chǎn)D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵6.下列關(guān)于生態(tài)系統(tǒng)的敘述,錯誤的是()A.生態(tài)系統(tǒng)中的生物成分是由種群和群落構(gòu)成的B.生態(tài)系統(tǒng)可通過信息傳遞調(diào)節(jié)種間關(guān)系,以維持其穩(wěn)定C.生態(tài)系統(tǒng)維持正常功能需要不斷得到來自系統(tǒng)外的能量D.自然生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者固定的能量必然大于消費者同化的能量二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)人t-PA蛋白能高效溶解血纖維蛋白凝聚的血栓。用傳統(tǒng)基因工程生產(chǎn)的t-PA給心?;颊叽髣┝孔⑸鋮s會誘發(fā)顱內(nèi)出血,原因在于其與血纖維蛋白結(jié)合的特異性低,但若將其第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,就能顯著降低出血副作用。據(jù)此,科學家對人t-PA基因進行序列改造,再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該突變基因,制造出了高性能的t-PA突變蛋白。(1)人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA。絲氨酸的密碼子為UCU,突變基因中對應(yīng)該氨基酸密碼子的堿基序列應(yīng)設(shè)計為______。(2)上述獲得突變目的基因的基本途徑是___。(3)如圖所示t-PA突變基因、質(zhì)粒,用__________限制酶切開該質(zhì)粒較好。(4)將相應(yīng)的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中,含t-PA突變基因的細胞應(yīng)具有的性狀是______。(5)上述生物工程技術(shù)是以_______為基礎(chǔ)的,首先通過________,再進行______,以滿足醫(yī)療需求的。8.(10分)某地將廢棄采礦區(qū)改造成生態(tài)公園,預(yù)期若干年后各種生物陸續(xù)遷入,逐步形成相對穩(wěn)定的生態(tài)系統(tǒng),請回答下列問題。(1)該生態(tài)公園生物群落的變化屬于_________演替,群落中物種數(shù)目的多少,稱為群落的_________。該群落演替到森林階段后,群落中還能找到苔蘚、草本植物和灌木,此現(xiàn)象說明群落的演替是一個_________,而不是全部物種的取代過程。(2)調(diào)查該生態(tài)系統(tǒng)中某種鳥類的種群密度常采用_________法,統(tǒng)計土壤中小動物豐富度的常用方法是_________。(3)若該生態(tài)系統(tǒng)中,由E、C、D組成食物網(wǎng),且C的動物性食物與植物性食物的比例由1:1調(diào)整為1:5,則該生態(tài)系統(tǒng)供養(yǎng)的C數(shù)量是原來的_________倍(能量傳遞效率按10%計算)。9.(10分)黃瓜花葉病毒(CMV)是能侵染多種植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn)。研究人員通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將該病毒外殼蛋白的cDNA導(dǎo)入番茄植株中,成功獲得抗CMV的番茄植株。(1)獲得CMV的RNA后,在__________的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。(2)獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的__________片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細胞的轉(zhuǎn)化。(3)將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間,只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA,你認為他們做出以上判斷的理由是_________________。(4)要想確定轉(zhuǎn)基因番茄已經(jīng)成功表達出CMV外殼蛋白,需要進行____________實驗。(5)若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力,請寫出實驗設(shè)計思路__________。轉(zhuǎn)基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,由此可以得出的結(jié)論是_________(答出兩點)。10.(10分)為了研究手機屏幕上的細菌數(shù)量和種類,有人做了下圖所示的實驗。回答下列問題:(1)在培養(yǎng)基的制備過程中,培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需的水、無機鹽、碳源和________等成分;在倒平板時,需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時,在__________附近倒平板,待平板冷卻后需倒置,其原因是_______________________________________。(2)圖中采取的接種方法是________________,實驗結(jié)束后,所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉的原因是_______________。(3)若按圖中方法取樣,測定某手機屏幕上的細菌數(shù)量,制成11mL菌懸液中,在3個平板上分別接入1.1mL稀釋液,經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為38、41和42,則該手機屏幕的細菌數(shù)為__________個/cm2。該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果偏__________(填“高”或“低”),原因是_____________________________________。