中科院分子生物學(xué)試題庫(kù)題庫(kù)2

三、填空題

1.RNA是由核糖核甘酸通過(guò)鍵連接而成的一種。幾乎所

有的RNA都是由DNA而來(lái)，因此，序列和其中一條

鏈。

2.多數(shù)類型的RNA是由加工產(chǎn)生的，真核生物前體tRNA的包

括的切除和的拼接。隨著和端的序列切

除，3'端加上了序列。在四膜蟲中，前體tRNA的切除和

的拼接是通過(guò)機(jī)制進(jìn)行的。

3.RNaseP是一種，含有作為它的活性部位，這種酶在序

列的切割O

4.C°t"2實(shí)驗(yàn)測(cè)定的是。

5.假定擺動(dòng)假說(shuō)是正確的，那么最少需要種tRNA來(lái)翻譯61種氨基酸密碼子。

6.寫出兩種合成后不被切割或拼接的RNA：和。

7.在DNA合成中負(fù)責(zé)復(fù)制和修復(fù)的酶是。

8.染色體中參與復(fù)制的活性區(qū)呈Y型結(jié)構(gòu)，稱為。

9.在DNA復(fù)制和修復(fù)過(guò)程中修補(bǔ)DNA螺旋上缺口的酶稱為。

10.在DNA復(fù)制過(guò)程中，連續(xù)合成的子鏈稱,另一條非連續(xù)合成的子鏈

稱為"

11.如果DNA聚合酶把一個(gè)不正確的核甘酸加到3'末端，一個(gè)含3'—5'活性的獨(dú)

立催化區(qū)會(huì)將這個(gè)錯(cuò)配堿基切去。這個(gè)催化區(qū)稱為酶。

12.DNA后隨鏈合成的起始要一段短的,它是由以核糖核

甘酸為底物合成的=

13.復(fù)制叉上DNA雙螺旋的解旋作用由催化的，它利用來(lái)源于ATP水解產(chǎn)

生的能量沿DNA鏈單向移動(dòng)。

14.幫助DNA解旋的與單鏈DNA結(jié)合，使堿基仍可參與模板反應(yīng)。

15.DNA引發(fā)酶分子與DNA解旋酶直接結(jié)合形成一個(gè)單位，它可在復(fù)制

叉上沿后隨鏈下移，隨著后隨鏈的延伸合成RNA引物。

16.如果DNA聚合酶顯現(xiàn)錯(cuò)誤，會(huì)產(chǎn)生一對(duì)錯(cuò)配堿基，這種錯(cuò)誤可以被一個(gè)通過(guò)甲基

化作用來(lái)區(qū)別新鏈和舊鏈的特別系統(tǒng)進(jìn)行校正。

17.對(duì)酵母、細(xì)菌以及幾種生活在真核生物細(xì)胞中的病毒來(lái)說(shuō)，都可在DNA特殊序列

處觀察到復(fù)制泡的形成。

18.可被看成一種可形成暫時(shí)單鏈缺口（I型）或暫時(shí)雙鏈缺口（H型）的可逆

核酸酶。

19.在大腸桿菌中發(fā)覺(jué)了種DNA聚合酶。DNA修復(fù)時(shí)需要DNA聚合酶

20.真核生物中有5種DNA聚合酶。它們是：（1）（2）（3）

（4）（5）。

21.在DNA修復(fù)過(guò)程中，需要第二種酶，,作用是將DNA中相鄰的

堿基起來(lái)。DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性。

有兩種外切核酸酶的活性，它們分別從和降解

DNA。DNA聚合酶只有外切核酸酶活性。

22.只有真核DNA聚合酶和顯示外切

核酸酶活性。

23.DNA大多數(shù)自發(fā)變化都會(huì)通過(guò)稱之為的作用很快被校正。僅在

極少情形下，DNA將變化的部分保留下來(lái)導(dǎo)致永久的序列變化，稱

為。

24.偶然情形下，在同一基因兩個(gè)稍微不同拷貝（等位基因）間發(fā)生重組的過(guò)程中，一個(gè)

