醫(yī)用微生物學(xué)專家講座

醫(yī)用微生物學(xué)風(fēng)濕免疫科孫爾維－6－28醫(yī)用微生物學(xué)第1頁微生物與病原微生物

微生物（microorganism）

存在于自然界一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不見，必須籍助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到微小生物。不是全部微生物都能致病，能夠引發(fā)疾病微生物叫做病原微生物醫(yī)用微生物學(xué)第2頁微生物種類與分布1.非細(xì)胞型微生物

無經(jīng)典細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)增殖。核酸類型為DNA或RNA。病毒屬之。能經(jīng)過除菌濾器2.原核細(xì)胞型微生物

核呈環(huán)狀裸DNA團(tuán)塊結(jié)構(gòu)，無核膜、核仁。細(xì)胞器很不完善，只有核糖體。DNA和RNA同時(shí)存在。分為古生菌（archaea）和細(xì)菌（bacterium）二大類。細(xì)菌種類繁多，包含細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌等。3.真核細(xì)胞型微生物

細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁。細(xì)胞器完整。真菌屬這類。醫(yī)用微生物學(xué)第3頁細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)醫(yī)用微生物學(xué)第4頁細(xì)菌（bacterium）：是屬原核生物界一個(gè)單細(xì)胞微生物.廣義細(xì)菌：包含細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體狹義細(xì)菌：專指其中數(shù)量最大、種類最多、含有經(jīng)典代表性細(xì)菌

醫(yī)用微生物學(xué)第5頁測(cè)量單位

微米（μm）

基本形態(tài)三種：球菌；桿菌；螺形菌1、細(xì)菌大小與形態(tài)醫(yī)用微生物學(xué)第6頁球菌（coccus）葡萄球菌

雙球菌

鏈球菌

醫(yī)用微生物學(xué)第7頁桿菌（bacillus）桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀醫(yī)用微生物學(xué)第8頁各種形態(tài)桿菌棒狀桿菌雙歧桿菌分枝桿菌醫(yī)用微生物學(xué)第9頁螺形菌（spiralbacterium）弧菌螺菌螺桿菌醫(yī)用微生物學(xué)第10頁細(xì)菌基本形態(tài)醫(yī)用微生物學(xué)第11頁2、細(xì)菌結(jié)構(gòu)

醫(yī)用微生物學(xué)第12頁1.肽聚糖

peptidoglycan革蘭陽性菌肽聚糖聚糖骨架四肽側(cè)鏈五肽交聯(lián)橋

細(xì)菌基本結(jié)構(gòu)

細(xì)胞壁主要成份是肽聚糖醫(yī)用微生物學(xué)第13頁革蘭陰性菌肽聚糖結(jié)構(gòu)骨架四肽側(cè)鏈醫(yī)用微生物學(xué)第14頁2.Ｇ＋菌特有成份磷壁酸，占菌體干重50％

壁磷壁酸膜磷壁酸醫(yī)用微生物學(xué)第15頁3.Ｇ-菌特有成份外膜：脂多糖；脂質(zhì)雙層；脂蛋白醫(yī)用微生物學(xué)第16頁脂多糖(LPS)LPS是Ｇ－菌內(nèi)毒素組成：

脂質(zhì)A：毒性部分關(guān)鍵多糖特異多糖：菌體O抗原屬特異種特異無特異，有毒醫(yī)用微生物學(xué)第17頁醫(yī)用微生物學(xué)第18頁4.細(xì)胞壁功效維持細(xì)菌形態(tài)，承受細(xì)胞內(nèi)高滲透壓參加菌體內(nèi)外物質(zhì)交換帶有各種抗原表位，能夠誘發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答細(xì)胞壁一些成份與細(xì)菌致病性相關(guān)醫(yī)用微生物學(xué)第19頁5.細(xì)胞壁缺點(diǎn)菌（L型菌）細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物原因直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細(xì)菌細(xì)胞壁缺點(diǎn)型。

1935年Luister研究所發(fā)覺醫(yī)用微生物學(xué)第20頁形態(tài)大小不一，G－臨床意義：

慢性和重復(fù)感染常規(guī)細(xì)菌檢驗(yàn)陰性醫(yī)用微生物學(xué)第21頁質(zhì)粒（plasmid）細(xì)菌染色體外雙鏈環(huán)狀DNA帶有遺傳信息，能自我復(fù)制控制細(xì)菌一些特定遺傳性狀醫(yī)用微生物學(xué)第22頁革蘭染色法步驟：涂片→固定→結(jié)晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脫色→復(fù)紅復(fù)染結(jié)果：

Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：紅色革蘭染色法意義：判別細(xì)菌選擇藥品研究細(xì)菌致病性醫(yī)用微生物學(xué)第23頁消毒滅菌慣用術(shù)語滅菌（sterilization）：殺滅物體上全部微生物

方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中

病原微生物方法。防腐（antisepsis）：預(yù)防或抑制皮膚表面細(xì)菌

生長(zhǎng)繁殖方法。清潔（cleaning）：是指經(jīng)過除去塵埃和一切污

穢以降低微生物數(shù)量過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌

意思，多是滅菌結(jié)果。預(yù)防細(xì)菌進(jìn)入人體

或其它物品操作技術(shù)，稱為無菌操作。醫(yī)用微生物學(xué)第24頁圖為定植于靜脈導(dǎo)管表面表皮葡萄球菌生物膜掃描電鏡照片（×6000）。（FromLansingM.Prescottetal.Microbiology,5thEdition,McGraw-HillCompanies;:p920醫(yī)用微生物學(xué)第25頁（二）毒素

1.外毒素（exotoxin）

主要由G＋和少數(shù)G－菌合成及分泌

主要特點(diǎn)：蛋白質(zhì)

毒性強(qiáng)

絕大多數(shù)不耐熱

抗原性強(qiáng)，可脫毒為類毒素

分類：神經(jīng)毒素（neurotoxin）

細(xì)胞毒素（cytotoxin）

腸毒素（enterotoxin）

醫(yī)用微生物學(xué)第26頁（二）毒素

1.外毒素（exotoxin）

2.內(nèi)毒素（endotoxin）

G－菌細(xì)胞壁脂多糖（LPS）

組成：O特異多糖

非特異關(guān)鍵多糖

脂質(zhì)A

特點(diǎn)：毒性弱

耐熱

不能脫毒為類毒素

致發(fā)燒反應(yīng)醫(yī)用微生物學(xué)第27頁醫(yī)院感染

（hospitalinfection）一、基本概念患者住院期間發(fā)生其它感染；二、醫(yī)院感染中微生物特點(diǎn)1.主要為條件致病性微生物2.常含有耐藥性3.常發(fā)生種類變遷4.適應(yīng)性強(qiáng)醫(yī)用微生物學(xué)第28頁三、醫(yī)院感染危險(xiǎn)原因

1.易感對(duì)象年紀(jì)和基礎(chǔ)疾病

2.診療技術(shù)

3.侵入性(介入性)檢驗(yàn)與治療

4.損害免疫系統(tǒng)原因四、醫(yī)院感染預(yù)防和控制1.消毒與滅菌2.隔離預(yù)防3.合理使用抗生素醫(yī)用微生物學(xué)第29頁肥達(dá)試驗(yàn)結(jié)果解釋：

1.正常值

普通是傷寒沙門菌O凝集效價(jià)<1:80，H凝集效價(jià)<1:160，引發(fā)副傷寒沙門菌H凝集效價(jià)<1:80。

2.動(dòng)態(tài)觀察

若效價(jià)逐次遞增或恢復(fù)期效價(jià)比首次效價(jià)≥4倍者即有診療意義。

3.O與H抗體診療意義

O、H凝集效價(jià)均超出正常值，則腸熱癥可能性大；如二者均低，患病可能性??；若O不高H高，有可能是預(yù)防接種或非特異性回想反應(yīng)；如O高H不高，則可能是感染早期或與傷寒沙門菌O抗原有交叉反應(yīng)其它沙門菌感染。

4.少數(shù)病例在整個(gè)病程中，肥達(dá)試驗(yàn)一直在正常范圍內(nèi)。醫(yī)用微生物學(xué)第30頁結(jié)核醫(yī)用微生物學(xué)第31頁結(jié)核病是一個(gè)古老疾病。從新石器時(shí)代人類遺骨和古代木乃伊骨關(guān)節(jié)病理組織中，已發(fā)覺人類在史前時(shí)代已患過結(jié)核病。中國(guó)醫(yī)史中，結(jié)核病最早記載于《內(nèi)經(jīng)》并形容為“虛癆”之癥。古代文件有提及肺癆為癆蟲于肺所致，但未能確定致病成因。

