第一章藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)

第一章藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)

一、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的和要求

藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的在于通過(guò)實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生掌握進(jìn)行藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本方法，了解獲得

藥理學(xué)知識(shí)的科學(xué)途徑，驗(yàn)證藥理學(xué)中的重要基本理論，更牢固地掌握藥理學(xué)的基本概念。

在實(shí)驗(yàn)課中還應(yīng)培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)工作的嚴(yán)肅的態(tài)度、嚴(yán)格的要求、嚴(yán)密的工作方法和實(shí)事求是

的作風(fēng)，并初步具備客觀地對(duì)事物進(jìn)行觀察、比較、分析、綜合和解決實(shí)際問(wèn)題的能力。

為了達(dá)到上述目的，要求做到下列事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)前（1）仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、方法和操作步驟，領(lǐng)會(huì)其設(shè)計(jì)原

理；（2）結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)藥理學(xué)和生理學(xué)、生化學(xué)等方面理論知識(shí)達(dá)到充分理解；

（3）估計(jì)實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的情況和發(fā)生的問(wèn)題。

實(shí)驗(yàn)中（1）將實(shí)驗(yàn)器材妥善安排，正確裝置；（2）嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書上的步驟進(jìn)行操

作，準(zhǔn)確計(jì)算給藥量，防止出現(xiàn)差錯(cuò)意外；（3）認(rèn)真、細(xì)致地觀察實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的現(xiàn)象，

隨時(shí)記錄藥物反應(yīng)的出時(shí)間、表現(xiàn)以及最后轉(zhuǎn)歸，聯(lián)系課堂講授內(nèi)容進(jìn)行思考；（4）注意節(jié)

約實(shí)驗(yàn)材料。

實(shí)驗(yàn)后（1）整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，經(jīng)過(guò)分析思考，寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告，按時(shí)交給指導(dǎo)教師；（2）整

理實(shí)驗(yàn)器材，洗凈擦干，妥為安放。將存活和死亡動(dòng)物分別送至指定處所。做好實(shí)驗(yàn)室的清

潔衛(wèi)生工作。

二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉持和給藥法

實(shí)驗(yàn)L1蛙和蟾蛛的捉持和給藥法

［目的］學(xué)習(xí)蛙和蟾蛛的捉持和淋巴囊給藥法。

［材料］蛙或蟾蛛；注射器、針頭、生理鹽水。

［方法］1.捉持法通常以左手握持，用食指和中指夾住左前肢，用拇指壓住右前肢，將

下肢拉直，用無(wú)名指及小指夾住。

2.淋巴囊內(nèi)注射法蛙及蟾蛛皮下有多個(gè)淋巴囊，注入藥物后易于吸收。通常將藥物注

射于胸、腹或股淋巴囊。蛙及蟾蛛的皮膚很薄，缺乏彈性，注射后藥物易自針眼漏出，故作

胸部淋巴囊注射時(shí)應(yīng)將針頭插入口腔，由口腔底部穿過(guò)下頜肌層而達(dá)胸部皮下；作股淋巴囊

注射時(shí)，應(yīng)由小腿皮膚剌入，通過(guò)膝關(guān)節(jié)而達(dá)大腿部皮下。這樣才可避免藥液外漏。注入藥

液量一般為0.25ml-0.50ml試以生理鹽水作胸淋巴囊和股淋巴囊注射練習(xí)。

實(shí)驗(yàn)L2小鼠的捉持和給藥法

［目的］學(xué)習(xí)小鼠的捉持和各種給藥法。

［材料］小鼠3s4只；鼠籠、天平、注射器、針頭、灌胃針頭、小鼠尾靜脈注射用固定

筒、生理鹽水。

［方法］1.捉持法以右手提鼠尾，將小鼠放于鼠籠或其它粗糙面上，將鼠尾向后輕拉,

使小鼠固定在粗糙面上，以左手的拇指及屈成“V”狀的食指捏其雙耳及頭頸部皮膚，無(wú)名指、

小指和掌心夾其背部皮膚和尾部，這樣便可將小鼠完全固定，并可保持頭頸部平直。

2.灌胃法以左手捉持小鼠，使其頭部朝上，頸部拉直。右手持配有灌胃針頭（以16

號(hào)輸血針頭磨去針尖后制成）的注射器，自口角插入口腔，再?gòu)纳嗝婢o沿上腭進(jìn)入食道。如

手法正確，不難成功。若遇阻力，應(yīng)退出后再插，不能用力強(qiáng)插，以免刺破食道或誤入氣管,

使動(dòng)物致死。灌胃的藥液量一般為01s0.3ml/10g。試以生理鹽水作灌胃練習(xí)。

3.皮下注射可由兩人合作。一人左手抓住小鼠頭部皮膚，右手拉住鼠尾。另一人左手

捏起背部皮膚，右手持注射器（5號(hào)或6號(hào)針頭），將針頭刺入背部皮下。如由一人操作，可

按前法捉持小鼠，右手持注射器，針尖從右側(cè)肋緣上穿入皮下，向前推至右前肢腋下部位，

將藥液推入即可。小鼠皮下注射的藥液量一般為0.05s（）.2ml/10g。試以生理鹽水進(jìn)行練習(xí)。

4.肌內(nèi)注射可由兩人合作。一人左手抓住小鼠頭部皮膚，右手拉住鼠尾。另一人持注

射器（4號(hào)或5號(hào)針頭），將針頭刺入后肢外側(cè)部肌肉。如一人單獨(dú)操作，以左手拇指和食指

抓住小鼠頭部皮膚，小指、無(wú)名指和掌部夾住鼠尾及一側(cè)后肢，右手持注射器刺入后肢肌肉

給藥。注射器每腿不宜超過(guò)O」ml。試以生理鹽水進(jìn)行練習(xí)。

5.腹腔注射以左手抓住小鼠，使腹部在上面，頭部下傾，右手持注射器（5號(hào)或6號(hào)