等位基因經(jīng)過(guò)過(guò)程會(huì)被另一等位基因代替。

25.通過(guò)基因重組，游動(dòng)DNA序列和一些病毒可進(jìn)入或離開一條目

的染色體。

26.DNA修復(fù)包括3個(gè)步驟：酶對(duì)DNA鏈上不正常堿基的識(shí)別與切除，

酶對(duì)已切除區(qū)域的重新合成，酶對(duì)剩下切口的修補(bǔ)。

27.一種主要的DNA修復(fù)途徑稱,包括一系列酶，它們都

能識(shí)別并切去DNA上不正常堿基。

28.途徑可以切去任何造成DNA雙螺旋大片段改變的DNA傷害。

29.大腸桿菌中，任何由于DNA傷害造成的DNA復(fù)制障礙都會(huì)誘導(dǎo)的

信號(hào)?，即答應(yīng)跨過(guò)障礙進(jìn)行復(fù)制，給細(xì)胞一個(gè)生存的機(jī)會(huì)。

30.在中，基因交換發(fā)生在同源DNA序列間，最常見是發(fā)生在同一染色

體的兩個(gè)拷貝間。

31.在交換區(qū)域，一個(gè)DNA分子的一條鏈與另一個(gè)DNA分子的一條鏈相互配對(duì)，在兩

個(gè)雙螺旋間形成一個(gè)。

32.通過(guò),兩個(gè)單鏈的互補(bǔ)DNA分子一起形成一個(gè)完全雙鏈螺

旋，人們認(rèn)為這個(gè)反應(yīng)從一個(gè)慢的步驟開始。

33.大腸桿菌的染色體配對(duì)需要；它與單鏈DNA結(jié)合并使同源雙鏈

DNA與之配對(duì)。

34.一樣性重組的主要中間體是,也用它的發(fā)覺(jué)者名字命名

為。

35.產(chǎn)生單個(gè)堿基變化的突變叫突變，如果堿基的改變產(chǎn)生一個(gè)并不改變

氨基酸殘基編碼的,并且不會(huì)造成什么影響，這就是突

變。如果改變了氨基酸殘基的密碼，這就是突變。這種突變對(duì)蛋白質(zhì)

功能影響程度要根據(jù)被改變的氨基酸殘基在蛋白質(zhì)或結(jié)構(gòu)中

的重要程度，或是與酶的的密切性來(lái)決定，活性變化

范疇可從到接近正常。

36.一種由于蛋白質(zhì)序列中丟失了殘基引起的突變將會(huì)阻止

的形成，這種蛋白質(zhì)更容易.如果在_____________溫度是穩(wěn)固

的而在_________________溫度是不穩(wěn)固的，將它稱為突變，是

突變的一個(gè)例子。

37.無(wú)義突變是將一種氨基酸的轉(zhuǎn)變成密碼子，結(jié)果使

蛋白質(zhì)鏈.一個(gè)堿基的插入或叫突變。由

于三聯(lián)的移動(dòng)，突變位置______________的整個(gè)氨基酸序列都會(huì)被

改變。上述兩種類型的突變(插入和缺失)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)同的不

同，通常是完全________________。

38.下面所列的是由突變而產(chǎn)生的一些非常表型(A),同時(shí)也列出了表型由突變而造成

的缺陷的可能原因(B)。請(qǐng)盡可能地將A項(xiàng)所列的非常表型同B項(xiàng)所列的可能原

因配對(duì)。

A非常表型：B缺陷可能顯現(xiàn)在:

(a)細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)缺陷型(t)合成途徑

(b)細(xì)菌溫度敏銳突變體(u)降解途徑

(c)細(xì)菌的誘導(dǎo)酶變成組成酶(v)DNA的修復(fù)

(d)果蠅的紅眼變成白眼(w)轉(zhuǎn)錄控制

(e)果蠅形成兩個(gè)胸節(jié)(x)細(xì)胞分裂控制

(f)人的鐮刀狀細(xì)胞貧血癥(y)胚胎發(fā)育控制

(g)人的原嚇琳癥(z)蛋白質(zhì)的穩(wěn)固性

(h)人著色性干皮病

(i)苯丙酮尿癥

(j)人腫瘤的發(fā)生

39.下面各句是對(duì)不同誘變劑作用的敘述，寫出相應(yīng)情形的誘變劑的名稱：

(1)通過(guò)同雙螺旋的結(jié)合，引起變構(gòu)，并激活修復(fù)性內(nèi)切核酸酶的誘變劑

是：。

(2)引起總?cè)旧w的傷害如斷裂和轉(zhuǎn)位的誘變劑是：。

(3)取代正常的堿基而摻人到DNA中，并通過(guò)互變異構(gòu)引起復(fù)制錯(cuò)誤的誘變劑是:

(4)只能夠除去胞喀咤和甲基胞口密咤的氨基基團(tuán)的誘變劑是：

(5)主要是引起同一條鏈上的相鄰喀嚏間的交聯(lián)的誘變劑是：

(6)主要是在DNA雙螺旋的形變和鏈的錯(cuò)排過(guò)程中引起插入或缺失的誘變劑是：

(7)可以除去DNA中任何一個(gè)帶有氨基基團(tuán)的堿基上氨基基團(tuán)的誘變劑

是：。

40.據(jù)估量，單倍體人基因組包括50000個(gè)基因，如果每個(gè)世代每個(gè)基因的突變率為

5X10t,那么，每個(gè)個(gè)體中存在剛產(chǎn)生的突變。

41.DNA中兩種常見的自發(fā)突變是由于腺喋吟、鳥噤吟與脫氧核糖間的N-糖基連接斷

裂而導(dǎo)致的和使胞喀咤變?yōu)槟蛏み宥鴮?dǎo)致的。

42.能夠誘導(dǎo)操縱子但不是代謝底物的化合物稱為誘導(dǎo)物。能夠誘導(dǎo)乳糖

操縱子的化合物就是其中一例。這種化合物同蛋白

質(zhì)結(jié)合，并使之與分離。乳糖操縱子的體內(nèi)功能性誘導(dǎo)物

是o

43.色氨酸是一種調(diào)劑分子，被視為。它與一種蛋白質(zhì)結(jié)合形

成。乳糖操縱子和色氨酸操縱于是兩個(gè)控制的例

子。cAMP-CAP蛋白通過(guò)控制起作用。色氨酸操縱子受另一種系

統(tǒng)一的調(diào)控，它涉及到第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因被轉(zhuǎn)錄前的轉(zhuǎn)錄。

44.負(fù)責(zé)把RNA轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA分子的酶可以說(shuō)明由引起

的永久性基因轉(zhuǎn)變。

45.利用自己的位點(diǎn)專一重組酶把自己從寄主基因組中的一個(gè)地方移到另一地方的遺

傳元件叫，也叫作。

46.酵母的Tyl元件是一種,它的轉(zhuǎn)座需一段完整RNA轉(zhuǎn)錄物的合

成，這個(gè)轉(zhuǎn)錄物又被復(fù)制成一個(gè)雙螺旋DNA,隨后被整合到一個(gè)新的染色體位置。

47.真核生物的mRNA加工過(guò)程中，5'端加上,在3'端加上,后

者由催化。如果被轉(zhuǎn)錄基因是不連續(xù)的，那么，一定要被切

除，并通過(guò)過(guò)程將連接在一起。這個(gè)過(guò)程涉及許多

RNA分子，如U1和U2等，它們被統(tǒng)稱為-它們分別與一組蛋白質(zhì)結(jié)

合形成,并進(jìn)一步地組成40s或60s的結(jié)構(gòu)，

叫”