醫(yī)用微生物學(xué)第32頁德國(guó)科學(xué)家RobertKoch在1882年發(fā)覺了一個(gè)特殊微生物——結(jié)核桿菌，結(jié)核病致病細(xì)菌。他還證實(shí)了這種微生物是能夠在培養(yǎng)基里培養(yǎng)出來。這一發(fā)覺使得結(jié)核試驗(yàn)研究成為現(xiàn)實(shí)。醫(yī)用微生物學(xué)第33頁世界結(jié)核病防治現(xiàn)實(shí)狀況自發(fā)覺TB以來，全球約有兩億人死于TB，且疫情發(fā)展日趨嚴(yán)重。WHO已將TB作為重點(diǎn)控制傳染病之一，并于1995年起將每年3月24日定為“世界防治結(jié)核病日”，以提醒公眾加深對(duì)TB認(rèn)識(shí)。醫(yī)用微生物學(xué)第34頁據(jù)WHO預(yù)計(jì)，當(dāng)前全球約20億人已感染了MTB。全球現(xiàn)有TB病人萬。TB死亡將達(dá)歷史最高水平，全球天天有8000人死于TB，每年約300萬人死于TB。尤其是在發(fā)展中國(guó)家，TB形勢(shì)尤其嚴(yán)峻，全球98％TB死亡和95％新發(fā)TB都是在發(fā)展中國(guó)家。醫(yī)用微生物學(xué)第35頁醫(yī)用微生物學(xué)第36頁我國(guó)屬于全球22個(gè)TB高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，TB患病人數(shù)在世界各國(guó)中居于第2位。我國(guó)TB流行含有“五多一高”特點(diǎn)：TB感染人數(shù)多。現(xiàn)患肺TB病人多。TB死亡人數(shù)多。耐藥TB人多。農(nóng)村TB人多。傳染性肺TB患者疫情居高不下。醫(yī)用微生物學(xué)第37頁結(jié)核分枝桿菌

分枝桿菌屬（Mycobacterium）是一類細(xì)長(zhǎng)或稍彎桿菌，因有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)而得名。

結(jié)核桿菌引發(fā)結(jié)核病。對(duì)人類致病有些人型結(jié)核桿菌和牛型結(jié)核桿菌。醫(yī)用微生物學(xué)第38頁

抗酸染色（Ziehl-Neelsen）顯示痰標(biāo)本中染為紅色特異性抗酸細(xì)菌（結(jié)核桿菌）。其它非抗酸性細(xì)菌及細(xì)胞漿質(zhì)等呈藍(lán)色。結(jié)核桿菌抗酸性取決于胞壁內(nèi)所含分枝菌酸殘基和胞壁固有層完整性。醫(yī)用微生物學(xué)第39頁培養(yǎng)特征與生化反應(yīng)?專性需氧菌?營(yíng)養(yǎng)要求高：在含有蛋黃、馬鈴薯、甘油和天門冬酰胺等固體培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)。最適pH為6.5~6.8，最適溫度為37℃。?生長(zhǎng)遲緩：18~24h繁殖一代，接種后3～4周才出現(xiàn)肉眼可見菌落。菌落為干燥、堅(jiān)硬、表面呈顆粒狀、乳酪色或黃色，形似菜花樣。在液體培養(yǎng)基中呈粗糙皺紋狀菌膜生長(zhǎng)。?不發(fā)酵糖類：與牛分枝桿菌區(qū)分在于前者可合成煙酸和還原硝酸鹽，而后者則不能。醫(yī)用微生物學(xué)第40頁結(jié)核桿菌培養(yǎng)菌落醫(yī)用微生物學(xué)第41頁3.結(jié)核菌素試驗(yàn)

將一定量結(jié)核菌素注入皮內(nèi)，如受試者曾感染結(jié)核桿菌，則在注射部位出現(xiàn)遲發(fā)型超敏反應(yīng)炎癥，判為陽性，未感染者則為陰性。此法可用于檢測(cè)可疑患者曾否感染過結(jié)核菌、接種卡介苗后是否陽轉(zhuǎn)以及檢測(cè)機(jī)體細(xì)胞免疫功效。