針頭），取30度角將針頭從一側(cè)下腹部向頭端刺入腹腔。進(jìn)針部位不宜太高，刺入不能太深,

以免傷及內(nèi)臟。注射量一般為01s0.2ml/10g。試以生理鹽水進(jìn)行練習(xí)。

6.尾靜脈注射將小鼠置特制的固定筒內(nèi)（或倒置的大漏斗、乳缽下），使鼠尾露出在

外。用酒精（或二甲苯）棉球涂擦尾部，或?qū)⑹笪苍?0C熱水中浸泡半分鐘，使血管擴(kuò)張。

用左手拉住尾尖，從左右兩側(cè)尾靜脈中，選擇一條擴(kuò)張最明顯的尾靜脈，右手持注射器（4

號(hào)針頭），將針頭刺入血管，推入藥液。如推注時(shí)有阻力，且局部腫脹變白，表明針頭沒(méi)有

剌入血管，應(yīng)撥出后重新穿刺。穿刺血管時(shí)宜從鼠尾末端開(kāi)始，以便失敗后可在第一次穿刺

點(diǎn)的近心端重新進(jìn)行。小鼠尾靜脈注射的藥液量一般為0.1-0.2ml/10go試以生理鹽水作尾

靜脈注射練習(xí)。

實(shí)驗(yàn)L3家兔的捉持和給藥法

［目的］學(xué)習(xí)家兔的捉持和各種給藥法。

［材料］家兔ls2只；兔固定箱、兔開(kāi)口器、磅稱、導(dǎo)尿管、注射器、

生理鹽水

［方法］1.捉持法用一手抓住家兔頸背部皮膚，將兔提起，另一手托其臀部，使兔

呈坐位姿勢(shì)。

2.灌胃需由兩人合作進(jìn)行。一人取坐位，用兩腿夾持兔身，左手握家兔雙耳，右手

抓住兩前肢，另一人將木制開(kāi)口器橫插家兔口內(nèi)，壓住舌頭，并固定之。取8號(hào)導(dǎo)尿管，從

開(kāi)口器中部小孔插入食道，深約15sl8cm。插管時(shí)易誤入氣管。區(qū)別方法主要在于謹(jǐn)慎觀

察插管后動(dòng)物的反應(yīng)。插入氣管時(shí)將引起劇烈掙扎和呼吸困難。也可將導(dǎo)尿管的外端浸入水

中，如有氣泡吹出，表示已誤入氣管內(nèi)，此時(shí)應(yīng)撥出重插。在判明導(dǎo)尿管確定插在食道內(nèi)以

后，取注射器接在導(dǎo)尿管上，將藥液推入。再推注少量空氣，使導(dǎo)尿管中不致有藥液殘留。

然后抽出導(dǎo)尿管，取出開(kāi)口器。如用兔固定箱，亦可一人操作。左手將開(kāi)口器固定于兔口內(nèi)，

右手將導(dǎo)尿管插入食道。家兔灌胃給藥時(shí)的藥液容量一般為5s20ml/kg。試以生理鹽水進(jìn)行

練習(xí)。

3.皮下、肌內(nèi)及腹腔注射給藥方法基本上同小白鼠，唯針頭可稍大（6號(hào)或7號(hào)），

給藥量可稍多（皮下與肌內(nèi)0.5sl.0ml/kg,腹腔1.0s5.0ml/kg）。

4.靜脈注射將家兔置固定箱內(nèi)，撥去耳殼外緣的毛，選擇一條比較明顯的耳緣靜脈,

用酒精棉球涂擦皮膚，使血管顯露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖，以食指墊在兔耳擬進(jìn)

針部位的下面，右手持注射器（6號(hào)），從近耳尖處將針頭刺入血管。如見(jiàn)到針頭確在血管內(nèi)，

即以左手將針頭固定在兔耳上，將藥液推入。推注時(shí)如有阻力，局部出現(xiàn)腫脹，表明針頭不

在血管內(nèi)，應(yīng)立即撥針重新穿刺。家兔的靜脈注射量，一般藥液為0.2s2.0ml/kg,等滲藥液

可達(dá)1Oml/kg,試以生理鹽水進(jìn)行練習(xí)。

附：其他動(dòng)物的給藥法

大鼠的捉持和給藥法

捉持法將大鼠放于粗糙面上，用右手拉其尾部，左手戴保護(hù)手套，以拇指和食指捉

其頭部，其余三指夾住背部腹部。對(duì)于身體特大或兇狠易咬人的大鼠，可先以布巾包裹全身

（露出口、鼻），然后進(jìn)行操作。

給藥法大鼠的各種給藥法基本上同小鼠，唯所用的給藥工具可稍大，給藥量也可稍多。

豚鼠的捉持和給藥法

捉持法豚鼠性溫和，一般不咬人，用手握住身體即可。

皮下、肌內(nèi)及腹腔注射方法基本上同小鼠，給藥量可稍多。

靜脈注射可選用后腳掌外側(cè)的靜脈或外頸靜脈進(jìn)行注射。作后腳掌外側(cè)靜脈注射時(shí),

可由一人捉豚鼠并固定一條后腿，另一人剪去注射部位的毛，用酒精棉球涂擦后腳掌外側(cè)的

皮膚使血管顯露，再將連在注射器上的小兒頭皮靜脈輸液針頭刺入血管。作外頸靜脈注射時(shí)

需先剪去一點(diǎn)皮膚，使血管暴露，然后將連在注射器上的小兒頭皮靜脈輸液針頭刺入。豚鼠

的靜脈管壁脆弱易破，操作時(shí)需特別小心。

貓的給藥法

皮下、肌內(nèi)及腹腔注射方法基本上同家兔。給性情暴躁的貓注射麻醉藥時(shí)，可先將

貓裝在布袋內(nèi)，然后逐漸收縮布袋，將貓推到袋角，按住頭部和軀體，隔著布層作腹腔內(nèi)注

射。

狗的給藥法

給藥前處置對(duì)于未經(jīng)馴服的狗，需先以特制鐵鉗夾住頸部，將其按倒，以繩索捆扎

狗嘴，然后才可作給藥操作。但是對(duì)于已經(jīng)馴養(yǎng)，用于慢性實(shí)驗(yàn)的狗，切不可用鐵鉗夾頸。

否則狗的性情將由此變得暴躁而難以操作。

灌胃、皮下、肌內(nèi)和腹腔注射方法上基本上同家兔，用具和給藥量應(yīng)相應(yīng)增大。

靜脈注射常用的注射部位是后肢小隱靜脈，該血管由外踝前側(cè)走向外上側(cè)。也可選

用前肢的皮下頭靜脈，該血管在腳爪上方背側(cè)的正前位。注射時(shí)先局部剪毛，以酒精涂擦皮

膚，一人捏緊注射肢體的上端，阻斷血液回流，使靜脈充盈，以便看清其走向，另一人持注

射器進(jìn)行靜脈穿刺，將藥液注入。

三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別鑒別、編號(hào)和處死法

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別鑒別

1.小鼠和大鼠兩性的區(qū)別要點(diǎn)有三：雄鼠可見(jiàn)陰囊，站位時(shí)陰囊內(nèi)睪丸下垂，熱天

尤為明顯，成熟雌鼠的腹部可見(jiàn)乳頭；雄鼠的尿道口與肛門距離較遠(yuǎn)，雌鼠的陰道口與肛門

比較靠近；肛門和生殖器間有溝的為雌鼠，無(wú)溝的為雄鼠。

2.豚鼠與小鼠和大鼠基本相同。

3.兔雄兔可見(jiàn)陰囊，兩側(cè)各有一個(gè)睪丸；用拇指和食指按壓生殖器部位，雄兔可露

出陰莖；雌兔的腹部可見(jiàn)乳頭。

4.其它較大動(dòng)物，性別特點(diǎn)明顯，不難辨認(rèn)。

（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)

較大的動(dòng)物如貓、狗、猴等，可用號(hào)碼牌掛在動(dòng)物頸部，或?qū)⑻刂频匿X質(zhì)標(biāo)牌固定在耳

殼上。小鼠、大鼠及家兔一般用1%苦味酸溶液（以稀醇配制）涂于體表不同部位的毛上。

方法不盡相同，以能明顯區(qū)別為原則。例如1號(hào)涂在左前肢，2號(hào)涂在左后肢，3號(hào)涂右前

肢，4號(hào)涂右后肢，5號(hào)涂頭部，6號(hào)涂背部，7號(hào)涂尾部，8號(hào)涂頭及背部，9號(hào)涂頭及尾

部，10號(hào)不涂色等。

（三）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死法

1.蛙和蟾蛛可以斷頭處死。也可用探針經(jīng)枕骨大孔破壞其腦和脊髓。

2.小鼠和大鼠也常以斷頭處死。對(duì)于小鼠，還可用頸椎脫臼法處死，即用左手的拇指

和食指緊按其頭部，右手捉其尾根，向后猛拉，就可使其致死。

3.兔、貓及狗靜脈注射空氣10到30毫升，可使動(dòng)物因血管氣栓而死。靜脈注射大劑

量戊巴比妥鈉等麻醉藥，則更可使動(dòng)物在死前免受痛苦。

四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥量的計(jì)算

在要給動(dòng)物給藥的時(shí)侯，常常會(huì)遇到兩個(gè)問(wèn)題：（1）給予多少劑量才恰當(dāng)？（2）應(yīng)配成

何種濃度的藥液，給予多少毫升才合適？現(xiàn)分述其處理方法。

（-）給藥劑量的決定

藥物對(duì)于某種動(dòng)物的適當(dāng)劑量得自實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，不能憑空推算。在我們?yōu)榱四骋荒康臏?zhǔn)備