48.膠原蛋白通過(guò)在不同的脯氨酸殘基上添加基團(tuán)而被化學(xué)修飾。

這個(gè)反應(yīng)是由兩種酶催化的，它們是和。其他的一些

蛋白質(zhì)被磷酸化。蛋白質(zhì)上添加寡聚糖的過(guò)程叫,

而添加脂肪酸鏈則叫。"寡聚糖是一種同或

殘基上氧連接的寡聚糖，而N—寡聚糖是通過(guò)與

上的氮原子連接而成。N一寡聚糖又是從同一種叫做脂的前體寡

聚糖衍生而來(lái)。

49.阿黑皮素原是被切割以后可以產(chǎn)生很多活性蛋白質(zhì)的一個(gè)例子。

如之類的RNA病毒也能合成類似的結(jié)構(gòu)物。蛋白水解過(guò)程也

涉及細(xì)胞外毒素的活性，如蜜蜂的和動(dòng)物激素的活性，如

和,

50.可使每個(gè)氨基酸和它相對(duì)應(yīng)的tRNA分子相偶聯(lián)形成一個(gè)分

子。

51.包括兩個(gè)tRNA分子的結(jié)合位點(diǎn)：,即P位點(diǎn)，緊密結(jié)合

與多肽鏈延伸尾端連接的tRNA分子，和,即A位點(diǎn)，結(jié)合帶有一個(gè)氨

基酸的tRNA分子。

52.催化肽鍵的形成，一樣認(rèn)為這個(gè)催化反應(yīng)是由核糖體大亞基上

的分子介導(dǎo)的。

53.開釋因子蛋白與核糖體上A位點(diǎn)的密碼結(jié)合，導(dǎo)致肽基轉(zhuǎn)移酶水

解連接新生多肽與tRNA分子的化學(xué)鍵。

54.任何mRNA序列能以三種的形式被翻譯，而且每一種都對(duì)應(yīng)一種

完全不同的多肽鏈。

55.蛋白質(zhì)合成的起始過(guò)程很復(fù)雜，包括一系列被催化的步驟。

56.在所有細(xì)胞中，都有一種特別的識(shí)別密碼子

AUG,它攜帶一種特別的氨基酸，即,作為蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸。

57.核糖體沿著mRNA前進(jìn)，它需要另一個(gè)延伸因子,這一步需要的

水解。當(dāng)核糖體遇到終止密碼(、、)的時(shí)候，延長(zhǎng)作用

終止，核糖體和新合成的多肽被開釋出來(lái)。翻譯的最后一步被稱為,并

且需要一套因子。

58.基因工程是年代發(fā)展起來(lái)的遺傳學(xué)的一個(gè)分支學(xué)科?；蚬こ碳夹g(shù)的

產(chǎn)生，使人們從簡(jiǎn)單地利用現(xiàn)存的生物資源進(jìn)行諸如發(fā)酵、釀酒、制醋和醬油等

傳統(tǒng)的生物技術(shù)時(shí)代，走向的時(shí)代。

59.隨著基因工程技術(shù)的產(chǎn)生和發(fā)展，人類可以通過(guò)、

和三種主要生產(chǎn)方式，大量取得過(guò)去只能從組織中提取的珍稀蛋

白，用于研究或治病。

60.Cohen等在年構(gòu)建了第一個(gè)有功能的重組DNA分子。

61.基因工程的兩個(gè)基本特點(diǎn)是：(1)，(2)o

62.基因克隆中三個(gè)基本要點(diǎn)是：；和。

63.年，美國(guó)斯坦福大學(xué)等上在發(fā)表了題為：

“將新的遺傳信息插入SV40病毒DNA的生物化學(xué)方法：含有人噬菌體基因和

七co"半乳糖操縱子的環(huán)狀SV40DNA”的論文，標(biāo)志著基因工程技術(shù)的產(chǎn)生。這

一工作具有劃時(shí)代的意義，但是他們并沒(méi)有。

64.克隆基因的主要目的有四：(1)；(2)；

(3):(4)。

65.嚴(yán)格地說(shuō)限制性內(nèi)切核酸酶(restrictionendonuclease)是指已被證明是

的酶?；蚬こ讨邪涯切┚哂凶R(shí)別__________________________________________

內(nèi)切核酸酶統(tǒng)稱為限制性內(nèi)切核酸酶。

66.年Luria和Human在T偶數(shù)噬菌體對(duì)大腸桿菌感染實(shí)驗(yàn)中首次發(fā)覺(jué)了細(xì)

菌的現(xiàn)象o

67.1970年，Smith和wilcox從流感嗜血桿菌中分離到一種限制酶，能夠特異性的切

割DNA,這個(gè)酶后來(lái)被命名為,這是第一個(gè)分離到的U類限制

性內(nèi)切核酸酶。

68.通過(guò)比較用不同組合的限制性內(nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大

小的片段，可以構(gòu)建顯示該區(qū)域各限制性內(nèi)切核酸酶切點(diǎn)相互位置的。

69.II類限制性內(nèi)切核酸酶分子量較小.一樣在20?40kDa,通常由亞基所

組成。它們的作用底物為雙鏈DNA,極少數(shù)H類酶也可作用于單鏈DNA,或DNA

/RNA雜合雙鏈。這類酶的專一性強(qiáng)，它不僅對(duì)酶切點(diǎn)鄰近的兩個(gè)堿基有嚴(yán)格要求，

而且對(duì)更遠(yuǎn)的堿基也有要求，因此，II類前既具有專一性，也具有專

一性，一樣在識(shí)別序列內(nèi)切割。切割的方式有,產(chǎn)生末端的

DNA片段或的DNA片段。作用時(shí)需要作輔助因子，但不需要

和.

