病原微生物評(píng)估綜合報(bào)告

病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定匯報(bào)模板1、生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定依據(jù)1）病原微生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例2）試驗(yàn)室生物安全通用要求3）人間傳染病原微生物名目4）WHO試驗(yàn)室生物安全手冊(cè)2、生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定要素1）病原微生物特征；2）病原微生物相關(guān)試驗(yàn)活動(dòng)；3）試驗(yàn)活感人員；4）試驗(yàn)活動(dòng)設(shè)施、設(shè)備和環(huán)境；5）風(fēng)險(xiǎn)認(rèn)定和評(píng)定結(jié)論。3生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定實(shí)施3.1病原微生物特征評(píng)定1）通常生物學(xué)特征：病原微生物起源、基因組及編碼、產(chǎn)物形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、細(xì)菌或病毒屬別和型別內(nèi)容或技術(shù)判定。2）致病性：臨床癥狀、潛伏期、病程、感染劑量、入侵部位、宿主類(lèi)型、否產(chǎn)生毒素等。3）感染路徑：呼吸道、消化道、血液、媒介、皮膚感染等。4）環(huán)境中穩(wěn)定性：是指其抵御外界環(huán)境存活能力，不一樣微生物穩(wěn)定性不一樣，對(duì)病原微生物穩(wěn)定性評(píng)定除考慮其在自然界中穩(wěn)定性外，還應(yīng)考慮其對(duì)物理原因和化學(xué)消毒劑敏感性。5）致病性和感染劑量：不一樣病原致病性不一樣，即使同類(lèi)病原不一樣菌（毒）株也有不一樣強(qiáng)度致病力；另微生物致病性和被感染者免疫狀態(tài)、易感性相關(guān)；暴露后果取決于病原微生物致病性和機(jī)體抵御力；不一樣屬、種、亞種、型病原微生物，甚至不一樣株病原微生物，其致病性各異；還取決于所感染病原微生物劑量，當(dāng)大量病原微生物侵襲人體時(shí)，潛伏期通常較短，而病情則較為嚴(yán)重；不一樣個(gè)體被傳染后，可產(chǎn)生多種不一樣結(jié)局。6）傳輸路徑：傳輸方法包含呼吸道傳輸、經(jīng)過(guò)水和食物等消化道傳輸、接觸傳輸、血液傳輸、母嬰垂直傳輸、媒介傳輸?shù)?；傳輸結(jié)果包含一個(gè)病原可有多個(gè)傳輸路徑和多個(gè)病原能夠引發(fā)相同癥狀。7）試驗(yàn)動(dòng)物研究、試驗(yàn)室感染。8）有效預(yù)防和診療方法：有效藥品、有效疫苗、疾病監(jiān)測(cè)手段、有效預(yù)防控制方法手段。3.2病原微生物試驗(yàn)活動(dòng)評(píng)定1）試驗(yàn)活動(dòng)：是指試驗(yàn)室從事和人病原微生物菌（毒）種、樣本相關(guān)研究、教學(xué)培訓(xùn)、檢測(cè)等活動(dòng)。2）試驗(yàn)活動(dòng)類(lèi)型包含：標(biāo)本或樣品處理、離心、勻漿、超聲、移液操作、銳器使用、生物安全柜使用、醫(yī)療廢物消毒或高壓滅菌處理等。3）試驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)影響原因：3a.氣溶膠產(chǎn)生：離心、旋轉(zhuǎn)、勻漿、接種環(huán)等。b.潛在傷害：注射器等銳器、酒精燈、玻璃器皿等。c.標(biāo)本濃縮：來(lái)自臨床、現(xiàn)場(chǎng)、培養(yǎng)、濃縮等。d.毒株和細(xì)胞：野毒、減毒、疫苗株、毒素產(chǎn)生等。e.操作指導(dǎo)書(shū)。4)病原微生物動(dòng)物試驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)原因a.標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)室廢棄物處理程序。b.化學(xué)消毒劑選擇、配置和使用。c.物理消毒設(shè)備使用和維護(hù)。d.多種試驗(yàn)材料、器具，尤其是銳器處理。e.動(dòng)物試驗(yàn)動(dòng)物及其排泄物處理。5)廢棄物處理風(fēng)險(xiǎn)影響原因:a.標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)室廢棄物處理程序。b.化學(xué)消毒劑選擇、配置和使用。c.物理消毒設(shè)備使用和維護(hù)。d.多種試驗(yàn)材料、器具，尤其是銳器處理。e.動(dòng)物試驗(yàn)動(dòng)物及其排泄物處理。3.3試驗(yàn)活感人員要求評(píng)定1）健康情況和健康歷史、耐藥和過(guò)敏。2）人員資質(zhì)和心里素質(zhì)。3）生物安全知識(shí)。4）微生物學(xué)專(zhuān)業(yè)知識(shí)。5）操作設(shè)施設(shè)備技能。6）免疫情況。7）培訓(xùn)情況。8）應(yīng)急事件處理能力。3.4設(shè)施、環(huán)境和設(shè)備原因要求評(píng)定1）生物安全試驗(yàn)室對(duì)應(yīng)等級(jí)設(shè)施。2）試驗(yàn)室生物安全設(shè)備。3）試驗(yàn)室檢測(cè)相關(guān)設(shè)備。4）應(yīng)急設(shè)施。5）設(shè)施設(shè)備管理、維護(hù)、校準(zhǔn)和檢驗(yàn)。3.5風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定結(jié)論（降低風(fēng)險(xiǎn)方法）：1）病原微生物風(fēng)險(xiǎn)分類(lèi)2）試驗(yàn)活動(dòng)和對(duì)應(yīng)設(shè)施設(shè)備要求3）個(gè)人防護(hù)裝備要求4）人員生物安全和專(zhuān)業(yè)技術(shù)資質(zhì)要求5）人員健康和素質(zhì)要求6）預(yù)防和診療方法要求7）菌（毒）種和試驗(yàn)活動(dòng)等風(fēng)險(xiǎn)管理要求8）應(yīng)急預(yù)案和方法要求4、生物安全委員會(huì)負(fù)責(zé)審核病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定匯報(bào)適宜性和科學(xué)性，并做出評(píng)定結(jié)論。生物因子生物危害評(píng)定匯報(bào)模板***菌危害評(píng)定匯報(bào)一、危害程度分類(lèi)(一)分類(lèi)等級(jí)(二)不一樣試驗(yàn)操作生物安全試驗(yàn)室等級(jí)要求二、背景資料(一)通常生物學(xué)特征1．形態(tài)染色2．培養(yǎng)特征(二)在外界環(huán)境穩(wěn)定性1．在自然環(huán)境中穩(wěn)定性和對(duì)溫度敏感性2．對(duì)日光和紫外線敏感性3．對(duì)化學(xué)因子敏感性(三)致病性和感染數(shù)量(四)傳輸路徑及暴露后果1．傳輸路徑2．暴露后后果(五)***菌宿主范圍(六)***菌預(yù)防、診療和診療1．預(yù)防2．診療3．診療三、試驗(yàn)室試驗(yàn)活動(dòng)及其危險(xiǎn)性和預(yù)防方法(一)試驗(yàn)室試驗(yàn)活動(dòng)背景資料1．試驗(yàn)活動(dòng)內(nèi)容2．試驗(yàn)包含***菌菌毒種背景資料3．試驗(yàn)室***菌感染動(dòng)物和培養(yǎng)物最高存量(二)可能造成不良后果原因和預(yù)防方法1．試驗(yàn)樣品接收和開(kāi)啟擬采取防護(hù)方法：2．試驗(yàn)樣品涂片擬采取防護(hù)方法：3．***菌接種培養(yǎng)擬采取防護(hù)方法：4．***菌培養(yǎng)物和動(dòng)物器官細(xì)菌再分離樣品制備擬采取防護(hù)方法：5．試驗(yàn)樣品研磨6．***菌攻擊擬采取防護(hù)方法：7．感染動(dòng)物喂養(yǎng)8．感染動(dòng)物解剖9．動(dòng)物血清標(biāo)本和未經(jīng)滅活組織標(biāo)本采集10．病理觀察用組織標(biāo)本采集11．試驗(yàn)儀器設(shè)備12試驗(yàn)動(dòng)物病原微生物潛伏感染13．培養(yǎng)物和試驗(yàn)廢棄物銷(xiāo)毀14．室內(nèi)空氣、試驗(yàn)用具和操作臺(tái)面污染15．菌種和培養(yǎng)物保藏(三)試驗(yàn)室試驗(yàn)活動(dòng)危害評(píng)定四、工作人員素質(zhì)五、評(píng)定結(jié)論附表***菌試驗(yàn)室試驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定***試驗(yàn)室工作人員個(gè)人素質(zhì)評(píng)價(jià)表金黃色葡萄球菌生物危害評(píng)定匯報(bào)一、金黃色葡萄球菌傳輸和致病

金黃色葡萄球菌在自然界中無(wú)處不在，在空氣、水、灰塵及人和動(dòng)物排泄物中全部可找到。所以，食品受其污染機(jī)會(huì)很多。金黃色葡萄球菌腸毒素是個(gè)世界性衛(wèi)生問(wèn)題，在美國(guó)由金黃色葡萄球菌腸毒素引發(fā)食物中毒占整個(gè)細(xì)菌性食物中毒33%，加拿大則更多，占45%，中國(guó)每十二個(gè)月發(fā)生這類(lèi)中毒事件也很多。

金黃色葡萄球菌流行病學(xué)通常有以下特點(diǎn)：季節(jié)分布，多見(jiàn)于春夏季；中毒食品種類(lèi)多，如奶、肉、蛋、魚(yú)及其制品。另外，剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引發(fā)中毒事件也有報(bào)道；上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%，所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。

通常說(shuō)，金黃色葡萄球菌可經(jīng)過(guò)以下路徑污染食品：食品加工人員、炊事員或銷(xiāo)售人員帶菌，造成食品污染；食品在加工前本身帶菌，或在加工過(guò)程中受到了污染，產(chǎn)生了腸毒素，引發(fā)食物中毒；熟食制品包裝不嚴(yán)，運(yùn)輸過(guò)程受到污染；奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時(shí)，對(duì)肉體其它部位污染。

而腸毒素形成條件包含：存放溫度，在37℃內(nèi)，溫度越高，產(chǎn)毒時(shí)間越短；存放地點(diǎn)，通風(fēng)不良氧分壓低易形成腸毒素；食物種類(lèi)，含蛋白質(zhì)豐富，水分多，同時(shí)含一定量淀粉食物，腸毒素易生成。

金黃色葡萄球菌是人類(lèi)化膿感染中最常見(jiàn)病原菌，可引發(fā)局部化膿感染，也可引發(fā)肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。

葡萄球菌性菌血癥可發(fā)生于任何和血管內(nèi)導(dǎo)管或其它異物相關(guān)不足葡萄球菌膿腫或感染,它是嚴(yán)重?zé)齻∪怂劳龀Ｒ?jiàn)原因。連續(xù)性發(fā)燒常見(jiàn),而且可伴有休克。

葡萄球菌性心內(nèi)膜炎尤其好發(fā)于靜脈注射給藥者和裝有些人工心臟瓣膜病人。忽然出現(xiàn)心臟雜音,膿毒性栓子和其它經(jīng)典體征便可作出可疑診療,確診需依據(jù)超聲心動(dòng)圖和血培養(yǎng)。

葡萄球菌性骨髓炎關(guān)鍵見(jiàn)于兒童,可引發(fā)寒戰(zhàn),發(fā)燒和受累骨疼痛,繼之出現(xiàn)紅腫。關(guān)節(jié)周?chē)腥境Ｒl(fā)關(guān)節(jié)積液,提醒為化膿性關(guān)節(jié)炎而不是骨髓炎。白細(xì)胞計(jì)數(shù)常＞15000/μl而且血培養(yǎng)常陽(yáng)性。X線改變?cè)?0~14日內(nèi)不顯著,骨質(zhì)疏松和骨皮質(zhì)反應(yīng)甚至更長(zhǎng)時(shí)間仍不能測(cè)出,而放射性核素骨掃描則常能較早出現(xiàn)異常。

現(xiàn)在葡萄球菌性小腸結(jié)腸炎很罕見(jiàn),但若住院病人出現(xiàn)發(fā)燒,腸梗阻,腹痛和腹脹,低血壓或腹瀉,尤其是新近作過(guò)腹部手術(shù)或接收過(guò)抗生素者,可提醒本病。若糞便鏡檢發(fā)覺(jué)大片嗜中性白細(xì)胞和革蘭氏陽(yáng)性球菌,則可能作出診療,但必需排除產(chǎn)毒性艱苦梭狀芽胞桿菌感染,這是抗生素相關(guān)性結(jié)腸炎最常見(jiàn)原因。