給某種動(dòng)物用藥而需要解決劑量問(wèn)題時(shí)，首先應(yīng)該查閱該藥的有關(guān)文獻(xiàn)（學(xué)報(bào)、文摘、手冊(cè)

和專著等），了解前人的經(jīng)驗(yàn)。如能查到為了同一目的，給相同種類動(dòng)物用藥的記錄，那就

可以直接照試。有時(shí)侯查不到治療劑量，但能找到致死量（LDso或MLD）,可先用1/5S1/3

的致死量進(jìn)行嘗試。

如果查不到待試動(dòng)物的劑量，但知道其它動(dòng)物的劑量或人用劑量，這就需要加以換算。

關(guān)于不同種類動(dòng)物間用藥劑量的換算，一般認(rèn)為不能簡(jiǎn)單的按體重比例增減，而需按單位體

重所占體表面積的比值來(lái)?yè)Q算，其具體方法詳見(jiàn)附錄五。但換算而得的劑量仍有可能偏大或

偏小，也只能當(dāng)作一個(gè)參考值。

（二）藥液濃度的考慮與給予藥液容量的計(jì)算

決定了給藥劑量以后，應(yīng)該怎樣考慮將要配制藥液的適當(dāng)濃度呢？這時(shí)侯就應(yīng)當(dāng)從在供

試動(dòng)物身上，以某種特定途徑給藥時(shí)的最適給藥容量入手，現(xiàn)舉例加以說(shuō)明：

例1已知戊巴比妥鈉給家兔靜脈注射時(shí)的適當(dāng)劑量為25mg/kg,問(wèn)宜將戊巴比妥鈉配

成何種濃度的溶液，方便于給藥？

解:家兔靜脈注射時(shí)的藥液容量以lml/kg較較恰當(dāng)?，F(xiàn)在即已決定采用25mg/kg的劑量，

這就是說(shuō)每1ml藥液中以含戊巴比妥鈉25mg為宜。25mg/ml的濃度如用百分濃度表示，就

是2.5%。因此當(dāng)需要給家兔按25mg/kg靜脈注射戊巴比妥鈉時(shí)，宜將藥液配成2.5%的濃度。

在需要按照預(yù)定劑量，利用現(xiàn)成藥液給藥的時(shí)侯，又該怎樣計(jì)算每個(gè)動(dòng)物應(yīng)當(dāng)給予的毫

升數(shù)呢？現(xiàn)再舉例說(shuō)明：

例2鹽酸嗎啡給小鼠腹腔注射時(shí)的劑量為15mg/kg。現(xiàn)有藥液的濃度為0.1%,17g體重

的小鼠應(yīng)注射此種藥液多少毫升？

解：按15mg/kg的劑量計(jì)算，17g體重的小白鼠應(yīng)給藥0.255mg,0.1%的藥液每100ml

含藥100mg,即每1ml含藥Img。所以該小鼠應(yīng)注射鹽酸嗎啡溶液0.26ml.

在某些藥理試驗(yàn)中，也按摩爾濃度配制藥液，如將1摩爾質(zhì)量的藥物溶于溶劑中，配成

1L的溶液（其它濃度依此類推），表示為Imol/L,余類推。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的整理和實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫

整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果和撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告就是做完每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)以后的總結(jié)工作。通過(guò)良好的總結(jié)，可

使我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中獲得的感性認(rèn)識(shí)提高到理性認(rèn)識(shí)，明確已經(jīng)取得的成果，尚未解決的問(wèn)

題以及工作中的優(yōu)缺點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)報(bào)告是向他人提供研究經(jīng)驗(yàn)及供本人日后查閱的重要資料。應(yīng)

當(dāng)充分認(rèn)識(shí)在校學(xué)習(xí)期間學(xué)會(huì)做這一道科學(xué)研究工作中關(guān)鍵性工序的重要性。

（一）實(shí)驗(yàn)結(jié)果的整理

實(shí)驗(yàn)結(jié)束以后應(yīng)對(duì)原始記錄進(jìn)行整理和分析。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果有測(cè)量資料（如血壓值、心

率數(shù)、瞳孔大小、體溫變化、生化測(cè)定數(shù)據(jù)和作用時(shí)間等），記數(shù)資料（如陽(yáng)性反應(yīng)或陰性

反應(yīng)數(shù)、死亡或存活數(shù)等），描記曲線、心電圖、腦電圖、照片和現(xiàn)象記錄等。凡屬測(cè)量資

料和計(jì)數(shù)資料，均應(yīng)以恰當(dāng)?shù)膯挝缓蜏?zhǔn)確的數(shù)值作定量的表示，不能籠統(tǒng)提示。必要時(shí)應(yīng)作

統(tǒng)計(jì)處理，以保證結(jié)論有較大的可靠性。盡可能將有關(guān)數(shù)據(jù)列成表格或繪制統(tǒng)計(jì)圖，使主要

結(jié)果有重點(diǎn)地表達(dá)出來(lái)，以便閱讀、比較和分析。作表格時(shí)，一般將觀察項(xiàng)目列在表內(nèi)左側(cè)，

由上而下逐項(xiàng)填寫，而將實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的變化，按照時(shí)間順序，由左而右逐格填寫。繪圖時(shí)，

應(yīng)在縱軸和橫軸上畫出數(shù)值刻度，表明單位。一般以縱軸表示反應(yīng)強(qiáng)度，橫軸表示時(shí)間或藥

物劑量，并在圖的下方注明實(shí)驗(yàn)條件。如果不是連續(xù)性變化，也可用柱形圖表示。凡有曲線

記錄的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)及時(shí)在曲線圖上標(biāo)注說(shuō)明，包括實(shí)驗(yàn)題目，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類、性別、體重、

給藥量和其他實(shí)驗(yàn)條件等。對(duì)較長(zhǎng)的曲線記錄，可選取有典型變化的段落，剪下后粘貼保存。

這里需要注意的是必須以絕對(duì)客觀的態(tài)度來(lái)進(jìn)行裁剪工作，不論預(yù)期內(nèi)的結(jié)果或預(yù)期外的結(jié)

果，均應(yīng)一律留樣。

（二）實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫作

每次實(shí)驗(yàn)后應(yīng)寫好報(bào)告，交負(fù)責(zé)老師批閱。實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求結(jié)構(gòu)完整、條理分明、用詞規(guī)

范、詳略得宜、措辭注意科學(xué)性和邏輯性。一般包括下列內(nèi)容：

1.實(shí)驗(yàn)題目

2.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

3.實(shí)驗(yàn)方法當(dāng)完全按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的步驟進(jìn)行時(shí)，也可不再重述。如果實(shí)驗(yàn)方法臨

時(shí)有所變動(dòng)，或者發(fā)生操作技術(shù)方面的問(wèn)題，影響觀察的可靠性時(shí)，應(yīng)作簡(jiǎn)要說(shuō)明。

4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果是實(shí)驗(yàn)報(bào)告中最重要的部分，需絕對(duì)保證其真實(shí)性。應(yīng)隨時(shí)將實(shí)

驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象在草稿本上記錄，實(shí)驗(yàn)告一段落后立即進(jìn)行整理。不可單憑記憶或擱置了