結(jié)核菌素試劑有兩種：

舊結(jié)核菌素（oldtuberculin，OT）：

含結(jié)核分枝桿菌甘油肉湯培養(yǎng)物加熱過濾液，主要成份是結(jié)核蛋白，也含細(xì)菌其它代謝產(chǎn)物和培養(yǎng)基成份。

純蛋白衍生物（purifiedproteinderivative,PPD）：OT經(jīng)三氯醋酸沉淀后純化物。醫(yī)用微生物學(xué)第42頁3.結(jié)核菌素試驗(yàn)方法：當(dāng)前多用PPD法。取PPD-C和BCG-PPD各5單位分別注入兩前臂皮內(nèi)，48～72h后，紅腫硬結(jié)小于5mm者為陰性反應(yīng)；超出5mm者為陽性；≥15

mm為強(qiáng)陽性。醫(yī)用微生物學(xué)第43頁結(jié)果分析：

陽性：有特異性免疫力強(qiáng)陽性：活動(dòng)性結(jié)核病陰性：未感染或未接種。原發(fā)感染早期、正患嚴(yán)重結(jié)核病或其它嚴(yán)重疾病致細(xì)胞免疫功效低下者（如用過免疫抑制者）也可能出現(xiàn)陰性反應(yīng)。3.結(jié)核菌素試驗(yàn)醫(yī)用微生物學(xué)第44頁支原體Mycoplasma定義－介于細(xì)菌與病毒之間缺乏細(xì)胞壁形態(tài)上呈高度多形性能經(jīng)過除菌濾器在無生命培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)繁殖最小原核細(xì)胞型微生物能形成有分支長(zhǎng)絲，故稱支原體醫(yī)用微生物學(xué)第45頁生物學(xué)性狀形態(tài)

0.3～0.5

μm

無細(xì)胞壁

高度多形性：球、桿、絲狀和分枝狀等

普通Giemsa染色較好，染為淡紫色醫(yī)用微生物學(xué)第46頁培養(yǎng)特征

營(yíng)養(yǎng)豐富培養(yǎng)基：

10%～20%人或動(dòng)物血清以提供膽固醇與其它長(zhǎng)鏈脂肪酸，多數(shù)還需添加酵母浸液、組織浸液、核酸提取物和輔酶。

pH：適宜7.6～8.0（<7.0易死亡），但解脲脲原體最適pH5.5～6.5

兼性厭氧：大多寄生性支原體在37℃時(shí)在微氧環(huán)境（含5%CO2和90%N2）中生長(zhǎng)最正確。

繁殖方式多樣：二分裂繁殖外，還有分節(jié)、斷裂、

出芽或分枝等方式醫(yī)用微生物學(xué)第47頁固體培養(yǎng)基：

2～7天長(zhǎng)出直徑約10～600

μm經(jīng)典“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基：

清亮，用顏色改變單位（CCU）表示。需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察醫(yī)用微生物學(xué)第48頁支原體經(jīng)典菌落醫(yī)用微生物學(xué)第49頁判別點(diǎn)支原體細(xì)菌L型細(xì)胞壁缺失原因在遺傳上與細(xì)菌無關(guān)與原菌相關(guān)，能夠回復(fù)

細(xì)胞膜含高濃度固醇細(xì)胞膜不含固醇培養(yǎng)特征需要膽固醇大多需要高滲培養(yǎng)菌落大小生長(zhǎng)慢，菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)混濁度極低有一定混濁度，可附壁支原體與細(xì)菌L型異同點(diǎn)不一樣點(diǎn)缺乏細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，能經(jīng)過濾菌器。固體培養(yǎng)—菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相同—間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等相同點(diǎn)醫(yī)用微生物學(xué)第50頁支原體所致疾病

?存在廣泛，多不致病

?肺炎支原體引發(fā)原發(fā)性非經(jīng)典性肺炎

?溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原體可

引發(fā)泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥?穿透支原體和發(fā)酵支原體為艾滋病輔助致病原因醫(yī)用微生物學(xué)第51頁防治標(biāo)準(zhǔn)

大環(huán)內(nèi)酯類藥品

喹諾酮類藥品醫(yī)用微生物學(xué)第52頁真菌(fungus)：真核細(xì)胞型微生物組成：核膜和核仁(細(xì)胞核)完整細(xì)胞器(胞漿)單細(xì)胞（少數(shù)）或多細(xì)胞（多數(shù)）生存方式：腐生或寄生繁殖方式：有性或無性

真菌概述醫(yī)用微生物學(xué)第53頁分布廣泛、種類繁多、數(shù)量大多數(shù)有益：如發(fā)酵、生產(chǎn)抗生素等少數(shù)有害：人類及動(dòng)、植物疾病 醫(yī)學(xué)（病原）真菌400種 常見有50~100種當(dāng)前真菌癥呈顯著上升趨勢(shì)原因：