金黃色葡萄球菌致病力強(qiáng)弱關(guān)鍵取決于其產(chǎn)生毒素和侵襲性酶：a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四種，能損傷血小板，破壞溶酶體，引發(fā)肌體局部缺血和壞死；b.殺白細(xì)胞素：可破壞人白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞；c.血漿凝固酶：當(dāng)金黃色葡萄球菌侵入人體時(shí)，該酶使血液或血漿中纖維蛋白沉積于菌體表面或凝固，阻礙吞噬細(xì)胞吞噬作用。葡萄球菌形成感染易局部化和此酶相關(guān)；d.脫氧核糖核酸酶：金黃色葡萄球菌產(chǎn)生脫氧核糖核酸酶能耐受高溫，可用來(lái)作為依據(jù)判定金黃色葡萄球菌；e.腸毒素：金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生數(shù)種引發(fā)急性胃腸炎蛋白質(zhì)性腸毒素，分為A、B、C、D、E及F五種血清型。腸毒素可耐受100°C煮沸30分鐘而不被破壞。它引發(fā)食物中毒癥狀是嘔吐和腹瀉。另外，金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。

二、金黃色葡萄球菌生物學(xué)特征

經(jīng)典金黃色葡萄球菌為球型，直徑0.8μm左右，顯微鏡下呈單個(gè)、成雙和排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌屬于葡萄球菌屬，無(wú)芽胞、鞭毛，大多數(shù)無(wú)莢膜，革蘭氏染色陽(yáng)性衰老、死亡和被白細(xì)胞吞噬后菌體革蘭染色呈陰性。金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高，在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，需氧或兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度35~37℃、最適生長(zhǎng)pH7.4~7.6。

金黃色葡萄球菌有高度耐鹽性，可在10-15%NaCl肉湯中生長(zhǎng)?？煞纸馄咸烟?、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅反應(yīng)陽(yáng)性，VP反應(yīng)弱陽(yáng)性。很多菌株可分解精氨酸，水解尿素，還原硝酸鹽，液化明膠。

金黃色葡萄球菌含有較強(qiáng)抵御力，對(duì)磺胺類(lèi)藥品敏感性低，但對(duì)青霉素、紅霉素等高度敏感。

三、金黃色葡萄球菌檢測(cè)和診療

1.標(biāo)本采集采自不一樣感染部位多種標(biāo)本，包含血液、腦脊液、穿刺液；痰液、膿液、創(chuàng)傷分泌物、尿液、糞便和嘔吐物等。

2.直接涂片鏡檢直接涂片檢驗(yàn)在正常情況下呈無(wú)菌狀態(tài)體液標(biāo)本如血液、腦脊液、穿刺液等，若有檢出革蘭氏陽(yáng)性，顯微鏡下呈葡萄狀排列、無(wú)芽胞、莢膜，直徑0.5-1μm球菌。即含相關(guān)鍵臨床價(jià)值。

3.分離培養(yǎng)能夠選擇一般營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血平板和高鹽甘露醇平板，血平板用葡萄糖肉湯增菌培養(yǎng)基。該菌在一般肉湯中呈均勻快速混濁生長(zhǎng)；若接種于瓊脂平板上35℃過(guò)夜后可形成直徑約2~3mm厚菌落、濕潤(rùn)有光澤、呈金黃色不透明圓形凸起。若接種于血平板，菌落周?chē)尚纬娠@著透明β—溶血環(huán)。在高甘露醇平板上金黃色葡萄球菌生成淡橙黃色菌落，以此可和其它凝固酶陰性葡萄球菌相判別。

4.判別試驗(yàn)

（1）血漿凝固酶試驗(yàn)：血漿凝固酶是金黃色葡萄球菌所產(chǎn)生，和其致病力相關(guān)一個(gè)侵襲性酶，其作用是使血漿中纖維蛋白在菌體表面沉積和凝固以阻礙吞噬細(xì)胞吞噬。血漿凝固酶分為結(jié)合型和游離型。前者結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞壁上，能直接作用于血漿中纖維蛋白原，使之轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，圍繞菌體而形成凝塊。而游離型血漿凝固酶則在產(chǎn)生后被分泌到菌體外，不能直接作用于纖維蛋白原，但能夠激活血漿凝血酶原，使之轉(zhuǎn)化成凝血酶，后者再作用于纖維蛋白原使其轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。具體測(cè)量方法也所以分為玻片法和試管法兩種。

玻片法:將待試菌落乳化于玻片上鹽水中，經(jīng)10~20S證實(shí)無(wú)自凝后，用接種環(huán)取人或兔血漿一環(huán)，和乳化菌液混合，出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性，另設(shè)生理鹽水為陰性對(duì)照。

試管法:吸收0.5mL兔血漿和0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯二十四小時(shí)培養(yǎng)物充足混勻，置37℃培養(yǎng)，每隔半小時(shí)觀察一次，連續(xù)觀察6小時(shí)，出現(xiàn)凝固，立即小試管傾斜或倒置時(shí)，內(nèi)容物不流動(dòng)，判為陽(yáng)性。

（2）耐熱核酸酶試驗(yàn)：將二十四小時(shí)肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min，用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭-DNA平板，35℃培養(yǎng)二十四小時(shí)，在刺種線周?chē)霈F(xiàn)淡粉色者為陽(yáng)性。本試驗(yàn)金黃色葡萄球菌為陽(yáng)性。

（3）甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)金黃色葡萄球菌可發(fā)酵甘露醇。

（4）Staphaurex膠乳凝集試驗(yàn)是判定金黃色葡萄球菌一個(gè)快速、簡(jiǎn)便商品化直接凝集試驗(yàn)。其基礎(chǔ)原理是在紙片上滴加包被有纖維蛋白原和IgG抗體聚苯乙烯膠乳，然后用接種環(huán)挑取待判定菌株新鮮培養(yǎng)物加入混勻，若出現(xiàn)凝集塊現(xiàn)象即為陽(yáng)性。

5.生化判定如上述，注意和其它凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌判別關(guān)鍵點(diǎn)：PYR（吡咯烷酮-β-萘基酰胺試驗(yàn)陰性；VP試驗(yàn)陽(yáng)性；鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)陰性。

6.免疫學(xué)方法用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和對(duì)流免疫電泳方法可檢測(cè)金葡菌磷壁酸抗體。

7.分子生物學(xué)方法包含PFGE脈沖場(chǎng)凝膠電泳和酶切圖譜分析等。

四、金黃色葡萄球菌防治及生物安全防護(hù)

一、細(xì)菌防治

金黃色葡萄球菌控制關(guān)鍵包含：

1）預(yù)防金黃色葡萄球菌污染食品，預(yù)防帶菌人群對(duì)多種食物污染：定時(shí)對(duì)生產(chǎn)加工人員進(jìn)行健康檢驗(yàn)，患局部化膿性感染（如疥瘡、手指化膿等）、上呼吸道感染（如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等）人員要臨時(shí)停止其工作或調(diào)換崗位。預(yù)防金黃色葡萄球菌對(duì)奶及其制品污染：如牛奶廠要定時(shí)檢驗(yàn)?zāi)膛Ｈ榉浚荒軘D用患化膿性乳腺炎牛奶；奶擠出后，要快速冷至-10℃以下，以防毒素生成、細(xì)菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶為原料，注意低溫保留。對(duì)肉制品加工廠，患局部化膿感染禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位，經(jīng)高溫或其它合適方法處理后進(jìn)行加工生產(chǎn)。

2）預(yù)防金黃色葡萄球菌腸毒素生成應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好條件下貯藏食物，以防腸毒素形成；在氣溫高春夏季，食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超出6小時(shí)，而且食用前要根本加熱。

3）無(wú)菌方法(如檢驗(yàn)病人前后根本洗手和消毒適用器械)至關(guān)關(guān)鍵。已被感染病人應(yīng)和其它易感病人隔離,患有活動(dòng)性葡萄球菌感染,即使是局部性感染(如癤)醫(yī)護(hù)人員,在其感染治愈前不得接觸病人或器械。無(wú)癥狀鼻腔帶菌者,除非所帶菌株十分危險(xiǎn)或被懷疑為暴發(fā)流行傳染源,通常無(wú)須隔離。

診療包含膿腫引流,抗生素(重癥病人需腸外給藥)和全身支持療法。培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)在開(kāi)始診療前或更換抗生素之前獲取?？股剡x擇和劑量取決于感染部位,疾病嚴(yán)重程度和細(xì)菌對(duì)藥品敏感性。

醫(yī)院取得葡萄球菌和大多數(shù)小區(qū)取得菌株,通常對(duì)青霉素G,氨芐青霉素和抗假單胞菌青霉素有耐藥性。大多數(shù)菌株對(duì)耐青霉素酶青霉素(甲氧苯青霉素,苯甲異噁唑青霉素,乙氧萘青霉素,鄰氯青霉素,雙氯青霉素),頭孢菌素(頭孢菌素Ⅰ,頭孢唑啉,頭孢菌素Ⅳ,頭孢拉定,頭孢羥唑,頭孢西丁和第三代頭孢菌素),卡巴培南類(lèi)(亞胺培南,美羅匹寧),慶大霉素,萬(wàn)古霉素,替考拉寧,林可霉素和氯林可霉素,是敏感。

即使頭孢菌素和萬(wàn)古霉素全部有效,但通常首選一個(gè)耐青霉素酶青霉素。很多葡萄球菌菌株對(duì)紅霉素,四環(huán)素類(lèi)藥品,氨基糖苷類(lèi),桿菌肽和氯霉素也敏感,但因有愈加好更安全藥可用,故極少使用氯霉素和桿菌肽。

現(xiàn)在耐甲氧苯青霉素金黃色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多，這種細(xì)菌雖可從小區(qū)取得感染病人中分離得到,但多數(shù)是從感染靜脈吸毒者和重癥監(jiān)護(hù)室病人中分離取得。MRSA菌株通常對(duì)耐β-內(nèi)酰胺酶青霉素,頭孢菌素和卡巴培南類(lèi)有耐藥性。這些細(xì)菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)和大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)(紅霉素,克拉霉素,阿齊霉素,林可霉素和氯林可霉素)耐藥性也很普遍。

即使亞胺培南-西拉司丁或喹諾酮類(lèi)對(duì)一些MRSA感染是有效,但靜脈注射萬(wàn)古霉素為首選。腎功效正常成人通用劑量是每6小時(shí)靜脈注射500mg或每12小時(shí)靜滴注1000mg,最少在1小時(shí)內(nèi)滴完。腎功效受損時(shí),劑量應(yīng)依據(jù)血清中藥品濃度加以調(diào)整,療程視感染部位及病人反應(yīng)而定,但通常為2~4周。一些嚴(yán)重或有并發(fā)癥感染,可能需要靜脈給藥診療6~8周,然后再口服診療1個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。

可用于替換萬(wàn)古霉素診療MRSA感染藥品有：TMP-SMZ,成人劑量為T(mén)MP10~15mg/(kg.d)加SMZ50~75mg/(kg.d),分劑口服或腸外給藥,每次間隔8小時(shí)或12小時(shí),連續(xù)2~4周；利福平(600mg/d)口服或腸外給藥；腸外給亞胺培南-西拉司丁(500mg每6小時(shí)1次)或美羅匹寧(0.5~1.0g每8小時(shí)1次。但利福平不要單獨(dú)應(yīng)用,因?yàn)榧?xì)菌很易產(chǎn)生抗藥性。在診療異物相關(guān)性MRSA感染或漿膜腔MRSA感染時(shí),利福平和氨基糖苷類(lèi)是有用輔助藥品。鄰氯青霉素,雙氯青霉素,TMP-SMZ,環(huán)丙沙星及局部用莫匹羅星(mupirocin)可用于診療MRSA帶菌狀態(tài),但MRSA對(duì)這些藥品可產(chǎn)生抗藥性?？谷f(wàn)古霉素腸球菌(VRE)菌株流行日益增加,這種菌株在試驗(yàn)室中可將引發(fā)抗萬(wàn)古霉素基因轉(zhuǎn)為凝固酶陽(yáng)性金黃色葡萄球菌菌株,而在感染病人中則轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂戈幮云咸亚蚓蛛x株?？墒沁@些葡萄球菌很輕易對(duì)診療這類(lèi)感染其它藥品產(chǎn)生抗藥性。桿菌肽,若有話,可試用于診療抗萬(wàn)古霉素葡萄球菌感染。對(duì)這些病人應(yīng)嚴(yán)格隔離,以防她們細(xì)菌傳輸。