70.完全的回文序列具有兩個(gè)基本的特點(diǎn)，就是：(1)

________________(2)_______________________________________________

71.H類限制性內(nèi)切核酸酶一樣識(shí)別個(gè)堿基，也有識(shí)別多序列的限制性

內(nèi)切核酸酶。根據(jù)對(duì)限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別序列的分析，限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別

序列具有傾向，即它們?cè)谧R(shí)別序列中含量較高。

72.%.K是I類限制性內(nèi)切核酸酶，分子組成是a262丫，分子量是300kDa。在這些

亞基中，a亞基具有作用；B亞基具有的活性；

丫亞基的作用則是o

73.個(gè)體之間DNA限制性片段長(zhǎng)度的差異叫。

74.限制性內(nèi)切核酸前是按屬名和種名相結(jié)合的原則命名的，第一個(gè)大寫字母取自

，第二、三兩個(gè)字母取自,第四個(gè)

字母則用表示。

75.限制性內(nèi)切核酸酶AcyI識(shí)別的序列是5'—GRCGYG-3',其中R,

Y。

76.在酶切反應(yīng)管加完各種反應(yīng)物后，需要離心2秒鐘，其目的是和

77.部分酶切可采取的措施有：(1)(2)

(3)等。

78.第一個(gè)分離的限制性內(nèi)切核酸酶差異是；而第一個(gè)用于構(gòu)建重組

體的限制性內(nèi)切核酸酶是。

79.限制性內(nèi)切核酸酶/冰I和“aelll的來(lái)源不同，但識(shí)別的序列都是,

它們屬于?

80.由于DNA是由4種堿基組成的，所以任何限制性內(nèi)切核酸酶的切割頻率的理論值

應(yīng)該是。

81SalI和NotI都是哺乳動(dòng)物中識(shí)別序列稀有的酶，在哺乳動(dòng)物基因組的5kb片

段中，找到NotI切點(diǎn)的概率是o

82.部分酶切是指控制反應(yīng)條件，使得酶在DNA序列上的識(shí)別位點(diǎn)只有部分得到切害U，

它的理論依據(jù)是。

83.I類限制酶識(shí)別DNA的位點(diǎn)和切割的DNA位點(diǎn)是不同的，切割位點(diǎn)的識(shí)別結(jié)合有

兩種模型，一種是,另一種是0

84.限制性內(nèi)切核酸酶通常儲(chǔ)存在濃度的甘油溶液中。

85.連接酶(ligase)是一類用于核酸分子連接形成鍵的核酸合成酶，有DNA

連接酶和RNA連接酶之分。

86.原核生物主要有兩種類型的DNA連接酶：E.co//DNA連接酶和T4DNA連接酶。

基因工程中使用的主要是T4DNA連接酶，它是從T4噬菌體感染的￡.c。〃中分

離的一種單鏈多肽酶，分子量為kDa,由T4噬菌體基因編

碼。E.coliDNA連接酶是由大腸桿菌基因編碼，也是一條多肽鏈的

單體，分子量為kDa。這兩種DNA連接酶有兩個(gè)重要的差異：

第一是它們?cè)诖呋磻?yīng)中所用的能量來(lái)源不同，T4DNA連接酶用,

而E.coliDNA連接酶則用作為能源。第二是它們催化平末

端連接的能力不同，在正常情形下只有T4DNA連接酶能夠連接平末端，&co〃DNA

連接酶則不能。即使是調(diào)整反應(yīng)條件，E.coliDNA連接酶催化平末端的連接效

率也只有T4DNA連接酶的o

87.DNA連接酶的單位通常用Weiss單位表示，一個(gè)Weiss單位是：

88.DNA聚合酶I是在1965年從大腸桿菌細(xì)胞中分離的，所以

又稱為聚合酶。該酶由大腸桿菌基因編碼，

是一種單鏈球蛋白，分子量為109kDa,酶蛋白中含有一個(gè)Zn原子。

89.T4DNA聚合酶與Klenow酶一樣，具有5'-3'聚合酶和3'-5'外切酶兩種活

性，但是它的3'-5'外切酶的活性比Klenow酶強(qiáng)倍。該酶的3'一

5'外切活性既能作用于單鏈DNA也能作用于雙鏈DNA,不過(guò)作用于

鏈的活性要強(qiáng)于鏈。

90.反向轉(zhuǎn)錄酶（reversetranscriptase）是由kDa和kDa兩個(gè)亞

單位組成的二聚體，作用時(shí)以RNA為模板合成DNA。

91.從小牛胸腺中分離純化的末端轉(zhuǎn)移酶催化的基本反應(yīng)是將,

同時(shí)開釋出游離的無(wú)機(jī)磷。催化反應(yīng)時(shí)不需，但

需要引物，單鏈DNA是最好的引物，單鏈DNA受體的長(zhǎng)度最短需有個(gè)

