紅毛藻不同乙醇濃度提取物的生物活性及其成分分析

文章亮點（1）分析了紅毛藻不同濃度乙醇提取物中總多酚、總黃酮、總生物堿含量與DPPH清除能力、胰脂肪酶、乙酰膽堿酯酶、酪氨酸酶抑制活性的相關(guān)性；（2）基于LC-MS/MS技術(shù)鑒定了紅毛藻乙醇提取物中的總多酚類物質(zhì)；（3）為紅毛藻活性物質(zhì)的研究及紅毛藻在功能性食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應用提供了理論依據(jù)和技術(shù)支持。圖文介紹1實驗部分1.1

主要儀器與試劑1.2

實驗方法1.2.1

樣品制備1.2.2

紅毛藻提取物DPPH清除能力的測定1.2.3

紅毛藻提取物酶抑制活性的測定1.2.3.1

酪氨酸酶抑制活性的測定[7]1.2.3.2

乙酰膽堿酯酶抑制活性的測定[8]1.2.3.3

胰脂肪酶抑制活性的測定1.2.4

紅毛藻提取物化學成分的測定1.2.4.1

總多酚含量的測定1.2.4.2

總黃酮含量的測定1.2.4.3

總生物堿含量的測定1.2.5

紅毛藻100%乙醇提取物中多酚類化合物的鑒定1.3

數(shù)據(jù)分析基于邁維（武漢）生物技術(shù)有限公司自建MVDB數(shù)據(jù)庫，根據(jù)二級譜信息進行物質(zhì)定性，利用三重四極質(zhì)譜的多反應檢測模式MRM完成多酚物質(zhì)定量，利用軟件Analyst1.6.3處理質(zhì)譜數(shù)據(jù)。每個實驗設(shè)定3組平行，利用Excel2016軟件進行數(shù)據(jù)分析和作圖，實驗結(jié)果采用`x±SD的形式表示，使用SPSS17.0分析軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，采用Duncan檢驗來檢驗數(shù)據(jù)均值之間的顯著差異。使用GraphPadPrism8.3.0進行Pearson相關(guān)性檢驗并分析作圖。2結(jié)果與討論2.1

紅毛藻提取物DPPH清除能力分析由于DPPH是一種相對穩(wěn)定的自由基，它可以接受電子或氫原子而成為穩(wěn)定的化合物分子，廣泛用于自由基清除活性的研究，本研究通過DPPH清除活性測定紅毛藻提取物的抗氧化能力。圖1為紅毛藻不同乙醇濃度提取物對供氫猝滅活性物質(zhì)DPPH的清除能力。2.2

紅毛藻提取物酶抑制活性分析紅毛藻不同乙醇濃度提取物對酪氨酸酶、乙酰膽堿酯酶和胰脂肪酶的抑制活性如圖2～4所示。2.3

紅毛藻提取物成分分析圖5顯示紅毛藻不同乙醇濃度提取物總多酚含量的范圍為（20.28～31.47）mg/g，不同乙醇濃度提取物之間有顯著性差異，紅毛藻提取物中的總多酚的含量隨著乙醇濃度的增大呈現(xiàn)先降低后增加的趨勢，這一變化趨勢與不同乙醇濃度提取物的DPPH清除力趨勢基本相同。2.4

相關(guān)性分析圖8為紅毛藻不同乙醇濃度提取物的化學成分與生物活性的相關(guān)性分析。2.5

紅毛藻100%乙醇提取物中多酚類化合物的鑒定圖9表示采用LC-MS/MS技術(shù)對紅毛藻100%乙醇提取物中的多酚類化合物進行定性的總離子色譜圖。根據(jù)二級譜信息進行化合物定性，并與標準數(shù)據(jù)庫進行比較。3結(jié)論

紅毛藻不同乙醇濃度提取物均具有DPPH清除能力，以及酪氨酸酶、胰脂肪酶、乙酰膽堿酯酶抑制活性，乙醇濃度不同，其提取物生物活性不同，總多酚、總黃酮、總生物堿含量不同。相關(guān)性分析表明，總多酚和總黃酮含量與酪氨酸酶抑制活性和DPPH清除能力均具有極顯著相關(guān)性。LC-MS/MS檢