長(zhǎng)時(shí)間之后再作整理，否則易致遺漏或差錯(cuò)。實(shí)驗(yàn)報(bào)告上一般只列經(jīng)過(guò)歸納、整理的結(jié)果。

但原始記錄應(yīng)予保存?zhèn)洳椤?/p>

5.討論應(yīng)針對(duì)實(shí)驗(yàn)中所觀察到的現(xiàn)象與結(jié)果，聯(lián)系課堂講授的理論知識(shí)，進(jìn)行分析和

討論。不能離開(kāi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果去空談理論。要判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否為預(yù)期的。如果屬于非預(yù)期的，

則應(yīng)該分析其可能原因。

6.結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)論是從實(shí)驗(yàn)結(jié)果歸納出來(lái)的概括性判斷，也就是對(duì)本實(shí)驗(yàn)所能說(shuō)明的問(wèn)

題、驗(yàn)證的概念或理論的簡(jiǎn)要總結(jié)。不必再在結(jié)論中重述具體結(jié)果。未獲證據(jù)的理論分析不

能寫入結(jié)論。

第二章藥理學(xué)總論

實(shí)驗(yàn)2.1藥物的局部作用與吸收作用

［目的］觀察藥物對(duì)動(dòng)物機(jī)體的局部作用和吸收作用

［材料1兔子1只；兔固定箱、鑲子、注射器、兔用麻醉口罩；

松節(jié)油、01%硝酸士的寧、麻醉乙醛、5%水合氯醛注射液

［方法］

1、取兔一只放于兔固定箱內(nèi)，對(duì)光觀察兔耳血管粗細(xì)及顏色等情況，然后對(duì)一只兔耳

涂擦松節(jié)油，待兩分鐘后對(duì)比兩只兔耳有何不同？

2、將兔稱重，先觀察正常活動(dòng)，用鑲子輕擊四肢和背部，看有何反應(yīng)。

(1)給兔皮下注射02%硝酸士的寧注射液0.2ml/kg,用藥后每隔二分鐘用鏡子輕擊四

肢，觀察兔有何反應(yīng)。

(2)待兔出現(xiàn)典型的士的寧中毒癥狀(表現(xiàn)為全身痙攣，角弓反張，呼吸暫停等)后,

立即套上有麻醉乙雁的兔口罩，再觀察兔的反應(yīng)。

(3)當(dāng)兔的中毒狀態(tài)消失后，除去麻醉口罩，靜注水合氯醛注射液2ml/kg。

［討論題］

記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明哪種作用是局部作用？哪種作用是吸收作用？

實(shí)驗(yàn)2.2藥物的協(xié)同作用和拮抗作用

L目的］觀察激動(dòng)劑與拮抗劑之間的相互作用

［材料］兔子1只；0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%鹽酸腎上腺素注液,0.2%硝酸毛果

蕓香堿注射液。

［方法］

1、取兔放于兔固定箱內(nèi)固定，避免陽(yáng)光直射眼睛，用毛剪剪去兔兩眼睫毛，然后用睡

孔量尺測(cè)量瞳孔大小，連續(xù)三次，取平均值。

2、在兔左眼滴入0.2%毛果蕓香堿3滴，滴藥時(shí)用姆指和食指將下眼瞼提起，使成囊狀,

再用中指壓住鼻淚管開(kāi)口處，防止藥液流入鼻淚管而不起作用，再用右手滴入藥液。15分鐘

后再測(cè)量瞳孔大小，連續(xù)三次，取平均值，并進(jìn)行比較。

3、滴入毛果蕓香堿20分鐘后，分別在兩眼滴入0.1%腎上腺素3滴，15分鐘后測(cè)量?jī)?/p>

瞳孔大小，連續(xù)3次，取平均值并進(jìn)行比較。

4、滴入腎上腺素15分鐘后，分別于兩眼滴入0.05%硫酸阿托品注射液3滴，15分鐘后

觀察兩眼瞳孔變化，并測(cè)量其大小，連續(xù)3次，并取平均值。

［記錄］

項(xiàng)目正常毛果蕓香堿腎上腺素阿托品

瞳孔左眼

大小右眼

［討論題］

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中如何說(shuō)明藥物的協(xié)同作用和拮抗作用?

實(shí)驗(yàn)2.3不同給藥途徑對(duì)藥物作用的影響

L目的］觀察不同途徑給藥對(duì)藥物效應(yīng)的影響

［材料］小白鼠5只；注射器、小白鼠灌胃器、鐘罩、電子秤、鏡子、3.5%硫酸鎂溶

液、5%炭末阿拉伯膠混懸液、0.3%戊巴比妥鈉。

［方法］］

一、灌胃和腹腔注射給硫酸鎂的藥效比較

取禁食12h的昆明種小鼠3只，稱重，分別標(biāo)為對(duì)照組、灌胃組和腹腔注射組按以下給

藥：

A:對(duì)照組：灌胃給生理鹽水0.2ml/10g;

B:灌胃組：灌胃給3.5%硫酸鎂溶液0.2ml/10g;

C:腹腔注射組：腹腔注射給3.5%硫酸鎂溶液0.2ml/10g。

給藥后注意觀察動(dòng)物的活動(dòng)情況，是否有肌肉松弛的表現(xiàn)。15min后每只小鼠均灌胃給

予5%炭末阿拉伯膠混懸液0.2ml。炭末灌胃后15min,將小鼠脫臼處死，剖開(kāi)腹腔，取出胃

腸道。剪去附著在腸管上的腸系膜，將腸管不加牽引地輕輕地平鋪在玻璃板上(玻璃板上滴少

許鹽水)。以幽門為起點(diǎn)，測(cè)量炭末在腸管內(nèi)的移動(dòng)距離和小腸(自幽門至回盲部)的全長(zhǎng)，計(jì)算

每只小鼠炭末的移動(dòng)距離占小腸全長(zhǎng)百分率，比較3組動(dòng)物的活動(dòng)狀況和胃腸炭末推進(jìn)率有

何不同。

炭末推進(jìn)率計(jì)算公式：

炭末的移動(dòng)距離(cm)

小腸推進(jìn)率----------------------xi00%

小腸全長(zhǎng)(cm)

［記錄］

鼠號(hào)體重(g)藥物及劑量給藥途徑動(dòng)物反應(yīng)炭末推進(jìn)率(％)

A

B

C

二、灌胃、皮下注射、腹腔注射戊巴比妥鈉的效應(yīng)比較

取體重相近的小白鼠3只，稱其體重分別放入鐘罩內(nèi)，觀察它們的正?；顒?dòng)及翻正反射

情況，然后用0.3%戊巴比妥鈉溶液0.1ml/10g的量以不同途徑給藥，甲鼠灌胃，乙鼠皮下注射,

丙鼠腹腔注射。觀察小白鼠用藥后的反應(yīng)及活動(dòng)情況，以翻正反射消失時(shí)作為麻醉開(kāi)始指標(biāo)。

記錄麻醉開(kāi)始時(shí)間（從給藥至翻正反射消失的時(shí)間），麻醉維持時(shí)間（即從翻正反射消失至

翻正反射恢復(fù)的時(shí)間），麻醉深度有何不同（用鏡子夾其后肢看其反應(yīng)）。

［記錄1

鼠號(hào)給藥方法麻醉開(kāi)始時(shí)間麻醉維持時(shí)間麻醉深度

［討論題］

為什么會(huì)有這些不同的結(jié)果?