dNTPo具有3'突出末端的雙鏈DNA也是較好的反應(yīng)底物。二價(jià)離子和DNA末端

狀態(tài)對(duì)催化反應(yīng)影響較大，但是用作為輔助離子，可以催化任何形

式的末端（突出的、隱含的、平齊的）加接單核甘酸，但突出的3'端效率較高。以

Mn*/Mg2+作為輔助因子，只能在單鏈DNA或雙鏈DNA的3'突出端加尾。

92.S1核酸酶（SInuclease）是從米曲霉oryzae）中分離純化的一種含

的金屬蛋白，分子量為32kDa,是一種耐熱的酶（37—65℃）。

93.在S1保護(hù)實(shí)驗(yàn)中，S1切割的溫度有兩種：20℃和45℃,這是因?yàn)椋涸?0℃時(shí)，

_______________________________________________________________;在45℃時(shí)，

____________________________________________________________O

94.技術(shù)可以用來(lái)鑒定DNA分子中與DNA結(jié)合蛋白相互作用

的特定序列。

95.真核生物有兩種DNA連接酶，連接酶I主要是參與,而連接酶

I【則是參與o

96.T4RNA連接酶是1972年發(fā)覺(jué)的，并于1977年純化。該醐是由T4噬菌體基因

編碼，作用是不需要模板。它在體內(nèi)的作用是參與T4噬菌體不

參與DNA合成的連接，但在中可能有作用。

97.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用切割DNA聚合酶I得到的分子

量為76KDa的大片段，具有兩種酶活性：(1).

(2)的活性),

98.反向轉(zhuǎn)錄酶除具有以DNA和RNA為摸板合成DNA的5'-3'合成酶的活性外，

還具有4種酶的活性：(1)；(2)；

(3)；(4)。

99.RNA連接酶作用時(shí)除了需要ATP和.外，還需要。

100.DNA聚合酶I是一種單體酶，分子量為109kDa,它含有金屬離

子。

101.為了防止DNA的自身環(huán)化，可用脫去雙

鏈DNA。

102.T4單核甘酸激酶進(jìn)行DNA片段的5'端標(biāo)記時(shí)，主要是通過(guò)兩種反應(yīng)即

和。

103.CIP催化脫磷酸時(shí)有兩種最適溫度，一種是37℃,適用于端脫磷酸；

另一種是56℃,適用于端脫磷酸。

104.入外切核酸醐可從雙鏈DNA的5'端依次切下5'單核背酸，但對(duì)不同末端的底

物來(lái)說(shuō)，作用效率不同，最高，最低。

105.EGTA是離子螯合劑。

106.測(cè)序酶是修飾了的T7DNA聚合醐，它只有酶的活性，而沒(méi)

有酶的活性。

107.切口移位(nicktranslation)法標(biāo)記DNA的基本原理在于利用的

和的作用?

108.欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈DNA分子轉(zhuǎn)變成平末端的雙鏈形式，通?？?/p>

采用或。

109.反轉(zhuǎn)錄酶除了催化DNA的合成外，還具有的作用，可以將

DNA-RNA雜種雙鏈中的水解掉。

110.基因工程中有3種主要類型的載體：、、

111.由于不同構(gòu)型的DNA插入EB的量不同，它們?cè)诃傊悄z電泳中的遷移率也不

同，SCDNA的泳動(dòng)速度,OCDNA泳動(dòng)速度,LDNA

居中，通過(guò)凝膠電泳和EB染色的方法可將不同構(gòu)型的DNA分別開來(lái)。

112.質(zhì)粒的復(fù)制像染色體的復(fù)制一樣，是從特定的起始點(diǎn)區(qū)開始的。然而，質(zhì)粒的復(fù)