1.抗生素、抗腫瘤藥品、免疫抑制劑等濫用2.器官移植、介入性治療等新技術(shù)開展3.艾滋病、糖尿病、惡性腫瘤等疾病造成宿主免疫低下醫(yī)用微生物學(xué)第54頁

真菌氣生菌絲及營(yíng)養(yǎng)菌絲醫(yī)用微生物學(xué)第55頁真菌各種菌絲醫(yī)用微生物學(xué)第56頁

病毒主要特點(diǎn)

體積非常微小，必須用電子顯微鏡放大幾萬至幾十萬倍后方可觀察；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，無完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)，僅有一個(gè)核酸（RNA或DNA）；嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生性，只能在一定種類活細(xì)胞中增殖；反抗生素不敏感，但對(duì)干擾素敏感。由此病毒被列為非細(xì)胞型微生物。醫(yī)用微生物學(xué)第57頁病毒與其它微生物比較-----+干擾素敏感性+++++-抗生素敏感性有性或無性二分裂二分裂二分裂二分裂復(fù)制增殖方式+--++-在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)DNA＋RNADNA＋RNADNA＋RNADNA＋RNADNA＋RNADNA或RNA核酸類型+++-+-有沒有細(xì)胞壁真核細(xì)胞原核細(xì)胞原核細(xì)胞原核細(xì)胞原核細(xì)胞非細(xì)胞結(jié)構(gòu)-+-+-+

經(jīng)過細(xì)菌濾器(0.45μm)真菌衣原體立克次體支原體細(xì)菌病毒特征醫(yī)用微生物學(xué)第58頁病毒大小與形態(tài)病毒體：有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和感染性完整病毒顆粒。大?。焊鞣N病毒體大小差異懸殊，最大病毒約300

nm，如痘病毒；最小20

nm，如微小病毒。測(cè)量單位為納米或毫微米（nanometer,nm，為1/1000

μm），最可靠測(cè)量方法是電子顯微鏡技術(shù)，也可用超速離心沉淀、分級(jí)超濾和X線晶體衍射等技術(shù)研究病毒大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)和亞單位等。形態(tài)：多數(shù)病毒為球形或近似球形，少數(shù)為桿狀、絲狀、彈狀和磚塊狀，噬菌體呈蝌蚪狀。

醫(yī)用微生物學(xué)第59頁病毒大小與形態(tài)比較示意圖醫(yī)用微生物學(xué)第60頁病毒表面結(jié)構(gòu)示意圖醫(yī)用微生物學(xué)第61頁X線晶體衍射病毒表面抗原分布示意圖醫(yī)用微生物學(xué)第62頁各種形態(tài)病毒電鏡照片醫(yī)用微生物學(xué)第63頁水平傳輸：在人群不一樣個(gè)體間傳輸，是大多數(shù)病毒傳輸方式。垂直傳輸：由宿主親代傳給子代傳輸方式。主要經(jīng)過胎盤或產(chǎn)道，如風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、人類免疫缺點(diǎn)病毒（HIV）及乙型肝炎病毒等。病毒感染傳輸方式醫(yī)用微生物學(xué)第64頁