實(shí)驗(yàn)2.4溶液pH值對(duì)某些藥物吸收速率的影響

［目的］通過(guò)對(duì)于不同pH值的阿托品溶液滴眼后作用快慢的比較，了解溶液的pH

值對(duì)弱堿（或弱酸）性藥物穿透生物膜速率的影響。

［材料］家兔1只；兔子固定箱、滴管、測(cè)瞳尺。

［方法］

1、取家兔1只，置箱內(nèi)固定。觀察二眼瞳孔大小（測(cè)量瞳孔直徑），及測(cè)試對(duì)光反射是

否存在。

2、由兩人協(xié)作，同時(shí)拉開(kāi)左右眼下眼瞼，在左眼內(nèi)滴入pH值為9.0的1%硫酸阿托品

溶液3滴，右眼內(nèi)滴入pH值為5.0的1%硫酸阿托品溶液3滴，讓藥液在結(jié)膜囊內(nèi)保留2分鐘,

然后放手。

3、立即同時(shí)連續(xù)觀察「.眼瞳孔大小的變化，并測(cè)試對(duì)光反射，直至二眼瞳孔不再擴(kuò)大,

對(duì)光反射完全消失為止。測(cè)量瞳孔大小。比較兩種阿托品溶液產(chǎn)生作用的快慢，并記錄結(jié)果。

［注意1

1、測(cè)試對(duì)光反射的方法為迅速以手電筒光照射兔眼。如瞳孔能隨光照而縮小，即認(rèn)為

對(duì)光反射存在。如不能縮小，則認(rèn)為對(duì)光反射消失。

2、兩種藥液的作用差異在滴藥后2—5分鐘最為明顯，應(yīng)抓住這一時(shí)機(jī)進(jìn)行比較。此

后由于分泌物的作用，溶液的pH值發(fā)生變化，差別就不顯著了。

［討論題］

已知弱堿性藥物阿托品在25℃時(shí)的pKa值為9.65,根據(jù)Henderson-Hasselbalch二氏的

［解離弱堿］

pKa=pH+lg的公式，計(jì)算溶液的pH值為5或9時(shí)以未解離形式存在于溶液中

［未解離弱堿］

的阿托品分子占有百分率。

實(shí)驗(yàn)2.5肝臟功能對(duì)藥物作用的影響

［目的］觀察肝功能損害對(duì)藥物作用的影響。

［材料］小白鼠4只；注射器、鐘罩、電子秤、0.2%戊巴比妥鈉溶液、20%四氯化碳

泊劑。

［方法1

取體重近似正常的小白鼠及損壞肝臟的小鼠（實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)皮下注射20%四氯化碳

O.lml/lOg）各兩只，分別由腹腔注射0.2%戊巴比妥鈉0.2ml/10g,記錄并比較兩組小白

鼠麻醉持續(xù)時(shí)間有何差別?

［記錄］

組別鼠號(hào)體重（g）藥量（ml）注射時(shí)間產(chǎn)生作用時(shí)間醒轉(zhuǎn)時(shí)間持續(xù)時(shí)間

正1

常2

損壞3

肝組4

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將小鼠拉斷頸椎處死，剖取肝臟，比較二組動(dòng)物肝臟外觀之不同。四氯化碳

中毒小鼠的肝臟較腫大，有的充血，有的呈灰黃色，觸之有油膩感，其小葉比正常肝臟更清

楚。

［討論題］

為什么損壞肝組織的小白鼠在注射戊巴比妥鈉后作用時(shí)間長(zhǎng)？有何意義？

實(shí)驗(yàn)2.6腎功能對(duì)藥物作用的影響

［目的］觀察腎功能損害對(duì)藥物作用的影響

［材料1小白鼠2只；注射器、鐘罩、電子秤；0.1%氯化高汞、5%硫酸鏈霉素。

［方法］

取正常小白鼠和腎功能已被破壞的小白鼠(實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)腹腔注射0.1%氯化高汞

0.07ml/10g)各2只，稱其體重，分別由腹腔注射3%硫酸鏈霉素0.15ml/10g(375mg/kg),觀

察小白鼠的活動(dòng)情況，比較兩組小白鼠的變化有何差別？

［記錄］

組別鼠號(hào)體重(g)藥量(ml)注射時(shí)間產(chǎn)生作用時(shí)間表現(xiàn)備注

正1

常2

損壞3

腎組4

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可將小鼠處死，比較二組動(dòng)物腎臟的差別。氯化高汞中毒小鼠的腎臟常明顯

腫大。如用小刀縱切，可見(jiàn)到皮質(zhì)部較為蒼白，髓質(zhì)部有充血現(xiàn)象。

［討論題］

為什么兩組小白鼠的表現(xiàn)不同？有何意義？

實(shí)驗(yàn)2.7藥物的配伍禁忌

［目的］了解兩種或兩種以上的藥物配合在一起時(shí)，可能產(chǎn)生的配伍禁忌。

［材料］小白鼠4只、試管架、試管、乳缽、注射器、電子秤、pH廣泛試紙、蒸儲(chǔ)

水、液體石蠟、水合氯醛、樟腦、10%磺胺喀咤鈉、維生素B1注射液、0.1%腎上腺素注

射液、5%碳酸氫鈉、0.3%戊巴比妥鈉、1%安鈉咖、4%硫酸鎂、1.25%鹽酸四環(huán)素、5%氯

化鈣。

［方法］

一、物理性配伍禁忌

1、樟腦酷lml+水1ml--＞混濁、析出樟腦

2、液體石蠟3ml+水3ml-----＞分層

3、水合氯醛2g+樟腦2g--＞液化

二、化學(xué)性配伍禁忌

1、10%磺胺喀嚏鈉1ml+維生素B,1ml-—磺胺喀咤（反應(yīng)前后均用pH廣泛試紙測(cè)定

pH值）

2、24萬(wàn)u青霉素G鉀溶液1ml+1.25%鹽酸四環(huán)素溶液1ml

3、（M%鹽酸腎上腺素1ml+5%碳酸氫鈉1ml

三、藥理性配伍禁忌

1、取小白鼠2只稱重，其中1只肌內(nèi)注射1%安鈉咖注射液0.1ml/10g,待5分鐘后二

鼠分別腹腔注射0.3%戊巴比妥鈉液0.2ml/l0g,觀察二鼠反應(yīng)有何不同？

2、取小白鼠2只，均肌內(nèi)注射待出現(xiàn)肌肉松馳現(xiàn)象后，一只立

即腹腔注射5%氯化鈣O.lml/lOg,觀察二鼠反應(yīng)有何不同？

［討論題］

用以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明藥物配伍禁忌的臨床實(shí)用意義。

實(shí)驗(yàn)2.8藥物急性LDs。的測(cè)定

［目的］通過(guò)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)測(cè)定LD,。的方法、步驟和計(jì)算過(guò)程，了解急性毒性實(shí)驗(yàn)的常

規(guī)方法。

［材料］小鼠(體重20g左右)；測(cè)試藥物、苦味酸、注射器、小鼠飼養(yǎng)籠

［方法J(以敵百蟲(chóng)藥物為例)

1、預(yù)備試驗(yàn)(探索劑量范圍)取小鼠8-10只，以2只為一組分成4一5組，選

擇組距較大的一系列劑量，分別按組腹腔注射敵百蟲(chóng)溶液，觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù)，

找出引起0%和100%的死亡率(至少應(yīng)找出引起20%—80%死亡率)劑量的所在范圍(參

考劑量：最小300mg/kg,最大1000mg/kg)。

2、正式試驗(yàn)

(1)取小鼠50只，用苦味酸進(jìn)行編號(hào)，用區(qū)組隨機(jī)法進(jìn)行分組，分為5組，每組1

0只小鼠。

(2)在預(yù)試所獲得的0%和100%的致死量范圍內(nèi)，選用5個(gè)劑量(一般用3—5個(gè)