二、細(xì)菌生物安全防護(hù)

依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸微生物名目（待頒布）金黃色葡萄球菌屬于三類(lèi)，BSL-2。相關(guān)防護(hù)事宜包含：

（1）操作要求

1、試驗(yàn)時(shí)，未經(jīng)試驗(yàn)室主任同意，限制或嚴(yán)禁進(jìn)入試驗(yàn)室。

2、不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。

3、全部操作過(guò)程應(yīng)盡可能細(xì)心，避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。

4、對(duì)于污染銳器，必需時(shí)刻保持高度警惕，包含針、注射器、玻片、加樣器等。

5、注射和吸收感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體）。用過(guò)一次性針頭必需彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將之小心放入不會(huì)被刺穿、用于搜集廢棄銳器容器中。非一次性銳器必需放置在堅(jiān)壁容器中，轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒，最好高壓殺菌。

6、打壞器皿不能直接用手處理，必需用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染針頭、銳器、碎玻璃容器在倒掉前，應(yīng)按攝影關(guān)要求進(jìn)行消毒。

7、全部培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它要求廢物在釋放前，均應(yīng)使用可行消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近試驗(yàn)室消毒物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi)，密封運(yùn)出試驗(yàn)室。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒物料，在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝，其包裝應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)。

8、濺出或偶然事件中，顯著暴露于傳染源時(shí)，要立即向試驗(yàn)室主任匯報(bào)。進(jìn)行合適醫(yī)學(xué)評(píng)定、觀察、診療，保留書(shū)面統(tǒng)計(jì)。

9、按日常程序、在相關(guān)傳染源工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊蟆⒒蚴艿狡渌鼈魅驹次廴竞?，試?yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)該使用有效消毒劑消毒。污染設(shè)備在送去修理、維護(hù)前，要按攝影關(guān)要求消毒；在離開(kāi)設(shè)施轉(zhuǎn)移前，要按攝影關(guān)要求打包運(yùn)輸。

（2）安全設(shè)備

1、正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其它適宜人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。

2、確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物試驗(yàn)過(guò)程，包含離心、研磨、勻漿、猛烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源容器、采集感染標(biāo)本等。

3、包含高濃度或大致積傳染源時(shí)，若選擇密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩離心機(jī)，若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi)，則可在開(kāi)放試驗(yàn)室內(nèi)離心。

4、當(dāng)必需在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí)，需采取面部保護(hù)方法（跟鏡、口罩、面罩、或其它防濺裝置），以免傳染源或其它有害物濺或?yàn)⒌矫嫔稀?/p>

5、在試驗(yàn)室內(nèi)，必需使用專(zhuān)用防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非試驗(yàn)室區(qū)域時(shí)，防護(hù)服必需留在試驗(yàn)室內(nèi)。防護(hù)服能夠在試驗(yàn)室內(nèi)處理，也能夠在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。

6、可能接觸潛在傳染源、被污染表面或設(shè)備時(shí)，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反復(fù)使用，不能用于接觸“潔凈”表面（鍵盤(pán)、電話等），也不應(yīng)該戴著到試驗(yàn)室外。要備有帶滑石粉乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。\o"評(píng)分0"淋病奈瑟菌生物危害評(píng)定匯報(bào)

一、淋病奈瑟菌傳輸和致病

淋病奈瑟菌又稱(chēng)淋球菌，是淋病病原菌，人類(lèi)是本菌唯一天然宿主和傳染源。淋病是淋菌性尿道炎簡(jiǎn)稱(chēng)，是由淋球菌引發(fā)泌尿生殖系統(tǒng)化膿性炎性疾病，它是人類(lèi)很古老，也是目前世界范圍內(nèi)流行很廣泛一個(gè)性傳輸疾病。

淋病患者是關(guān)鍵傳染源，有癥狀或無(wú)癥狀患者均可經(jīng)過(guò)性接觸傳輸，其中輕癥或無(wú)癥狀淋病患者是關(guān)鍵傳染源。其傳輸路徑關(guān)鍵包含性交傳染，還可經(jīng)過(guò)非性接觸傳輸，如經(jīng)過(guò)接觸患者分泌物污染用具（衣褲、床上用具、毛巾、浴盆、馬桶等）間接感染；孕婦淋病患者當(dāng)羊膜破裂，可繼發(fā)羊膜腔內(nèi)及胎兒感染；新生兒經(jīng)過(guò)患淋病母體產(chǎn)道時(shí)?？梢l(fā)淋菌性眼炎；另外尚可經(jīng)過(guò)醫(yī)護(hù)人員手和器具引發(fā)醫(yī)源性感染。

本病最初多侵犯尿道、宮頸內(nèi)膜，繼而可波及前列腺、精囊、副睪、子宮內(nèi)膜及輸卵管。有時(shí)肛門(mén)、直腸、咽粘膜、眼結(jié)膜也可受染。尚可經(jīng)血行播散引發(fā)菌血癥、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及腦膜炎，可引發(fā)死亡或不育、不孕、失明及尿道狹窄等后果。因?yàn)楸静摲诙獭魅拘詮?qiáng)、后果嚴(yán)重，所以它是中國(guó)目前關(guān)鍵防治性病之一。

二、淋病奈瑟菌生物學(xué)特征

淋病奈瑟菌屬奈瑟菌屬，鏡下呈腎形，常成雙排列，鄰近面扁平或稍凹，像兩瓣黃豆對(duì)在一起，大小0.6μm×0.8μm。革蘭氏染色陰性，呈粉紅色，美藍(lán)染色呈藍(lán)色。急性炎癥期細(xì)菌多在患者分泌物少部分中性粒細(xì)胞胞漿中，慢性期則多在細(xì)胞外，且有些可呈單個(gè)球形或四聯(lián)狀。人工培養(yǎng)后形態(tài)亦常呈球形、單個(gè)、成雙或四聯(lián)排列。

淋球菌適于潮濕（相對(duì)溫度80％～85％）、溫暖（35.5℃～36.5℃）、中性偏堿（pH7.2～7.6）、含5％～10％二氧化碳條件下生長(zhǎng)。最怕干燥，在完全干燥環(huán)境下只能存活1～2小時(shí)，對(duì)溫度改變敏感，超出38℃或低于30℃則不能生長(zhǎng)，在培養(yǎng)基上室溫放置1～2天即可死亡，在39℃存活13小時(shí)，42℃存活15分鐘，50℃存活5分鐘。如在不完全干燥衣褲、被褥、毛巾、玩具上則可存活18～二十四小時(shí)。通常消毒劑輕易將它殺滅，在1:4000硝酸銀溶液中7分鐘死亡，1％石炭酸溶液中3分鐘內(nèi)死亡。

淋球菌較為嬌嫩，酶系統(tǒng)不完整，初代培養(yǎng)一般培養(yǎng)基不易成功，需在含有動(dòng)物蛋白培養(yǎng)基上，且含有二氧化碳條件下才能生長(zhǎng)。淋球菌在血瓊脂培養(yǎng)基孵育二十四小時(shí)后，可形成直徑0.5～1mm圓形稍隆起，濕潤(rùn)光滑，半透明，邊緣呈花瓣?duì)睿姓承月兜螤罹?/p>

淋球菌生化反應(yīng)不發(fā)達(dá)，只分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解麥芽糖及蔗糖。藉助上述生化特征亦可和腦膜炎球菌及其它奈瑟菌相判別。淋球菌能產(chǎn)生氧化酶和過(guò)氧化氫酶，在診療上有一定意義。

三、淋病奈瑟菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其診療

細(xì)菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其它檢驗(yàn)

（1）涂片檢驗(yàn)：取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物，作革蘭氏染色，在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。涂片對(duì)有大量膿性分泌物單純淋菌性前尿道炎患者，此法陽(yáng)性率在90%左右，能夠初步診療。女性宮頸分泌物中雜菌多，敏感性和特異性較差，陽(yáng)性率僅為50-60%，且有假陽(yáng)性，所以世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢驗(yàn)女病人。慢性淋病因?yàn)榉置谖镏辛芮蚓^少，陽(yáng)性率低，所以要取前列腺按摩液，以提升檢出率。

咽部涂片發(fā)覺(jué)革蘭氏陰性雙球菌不能診療淋病，因?yàn)槠渌紊鷮僭谘什渴钦＞?。另外?duì)癥狀不經(jīng)典涂片陽(yáng)性應(yīng)作深入檢驗(yàn)。

（2）培養(yǎng)檢驗(yàn)：淋球菌培養(yǎng)是診療關(guān)鍵佐證，培養(yǎng)法對(duì)癥狀很輕或無(wú)癥狀男性、女性病人全部是較敏感方法，只要培養(yǎng)陽(yáng)性就可確診，在基因診療問(wèn)世以前，培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦篩選淋病唯一方法。

現(xiàn)在國(guó)外推薦選擇培養(yǎng)基有改良Thayer-Martin（TM）培養(yǎng)基和NewYorkCity（NYC）培養(yǎng)基。中國(guó)采取巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基，均含有抗生素，可選擇地抑制很多其它細(xì)菌生長(zhǎng)。在36℃，70%濕度，含5%-10%CO2（燭缸）環(huán)境中培養(yǎng)，24-48小時(shí)觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài)，革蘭氏染色，氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等判定。培養(yǎng)陽(yáng)性率男性80%-95%，女性80-90%。培養(yǎng)后需依據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)做出判定。培養(yǎng)陽(yáng)性率男性為80％～95％，女性為80％～90％。

（3）抗原檢測(cè)

1．固相酶免疫試驗(yàn)（EIA）：可用來(lái)檢測(cè)臨床標(biāo)本中淋球菌抗原，在流行率很高地域而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長(zhǎng)時(shí)間遠(yuǎn)送時(shí)使用，能夠在婦女人群中用來(lái)診療淋球菌感染。

2．直接免疫熒光試驗(yàn)：經(jīng)過(guò)檢測(cè)淋球菌外膜蛋白I單克隆抗體作直接免疫熒光試驗(yàn)。但現(xiàn)在在男女二性標(biāo)本敏感不高，特異性差，加之試驗(yàn)人員判定水平，故該試驗(yàn)尚不能推薦用來(lái)診療淋球菌感染。

（4）基因診療

1．淋球菌基因探針診療:淋球菌基因探針診療，所用探針有：質(zhì)粒DNA探針，染色體基因探針和rRNA基因探針。

2、淋球菌基因擴(kuò)增檢測(cè)PCR技術(shù)和連接酶鏈反應(yīng)出現(xiàn)深入提升了檢測(cè)淋球菌靈敏性，它含有快速、靈敏、特異、簡(jiǎn)便優(yōu)點(diǎn)，能夠直接檢測(cè)臨床標(biāo)本中極微量病原體。

（5）藥敏試驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)陽(yáng)性者可深入用紙片擴(kuò)散法做藥敏試驗(yàn)，或用瓊脂平皿稀釋法測(cè)定藥品最小抑菌濃度（MIC），和用紙片酸度定量法檢測(cè)β－內(nèi)酰胺酶（使用WhatmanI號(hào)濾紙PP-NG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃，陽(yáng)性為PPNG，陰性為N-PPNG），以確定淋球菌對(duì)抗生素敏感性，合理選擇用藥。

四、淋病預(yù)防

淋病奈瑟菌預(yù)防關(guān)鍵點(diǎn)以下：

1.避免婚外性行為。

2.在性生活中提倡使用避孕套等理化屏障，以預(yù)防淋球菌感染。

3.預(yù)防性使用抗生素可降低感染危險(xiǎn)，可應(yīng)用于已知和淋病患者有性接觸者。

4.按淋病診療方案對(duì)病人進(jìn)行合理診療，根本消亡傳染源。

5.對(duì)性伴侶應(yīng)進(jìn)行檢驗(yàn)和診療。

6.患者宜注意個(gè)人衛(wèi)生和隔離，不和家人、小孩（尤其女孩）同床、共浴。

7.實(shí)施對(duì)新生兒硝酸銀溶液或紅霉素溶液預(yù)防滴眼要求，預(yù)防新生兒淋病性眼炎發(fā)生。

8.病人需經(jīng)根本治愈后，方可結(jié)婚、生育和安排工作。

五、淋病奈瑟菌生物安全防護(hù)