產(chǎn)前

胎盤

風(fēng)疹、巨細(xì)胞病毒、梅

毒螺旋體、弓形體、淋

病奈瑟菌

圍產(chǎn)期

已感染產(chǎn)道

衣原體

產(chǎn)后

哺乳

直接接觸巨細(xì)胞病毒、乙

型肝炎病毒

生殖細(xì)胞人基因組含病毒DNA各種反轉(zhuǎn)錄病毒垂直傳輸方式及常見微生物性疾病類型

路徑

微生物性疾病醫(yī)用微生物學(xué)第65頁干擾素（Interferon,IFN）

干擾素是由病毒或其它干擾素誘生劑誘使人或動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生一類糖蛋白，作用于機(jī)體細(xì)胞，可表現(xiàn)出抗病毒、抗腫瘤及免疫調(diào)整等多方面生物活性。醫(yī)用微生物學(xué)第66頁天然干擾素α、β、γ三型特征比較型別誘生劑產(chǎn)生細(xì)胞編碼基因位于pH2.056℃種特異性IFN-α病毒主要為白細(xì)胞在誘生劑刺激下產(chǎn)生第9號(hào)染色體穩(wěn)定低IFN-β有機(jī)聚合物主要為成纖維細(xì)胞在誘生劑刺激下產(chǎn)生第9號(hào)染色體穩(wěn)定強(qiáng)IFN-γT細(xì)胞促分裂劑，抗原主要為致敏淋巴細(xì)胞在誘生劑刺激下產(chǎn)生第12號(hào)染色體不穩(wěn)定強(qiáng)醫(yī)用微生物學(xué)第67頁干擾素抑制病毒蛋白翻譯兩種路徑示意圖醫(yī)用微生物學(xué)第68頁病毒分離與判定

病毒分離培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)（cell

culture）

雞胚接種（egginoculation）

動(dòng)物接種（animalinoculation）醫(yī)用微生物學(xué)第69頁

病毒分離培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)單層細(xì)胞培養(yǎng)（monolayercellculture）

分類懸浮細(xì)胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）原代細(xì)胞（primarycell）細(xì)胞種類二倍體細(xì)胞（diploidcell）傳代細(xì)胞系（continuouscellline）醫(yī)用微生物學(xué)第70頁雞胚培養(yǎng)

采取孵化9～14天雞胚

絨毛尿囊膜（allantocherion）痘苗病毒、人類皰疹病毒尿囊腔（allantoiccavity）接種部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔（amnioticcavity）流感病毒首次分離卵黃囊（yolksac）

嗜神經(jīng)病毒

醫(yī)用微生物學(xué)第71頁醫(yī)用微生物學(xué)第72頁雞胚培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)：易管理，不帶微生物，成本較低缺點(diǎn)：操作程序復(fù)雜醫(yī)用微生物學(xué)第73頁醫(yī)用微生物學(xué)第74頁

動(dòng)物接種

應(yīng)用：尚無敏感細(xì)胞病毒培養(yǎng)

動(dòng)物：兔、鼠、黑猩猩、猴等

優(yōu)點(diǎn)：結(jié)果易觀察，可建立動(dòng)物模型缺點(diǎn)：有喂養(yǎng)條件要求，費(fèi)用高，動(dòng)物體內(nèi)常帶有潛伏病毒醫(yī)用微生物學(xué)第75頁

脊髓灰質(zhì)炎病毒咽部、腸道淋巴結(jié)中增殖血（第一次病毒血癥）全身淋巴組織再次增殖血（第二次病毒血癥）靶器官（脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞、腦膜等）病變輕微暫時(shí)性肢體麻痹病變嚴(yán)重遲緩性麻痹極少數(shù)延髓麻痹呼吸、心臟衰竭死亡隱性感染（約90％）頓挫感染（約5％）非麻痹型脊髓灰質(zhì)炎/無菌性腦膜炎（0.1%～2.0%）麻痹型致病性損傷細(xì)胞醫(yī)用微生物學(xué)第76頁疫

苗*滅活脊髓灰質(zhì)炎疫苗（inactivatedpoliovaccine,IPV,Salk苗）；*口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗（liveoralpoliovaccine,OPV,Sabin苗）；*IPV和OPV均為三價(jià)混合疫苗；*近年部分國(guó)家發(fā)生了疫苗相關(guān)麻痹型

脊髓灰質(zhì)炎（VAPP），應(yīng)引發(fā)關(guān)注。醫(yī)用微生物學(xué)第77頁肝炎病毒世界性傳染病傳染性強(qiáng)傳輸路徑復(fù)雜流行廣泛發(fā)病率較高醫(yī)用微生物學(xué)第78頁與肝臟炎癥相關(guān)病毒

肝炎病毒巨細(xì)胞病毒（CMV）EB病毒（EBV）黃熱病毒醫(yī)用微生物學(xué)第79頁甲型肝炎病毒（HAV)乙型肝炎病毒（HBV)丙型肝炎病毒(HCV)丁型肝炎病毒(HDV)

戊型肝炎病毒（HEV）肝炎相關(guān)病毒（HGV、TTV）

肝炎病毒類型醫(yī)用微生物學(xué)第80頁

HBV感染臨床類型

無癥狀攜帶者重癥肝炎急性肝炎慢性乙肝與肝硬化和肝癌親密相關(guān)醫(yī)用微生物學(xué)第81頁HBV流行久遠(yuǎn)、傳輸廣泛，是全球性公共衛(wèi)生問題：全球3.5億人攜帶HBV我國(guó)為高流行區(qū)感染率60%