制可以是向的、或是向的。在雜種質(zhì)粒中，每個(gè)復(fù)制子

的起點(diǎn)都可以有效地加以使用。但是在正常條件下只有一個(gè)起點(diǎn)可能居支配地

位。并認(rèn)為：當(dāng)某些具有低拷貝數(shù)的嚴(yán)緊型質(zhì)粒與放松性質(zhì)粒融合后，在正常情

形下的復(fù)制起點(diǎn)可能被關(guān)閉。

113.就克隆一個(gè)基因（DNA片段）來(lái)說(shuō)，最簡(jiǎn)單的質(zhì)粒載體也必需包括三個(gè)部

:、、。

另外，一個(gè)理想的質(zhì)粒載體必須具有低分子量。

114.如果兩個(gè)質(zhì)粒不能穩(wěn)固地共存于同一個(gè)寄主細(xì)胞中，則屬于群，

這是因?yàn)樗鼈兊乃隆?/p>

115.質(zhì)?？截悢?shù)是指細(xì)胞中o

116.復(fù)制子由三部分組成：⑴⑵⑶。

117.酵母的2nm質(zhì)粒有,可以配對(duì)形成啞鈴結(jié)構(gòu)。

118.一個(gè)帶有質(zhì)粒的細(xì)菌在有EB的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后，一部分細(xì)胞中已測(cè)不

出質(zhì)粒，這種現(xiàn)象叫。

119.pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，它的復(fù)制子來(lái)源于,它的四環(huán)

素抗性基因來(lái)自于，它的氨茉青霉素抗性基因來(lái)自于o

120.質(zhì)粒的消逝同染色體基因的突變是不同的，前者不能復(fù)原，后者可以通過(guò)復(fù)

原該基因的性狀。

121.ColEl質(zhì)粒復(fù)制的起始需要三種酶，即、

和。

122.YAC的最大容載能力是,BAC載體的最大容載能力是。

123.pSC101是一種復(fù)制的質(zhì)粒。

124.把那些沒(méi)有可檢測(cè)表型的質(zhì)粒稱為.

125.轉(zhuǎn)座子主要由下列部分組成：（1）（2）

（3）?

126.pUC18質(zhì)粒是目前使用較為廣泛的載體。pUC系列的載體是通過(guò)

和兩種質(zhì)粒改造而來(lái)。它的復(fù)制子來(lái)自,Amp

抗性基因則是來(lái)自。

127.在基因型的表示中，符號(hào)Q表示；符號(hào)A表示。

128.噬菌體之所以被選為基因工程載體，主要有兩方面的原因：

是:二是。

129.第一個(gè)報(bào)道的全測(cè)序的單鏈DNA噬菌體是6X174,DNA長(zhǎng)5386個(gè)堿基對(duì)，共個(gè)

基因，為一環(huán)狀DNA分子，基因組的最大特點(diǎn)是。

130.入噬菌體的基因組DNA為kb,有多個(gè)基因。在體內(nèi)，

它有兩種復(fù)制方式，擴(kuò)增時(shí)（早期復(fù)制）按復(fù)制，成熟包裝（晚期

復(fù)制）則是按復(fù)制。它有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，進(jìn)行向復(fù)制。

入噬菌體的DNA既可以以線性存在又可以環(huán)狀形式存在，并且能夠自然成環(huán)。

其原因主要是在X噬菌體線性DNA分子的兩端各有一個(gè)個(gè)堿基組成的

天然粘性末端。這種粘性末端可以自然成環(huán)。成環(huán)后的粘性末端部位就叫做

位點(diǎn)。

131.根據(jù)噬菌體的包裝能力，將野生型人噬菌體的基因組DNA改造成插入型載體，該

載體的最小分子大小約為kb,插入的外源片段最大不超過(guò)kb。

132.野生型的Ml3不適合用作基因工程載體，主要原因是

和。

133.粘粒(cosmid)是質(zhì)粒-噬菌體雜合載體，它的復(fù)制子來(lái)自、cos位

點(diǎn)序列來(lái)自,最大的克隆片段達(dá)到kb。

134.有兩類改造型的人噬菌體載體，即插入型和取代型。從酶切點(diǎn)看，插入型為

個(gè)，取代型為個(gè)。

135.野生型的人噬菌體DNA不宜作為基因工程載體，原因是：(1)

(2)(3)0

136.M13單鏈?zhǔn)删w的復(fù)制分為三個(gè)階段：(1)(2)

(3)。

137.噬菌粒是由質(zhì)粒和噬菌體DNA共同構(gòu)成的，其中來(lái)自質(zhì)粒的主要結(jié)構(gòu)

是,而來(lái)自噬菌體的主要結(jié)構(gòu)是o

138.M13單鏈?zhǔn)删w基因2和基因4之間的IG區(qū)有三個(gè)最重要的功能，即(1)

(2)(3)。

139.野生型的M13有10個(gè)基因，分為三個(gè)功能集團(tuán)，其中與復(fù)制有關(guān)的兩個(gè)基因是：

和.