11.(15分)世界衛(wèi)生組織將新型冠狀病毒感染的肺炎命名為“COVID-19”,新型冠狀病毒被稱為“SARS-CoV-2”。感染新型冠狀病毒的患者出現(xiàn)的癥狀類似非典,感染者會出現(xiàn)急性、嚴重呼吸道疾病,伴有發(fā)熱、咳嗽、氣短及呼吸困難,嚴重的病例會出現(xiàn)腎功能衰竭和死亡,請回答下列問題:(1)冠狀病毒能將人細胞膜上的ACE2(血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2)作為受體從而入侵細胞,說明細胞膜具有_____的功能,這也說明細胞膜具有_____的結(jié)構(gòu)特點。(2)新型冠狀病毒為單股正鏈的RNA病毒,屬于RNA復(fù)制病毒,其RNA復(fù)制時所需要的酶是在_____合成的,其RNA可以直接作為_____的模板。(3)人體免疫系統(tǒng)對新冠病毒反應(yīng)相對遲鈍,其容易突破第一、二道防線后大量繁殖,原因是_____。(4)結(jié)合體液免疫和細胞免疫過程,闡述人體通過自身免疫功能清除新冠病毒的機理:_____。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解析】
胚胎移植時,通常需用促性腺激素處理供體,使之超數(shù)排卵,受體需同期發(fā)情處理。體外受精主要操作步驟有卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能,采集方法有假陰道法、手握法和電刺激法等,獲能方法有培養(yǎng)法和化學法,獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細胞在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。【詳解】A.胚胎移植中的胚胎是通過人工體外授精獲得的,屬于有性生殖,A錯誤;B.受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),因此無需使用免疫抑制劑,B錯誤;C.用促性腺激素對良種奶牛進行注射處理,可促使其超數(shù)排卵,C正確;D.收集精子的方法有假陰道法、手握法和電刺激法,對精子進行獲能處理方法包括培養(yǎng)法和化學誘導(dǎo)法,D錯誤。2、B【解析】
哺乳動物未成熟的紅細胞具有細胞核和各種細胞器,血紅蛋白的肽鏈在核糖體上合成后,在細胞質(zhì)中形成空間結(jié)構(gòu),成熟的紅細胞不含細胞核和細胞器,不能合成血紅蛋白?!驹斀狻緼、人體成熟紅細胞無細胞核,不能合成血紅蛋白,A正確;B、選擇透過性的基礎(chǔ)是細胞膜上的載體蛋白具有特異性,磷脂分子不具有特異性,B錯誤;C、溶酶體內(nèi)含有多種水解酶,溶酶體膜破裂后釋放出的酶會造成細胞結(jié)構(gòu)的破壞,C正確;D、胰島B細胞內(nèi)的胰島素基因選擇性表達,進而指導(dǎo)合成胰島素,D正確。故選B。【點睛】本題主要考查細胞的結(jié)構(gòu)與功能,意在考查考生的識記和理解能力。3、D【解析】
1、葉綠體色素的提取和分離實驗:
①提取色素原理:色素能溶解在酒精或丙酮等有機溶劑中,所以可用無水酒精等提取色素。
②分離色素原理:各種色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同,從而分離色素。溶解度大,擴散速度快;溶解度小,擴散速度慢。
2、探究酵母菌細胞呼吸方式實驗的原理是:
(1)酵母菌是兼性厭氧型生物;
(2)酵母菌呼吸產(chǎn)生的CO2可用溴麝香草酚藍水溶液或澄清石灰水鑒定,因為CO2可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃,或使澄清石灰水變渾濁;
(3)酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的酒精可用重鉻酸鉀鑒定,由橙色變成灰綠色?!驹斀狻緼、不同色素在層析液中的溶解度不同是分離菠菜綠葉中色素的原理,A錯誤;B、DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,B錯誤;C、洋蔥鱗片葉表皮細胞是高度分化的成熟植物細胞,沒有分裂能力,因此低溫誘導(dǎo)不能使之染色體數(shù)目加倍,C錯誤;D、有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳的速率比無氧呼吸快,且量比無氧呼吸多,因此根據(jù)C02通入溴麝香草酚藍水溶液后的變色速度,可判斷酵母菌的呼吸方式,D正確。故選D。4、B【解析】
細胞衰老的特征:(1)細胞內(nèi)水分減少,結(jié)果使細胞萎縮,體積變小,細胞新陳代謝速率減慢;(2)細胞內(nèi)多種酶的活性降低;(3)細胞內(nèi)的色素會隨著細胞衰老而逐漸累積,它們會妨礙細胞內(nèi)物質(zhì)的交流和傳遞,影響細胞正常的生理功能;(4)細胞內(nèi)呼吸速度減慢,細胞核的體積增大,核膜內(nèi)折,染色質(zhì)收縮,染色加深;(5)細胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運輸功能降低?!驹斀狻緼、人體衰老是因為體內(nèi)大多數(shù)細胞衰老,這與基因突變無關(guān),A錯誤;B、老年人骨折后愈合得很慢,與成骨細胞的衰老有關(guān),B正確;C、細胞中的酪氨酸酶活性降低(黑色素合成減少)會導(dǎo)致老年人的頭發(fā)變白,C錯誤;D、細胞衰老后,黑色素的合成減少,老年斑的形成是因為色素(如褐色素)隨皮膚細胞衰老而逐漸積累,D錯誤。故選B。【點睛】本題考查細胞衰老的相關(guān)知識,要求考生識記衰老細胞的主要特征。5、B【解析】
分析題圖:圖中排料口的作用是出料、檢測;充氣口的作用是在果酒制作前期通入氧氣的,以便于酵母菌有氧呼吸大量繁殖;排氣孔是排氣,其彎彎曲曲的好處是防止雜菌和浮塵進入發(fā)酵罐內(nèi)造成污染?!驹斀狻緼、果酒制作是利用酵母菌的無氧呼吸,而酵母菌適宜生存的溫度為18~25℃,而夏天溫度較高,因此夏季生產(chǎn)果酒時,常需對罐體進行降溫處理,A正確;B、產(chǎn)生酒精表明此時已經(jīng)進行無氧呼吸,無氧呼吸過程中不能充氣,否則會抑制酵母菌的無氧呼吸,B錯誤;C、正常發(fā)酵過程中,酵母菌無氧呼吸不消耗氣體,但是不斷產(chǎn)生二氧化碳,因此罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓,需定時關(guān)注壓力變化以保證安全生產(chǎn),C正確;D、可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵,D正確。故選B。6、A【解析】