HBsAg攜帶率

8%~10%慢性乙肝病人1000萬80%原發(fā)性肝癌與HBV慢性感染相關(guān)

醫(yī)用微生物學(xué)第82頁

形態(tài)與結(jié)構(gòu)電鏡下HBV呈三種不一樣形態(tài)顆粒：Dane顆粒：直徑42

nm完整病毒顆粒，具傳染性小球形顆粒：直徑22

nm中空病毒顆粒，主要含HBsAg

管型顆粒：由小球形顆粒聚集而成

醫(yī)用微生物學(xué)第83頁HBV電鏡圖醫(yī)用微生物學(xué)第84頁HBV三種顆粒模式圖醫(yī)用微生物學(xué)第85頁HBV抗原組成

HBsAg（表面抗原）有四個(gè)不一樣亞型：adr,adw,ayr,ayw有共同a抗原表位

有兩組相互排斥抗原表位（d/y,w/r）醫(yī)用微生物學(xué)第86頁在血液中大量存在誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性抗體抗HBs不一樣亞型間有交叉免疫保護(hù)作用誘導(dǎo)細(xì)胞免疫反應(yīng)醫(yī)用微生物學(xué)第87頁P(yáng)reS1、PreS2抗原性強(qiáng)與肝細(xì)胞表面受體結(jié)合特異性抗體有免疫保護(hù)作用抗PreS1連續(xù)時(shí)間長(zhǎng)抗PreS2連續(xù)時(shí)間短（2～3個(gè)月）醫(yī)用微生物學(xué)第88頁HBcAg（關(guān)鍵抗原）存在于病毒關(guān)鍵及被感染肝細(xì)胞表面普通不游離于血循環(huán)中含有很強(qiáng)抗原性抗HBc沒有免疫保護(hù)作用抗HBc-IgM是病毒復(fù)制指標(biāo)含有T細(xì)胞表位，可刺激產(chǎn)生細(xì)胞免疫反應(yīng)醫(yī)用微生物學(xué)第89頁HBeAg游離存在于血中與病毒復(fù)制成正比是病毒復(fù)制指標(biāo)之一抗HBe含有免疫保護(hù)作用Pre-C區(qū)突變免疫逃逸醫(yī)用微生物學(xué)第90頁HBV復(fù)制周期

醫(yī)用微生物學(xué)第91頁

傳染源：病人、無癥狀攜帶者

傳輸路徑：

1.血液和血制品傳輸

血液及血制品、注射、外科、牙科手術(shù)、

針刺、共用剃刀或牙刷、皮膚黏膜微小損傷

2.母—嬰傳輸：胎兒期、圍生期、哺乳傳輸

3.性傳輸及親密接觸傳輸

醫(yī)用微生物學(xué)第92頁

過分強(qiáng)烈細(xì)胞免疫大面積肝細(xì)胞損傷

暴發(fā)型肝炎（重癥肝炎）

免疫功效正常隱性感染或急性肝炎

免疫功效低下慢性肝炎或慢性活動(dòng)性肝炎免疫耐受無癥狀攜帶者醫(yī)用微生物學(xué)第93頁感染后月數(shù)甲型肝炎臨床經(jīng)過與免疫反應(yīng)醫(yī)用微生物學(xué)第94頁

HBV抗原、抗體檢測(cè)血清HBV-DNA檢測(cè)血清DNA多聚酶檢測(cè)醫(yī)用微生物學(xué)第95頁HBsAg

HBV感染主要指標(biāo)感染早期出現(xiàn)急性肝炎恢復(fù)后1～4個(gè)月內(nèi)消失連續(xù)6個(gè)月以上提醒為慢性肝炎或HBV攜帶者

HBsAb

中和抗體

見于恢復(fù)期、既往感染、疫苗接種后

陽性提醒機(jī)體對(duì)乙肝有免疫力醫(yī)用微生物學(xué)第96頁P(yáng)reS1、PreS2與HBV-DNA成正比是病毒復(fù)制指標(biāo)

PreS1-Ab、PreS2-Ab在恢復(fù)期早期出現(xiàn)陽性提醒病毒正在或已經(jīng)被去除是預(yù)后良好指標(biāo)醫(yī)用微生物學(xué)第97頁