依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸微生物名目（待頒布）霍亂弧菌屬于三類(lèi)，BSL-2。相關(guān)防護(hù)事宜包含：

（1）操作要求

1、試驗(yàn)時(shí)，未經(jīng)試驗(yàn)室主任同意，限制或嚴(yán)禁進(jìn)入試驗(yàn)室。

2、不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。

3、對(duì)于污染銳器，必需時(shí)刻保持高度警惕，包含針、注射器、玻片、加樣器等。

4、注射和吸收感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體）。用過(guò)一次性針頭必需彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將之小心放入不會(huì)被刺穿、用于搜集廢棄銳器容器中。非一次性銳器必需放置在堅(jiān)壁容器中，轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒，最好高壓殺菌。

5、打壞器皿不能直接用手處理，必需用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染針頭、銳器、碎玻璃容器在倒掉前，應(yīng)按攝影關(guān)要求進(jìn)行消毒。

6、全部培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它要求廢物在釋放前，均應(yīng)使用可行消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近試驗(yàn)室消毒物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi)，密封運(yùn)出試驗(yàn)室。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒物料，在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝，其包裝應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)。

7、濺出或偶然事件中，顯著暴露于傳染源時(shí)，要立即向試驗(yàn)室主任匯報(bào)。進(jìn)行合適醫(yī)學(xué)評(píng)定、觀察、診療，保留書(shū)面統(tǒng)計(jì)。

8、按日常程序、在相關(guān)傳染源工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其它傳染源污染后，試?yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)該使用有效消毒劑消毒。污染設(shè)備在送去修理、維護(hù)前，要按攝影關(guān)要求消毒；在離開(kāi)設(shè)施轉(zhuǎn)移前，要按攝影關(guān)要求打包運(yùn)輸。

（2）安全設(shè)備

1、正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其它適宜人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。

2、確定可能形成傳染性濺出物試驗(yàn)過(guò)程，包含離心、研磨、勻漿、猛烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源容器、采集感染標(biāo)本等。

3、包含高濃度或大致積傳染源時(shí)，若選擇密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩離心機(jī)，若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi)，則可在開(kāi)放試驗(yàn)室內(nèi)離心。

4、當(dāng)必需在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí)，需采取面部保護(hù)方法（跟鏡、口罩、面罩、或其它防濺裝置），以免傳染源或其它有害物濺或?yàn)⒌矫嫔稀?/p>

5、在試驗(yàn)室內(nèi)，必需使用專(zhuān)用防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非試驗(yàn)室區(qū)域時(shí)，防護(hù)服必需留在試驗(yàn)室內(nèi)。防護(hù)服能夠在試驗(yàn)室內(nèi)處理，也能夠在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。

6、可能接觸潛在傳染源、被污染表面或設(shè)備時(shí)，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反復(fù)使用，不能用于接觸“潔凈”表面（鍵盤(pán)、電話等），也不應(yīng)該戴著到試驗(yàn)室外。要備有帶滑石粉乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。\o"評(píng)分0"結(jié)核桿菌生物危害評(píng)定匯報(bào)一、結(jié)核桿菌傳輸和致病

結(jié)核桿菌通常指結(jié)核分枝桿菌和牛分枝桿菌，其中結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis）是引發(fā)人類(lèi)結(jié)核病關(guān)鍵病原體。

結(jié)核分枝桿菌關(guān)鍵傳染路徑是經(jīng)呼吸道傳輸，由排菌肺結(jié)核病人在咳嗽、噴嚏或大聲說(shuō)話時(shí)隨呼吸道分泌物排出到空氣中，或排菌肺結(jié)核病人隨地吐痰經(jīng)過(guò)再生氣溶膠(塵埃)，攜帶結(jié)核桿菌，飛揚(yáng)在空氣中，被健康人吸入后發(fā)生感染和發(fā)病，所以排菌肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽(yáng)性未經(jīng)診療者)是結(jié)核病關(guān)鍵傳染源。通常結(jié)核病患者痰中結(jié)核桿菌越多，傳輸危險(xiǎn)性越大。患者排出飛沫在1-10微米者，在空氣中漂浮時(shí)間長(zhǎng)，傳染性越大?；颊卟∽兒桶Y狀越嚴(yán)重，傳染性也越大。周?chē)巳汉突颊呓佑|越親密者，受感染機(jī)會(huì)越多。和患者同處于空氣不流通室內(nèi)親密接觸者，受感染可能性增大。

未受結(jié)核感染人是結(jié)核病易感人群，因?yàn)榻Y(jié)核病是人畜共患病，哺乳類(lèi)動(dòng)物如牛、鹿、猴、豬、貓、狗等也全部能夠患結(jié)核病。

感染結(jié)核桿菌后，終生全部有可能發(fā)病，發(fā)病時(shí)間因人而異，通常2個(gè)月～20年才發(fā)病。經(jīng)典肺結(jié)核起病緩慢，病程較長(zhǎng)，有低熱、倦怠、食欲不振、咳嗽及少許咯血。但多數(shù)患者病灶輕微，無(wú)顯著癥狀。（1）癥狀①全身癥狀表現(xiàn)為午后低熱、乏力、食欲不振、消瘦、盜汗等。②呼吸系統(tǒng)癥狀通常為干咳或帶少許黏液痰；繼發(fā)感染時(shí)，痰呈粘液膿性。約1/3患者有不一樣程度咯血，咯血后常有低熱。大咯血時(shí)可發(fā)生失血性休克，偶因血塊阻塞大氣道引發(fā)窒息。病灶炎癥累及壁層胸膜時(shí)，對(duì)應(yīng)胸壁有刺痛，通常多不猛烈，隨呼吸及咳嗽而加重。若并發(fā)氣胸或大量胸腔積液，呼吸困難癥狀尤為嚴(yán)重。（2）體征早期病灶小或在肺組織深部，多無(wú)異常體征。若病變范圍較大，患側(cè)肺部呼吸運(yùn)動(dòng)減弱，叩診呈濁音，聽(tīng)診時(shí)呼吸音減低，或?yàn)橹夤芊闻莺粑?。因肺結(jié)核好發(fā)于肺上葉尖后段及下葉背段，故鎖骨上下、肩胛區(qū)叩診略濁，咳嗽后偶可聞及濕啰音，對(duì)診療有參考意義。肺部病變發(fā)生廣泛纖維化或胸膜粘連增厚時(shí)，患側(cè)胸廓常呈下陷、肋間隙變窄、氣管移位和叩濁，對(duì)側(cè)可有代償性肺氣腫征。

二、結(jié)核桿菌生物學(xué)特征

從分類(lèi)學(xué)上看結(jié)核桿菌屬于裂殖菌綱、放線菌目、分枝桿菌科、分枝桿菌屬。

結(jié)核分枝桿菌正常經(jīng)典形態(tài)是直或稍彎曲、兩端鈍圓桿菌，菌體長(zhǎng)1-4納米，寬0.3-0.6納米，無(wú)芽胞、無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛，生長(zhǎng)發(fā)育期間有分枝生長(zhǎng)傾向。鏡下常呈單個(gè)散在或呈“人、V、T、Y”形排列，菌體多時(shí)細(xì)菌扭集一起呈繩索狀、束狀或叢狀。另外結(jié)核桿菌菌體還含有多形態(tài)特征，受不良生長(zhǎng)條件影響可分別表現(xiàn)為桿菌型(基礎(chǔ)形態(tài))、濾過(guò)型、顆粒型和球菌型(L型)4種不一樣類(lèi)型。

分枝桿菌生長(zhǎng)緩慢，在人工培養(yǎng)基內(nèi)繁殖一代約需15-20小時(shí)，通常需2-4周或更長(zhǎng)時(shí)間始見(jiàn)菌落生長(zhǎng)，甚至有極少數(shù)生長(zhǎng)極為緩慢者需8周以上才開(kāi)始有菌落生長(zhǎng)。它為專(zhuān)性需氧菌，生長(zhǎng)溫度范圍是35-40℃，pH5.5-7.2。培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高且特殊，培養(yǎng)基需含雞蛋、血清、氨基酸、甘油等營(yíng)養(yǎng)豐富復(fù)雜有機(jī)物及少許無(wú)機(jī)鹽類(lèi)。而且結(jié)核桿菌伴隨環(huán)境改變易發(fā)生菌落形態(tài)、毒力、L型及藥品耐藥性變異，如在人工培養(yǎng)基上反復(fù)連續(xù)傳代，可產(chǎn)生變異而致毒力降低，

三、結(jié)核桿菌檢測(cè)和診療

（1）細(xì)菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其它檢驗(yàn)

①結(jié)核菌檢驗(yàn)是確診肺結(jié)核最特異性方法，痰中找到結(jié)核菌為確診肺結(jié)核關(guān)鍵依據(jù)。涂片抗酸染色鏡檢快速簡(jiǎn)便。在中國(guó)非經(jīng)典分枝桿菌尚屬少見(jiàn)，故抗酸桿菌陽(yáng)性，肺結(jié)核診療基礎(chǔ)即可成立。痰菌陽(yáng)性表明其病灶是開(kāi)放性，含有傳染性。培養(yǎng)法更為正確，尚可作藥品敏感試驗(yàn)和菌型判定。但結(jié)核菌生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)較為費(fèi)時(shí)，但正確可靠，特異性高。若涂片陰性或診療有疑問(wèn)時(shí)，培養(yǎng)尤其關(guān)鍵；而且，培養(yǎng)后可做藥品敏感性測(cè)定，指導(dǎo)臨床用藥。PCR技術(shù)檢測(cè)結(jié)核菌DNA快速、簡(jiǎn)便，并可判定菌型，不足之處是可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。

②影像學(xué)檢驗(yàn)胸部X線檢驗(yàn)?zāi)軌虬l(fā)覺(jué)肺內(nèi)病變部位、范圍、有沒(méi)有空洞或空洞大小、洞壁厚薄等。X線對(duì)各類(lèi)結(jié)核病透過(guò)分不一樣，經(jīng)過(guò)X線檢驗(yàn)?zāi)艽笾鹿懒拷Y(jié)核病

灶病理性質(zhì)，并能早期發(fā)覺(jué)肺結(jié)核，和判定病情發(fā)展及診療效果，有利于決定診療方案。肺結(jié)核常見(jiàn)X線表現(xiàn)包含：纖維鈣化硬結(jié)病灶、浸潤(rùn)性病灶和干酪樣病灶等。胸部CT檢驗(yàn)對(duì)于發(fā)覺(jué)微小或隱蔽性病變，了解病變范圍及病變判別等方面全部有幫助。

③結(jié)核菌素試驗(yàn)是診療結(jié)核感染參考指標(biāo)。使用變應(yīng)原有舊結(jié)核菌素（oldtuberculin,OT）和結(jié)核菌素純化蛋白衍化物（purifiedproteinderivative,PPD），現(xiàn)臨床多用PPD。皮內(nèi)注射0.1ml（5IU），硬結(jié)平均直徑≥5mm為陽(yáng)性反應(yīng)。結(jié)核菌素試驗(yàn)有利于判定有沒(méi)有結(jié)核菌感染。若呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，常表示為活動(dòng)性結(jié)核病。結(jié)核菌素試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)僅表示曾有結(jié)核感染，并不一定現(xiàn)在患病。結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性反應(yīng)除表示沒(méi)有結(jié)核菌感染外，尚需考慮以下情況：結(jié)核菌在感染4～8周后才建立充足變態(tài)反應(yīng)，在這之前，結(jié)核菌素試驗(yàn)可呈陰性；應(yīng)用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑，或營(yíng)養(yǎng)不良、麻疹、百日咳等患者，結(jié)核菌素反應(yīng)亦可臨時(shí)消失。

④其它檢驗(yàn)結(jié)核病患者血像通常無(wú)改變，嚴(yán)重病例常有繼發(fā)性貧血，急性粟粒型肺結(jié)核時(shí)白細(xì)胞總數(shù)減低或出現(xiàn)類(lèi)白血病反應(yīng)。血沉增快常見(jiàn)于活動(dòng)性肺結(jié)核。用ELISA法檢測(cè)患者血清中特異性抗體，可對(duì)無(wú)痰或痰菌陰性者和肺外結(jié)核診療提供參考。纖支鏡檢驗(yàn)對(duì)于發(fā)覺(jué)氣管內(nèi)膜結(jié)核、了解有沒(méi)有腫瘤、吸收分泌物、解除阻塞或作病原菌及脫落細(xì)胞檢驗(yàn)，和取活組織作病理檢驗(yàn)等，全部相關(guān)鍵診療價(jià)值。淺