生態(tài)系統(tǒng)的成分包括生物成分和非生物的物質(zhì)和能量,生態(tài)系統(tǒng)具有物質(zhì)循環(huán)、能量流動、信息傳遞三大功能,信息傳遞可以調(diào)節(jié)種間關(guān)系,維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,能量流動具有單向流動、逐級遞減的特點。【詳解】A、生態(tài)系統(tǒng)的生物成分是由群落構(gòu)成,A錯誤;B、生態(tài)系統(tǒng)可通過信息傳遞調(diào)節(jié)種間關(guān)系,以維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定,B正確;C、生態(tài)系統(tǒng)能量流動是單向流動、逐級遞減,生態(tài)系統(tǒng)維持正常功能需要不斷得到來自系統(tǒng)外的能量,C正確;D、生態(tài)系統(tǒng)的總能量是生產(chǎn)者所固定的太陽能,能量流動具有單向流動、逐級遞減的特點,因此自然生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者固定的能量必然大于消費者同化的能量,D正確。故選A。二、綜合題:本大題共4小題7、AGA從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的基因脫氧核苷酸序列Xmal、Bg/II新霉素抗性且呈白色蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造新的蛋白質(zhì)【解析】
本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識?;蚬こ痰幕静僮鞑襟E:獲取目的基因→構(gòu)建基因表達載體→導(dǎo)入受體細胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測與鑒定。蛋白質(zhì)工程可以通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進行改造,或制造新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?!驹斀狻浚?)人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA,根據(jù)轉(zhuǎn)錄過程堿基互補配對原則,絲氨酸的密碼子為UCU,則其模板鏈編碼序列為AGA,要將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,故需將編碼序列變?yōu)锳GA;(2)蛋白質(zhì)工程的基本途徑:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā),設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測應(yīng)有的氨基酸序列,找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因),以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑;(3)由于目的基因的兩端的堿基序列分別是CCGG、CTAG,所以應(yīng)用XmaI和BgII兩種限制酶切割,以便于把目的基因連接到質(zhì)粒pCLY11上;(4)由圖1可知,將連接好的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌中,由于限制酶切割質(zhì)粒破壞了mlacZ基因,所以含t-PA突變基因重組DNA分子的細胞應(yīng)具有的表型是新霉素抗性且呈白色;(5)蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。【點睛】本題綜合性較強,難度較大。理清轉(zhuǎn)錄中堿基互補配對原則及基因工程的核心步驟即基因表達載體的構(gòu)建是解題的關(guān)鍵。需要注意的是:蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)。8、次生物種豐富度優(yōu)勢物種取代標志重捕法記名計算法和目測估計法2.2【解析】
1、隨著時間的推移,一個群落被另一個群落代替的過程叫群落的演替。群落演替的原因:生物群落的演替是群落內(nèi)部因素(包括種內(nèi)關(guān)系、種間關(guān)系等)與外界環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果。2、許多土壤動物有較強的活動能力,而且身體微小,因此不適于用樣方法或標記重捕法進行調(diào)查。在進行這類研究時,常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查。即用一定規(guī)格的捕蟲器(如采集罐、吸蟲器等)進行取樣,通過調(diào)查樣本中小動物的種類和數(shù)量來推測某一區(qū)域內(nèi)土壤動物的豐富度。3、生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動是逐級遞減的,能量的傳遞效率一般在10%~20%之間,營養(yǎng)級越高,所獲得的能量越少。【詳解】(1)該生態(tài)公園生物群落的變化屬于群落的演替現(xiàn)象,該公園生物群落的變化屬于次生演替。公園群落中物種數(shù)目的多少,稱為群落的物種豐富度。若演替到森林階段,群落中還能找到苔蘚、草本植物和灌木,此現(xiàn)象說明群落的演替是優(yōu)勢物種取代的過程。(2)鳥類是屬于活動能力強,活動范圍廣的動物,因此調(diào)查該公園中某種鳥類的種群密度應(yīng)采用標志重捕法。調(diào)查土壤小動物類群豐富度,常用的方法是取樣器取樣法,統(tǒng)計土壤中小動物豐富度的常用方法有記名計算法和目測估計法。