劑量，按等比級(jí)數(shù)增減)，盡可能使半數(shù)組的死亡率都在50%以上，另半數(shù)組的死亡率都在

50%以下。

(3)完成動(dòng)物分組和劑量計(jì)算后按組腹腔注射給藥(最好先從中劑量組開(kāi)始，以便能

從最初幾組動(dòng)物接受藥物后的反應(yīng)來(lái)判斷兩端的劑量是否合適，否則可隨時(shí)進(jìn)行調(diào)整)。

3、LD,。測(cè)定中應(yīng)觀察記錄的項(xiàng)目

(1)實(shí)驗(yàn)各要素：實(shí)驗(yàn)題目，實(shí)驗(yàn)日期，室溫，檢品的批號(hào)、規(guī)格、來(lái)源、理化性狀、

配制方法及所用濃度等；動(dòng)物品系、來(lái)源、性別、體重、給藥方式及劑量(藥物的絕對(duì)量與

溶液的容量)和給藥時(shí)間等。

(2)給藥后各種反應(yīng)：潛伏期(從給藥開(kāi)始出現(xiàn)毒性反應(yīng)的時(shí)間)；中毒現(xiàn)象及出現(xiàn)的

先后順序、開(kāi)始出現(xiàn)死亡的時(shí)間；死亡集中時(shí)間；末只死亡時(shí)間；死前現(xiàn)象等。逐日記錄各

組死亡只數(shù)。

(3)尸解及病理切片：從給藥時(shí)開(kāi)始記時(shí)，凡兩小時(shí)以后死亡的動(dòng)物，均及時(shí)尸解以

觀察內(nèi)臟的病變，記錄病變情況。若有肉眼可見(jiàn)變化時(shí)則需進(jìn)行病理檢查。整個(gè)實(shí)驗(yàn)一般要

觀察7—14天，觀察結(jié)束時(shí)，對(duì)全部存活動(dòng)物稱體重，尸解，同樣觀察內(nèi)臟病變并與中毒

死亡尸解情況相比較。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有病變時(shí)，也同樣作病理檢查，以比較中毒后病理改變及恢復(fù)

情況。

4、結(jié)果記錄和處理

(1)結(jié)果處理實(shí)驗(yàn)資料按下表列出：

受試物劑量對(duì)數(shù)劑量動(dòng)物數(shù)死亡率概率單位LD50

(mg/kg)(X)(只)(%)(Y)及置信限(95%)

(2)結(jié)果計(jì)算

用簡(jiǎn)化概率法計(jì)算LDso；計(jì)算IgLDso的標(biāo)準(zhǔn)誤(Sx50);計(jì)算95%的可信限；計(jì)算回歸

直線斜率b;并算出LDw,

LD90O

附：戊巴比妥鈉半數(shù)致死量(LD50)測(cè)定的實(shí)驗(yàn)示例(寇氏法)

［方法］取體重20g左右小白鼠50只，分為5組，每組10只，各組分別腹腔注射不同

劑量戊巴比妥鈉，注射后24h記錄各組出現(xiàn)的死亡鼠數(shù)，結(jié)果如下所示。按公式：

LD5o=log、Xm-i(Ep—0.5)］計(jì)算，求LD50。

［結(jié)果］

組別劑量DlogD實(shí)驗(yàn)鼠數(shù)死亡鼠數(shù)死亡反應(yīng)PLD50

(mg/kg)百分率(mg/kg)

1187.52.27310101001

21502.176107700.7

31202.079106600.6120

4961.982102200.2

576.81.88510000

按公式：LD50=log“[Xm-i(Xp—0.5)]計(jì)算，求LDso。

其中：Xm=最大劑量對(duì)數(shù)值；P=動(dòng)物死亡率(用小數(shù)表示)；EP=動(dòng)物死亡率的總和；i

=相鄰兩組劑量比值的對(duì)數(shù)(高劑量作分子)。

求LDso的95%平均可信限：

SLDso=1＞口5杜4.5LDsoxjx總P-EP/n-l

將實(shí)驗(yàn)結(jié)果代入上公式：

Xm=Logl87.5=2.273

Ep=1.0+0.7+0.6+0.2+0=2.5

,187.5

i=log77=log1.25=0.0969

1

LD50=log_[Xm-I(Sp-0.5)]

=log1[2.273-0.0969*(2.5-0.5)]

=log'(2.273-0.1938)

=10^*2.0792

=120mg/kg

［討論題］

什么叫LD50?測(cè)定LD50的意義和根據(jù)是什么?

實(shí)驗(yàn)2.9家兔血和肝中游離磺胺喀咤濃度的測(cè)定

［目的］掌握磺胺藥物在動(dòng)物體組織和血液中濃度測(cè)定的方法；了解磺胺喀嚏在體內(nèi)的

分布情況。

［材料］家兔1只；燒杯，試管，漏斗，濾紙，試管架，研缽，注射器，小動(dòng)物手術(shù)臺(tái)，

手術(shù)器械，刻度吸管，721分光光度計(jì)。

磺胺喀唯鈉注射液，5%三氯醋酸溶液，3%三氯醋酸溶液，0.1%亞硝酸鈉溶液，0.5%氨

基磺胺溶液，0.1%二鹽酸N（1-蔡基）一乙二胺溶液，磺胺嗑咤標(biāo)準(zhǔn)品，95%乙二醇，0.1

N氫氧化鈉，4N硫酸。

［原理J

具有游離氨基的磺胺類藥物在酸介質(zhì)中經(jīng)重氧化后可與N-（1—蔡基）-乙二胺產(chǎn)生

偶合反應(yīng)，生成紅色的偶氮染料，再與同樣處理磺胺藥標(biāo)準(zhǔn)比較，即可求得體液中磺胺類藥

的含量，剩余的亞硝酸影響測(cè)定，以氨基磺胺鈉分解除去。

［方法1

1、配液：（1）15%的三氯醋酸溶液；（2）空白對(duì)照液（3%三氯醋酸溶液）：取15%三氯醋酸

溶液，用蒸懦水稀釋即得；（3）0.1%亞硝酸鈉溶液；（4）0.5%氨基磺胺溶液；（5）0.5%二鹽酸N

-（1-蔡基）一乙二胺溶液：取二鹽酸N一（1—蔡基）一乙二胺0.5g,溶于95%乙醇約

400ml中，再加乙醇稀釋至500ml,置棕色玻璃瓶中冰箱保存；（6）貯存標(biāo)準(zhǔn)液：精確稱取磺胺

口密咤標(biāo)準(zhǔn)品0」25g,溶于0.1N氫氧化鈉25ml中，然后加4N硫酸175ml,并用蒸儲(chǔ)水稀釋

至1000ml;（7）應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液：精確吸取上述貯存標(biāo)準(zhǔn)液3.0mll,置100ml容量瓶中，用3%三

氯醋酸液稀釋至刻度。

2、取兔1只，靜脈注射10%磺胺口密唾注射液半小時(shí)后心臟采血，檢查血藥濃

度（游離磺胺測(cè)定法）。

3、記錄取全血0.5ml,加蒸儲(chǔ)水15.5ml混勻,放置15分鐘;

（1）加15%三氯醋酸溶液4.0ml,混勻，并過(guò)濾；

（3）在試管中加上述濾液5ml作為測(cè)定管，在另一試管中加入空白對(duì)照液5ml作為空白管;

在另一試管中加入應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液5.0ml作為標(biāo)準(zhǔn)管。在以上三管中各加入0.1%亞硝酸鈉液，混