表淋巴結(jié)活檢，有利于結(jié)核判別診療。

（2）診療和判別診療

痰結(jié)核菌檢驗(yàn)不僅是診療肺結(jié)核關(guān)鍵依據(jù)，亦是考評(píng)療效、隨訪病情關(guān)鍵指標(biāo)。X線檢驗(yàn)是診療肺結(jié)核必需手段，對(duì)早期診療、確定病變部位、范圍、性質(zhì)、了解其演變及選擇診療等均含相關(guān)鍵價(jià)值。在臨床診療中，中國(guó)現(xiàn)用分類(lèi)法包含四部分，即肺結(jié)核類(lèi)型、病變范圍及空洞部位、痰菌檢驗(yàn)、活動(dòng)性及轉(zhuǎn)歸。肺結(jié)核分為五型：Ⅰ型為原發(fā)型肺結(jié)核；Ⅱ型為血行播散型肺結(jié)核；Ⅲ型為浸潤(rùn)型肺結(jié)核；Ⅳ型為慢性纖維空洞型肺結(jié)核；Ⅴ型為結(jié)核性胸膜炎。還應(yīng)注意將結(jié)核病和肺癌、肺炎、支氣管擴(kuò)張、慢性支氣管哮喘和其它發(fā)燒性疾病如傷寒、敗血癥、白血病、縱隔淋巴瘤及結(jié)節(jié)病等進(jìn)行判別。

四、結(jié)核桿菌防治及生物安全防護(hù)

細(xì)菌防治

依據(jù)《中國(guó)傳染病防治法》和《試驗(yàn)室生物安全通用要求》中相關(guān)要求，結(jié)核病屬于乙類(lèi)傳染病，根據(jù)乙類(lèi)傳染病進(jìn)行預(yù)防控制。

在結(jié)核病預(yù)防方面要針對(duì)傳染源、傳輸路徑、易感人群三個(gè)步驟，采取以管理和控制傳染源為主綜合性防治方法，努力做到“早發(fā)覺(jué)、早匯報(bào)、早診療”，以利于控制和管理傳染源。臨床上肺結(jié)核化學(xué)診療標(biāo)準(zhǔn)是早期、規(guī)律、全程、適量、聯(lián)合。整個(gè)診療方案分強(qiáng)化和鞏固兩個(gè)階段。中國(guó)結(jié)核病防治計(jì)劃指南要求采取統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)診療方案。

表1國(guó)家防癆計(jì)劃結(jié)核病化療方案

療程

化療方案

6個(gè)月

2RHZ/4RH

2ERHZ/4RH或4R2H2

2SRHZ/4RH或4R2H2

8個(gè)月

2SRHZ/6TH或6EH

2SRHZ/6S2H2Z2

R代表利福平，H代表異煙肼，Z代表吡嗪酰胺，E代表乙胺丁醇，S代表鏈霉素，

T代表丙硫異煙胺。下標(biāo)數(shù)字表示每日用藥次數(shù)；其它數(shù)字表示用藥月數(shù)，斜線前數(shù)字表示前2個(gè)月，斜線后字表示后多個(gè)月。

對(duì)復(fù)治病例，通?？捎靡韵露鄠€(gè)方案：①2S(E)RHZ/4RH(E)，督促化療，確保規(guī)律用藥。②初治規(guī)則診療失敗患者，可用2S3H3Z3E3/6H3R3E3；③慢性排菌者可用敏感一線藥和二線藥聯(lián)用，應(yīng)嚴(yán)密觀察藥品不良反應(yīng)，療程以6～12個(gè)月為宜。

對(duì)毒性癥狀嚴(yán)重者，可加用糖皮質(zhì)激素，以減輕炎癥及過(guò)敏反應(yīng)，促進(jìn)滲液吸收，降低纖維組織形成及胸膜粘連。對(duì)咯血患者，應(yīng)對(duì)癥診療，包含休息、止咳、鎮(zhèn)靜和應(yīng)用止血藥如安絡(luò)血等。

五、細(xì)菌試驗(yàn)室安全防護(hù)

依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸微生物名目（待頒布）結(jié)核桿菌屬于二類(lèi)，BSL-3。WHO將結(jié)核桿菌生物危害等級(jí)定為Ⅲ級(jí)。全部參與結(jié)核桿菌防治和研究試驗(yàn)室和試驗(yàn)室人員全部必需遵守《結(jié)核病試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《結(jié)核病診療試驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》。

（1）安全防護(hù)

大多數(shù)試驗(yàn)室取得性結(jié)核病是因?yàn)樘幚砀腥菊邩?biāo)本引發(fā)——可從痰、尿、組織、大便和其它體液標(biāo)本中分離到結(jié)核桿菌。處理標(biāo)本或培養(yǎng)物時(shí)產(chǎn)生氣溶膠是試驗(yàn)室取得性結(jié)核病最關(guān)鍵危險(xiǎn)原因，也可經(jīng)過(guò)損傷皮膚接觸感染。

所以首先應(yīng)樹(shù)立全程防護(hù)觀念，全方面加強(qiáng)從事結(jié)核桿菌科研、檢測(cè)、試劑和疫苗生產(chǎn)機(jī)構(gòu)生物安全管理。嚴(yán)格限定有資質(zhì)開(kāi)展研究試驗(yàn)室和研究者。建立健全傳染病病原管理組織；制訂和完善傳染病試驗(yàn)室生物安全技術(shù)操作規(guī)范；加強(qiáng)可能暴露于結(jié)核桿菌或潛在感染性材料相關(guān)業(yè)務(wù)人員生物安全知識(shí)培訓(xùn)和風(fēng)險(xiǎn)

和意識(shí)教育；切實(shí)落實(shí)各項(xiàng)管理制度，預(yù)防和控制試驗(yàn)室等渠道造成結(jié)核桿菌感染和傳輸；加強(qiáng)部門(mén)間溝通和合作，加強(qiáng)對(duì)高暴露試驗(yàn)室工作人員監(jiān)測(cè)工作，并確保她們能立即被發(fā)覺(jué)和診療。當(dāng)進(jìn)行大量活菌試驗(yàn)時(shí)，全部操作應(yīng)在BSL-3級(jí)試驗(yàn)室生物安全柜中進(jìn)行。為預(yù)防試驗(yàn)過(guò)程產(chǎn)生氣溶膠造成試驗(yàn)室感染，全部操作

應(yīng)使用三級(jí)生物安全防護(hù)。

在具體操作過(guò)程中包含標(biāo)本留取、運(yùn)輸、處理和廢物處理等程序全部應(yīng)預(yù)防感染性氣溶膠產(chǎn)生。病人留取標(biāo)本應(yīng)在獨(dú)立房間，應(yīng)定時(shí)作好房間消毒，保持通風(fēng)。標(biāo)本應(yīng)留取在封閉器皿內(nèi)送檢。檢驗(yàn)人員應(yīng)穿戴防護(hù)服、口罩、手套等防護(hù)裝備，嚴(yán)格遵守試驗(yàn)操作規(guī)程，試驗(yàn)室空氣、試驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)定時(shí)消毒。痰、尿標(biāo)本找抗酸桿菌，應(yīng)先高壓滅菌后，再涂片染色。尤其是痰標(biāo)本進(jìn)行涂片制作時(shí)，在打開(kāi)標(biāo)本容器、涂片、加熱固定時(shí)輕易產(chǎn)生氣溶膠，為預(yù)防試驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生氣溶膠

造成試驗(yàn)室感染，全部操作應(yīng)在二級(jí)生物安全柜中進(jìn)行，并使用二級(jí)生物安全防護(hù)。痰標(biāo)本培養(yǎng)時(shí)，在標(biāo)本進(jìn)行前處理高速振蕩混合和離心、培養(yǎng)液或上清液傾倒、轉(zhuǎn)移和接種等操作過(guò)程有產(chǎn)生氣溶膠和意外濺灑可能，為預(yù)防試驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生氣溶膠等造成試驗(yàn)室感染，全部操作應(yīng)在二級(jí)生物安全柜中進(jìn)行，并使用二級(jí)生物安全防護(hù)。藥品敏感性測(cè)定時(shí)，在磨菌、滴加菌液、接種培養(yǎng)物、燒灼接種環(huán)等操作過(guò)程有產(chǎn)生氣溶膠和意外濺灑可能，試驗(yàn)者有可能直接大劑量暴露細(xì)菌。所以該項(xiàng)操作一定在BSL-3級(jí)試驗(yàn)室完成，且最好試驗(yàn)室內(nèi)要有負(fù)壓。而且操作者著二級(jí)生物防護(hù)用具。

（2）意外事故處理

結(jié)核桿菌滅活方法有化學(xué)和物理方法。試驗(yàn)過(guò)程中：

1)如標(biāo)本或標(biāo)本前消化處理液被打翻污染操作臺(tái)或地面，應(yīng)以吸滿75%已乙醇溶液衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū)，15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去；

2)如污染物濺落到身體表面，或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生，應(yīng)立即停止試驗(yàn)工作進(jìn)行緊急處理：更換被污染試驗(yàn)服裝，皮膚表面用消毒液清洗，傷口以碘酒及酒精消毒，眼睛用無(wú)菌生理鹽水沖洗；

3)假如發(fā)生菌液溢出、帶菌培養(yǎng)管破碎等，造成中、小面積污染?？捎帽任廴久娣e大25%以上紗布覆蓋污染區(qū)域，邊緣用脫脂棉圍住，向紗布傾倒5%苯酚溶液或75%乙醇溶液，浸泡2小時(shí)以上(其間適量添加溶液預(yù)防干燥)，再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時(shí)以上；被污染器械、容器等立即浸泡于75%乙醇溶液中2小時(shí)以上，試驗(yàn)完成后再進(jìn)行高壓消毒處理；

4)假如發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染，應(yīng)立即停止試驗(yàn)并關(guān)閉試驗(yàn)室，對(duì)試驗(yàn)區(qū)域和試驗(yàn)室進(jìn)行紫外燈照射消毒過(guò)夜；第二天對(duì)污染區(qū)域進(jìn)行二十四小時(shí)封閉空氣熏蒸消毒(乙醛消毒法：5ml乙醛+2g高錳酸鉀/平方米空間)，直接被污染區(qū)域可參考第3)條進(jìn)行處理。

（3）試驗(yàn)室人員防護(hù)

從事結(jié)核桿菌檢測(cè)、研究試驗(yàn)室工作人員必需在身體情況良好情況下，才能進(jìn)入試驗(yàn)室工作，出現(xiàn)下列情況，不能進(jìn)入：身體出現(xiàn)開(kāi)放性損傷；患發(fā)燒性疾病；感冒、上呼吸道感染、或其它造成抵御力下降情況；妊娠、已經(jīng)在試驗(yàn)室控制區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作4h以上，或其它原因造成疲憊狀態(tài)。

從事結(jié)核桿菌檢測(cè)工作人員可間隔數(shù)年接種卡介苗一次。若操作者或其所在試驗(yàn)室工作人員在此期間出現(xiàn)和被操作病原微生物造成疾病類(lèi)似癥狀或體征時(shí)，比如發(fā)燒、盜汗、咳嗽、咳痰、咯血或痰中帶血等癥狀，則應(yīng)被視為可能發(fā)生試驗(yàn)室感染。應(yīng)立即匯報(bào)試驗(yàn)室責(zé)任人，采取早發(fā)覺(jué)、早匯報(bào)、早診療以控制管理傳染源為主綜合性防治方法。\o"評(píng)分0"蠟樣芽胞桿菌生物危害評(píng)定匯報(bào)一、細(xì)菌傳輸和致病

蠟樣芽胞桿菌在自然界分布廣泛，常存在于土壤、灰塵和污水中，植物和很多生熟食品中常見(jiàn)。已從多個(gè)食品中分離出該菌，包含肉、乳制品、蔬菜、魚(yú)、土豆、糊、醬油、布丁、炒米飯和多種甜點(diǎn)等。在美國(guó)，炒米飯是引發(fā)蠟樣芽胞桿菌嘔吐型食物中毒關(guān)鍵原因；在歐洲大全部由甜點(diǎn)、肉餅、色拉和奶、肉類(lèi)食品引發(fā)；在中國(guó)則關(guān)鍵和受污染米飯或淀粉類(lèi)制品相關(guān)。