(3)設(shè)食物結(jié)構(gòu)調(diào)整前動物性食物與植物性食物供給C的總能量為X,調(diào)整后動物性食物與植物性食物供給C的總能量為Y,則有:X/2÷10%+X/2÷10%÷10%=5Y/6÷10%+Y/6÷10%÷10%,整理得:33X=15Y,Y/X=33/15=2.2?!军c睛】題考查了種群、群落、能量流動的相關(guān)知識,要求考生識記種群的數(shù)量特征,識記群落演替的類型和影響因素,識記生態(tài)系統(tǒng)中能量流動的過程,掌握能量傳遞效率的相關(guān)計算,多條食物鏈能量流動的計算可以每條實物鏈計算后相加。9、逆轉(zhuǎn)錄酶Ti質(zhì)粒的T-DNA重組表達載體同時含有卡那霉素和青霉素抗性基因,只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織抗原-抗體雜交用等量強致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄(普通番茄),在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間,觀察它們對CMV的抗性目的基因整合到受體細胞的一條染色體上,獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:1、目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。2、基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不同。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。4、目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù);④個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄,該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是:農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體DNA上。因此,獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細胞的轉(zhuǎn)化。(3)重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織,據(jù)此可知生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA。(4)檢測目的基因是否表達產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì),需要進行抗原-抗體雜交實驗。(5)若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力,應(yīng)進行個體水平上的鑒定,自變量為番茄植株的種類,即用等量強致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄(普通番茄),在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間,觀察它們對CMV的抗性。轉(zhuǎn)基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,符合基因分離定律,由此可以得出的結(jié)論是目的基因整合到受體細胞的一條染色體上,獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子?!军c睛】本題的難點在于結(jié)合了基因工程和遺傳的基本規(guī)律。由于受體細胞為植物細胞,經(jīng)過植物組織培養(yǎng)可以獲得攜帶目的基因的幼苗,所以在最終鑒定的時候通常應(yīng)用雜交或自交實驗完成。10、氮源酒精燈火焰既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染稀釋涂布平板法防止污染環(huán)境或感染其他生物161低當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落【解析】
測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目,可采用顯微鏡直接計數(shù)(或血細胞計數(shù)板計數(shù))法對培養(yǎng)液中的微生物直接計數(shù),也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,通過計數(shù)菌落數(shù)目計算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計數(shù)時不能剔除死菌,采用第二種方法計數(shù)時,當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,所以第一種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目高,第二種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目低?!驹斀狻浚?)培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需營養(yǎng)物質(zhì),包括四類的水、無機鹽、碳源和氮源等成分;在倒平板時,需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時,酒精燈火焰旁是無菌區(qū),所以,倒平板操作通常在在酒精燈火焰附近進行,待平板冷卻后,需將平板倒置,這樣既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。(2)根據(jù)圖中菌落的分布情況可知,接種時采取的是稀釋涂布平板法,實驗結(jié)束后,為防止污染環(huán)境或感染其他生物,所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉。(3)用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時,首先統(tǒng)計平板中的菌落數(shù),然后求均值,再計算,(38+41+42)/
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