HBcAg不易檢出陽性提醒病毒顆粒存在血液含有傳染性醫(yī)用微生物學(xué)第98頁HBcAb-IgM

陽性提醒HBV處于復(fù)制狀態(tài)，含有強(qiáng)傳染性HBcAb-IgG

低滴度提醒既往感染，高滴度高提醒急性感染醫(yī)用微生物學(xué)第99頁HBeAg

陽性提醒病毒在體內(nèi)復(fù)制，含有傳染性HBeAb

機(jī)體取得免疫力病毒復(fù)制減弱傳染性降低醫(yī)用微生物學(xué)第100頁兩對(duì)半檢驗(yàn)

HBsAg,HBsAb

HBeAg,HBeAb

HBcAb大三陽

HBsAg(+),HBeAg(+)，HBcAb(+)小三陽

HBsAg(+),HBeAb(+),HBcAb(+)醫(yī)用微生物學(xué)第101頁HBV抗原、抗體檢測(cè)結(jié)果臨床分析

HBsAgHBeAg抗HBs抗HBe抗HBcIgM抗HBcIgG結(jié)果分析

+－

－－－

－HBV感染者或

無癥狀攜帶者

+

+

－－

+

－急性或慢性乙型肝炎

+－

－

+

－

+

急性感染趨向恢復(fù)

+

+

－－

+

+急性或慢性乙型肝炎

或無癥狀攜帶者

－－

+

+－

+乙型肝炎恢復(fù)期

－－

－－－

+既往感

－－

+－－

－感染過或接種過疫苗醫(yī)用微生物學(xué)第102頁篩選供血員加強(qiáng)傳染源管理保護(hù)易感人群

HBsAg血源疫苗

主動(dòng)免疫HBsAg基因工程疫苗

多肽疫苗、核酸疫苗

被動(dòng)免疫：HBsAb免疫球蛋白防治標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)用微生物學(xué)第103頁無特效療法α-IFN拉米夫定（lamivudine）泛昔洛韋（famciclovir）

有一定療效單磷酸阿糖腺苷（Ara-A）

治療醫(yī)用微生物學(xué)第104頁逆轉(zhuǎn)錄病毒

醫(yī)用微生物學(xué)第105頁一組含有反（逆）轉(zhuǎn)錄酶（reversetranscriptase）RNA病毒。反（逆）轉(zhuǎn)錄病毒*對(duì)人致病反轉(zhuǎn)錄病毒主要有：

1.人類嗜T細(xì)胞病毒（HTLV），為成人

T淋巴細(xì)胞白血病病原體。

2.人類免疫缺點(diǎn)病毒（HIV），是人類

艾滋病病原體。醫(yī)用微生物學(xué)第106頁人類免疫缺點(diǎn)病毒

（HIV）醫(yī)用微生物學(xué)第107頁HIV-1于1983年從一例淋巴腺綜合癥患者淋巴結(jié)中分離出。*分類：反轉(zhuǎn)錄病毒科（Retraviridae）

慢病毒屬（Lentivirus）*型別：有兩型

HIV-1：大多數(shù)AIDS由HIV-1引發(fā)。

HIV-2：主要在西非和西歐流行。

醫(yī)用微生物學(xué)第108頁AIDS——全球主要公共衛(wèi)生問題

自美國(guó)1981年診療出首例艾滋病患者以來，HIV在全球傳輸速度驚人。依據(jù)聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署和世界衛(wèi)生組織年11月21日共同公布《年世界艾滋病匯報(bào)》，艾滋病病毒感染者總數(shù)已達(dá)3950萬。

我國(guó)處于艾滋病快速增加期，艾滋病群體已由高危人群向普通人群擴(kuò)散。醫(yī)用微生物學(xué)第109頁HIV在全球范圍內(nèi)傳輸速度驚人醫(yī)用微生物學(xué)第110頁年全球新增HIV感染者430萬，

HIV感染者總數(shù)達(dá)3950萬。醫(yī)用微生物學(xué)第111頁年依據(jù)最新評(píng)定結(jié)果，中國(guó)現(xiàn)有HIV感染者約65萬，其中艾滋病病人約7.5萬。醫(yī)用微生物學(xué)第112頁

年12月1日，是第19個(gè)世界艾滋病日主題：遏制艾滋，推行承諾12月1日世界艾滋病日醫(yī)用微生物學(xué)第113頁醫(yī)用微生物學(xué)第114頁變

異

性*HIV顯著特點(diǎn)之一