140.以入噬菌體載體和粘粒載體構(gòu)建文庫(kù)時(shí)，起始DNA的長(zhǎng)度是不同的，前者為

kb后者為kbo

141.入噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長(zhǎng)度應(yīng)在噬菌體

基因組的的范疇內(nèi)。

142.不同的宿主細(xì)胞其核酸酶的活性是不同的，如細(xì)菌中的HB101菌株及JM系列的

宿主菌所含核酸酶的活性比DHLLE392等菌株。

143.SDS是分離DNA經(jīng)常用的一種陰離子除垢劑，它有四個(gè)作用：

(1)；

(2)；

(3)；

(4)o

144.酚是蛋白變性劑，用酚抽提細(xì)胞DNA時(shí)，具有兩方面的作用：(1)

(2)o

145.用酚一氯仿抽提DNA時(shí)，通常要在氯仿或酚一氯仿中加少許異戊醇。這是因?yàn)椋?/p>

異戊醇o(jì)另外，異戊醇有助

于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維

持穩(wěn)固。

146.同其他水解蛋白酶相比，蛋白水解酶K具有兩個(gè)顯著的優(yōu)點(diǎn)：(1)

(2)。

147.在分離DNA時(shí)要使用金屬離子整合劑，如EDTA和檸檬酸鈉等，其目的是

148.用乙醇沉淀DNA時(shí)，通常要在DNA溶液中加入單價(jià)的陽(yáng)離子，如NaCl和NaAc,

其目的是:

149.濃縮DNA的方法有：(1);(2);(3)

(4)。

150.通常可在三種溫度下儲(chǔ)存DNA:4?5℃、一20℃、—70℃,其中以最好。

151.用于分離質(zhì)粒DNA的細(xì)菌培養(yǎng)濃度達(dá)到0.8X10,細(xì)胞/ml時(shí)，即可通過(guò)離心收

集菌體。收集菌體使用定角轉(zhuǎn)子，離心的速度以為宜。

152.引物在基因工程中至少有4個(gè)方面的用途：(1);

(2);(3);(4)。

153.Clark發(fā)覺(jué)用TagDNA聚合酶得到的PCR反應(yīng)產(chǎn)物不是平末端，而是有一個(gè)突出

堿基末端的雙鏈DNA分子。根據(jù)這一發(fā)覺(jué)設(shè)計(jì)了克隆PCR產(chǎn)物的。

154.在用SDS分離DNA時(shí)，要注意SDS的濃度，0.1%和1級(jí)的SDS的作用成效是

不同的，前者,后者o

155.堿解法和清亮裂解法是分離質(zhì)粒的兩種常用的方法，二者的原理是不同的，前者

是根據(jù),后者則是根據(jù)

156.在DNA分離過(guò)程中，通常要進(jìn)行透析，其目的是。

157.在分離質(zhì)粒DNA的菌體培養(yǎng)過(guò)程中，加入氯霉素有兩個(gè)好處：(1)

(2)?

158.在DNA分離過(guò)程中造成DNA分子斷裂的因素很多，主要有(1)

(2)(3)o

159.在分離DNA時(shí)，常用法、法、法

及法等方法去除蛋白質(zhì)。

160.在DNA儲(chǔ)存液中，常加一滴氯仿，主要是起作用。

161.按照人們的意愿，改變基因中堿基的組成，以達(dá)到的技術(shù)

稱為o

162.1955年，英國(guó)劍橋大學(xué)的第一個(gè)合成了具有3',5'一磷酸二

酯鍵的TpT和pTpT,為此獲得了年的諾貝爾獎(jiǎng)。

163.可以用除去DNA溶液中的氯化絕。

164.在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在

165.在簡(jiǎn)并引物的設(shè)計(jì)中，常常要用到di(次黃喋吟)，原因是

166.在分離DNA時(shí)，要戴手套操作，原因是。

167.乙醇沉淀DNA的原理是?

168.簡(jiǎn)并引物PCR主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計(jì)引物來(lái)合成

相應(yīng)的基因。

169.超離心法純化質(zhì)粒DNA時(shí)，選用CsCl作介質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是：

(1)

(2),從而使不同分子量的DNA分子得以分開。

170.缺失突變的原理是缺失了_________________________________________________

171.用核酸醐Bal31作系列缺失突變，得到的產(chǎn)物是:

172.SSC是由NaCl和檸檬酸鈉組成的試劑，其中NaCl的作用是使,而

檸檬酸鈉的作用是o