勻，放置3分鐘。

（4）各加入0.5%艇基磺胺溶液0.5ml混合并放置2分鐘。

（5）加入0.1%二鹽酸N-（l-茶基）一乙二胺溶液2.5ml,充分混合，放置10分鐘。

(6)用分光光度計(jì)或光電比色計(jì)于550nm波長(zhǎng)處進(jìn)行比色，以空白管校正光密度到。點(diǎn),

讀取標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管光密度，計(jì)算游離磺胺藥含量。

鱉心鬻x應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)濃度x樣品稀釋倍數(shù)=樣品的藥物濃度

林準(zhǔn)L；光給度

例如：標(biāo)準(zhǔn)管光密度為05,測(cè)定管光密度為0.4,則

04

告x0.375〃zg%x40=120〃?g%

3、采血后立即將兔處死，打開(kāi)腹腔，稱取肝組織2g,在研缽中加蒸鐳水5ml研磨，取

上清液，殘?jiān)偌诱羝疀_洗研缽，并回收于刻度試管，共得16ml,然后加15%三氯醋酸

4ml,混勻，靜置后過(guò)濾，待測(cè)定。

測(cè)定藥物濃度的方法同上。

計(jì)算時(shí)樣品稀釋倍數(shù)為10,若標(biāo)準(zhǔn)管光密度為0.5,測(cè)定光密度為0.4時(shí)，則

0.4

■^yx0.375,z?gxl0=3,〃g%

4、記錄并計(jì)算

血藥濃度----x3.75mgx10=mg%

月干藥學(xué)濃度——x3.15mgxl0=mg%

［討論題］

試分析磺胺血藥濃度和肝藥濃度的高低與臨床應(yīng)用的關(guān)系。

實(shí)驗(yàn)2.10磺胺喀咤藥動(dòng)學(xué)的生物半衰期的測(cè)定

［目的1了解磺胺喀呢（SD）在雞體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)動(dòng)態(tài)規(guī)律并計(jì)算出其生物半衰

期，為臨床用藥提供依據(jù)。

［材料］動(dòng)物：雞（成年健康家雞）。

1、10%磺胺喀咤鈉注射液

2、15%三氯醋酸

3、0.1%亞硝酸鈉（貯存冰箱可保存二周）

4、0.5%氨基橫酸鐵

5、0.1%二鹽酸N-（1-蔡基）乙二胺，取本品0.5g,用95%乙醇400ml溶解，再用

乙醇稀釋至500ml,置于棕色瓶中，（貯存于冰箱中）。

6、貯存標(biāo)準(zhǔn)液：精確稱取被測(cè)定的磺胺喀咤0.125g,溶于蒸儲(chǔ)水中，并稀釋至1000ml,

因其不易溶于水，可先溶于0.1N氫氧化鈉25ml中，然后加4N硫酸175ml,并用蒸儲(chǔ)水稀

釋至1000ml?

7、應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液：精確吸取上述貯存標(biāo)準(zhǔn)液3.0ml,置于100ml溶量瓶中，用3%三氯醋

酸稀釋至刻度。

器材：721型分光光度計(jì)、容量瓶、刻度試管、注射器、吸管、手術(shù)器械。

［方法1

1、動(dòng)物準(zhǔn)備：取健康成年家雞一只，稱體重后，通常用毛巾將雞裹住，即可被固定。

或一手握住兩翼根部，一手握著兩爪將雞固定好，暴露并剝離一側(cè)靜脈，手插入一根細(xì)硬塑

料膠管，固定，供采血時(shí)用。

2.（1）在注藥前，由翼下靜脈采血0.5ml,作空白管用。

（2）快速靜脈推注10%SD鈉（70mg/kg）,注后計(jì)時(shí)。

3、采血：于注藥后的下述時(shí)間各采一次，每次0.5ml,分別在5:10\15\20\30\

45\60，采血后立即加入15.5ml蒸饋水，使全部溶血，放置15,后，置冰箱保薦（4℃）。

4、加15%三氯醋酸溶液4.0ml,并過(guò)濾。

5、在管中加入上述濾液5.0ml作為測(cè)定管，在另一管中加入空白全血濾液5.0ml作為

空白管，在另一試管中加入應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液5.0ml,混合，放置三分鐘。

6、各管分別加入0.5%氨基磺酸鏤溶液0.5ml,混合，并放置二分鐘。

7、各管分別加入0」％二鹽酸N一(1—蔡基)乙二胺溶液2.5ml,充分混勻，放置10

分鐘。

8、721型分光光度計(jì)于545—550nm波長(zhǎng)處進(jìn)行比色，以空白管校正光密度到0點(diǎn)，讀

取標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管光密度，標(biāo)出血液中游離磺胺喀噬的含量(mg/100ml)。

磺胺量=學(xué)x應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液濃度x稀釋倍數(shù)

標(biāo)準(zhǔn)管光密度1

血藥濃度(C)=膂/鬻x應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液濃度x稀釋倍數(shù)

標(biāo)準(zhǔn)2管光密度

9、模型選擇與生物半衰期(tl/2)的計(jì)算：

(1)模型選擇：將測(cè)得不同時(shí)間的血藥濃度取其自然對(duì)數(shù)為縱座標(biāo)，以相應(yīng)時(shí)間為橫

座標(biāo)繪制Inc—t曲線草圖，按直觀法(數(shù)點(diǎn)法)用計(jì)算器回歸，求出n與b值，再確定動(dòng)力

學(xué)模型(此步略)。

(2)按各次血液中SD的濃度值，求出半衰期(tl/2):

將多次血藥濃度值，用直線回歸法求出SD半衰期；設(shè)X為用藥后的時(shí)間(以分計(jì)算),

Y為血液中SD濃度對(duì)數(shù)值(濃度mg%計(jì)算)得一座標(biāo)點(diǎn)，各點(diǎn)間連成直線的斜率b:

半衰期(1/2)="史

消除速率常數(shù)Kc=bx2.303

Ke

在未知初始濃度C0,而知道任意時(shí)間ti和t2時(shí)的濃度C＞和C2時(shí)，可用下式求K值:

徐=微?電言;n/2=啜

［實(shí)驗(yàn)記錄］

采血時(shí)間(t)號(hào)數(shù)(N)光密度(E)血藥濃度(C)

1

2

0

3

取值

1

2

標(biāo)準(zhǔn)值

3

取值

1

2

5，

3

取值

1

2

10，

3

取值

1

2

15，

3

取值

1

2

20，

3

取值

1

2

30，

3

取值

第三章各論

實(shí)驗(yàn)3.1普魯卡因與丁卡因表面麻醉作用的比較

［目的］了解普魯卡因與丁卡因作用的區(qū)別。

［材料］兔1只；0.5%鹽酸普魯卡因溶液、0.6%鹽酸丁卡因溶液、兔固定箱、毛剪、

滴管。

［方法1

1、取兩眼無(wú)眼疾的健康家兔1只，放入固定箱內(nèi)，用毛剪剪去兩眼睫毛。用同一根兔

須以相等的力量輕觸角膜，試驗(yàn)正常的角膜反射。觸及部位可按上、中、下、左、右的順序,

刺激五個(gè)點(diǎn)。全部陽(yáng)性（5次都不霎眼）時(shí)記5/5,全部陰性（5次都霎眼）時(shí)記0/5,

其余類推。

2、用拇指和食指將兔下眼瞼拉成囊狀，再用中指壓住鼻淚管（以兔藥液流入鼻腔），

然后在兩眼滴藥，左眼滴入0.5%的普魯卡因溶液2滴；右眼滴入0.6%的鹽酸丁卡因溶液2

滴。輕揉眼瞼，使藥液與角膜充分接觸，并在眼中存留1分鐘，然后放手。滴藥后每隔5分

鐘測(cè)試角膜反射1次，到30分鐘為止。同時(shí)觀察有無(wú)結(jié)膜充血等反應(yīng)，記錄并比較兩藥之

作用。

［記錄］

兔眼滴入藥物滴藥前角滴藥后角膜反射

膜反射5minlOmin15min20min25min30min

左普魯卡因

右丁卡因

［討論題］

1、影響藥物表面麻醉效果的因素有哪些？使用中需注意什么問(wèn)題?