1950年Hauge在對(duì)挪威奧斯陸某醫(yī)院職員和病員進(jìn)食甜食后引發(fā)食物中毒研究中，首次明確指出蠟樣芽胞桿菌致病作用。蠟樣芽胞桿菌作為一個(gè)食源性疾病報(bào)導(dǎo)較多，在多種食品中檢出率也較高，如1982年犬飼等對(duì)日本名古屋所采1641份食品樣品中，有193份檢出了該菌、陽(yáng)性率為11.8%；1984年中國(guó)相關(guān)單位對(duì)南京市所采211份食品樣品中，有81份檢出了該菌，陽(yáng)性率為38.4%。

蠟樣芽胞桿菌食物中毒通常以夏秋季（6-10月）最高。引發(fā)中毒食品常于食前因?yàn)楸Ａ魷囟炔煌祝胖脮r(shí)間較長(zhǎng)或食品經(jīng)加熱而殘余芽胞以生長(zhǎng)繁殖條件，所以造成中毒。中毒發(fā)病率較高，通常為60-100%。但也有在可疑食品中找不到蠟樣芽胞桿菌而引發(fā)食物中毒情況，通常認(rèn)為是因?yàn)橄灄U芽胞桿菌產(chǎn)生熱穩(wěn)定毒素所致。

當(dāng)攝入食品其蠟樣芽胞桿菌數(shù)量達(dá)>106/克時(shí)?？稍斐墒澄镏卸尽Ｏ灅友堪麠U菌食物中毒在臨床上可分為嘔吐型和腹瀉型兩類(lèi)。嘔吐型潛伏期為0.5-6小時(shí)，中毒癥狀以惡心、嘔吐為主，偶而有腹痙攣或腹瀉等癥狀，病程不超出二十四小時(shí)，這種類(lèi)型癥狀類(lèi)似于由金黃色葡萄球菌引發(fā)食物中毒。腹瀉型潛伏期為6-15小時(shí)，癥狀以水瀉、腹痙攣、腹痛為主，有時(shí)會(huì)有惡心等癥狀，病程約二十四小時(shí)，這種

類(lèi)型癥狀類(lèi)似于產(chǎn)氣莢膜梭菌引發(fā)食物中毒。嚴(yán)重者還可造成敗血癥。

蠟樣芽胞桿菌引發(fā)食物中毒是因?yàn)樵摼僧a(chǎn)生腸毒素。它產(chǎn)生兩種性質(zhì)不一樣代謝物，引發(fā)腹瀉型綜合癥是一個(gè)大分子量蛋白；而引發(fā)嘔吐型綜合癥被認(rèn)為是一個(gè)小分子量、熱穩(wěn)定多肽。致嘔吐型綜合癥腸毒素至今還未提純，致腹瀉型綜合癥腸毒素已提純，其純化腸毒素分子量為55-6.0×103。致腹瀉腸毒素能使小白鼠致死。

二、細(xì)菌生物學(xué)特征

蠟樣芽胞桿菌分類(lèi)為芽胞桿菌屬第I群，該群有22個(gè)種。依據(jù)營(yíng)養(yǎng)型菌細(xì)胞寬度分為兩類(lèi)，蠟樣芽胞桿菌、蕈狀芽胞桿菌、蘇云金芽胞桿菌、炭疽芽胞桿菌和巨大芽胞桿菌屬“大細(xì)胞菌種”。

蠟樣芽胞桿菌為革蘭氏陽(yáng)性大桿菌，大小為1-1.3×3-5μm，需氧或兼性需氧，生長(zhǎng)6h即可形成原形芽胞，芽胞在菌體中心或次末端不突出菌體，菌體兩端較平整，多數(shù)呈鏈狀排列，和炭疽桿菌相同。引發(fā)食物中毒菌株多為周鞭毛，有動(dòng)力無(wú)莢膜。它生長(zhǎng)溫度為25-37℃，最好溫度30-35℃。在肉湯中生長(zhǎng)混濁有菌膜或壁環(huán)，振搖易乳化。在一般瓊脂上生成菌落較大，直徑3-10mm，灰白色、不透明，表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀，邊緣常呈擴(kuò)展?fàn)罟识妹Ｅ加挟a(chǎn)生黃綠色色素，在血瓊脂平板上呈草綠色溶血。在甘露醇、卵黃多粘菌素（MYP）平板上，呈伊紅粉色菌落。能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊素等，VP試驗(yàn)陽(yáng)性，可液化明膠，卵磷脂酶陽(yáng)性，但數(shù)次傳代后，其生化特征?？筛淖?。

另外蠟桿芽胞桿菌耐熱，其食物中毒菌株中游離芽胞能耐受100℃30分鐘，而干熱滅菌需120℃60分鐘才能殺死。本菌對(duì)氯霉素、紅霉素和慶大霉素敏感，對(duì)青霉素、磺胺類(lèi)和呋喃類(lèi)耐藥。

三、細(xì)菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其它檢驗(yàn)

1.標(biāo)本搜集

采集可疑食物或搜集糞便和嘔吐物進(jìn)行直接涂片染色鏡檢和其它操作。

2.活菌計(jì)數(shù)

無(wú)菌操作稱(chēng)取樣品50g放入滅菌攪拌缸內(nèi)。加Butterfield磷酸鹽緩沖稀釋液450mL，以高速（18.000-21.000rpm）均質(zhì)2min。用上述1:10稀釋液，連續(xù)稀釋供蠟樣芽胞桿菌計(jì)數(shù)。移取10mL均質(zhì)樣液（1:10稀釋?zhuān)┘拥?0mL空白液中，從10-2到10-6制備一系列稀釋液，充足混勻，并繼續(xù)稀釋直到10-6為止。取樣品各個(gè)稀釋液（包含1:10）0.1mL接種2只MYP（甘露醇一卵黃多粘菌素瓊脂）平板，用滅菌玻璃棒在每只平板表面涂布均勻。將平板置30℃培養(yǎng)二十四小時(shí)，并檢驗(yàn)菌落周?chē)谐恋砣φ?，表示產(chǎn)生卵磷脂酶。蠟樣芽胞桿菌菌落通常是粉紅色，伴隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)則更顯著。假如上述反應(yīng)不清楚，應(yīng)將平板再培養(yǎng)二十四小時(shí)后計(jì)數(shù)，從MYP平板上挑取經(jīng)典菌落5個(gè)或更多，移種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上供蠟樣芽胞桿菌證實(shí)試驗(yàn)用。

3.MPN技術(shù)被推薦用于食品中低于10個(gè)/g蠟樣芽胞桿菌檢驗(yàn)。一些不適適用平板計(jì)數(shù)法脫水淀粉類(lèi)食品也可用此法檢驗(yàn)。在胰酪胨大豆多粘菌素肉湯中接種3管MPN系列，10-1、10-2、10-3稀釋液各接種1mL于3管。將培養(yǎng)管置30℃培養(yǎng)48±2小時(shí)，檢驗(yàn)生長(zhǎng)密集、經(jīng)典蠟樣芽胞桿菌。將陽(yáng)性管培養(yǎng)物劃線接種于MYP平板，于30℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。以下步驟同2。

4.分離培養(yǎng)

將可疑食物置無(wú)菌乳缽中，加適量生理鹽水研磨后，劃線接種于一般瓊脂平板或血瓊脂平板，若為嘔吐物可直接劃線接種于上述平板，于37℃培養(yǎng)，

5.若有類(lèi)似蠟樣芽胞桿菌菌落出現(xiàn)再深入分離純化和進(jìn)行生化反應(yīng)。

6.蠟樣芽胞桿菌證實(shí)試驗(yàn)

蠟樣芽胞桿菌分離物應(yīng)符合下述條件：1)革蘭氏陽(yáng)性產(chǎn)芽胞大桿菌，其芽胞不突出體外；2）在MYP瓊脂上產(chǎn)生卵磷脂酶而不發(fā)酵甘露醇；3）厭氧培養(yǎng)生長(zhǎng)，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸；4）還原硝酸鹽；5）VP陽(yáng)性；6）分介L(zhǎng)-酪氨酸；7）在含0.001%溶菌酶培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)。

7.蠟樣芽胞桿菌群判別試驗(yàn)要判別經(jīng)典蠟樣芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌群其它種還需深入進(jìn)行下述試驗(yàn)：1）動(dòng)力試驗(yàn)；2）根狀生長(zhǎng)試驗(yàn)；3）溶菌活性試驗(yàn)；4）蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)：蠟樣芽胞桿菌有動(dòng)力、強(qiáng)溶血、不形成根狀菌落，或不產(chǎn)生蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶。而且蠟樣芽胞桿菌在4℃、pH4.3、鹽濃度18%條件下仍能存活或生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)高溫殺菌或合適冷藏能夠控制蠟樣芽胞桿菌增殖。

8.血清學(xué)分型、噬菌體分型。

四、細(xì)菌防治

蠟樣芽胞桿菌所引發(fā)食物中毒多因食品在食用前保留溫度較高（20℃以上）和放置時(shí)間較長(zhǎng)，故對(duì)中毒預(yù)防包含：因?yàn)橄灅友堪麠U菌在15℃以下不繁殖，剩飯、剩菜應(yīng)放在低溫保留。該菌污染食品通常無(wú)腐敗變質(zhì)異味，不易被發(fā)覺(jué)。所以，剩飯、剩菜在食用前一定要再加熱。注意食品貯藏和個(gè)人衛(wèi)生，預(yù)防塵土、昆蟲(chóng)及其它不潔物污染食品。

若一旦發(fā)生了中毒，則立即停止食用可疑污染食品，多飲水。通常不需要使用抗生素診療。腹瀉較重者可到醫(yī)院就診。

五、細(xì)菌生物安全防護(hù)

依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸微生物名目（待頒布）蠟樣芽胞桿菌屬于三類(lèi)，BSL-2。

（1）操作要求

1、試驗(yàn)時(shí)，未經(jīng)試驗(yàn)室主任同意，限制或嚴(yán)禁進(jìn)入試驗(yàn)室。

2、不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。

3、全部操作過(guò)程應(yīng)盡可能細(xì)心，避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。

4、對(duì)于污染銳器，必需時(shí)刻保持高度警惕，包含針、注射器、玻片、加樣器等。

5、注射和吸收感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體）。用過(guò)一次性針頭必需彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將之小心放入不會(huì)被刺穿、用于搜集廢棄銳器容器中。非一次性銳器必需放置在堅(jiān)壁容器中，轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒，最好高壓殺菌。

6、打壞器皿不能直接用手處理，必需用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染針頭、銳器、碎玻璃容器在倒掉前，應(yīng)按攝影關(guān)要求進(jìn)行消毒。

7、全部培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它要求廢物在釋放前，均應(yīng)使用可行消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近試驗(yàn)室消毒物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi)，密封運(yùn)出試驗(yàn)室。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒物料，在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝，其包裝應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)。

8、濺出或偶然事件中，顯著暴露于傳染源時(shí)，要立即向試驗(yàn)室主任匯報(bào)。進(jìn)行合適醫(yī)學(xué)評(píng)定、觀察、診療，保留書(shū)面統(tǒng)計(jì)。

9、按日常程序、在相關(guān)傳染源工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其它傳染源污染后，試?yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)該使用有效消毒劑消毒。污染設(shè)備在送去修理、維護(hù)前，要按攝影關(guān)要求消毒；在離開(kāi)設(shè)施轉(zhuǎn)移前，要按攝影關(guān)要求打包運(yùn)輸。

（2）安全設(shè)備

1、正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其它適宜人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。

2、確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物試驗(yàn)過(guò)程，包含離心、研磨、勻漿、猛烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源容器、采集感染標(biāo)本等。

3、包含高濃度或大致積傳染源時(shí)，若選擇密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩離心機(jī)，若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi)，則可在開(kāi)放試驗(yàn)室內(nèi)離心。

4、當(dāng)必需在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí)，需采取面部保護(hù)方法（跟鏡、口罩、面罩、或其它防濺裝置），以免傳染源或其它有害物濺或?yàn)⒌矫嫔稀?/p>

5、在試驗(yàn)室內(nèi)，必需使用專(zhuān)用防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非試驗(yàn)室區(qū)域時(shí)，防護(hù)服必需留在試驗(yàn)室內(nèi)。防護(hù)服能夠在試驗(yàn)室內(nèi)處理，也能夠在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。

6、可能接觸潛在傳染源、被污染表面或設(shè)備時(shí)，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反復(fù)使用，不能用于接觸“潔凈”表面（鍵盤(pán)、電話等），也不應(yīng)該戴著到試驗(yàn)室外。要備有帶滑石粉乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。

\o"評(píng)分0"假結(jié)核棒狀桿菌生物危害評(píng)定匯報(bào)一、細(xì)菌傳輸和致病

假結(jié)核棒狀桿菌廣泛分布于自然界水和土壤中，是一個(gè)條件致病菌。關(guān)鍵引發(fā)家畜（羊、馬）慢性淋巴淋巴管炎，偶然也會(huì)引發(fā)人淋巴結(jié)炎、肺炎等疾病。

二、細(xì)菌生物學(xué)特征

假結(jié)核棒狀桿菌屬于棒狀桿菌屬，是一個(gè)兼性厭氧，沒(méi)有芽胞、沒(méi)有莢膜，抗酸陰性革蘭陽(yáng)性桿菌。細(xì)菌末端膨大呈棒狀，菌體有時(shí)成單或成雙。有時(shí)菌體染色不均勻呈柵欄狀排列。它沒(méi)有動(dòng)力，但觸酶呈陽(yáng)性、尿素陽(yáng)性。

所使用培養(yǎng)基包含血和亞碲酸鉀，比如Hoyle亞碲酸鹽培養(yǎng)基是一個(gè)很好選擇性判別培養(yǎng)基。假結(jié)核棒狀桿菌能夠在血平板上產(chǎn)生輕微溶血。

三、細(xì)菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其它檢驗(yàn)

1.鏡下形態(tài)

革蘭染色呈革蘭陽(yáng)性桿菌、多型性、錐形或棒狀細(xì)菌末端略有彎曲。

菌體單個(gè)或成雙，時(shí)常呈“v”型。有些菌體染色微弱或不均勻，呈珠狀。

2.分離培養(yǎng)

血平板－皮膚拭子培養(yǎng)：5-10％CO2

35-37℃

40-48h；

喉拭子培養(yǎng)：厭氧，35-37℃16-24h；菌落周?chē)形⑿溶血環(huán)；

Hoyle亞碲酸鹽培養(yǎng)基：35-37℃16-48h：灰色/黑色,很干燥透明菌落。

3.生化試驗(yàn)：硝酸鹽陰性；尿素陽(yáng)性；

4.PCR是一個(gè)快速試驗(yàn)，能夠在接收到菌株后3-4小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。

5.毒素確診試驗(yàn)還要結(jié)合毒素表型試驗(yàn)。

6.假如初步試驗(yàn)結(jié)果提醒有假結(jié)核棒狀桿菌，需要結(jié)合臨床癥狀考慮結(jié)果。

四、細(xì)菌生物安全防護(hù)

依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸

微生物名目（待頒布）假結(jié)核棒狀桿菌屬于三類(lèi)，BSL-2。

試驗(yàn)室在處理過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，所以懷疑假結(jié)核棒狀桿菌菌株必需在生物安全柜內(nèi)處理。對(duì)于尿素試驗(yàn)認(rèn)為使用尿素斜面比使用尿素液體培養(yǎng)基安全。在運(yùn)輸時(shí)還應(yīng)該遵守郵政局危險(xiǎn)品運(yùn)輸手冊(cè)，假如以上初步試驗(yàn)提醒該菌株是假結(jié)核棒狀桿菌,需立即通知上級(jí)相關(guān)單位,并依據(jù)試驗(yàn)室安全手冊(cè)進(jìn)行隔離。。