3.2腎上腺素對(duì)普魯卡因浸潤(rùn)麻醉作用的影響

L目的］了解腎上腺素與普魯卡因聯(lián)合用藥可延長(zhǎng)局部麻醉作用的特點(diǎn)。

［材料］兔子1只；注射器、毛剪、燒杯、酒精棉球；0.2%普魯卡因注射液、含有1

/io萬(wàn)0.2ml腎上腺素的普魯卡因注射液。

［方法］

1、取家兔1只，在脊背兩側(cè)各選擇相互對(duì)稱，直徑2cm左右的部位一塊，將毛剪凈

裝于盛水的燒杯里（以免兔毛飛揚(yáng)），用酒精消毒后，用針頭刺皮膚，試其痛覺(jué)反應(yīng)，用手

掌緊貼兔背部皮膚，感覺(jué)刺激部位肌肉抽縮為痛感指標(biāo)。刺激方式按左、中、右、上、中、

下的順序進(jìn)行。全部陽(yáng)性反應(yīng)記6/6,全部陰性反應(yīng)記為0/6,其余類推。

2、于兩背部分別用0.2%普魯卡因注射液2ml和0.2%普魯卡因腎上腺素注射液2ml作

皮下注射。注射后于1min、2min、5min分別刺激注射部位測(cè)其痛覺(jué)，然后每5min測(cè)試一

次，并比較兩種藥液的麻醉作用、維持時(shí)間及注射部位皮膚顏色有何不同？

［記錄］

用藥后反應(yīng)

藥物用藥前反應(yīng)

5min1Omin15min20min25min30min35min

普魯卡因

普魯卡因+Ad

［討論題］

以實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明普魯卡因與腎上腺素合用的臨床意義?

3.3氯丙嗪鎮(zhèn)靜作用及其強(qiáng)化麻醉的觀察

［目的］觀察氯丙嗪的鎮(zhèn)靜作用和強(qiáng)化麻醉作用。

［材料］家兔3只；注射器；0.5%鹽酸氯丙嗪、2%戊巴比妥鈉溶液、酒精棉球。

［方法］

每組取家兔1只，稱其體重，根據(jù)下列規(guī)定藥物、劑量、用法、并記錄反應(yīng)。

［記錄］

兔號(hào)體0.5%0.2%戊麻醉

用藥前用藥后

重氯丙嗪巴比妥作用

注射液鈉液發(fā)維痛瞳眼角體痛11眼角體

生持孔瞼膜孔瞼膜

時(shí)時(shí)覺(jué)大反反溫覺(jué)大反反溫

向同小射射「小射

甲lml/kg

iv

乙lml/kglml/kg

iviv

丙lml/kg

iv

注：甲、乙兔各靜注氯丙嗪10分鐘后，再給乙、丙兔分別注射戊嘏比妥鈉。

［討論題］

以上結(jié)果說(shuō)明了什么問(wèn)題？

3.4藥物的鎮(zhèn)痛作用

一、化學(xué)刺激法觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用

［目的］觀察哌替咤、羅通定的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，掌握扭體法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法。

［材料］小白鼠，體重18?22g;1ml注射器、鼠籠、苦味酸等；生理鹽水、0.2%哌替

嚏溶液、0.2%羅通定溶液、0.3%酒石酸睇鉀溶液

［方法］取健康小白鼠6只，稱重，隨機(jī)分成3組，每組2只，觀察各鼠活動(dòng)情況后，

分別腹腔注射0.2%哌替唯溶液、0.2%顱痛定溶液及生理鹽水，給藥體積均為01ml/10g。

給藥30min后，各鼠分別腹腔注射0.3%酒石酸睇鉀0.3ml/只，觀察lOmin內(nèi)產(chǎn)生“扭體”反

應(yīng)的動(dòng)物數(shù)。

［記錄］

藥物對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用

扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭

哌替咤

羅通定

生理鹽水

［結(jié)果］

匯總?cè)珜?shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將所測(cè)得的結(jié)果代入下列公式計(jì)算：

實(shí)驗(yàn)組無(wú)扭體反應(yīng)的動(dòng)物數(shù)-對(duì)照組無(wú)扭體反應(yīng)的動(dòng)物數(shù)

藥物鎮(zhèn)痛百分率------------------------------------------------------xl00%

對(duì)照組扭體反應(yīng)的動(dòng)物數(shù)

注：“扭體”反應(yīng)的標(biāo)志：腹部?jī)?nèi)凹，軀體與后腿伸張，同時(shí)肢體扭曲，抬臀豎尾等。

二、熱板法觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用

［目的］學(xué)習(xí)熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法；觀察哌替咤和羅通定的鎮(zhèn)痛作用。

［原理］將小鼠置于恒溫的熱板上，以熱刺激小鼠足部產(chǎn)生疼痛反應(yīng)（舔后爪），通過(guò)

測(cè)定小鼠痛閾（出現(xiàn)疼痛反應(yīng)即舔后爪時(shí)間），比較組與對(duì)照組小鼠痛閾的差異，判定藥物

有無(wú)鎮(zhèn)痛作用。

［材料］小鼠，雌性，體重18~22g;器材：1ml注射器、鼠籠、天平、智能熱板儀；0.2

%哌替咤生理鹽水溶液、0.2%羅通定生理鹽水溶液。

［方法］

1、準(zhǔn)備工作打開(kāi)智能熱板儀，設(shè)定溫度為55士0.5。（3,預(yù)熱15分鐘左右，使其達(dá)到

恒溫。

2、小鼠的選擇及正常痛閾的測(cè)定取小鼠數(shù)只，依次放入熱板儀上。自放入熱板儀至

出現(xiàn)舔后足所需的時(shí)間（秒）作為該鼠的痛閾值。凡在30秒內(nèi)不舔足或逃避者棄置不用。

取篩選合格的小鼠6只，隨機(jī)分為3組，各鼠編號(hào)后重復(fù)測(cè)其正常痛閾值?次，將所測(cè)兩次

正常痛閾平均值作為該鼠給藥前痛閾值。

3、給藥及給藥后痛閾值測(cè)定按0.1ml/10g腹腔注射給藥，第1組給予0.2%哌替咤溶

液，第2組給予0.2%羅通定溶液，第3組給予生理鹽水作為對(duì)照。給藥后lOmin、30min后

各測(cè)小鼠痛閾值1次。若放入燒杯內(nèi)60秒仍無(wú)反應(yīng)，應(yīng)將小鼠取出，痛閾值以60秒計(jì)。

4、實(shí)驗(yàn)完畢后，按下列公式計(jì)算不同時(shí)間的痛閾提高百分率：

給藥后平均痛閾值-給藥前平均痛閾值

痛閾提高百分率（％）=----------------------------------------xlOO%

給藥前平均痛閾值

［記錄］

藥物對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用

TT"戰(zhàn)她二加斗擊女估,訃、給藥后平均痛閾值（秒）痛閾提高（％）