志賀氏菌屬生物危害評(píng)定匯報(bào)一、細(xì)菌傳輸和致病志賀菌屬是關(guān)鍵腸道病原菌之一，也是引發(fā)人類(lèi)細(xì)菌性痢疾病原體。本屬細(xì)菌分布于全世界,是炎癥性痢疾經(jīng)典病原菌,很多地域5%~10%腹瀉性疾病是由該菌屬所致。弗氏志賀菌和宋內(nèi)志賀菌比鮑氏志賀菌和毒力尤其強(qiáng)痢疾志賀菌分布更廣。美國(guó)猶她州全部臨床試驗(yàn)室工作者志賀菌病年發(fā)病率為0.7/1000，而臨床微生物學(xué)工作者年發(fā)病率為5.4/1000。在英國(guó)臨床試驗(yàn)室，沙門(mén)菌病和志賀菌病年發(fā)病率分別為0.137/1000和0.322/1000，大多數(shù)感染者為微生物學(xué)工作者。感染者和恢復(fù)期帶菌者排泄物是傳染源,經(jīng)糞-口路徑直接傳輸,經(jīng)污染食物或物體可間接傳輸。蒼蠅可作為機(jī)械性媒介,水源性傳輸不常見(jiàn)。衛(wèi)生條件差擁擠人群中最易發(fā)生流行,流行區(qū)幼兒志賀菌病尤其常見(jiàn),而成人得病較輕?；謴?fù)期和亞臨床帶菌者是關(guān)鍵傳染源,但真正長(zhǎng)久帶菌者罕見(jiàn)。感染極少或不誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫性,所以同一菌種再感染是可能。志賀菌可穿入低位腸段粘膜,引發(fā)粘液分泌,充血,白細(xì)胞浸潤(rùn),水腫,并常有表淺粘膜潰瘍。志賀菌感染相關(guān)水瀉由內(nèi)毒素介導(dǎo)所致,因這種內(nèi)毒素可引發(fā)腸道分泌增多。由志賀菌感染所造成癥狀包含：（1）急性細(xì)菌性痢疾經(jīng)潛伏期1~4日,幼兒起病忽然,表現(xiàn)為發(fā)燒,煩躁不安,嗜睡,厭食,惡心或嘔吐,腹瀉,腹痛和腹脹和里急后重。3日內(nèi)大便中出現(xiàn)血液,膿液和粘液.大便次數(shù)可增加到≥20次/d,體重下降和失水嚴(yán)重。若不診療,患兒可在12日內(nèi)死亡；若患兒存活,則在第2周急性癥狀消退.成人可表現(xiàn)為無(wú)發(fā)燒非血性,非粘液性腹瀉,極少有或完全沒(méi)有里急后重.但其最初癥狀可為發(fā)作性腹絞痛,急于排便,起初排出成形大便并在排便后可緩解腹痛.以后反復(fù)發(fā)作,而且日趨嚴(yán)重和頻繁.腹瀉變得顯著,系軟便或含有粘液,膿及常有血液水瀉。嚴(yán)重里急后重可造成直腸脫垂和大便失禁。成人患病常可自愈：輕者4~8日,重者3~6周。伴有循環(huán)虛脫顯著脫水和電解質(zhì)喪失及死亡關(guān)鍵發(fā)生于＜2歲嬰兒和衰弱成人；（2）慢性細(xì)菌性痢疾關(guān)鍵是因急性菌痢診療不根本，造成反復(fù)發(fā)作遷延不愈，病程超出兩個(gè)月以上者；若是有病史、無(wú)癥狀，結(jié)腸鏡檢或糞便培養(yǎng)陽(yáng)性者稱(chēng)為隱匿型菌痢，在流行病學(xué)上亦含相關(guān)鍵意義；（3）攜帶者是指恢復(fù)期帶菌、慢性帶菌者和健康帶菌者三種類(lèi)型，尤其是健康帶菌者是關(guān)鍵傳染源。除此以外，還可發(fā)生繼發(fā)性細(xì)菌感染,尤其是衰弱和脫水病人。嚴(yán)重粘膜潰瘍可引發(fā)顯著急性失血.其它并發(fā)癥雖不多見(jiàn),但可有中毒性神經(jīng)炎,關(guān)節(jié)炎,心肌炎和罕見(jiàn)腸穿孔。小兒志賀菌病可并發(fā)溶血性尿毒癥綜合征。本病不會(huì)變成慢性,也不會(huì)成為潰瘍性結(jié)腸炎病因?qū)W原因。但有HLA-B27基因型病人在志賀菌病后常常比較輕易發(fā)生關(guān)節(jié)炎或顯著Reiter綜合征。二、細(xì)菌生物學(xué)特征志賀菌（Shigella）隸屬于腸桿菌科，分為A,B,C,D4個(gè)亞群——A群痢疾志賀菌、B群福氏志賀菌、C群鮑特志賀菌和D群宋內(nèi)志賀菌，而各亞群又可分多種血清決定型。它們均為革蘭氏陰性桿菌，菌體短小、無(wú)芽胞無(wú)鞭毛，有菌毛，在胞質(zhì)中存在著大小兩種質(zhì)粒，和該菌侵襲性和耐藥性相關(guān)。志賀菌為兼性厭氧菌，對(duì)理化原因抵御力較弱，對(duì)酸敏感，在1%石炭酸中15~30min可被殺死，所以運(yùn)輸時(shí)必需采取含有緩沖劑培養(yǎng)基。它們最適生長(zhǎng)溫度為37℃，pH為7.2~7.4，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高，可在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在腸道培養(yǎng)基上可形成不發(fā)酵乳糖無(wú)色半透明菌落，而宋內(nèi)志賀菌還常形成粗糙型菌落，也所以可發(fā)生S-R變異。志賀菌屬?zèng)]有H抗原，但有O抗原和部分菌種K抗原。O抗原可耐熱，100℃60min不被破壞，它是分類(lèi)依據(jù)，含有群特異性和型特異性?xún)煞N抗原。正是依據(jù)O抗原不一樣和生化反應(yīng)結(jié)果將志賀菌分成了4個(gè)血清群和32個(gè)血清型；而K抗原存在于A群和C群全部菌型和B群種部分菌種中，不耐熱，對(duì)分類(lèi)無(wú)意義，但它存在將阻斷O抗原和對(duì)應(yīng)抗血清凝集作用，故可先以100℃60min破壞之。志賀菌致病原因關(guān)鍵有：1.菌毛侵襲作用；2.內(nèi)毒素：各群志賀菌全部能形成強(qiáng)烈內(nèi)毒素，其作用機(jī)制包含：破壞腸粘膜上皮,造成粘膜下層炎癥,并有毛細(xì)血管血栓形成,以致壞死,脫落,形成潰瘍,出現(xiàn)粘液膿血便；使腸壁通透性增高,促進(jìn)毒素吸收,引發(fā)一系列毒血癥癥狀,如發(fā)燒,神志障礙,甚至中毒性休克；作用于腸壁植物神經(jīng),使腸蠕動(dòng)失調(diào)并痙攣,尤以直腸括約肌受累顯著,所以發(fā)生腹痛,腹瀉,里急后重等癥狀；3.外毒素：A群志賀菌Ⅰ型和Ⅱ型能產(chǎn)生志賀外毒素(ST),ST能引發(fā)Vero細(xì)胞病變,故也稱(chēng)Vero毒素(VT)。ST組成是由1個(gè)A及5個(gè)B亞單位組成.B亞單位是毒素和靶細(xì)胞表面糖脂受體結(jié)合單位;A亞單位鏈為毒性部分能抑制蛋白質(zhì)合成。ST含有細(xì)胞毒素,腸毒素和神經(jīng)毒素3種生物學(xué)活性：腸毒素性，此毒素有類(lèi)似E.coli和霍亂腸毒素作用能引發(fā)腹瀉和嘔吐；細(xì)胞毒性，它能夠阻止小腸上皮細(xì)胞對(duì)糖和氨基酸吸收；神經(jīng)毒性，在痢疾志賀菌引發(fā)重癥感染者可作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),造成昏迷或腦膜炎；ST在體外還可加重對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。ST和內(nèi)毒素連續(xù)存在聯(lián)合作用可能和志賀菌感染溶血性尿毒綜合征等并發(fā)癥相關(guān)。二、細(xì)菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其它檢驗(yàn)關(guān)鍵依據(jù)暴露史、臨床特征和試驗(yàn)室檢驗(yàn)診療。急性期有發(fā)燒、腹痛、腹瀉、里急后重及黏液膿血便，左下腹顯著壓痛。糞便鏡檢有多數(shù)白細(xì)胞或膿細(xì)胞及紅細(xì)胞即可診療。確診則依靠于糞便培養(yǎng)出痢疾桿菌。1.血常規(guī)急性期白細(xì)胞總數(shù)輕至中度增高，多在（10~20）×109/L，中性粒細(xì)胞亦增高。2.直腸鏡檢驗(yàn)可見(jiàn)粘膜表面彌漫性充血并有大量小潰瘍?？捎檬米訌臐兲幦〔淖魍科瑱z驗(yàn)或培養(yǎng)。這些拭子及大便標(biāo)本均應(yīng)立即鏡檢及培養(yǎng)，標(biāo)本接種于腸道桿菌選擇培養(yǎng)基或判別培養(yǎng)基上,常見(jiàn)S-S培養(yǎng)基.37℃3.糞便檢驗(yàn)外觀多為黏液膿血便，無(wú)糞質(zhì)。鏡檢有大量膿細(xì)胞或白細(xì)胞及紅細(xì)胞，如有巨噬細(xì)胞有利于診療。糞便培養(yǎng)病原學(xué)檢驗(yàn)有利于確診，同時(shí)可做藥品敏感試驗(yàn)以指導(dǎo)臨床合理選擇抗菌藥品診療。糞便免疫學(xué)檢驗(yàn)和細(xì)菌培養(yǎng)比較含有早期快速診療優(yōu)點(diǎn)，但因?yàn)榧S便中抗原成份復(fù)雜，易出現(xiàn)假陽(yáng)性，故現(xiàn)在臨床上還未廣泛應(yīng)用。4.濕片或經(jīng)甲基藍(lán)或賴(lài)特染色涂片可見(jiàn)大片白細(xì)胞,這點(diǎn)可判別細(xì)菌性和阿米巴痢疾(因阿米巴可破壞白細(xì)胞)。5.毒力試驗(yàn)Senery毒力試驗(yàn)：將受試菌37℃6.免疫染色法將糞便和志賀菌抗血清混勻,在顯微鏡觀察有沒(méi)有凝集現(xiàn)象。7.免疫熒光菌球檢驗(yàn)法在含有熒光素標(biāo)識(shí)志賀菌屬免疫血清液體培養(yǎng)基中接種標(biāo)本,培育4-8h后發(fā)覺(jué)帶有熒光菌球?yàn)殛?yáng)性。8.協(xié)同凝集試驗(yàn)用含有SPA葡萄球菌標(biāo)識(shí)志賀菌屬抗體,測(cè)定病人糞便中或增菌培養(yǎng)液中細(xì)菌及其可溶性抗原。9.PCR法檢測(cè)志賀菌核酸，快速、敏感，可提升45%志賀菌標(biāo)本檢出率，現(xiàn)在還未廣泛應(yīng)用。10.此病還應(yīng)和急性阿米巴痢疾、細(xì)菌性胃腸型食物中毒、其它病原菌引發(fā)腸道感染、急性壞死性出血性腸炎及腸套疊相判別。三、細(xì)菌防治首先是防治：1早期發(fā)覺(jué),早期隔離和早期根本診療病人外,查出帶菌者2切斷傳染路徑,操作食品前應(yīng)根本洗手。臟衣和床單應(yīng)放在帶蓋桶內(nèi)用肥皂水浸泡然后再煮沸消毒。房屋應(yīng)使用蚊帳紗和屏障。對(duì)病人和帶菌者應(yīng)采取對(duì)應(yīng)隔離方法(尤其是對(duì)糞便隔離)。另外還包含加強(qiáng)水源管理及食品衛(wèi)生監(jiān)督等3口服菌苗預(yù)防有鏈霉素依靠(Sd)株及口服重組活菌苗。Sd株口服后,因腸道無(wú)鏈霉素它不生長(zhǎng)也不立即死亡,而產(chǎn)生SIgA,但只對(duì)同型菌再感染有保護(hù)作用,故使用此菌苗時(shí)應(yīng)考慮到當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)流行菌型。重組活菌苗由多個(gè)型別(或種型)免疫原組成,含有廣譜保護(hù)作用,已開(kāi)始生產(chǎn)在診療方面：1.補(bǔ)液療法腹瀉常引發(fā)等張性脫水(鹽和水丟失相等)并伴有代謝性酸中毒和顯著失鉀.脫水造成口渴使病人過(guò)多飲水又可引發(fā)低張性改變。無(wú)腹瀉痢疾不會(huì)造成過(guò)多失水尤其是氣候炎熱地域嬰兒,經(jīng)過(guò)出汗和呼吸失水再加上嚴(yán)重腹瀉,可造成高張性脫水。過(guò)早地應(yīng)用高滲性液體(牛奶,鼻飼、自制電解質(zhì)混合液)可引發(fā)高張性損害,包含抽搐。2.抗生素在決定應(yīng)用抗生素時(shí),應(yīng)考慮到疾病嚴(yán)重程度,病人年紀(jì)、衛(wèi)生情況,深入傳輸可能性和造成細(xì)菌耐抗生素可能性等原因。另外,早期用合適可吸收抗菌藥品診療,可顯著減輕癥狀和降低志賀菌排出：對(duì)兒童,TMP-SMX中TMP成份4mg/kg每12小時(shí)1次為首選方案；對(duì)成人,用雙倍加強(qiáng)片(TMP320mg)每12小時(shí)1次。成人還可用諾氟沙星400mg口服每日2次或環(huán)丙沙星500mg口服每日2次。很多志賀菌株可能對(duì)氨芐青霉素和四環(huán)素耐藥。3.其它診療熱水袋有利于緩解腹部不適,用可被吸收且起減輕刺激作用甲基纖維素制劑對(duì)腹瀉和里急后重起不到任何緩解作用.抗膽堿能藥品和樟腦阿片酊應(yīng)盡可能不用,因?yàn)樗鼈兛梢l(fā)腸道郁滯,延長(zhǎng)發(fā)燒期,并使大便連續(xù)排菌。四、細(xì)菌生物安全防護(hù)依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸微生物名目（待頒布）志賀菌屬于三類(lèi)、BSL-2。相關(guān)防護(hù)事宜包含：（1）操作要求1、試驗(yàn)時(shí)，未經(jīng)試驗(yàn)室主任同意，限制或嚴(yán)禁進(jìn)入試驗(yàn)室。2、不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。3、全部操作過(guò)程應(yīng)盡可能細(xì)心，避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。4、對(duì)于污染銳器，必需時(shí)刻保持高度警惕，包含針、注射器、玻片、加樣器等。5、注射和吸收感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體）。用過(guò)一次性針頭必需彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要不將之小心放入不會(huì)被刺穿、用于搜集廢棄銳器容器中。非一次性銳器必需放置在堅(jiān)壁容器中，轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒，最好高壓殺菌。6、打壞器皿不能直接用手處理，必需用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染針頭、銳器、碎玻璃容器在倒掉前，應(yīng)按攝影關(guān)要求進(jìn)行消毒。7、全部培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它要求廢物在釋放前，均應(yīng)使用可行消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近試驗(yàn)室消毒物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi)，密封運(yùn)出試驗(yàn)室。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒物料，在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝，其包裝應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)。8、濺出或偶然事件中，顯著暴露于傳染源時(shí)，要立即向試驗(yàn)室主任匯報(bào)。進(jìn)行合適醫(yī)學(xué)評(píng)定、觀察、診療，保留書(shū)面統(tǒng)計(jì)。9、按日常程序、在相關(guān)傳染源工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其它傳染源污染后，試?yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)該使用有效消毒劑消毒。污染設(shè)備在送去修理、維護(hù)前，要按攝影關(guān)要求消毒；在離開(kāi)設(shè)施轉(zhuǎn)移前，要按攝影關(guān)要求打包運(yùn)輸。（2）安全設(shè)備1、正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其它適宜人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。2、確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物試驗(yàn)過(guò)程，包含離心、研磨、勻漿、猛烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源容器、采集感染標(biāo)本等。3、包含高濃度或大致積傳染源時(shí)，若選擇密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩離心機(jī)，若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi)，則可在開(kāi)放試驗(yàn)室內(nèi)離心。4、當(dāng)必需在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí)，需采取面部保護(hù)方法（跟鏡、口罩、面罩、或其它防濺裝置），以免傳染源或其它有害物濺或?yàn)⒌矫嫔稀?、在試驗(yàn)室內(nèi)，必需使用專(zhuān)用防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非試驗(yàn)室區(qū)域時(shí)，防護(hù)服必需留在試驗(yàn)室內(nèi)。防護(hù)服能夠在試驗(yàn)室內(nèi)處理，也能夠在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。6、可能接觸潛在傳染源、被污染表面或設(shè)備時(shí)，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反復(fù)使用，不能用于接觸“潔凈”表面（鍵盤(pán)、電話等），也不應(yīng)該戴著到試驗(yàn)室外。要備有帶滑石粉乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。陰溝腸桿菌生物危害評(píng)定匯報(bào)一、細(xì)菌傳輸和致病陰溝腸桿菌廣泛分布于環(huán)境中，土壤、水、污水、腐爛蔬菜和乳制品亦可發(fā)覺(jué)，在陰溝污水中含量可高達(dá)10７/g。它是存在于人和動(dòng)物腸道內(nèi)條件致病菌，易致泌尿道和呼吸道感染，它也可發(fā)生傷口感染、菌血癥和敗血癥，尤其易發(fā)于下列危險(xiǎn)原因患者：如長(zhǎng)久住院（尤其是在ICU）、患嚴(yán)重疾病、長(zhǎng)久應(yīng)用廣譜抗生素、進(jìn)行侵襲性操作、應(yīng)用放療或化療及免疫抵制劑等患者。據(jù)報(bào)道：在重癥監(jiān)護(hù)病房（ICU）革蘭陰性菌感染中，腸桿菌屬細(xì)菌感染僅次于銅綠假單胞菌，居第二位。二、細(xì)菌生物學(xué)特征陰溝腸桿菌屬于腸桿菌科腸桿菌屬，為革蘭氏陰性粗短桿菌，有周身鞭毛、無(wú)芽胞，兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，在一般培養(yǎng)基上能夠形成大而濕潤(rùn)粘液狀菌落。在血瓊脂平板上不溶血，在腸道選擇性培養(yǎng)基上可發(fā)酵乳糖形成紅色菌落。三、細(xì)菌試驗(yàn)室檢驗(yàn)及其它檢驗(yàn)1.標(biāo)本采集采自不一樣感染部位多種標(biāo)本如糞便、血液、尿液等；2.染色鏡檢為革蘭氏陰性粗短桿菌3.分離培養(yǎng)可選擇血平板、MAC、EMB等；4.生化判定是關(guān)鍵判定依據(jù)。IMViC試驗(yàn)呈――＋＋；動(dòng)力和鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)均為陽(yáng)性——此能夠和IMViC試驗(yàn)同為――＋＋肺炎克雷伯菌相區(qū)分；在同屬菌種之間：陰溝腸桿菌對(duì)賴(lài)氨酸/精氨酸/鳥(niǎo)氨酸反應(yīng)為―＋＋。四、細(xì)菌防治因?yàn)殛帨夏c桿菌為條件致病菌，所以要加強(qiáng)院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)，對(duì)于久病，尤其是合并致免疫功效低下基礎(chǔ)病患者，應(yīng)規(guī)范操作，尤其是侵襲性操作患者，應(yīng)重視該菌培養(yǎng)，鑒于該菌耐藥性較高，臨床應(yīng)首選喹諾酮類(lèi)和氨基糖甙類(lèi)抗菌藥盡可能降低青霉素類(lèi)及一、二代頭孢抗生素應(yīng)用，對(duì)重癥患者可選擇亞胺培南。同時(shí)應(yīng)重視避免或縮短侵入性操作，加強(qiáng)消毒隔離，降低耐藥菌株產(chǎn)生和擴(kuò)散。五、細(xì)菌生物安全防護(hù)依據(jù)《病原微生物生物試驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中相關(guān)要求，人間傳輸微生物名目（待頒布）陰溝腸桿菌屬于三類(lèi)，BSL-2。在試驗(yàn)室操作上對(duì)于有高風(fēng)險(xiǎn)人員，如免疫缺點(diǎn)者，要嚴(yán)格限制進(jìn)入。對(duì)于針頭和銳器要有警示，要用專(zhuān)門(mén)存放銳器容器盛裝。在個(gè)人防護(hù)上，要求穿隔離衣，出試驗(yàn)室時(shí)應(yīng)將隔離衣脫下；在可能接觸病原時(shí)要戴一次性使用手套，但不要戴手套接觸清潔表面（如電話等），脫去手套后要洗手；在BSC外面進(jìn)行操作時(shí)，要進(jìn)行面部保護(hù)，如套口罩、眼罩、面罩等。要有泡手消毒缸和洗眼臺(tái)，還要有高壓消毒器。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌生物危害評(píng)定匯報(bào)一、細(xì)菌傳輸和致病小腸結(jié)腸炎耶爾