2025屆貴州六盤水育才中學高考生物押題試卷含解析

2025屆貴州六盤水育才中學高考生物押題試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．某同學做了以下實驗：取A、B兩支試管，在A中加入煮熟的蠶豆子葉，B中加入發(fā)芽的蠶豆子葉。在兩試管中分別加入亞甲基藍溶液（亞甲基藍氧化態(tài)為藍色，還原態(tài)為無色），一段時間后倒出溶液，兩試管中的子葉都呈藍色。然后兩試管分別加水淹沒子葉，抽氣，在水面覆蓋適量石蠟油，適宜溫度下保溫一段時間后，A管子葉藍色深度不變，B管子葉藍色變淺。取出兩管子葉放在濾紙上一段時間，A管子葉藍色深度不變，B管子葉藍色深度一定程度恢復(fù)。下列分析不合理的是（）A．該實驗中抽氣并在水面覆蓋適量石蠟油的目的是隔絕空氣，制造無氧環(huán)境B．保溫后A管子葉藍色深度不變的原因是高溫導致酶失活，細胞無呼吸作用C．保溫后B管子葉藍色變淺的原因是亞甲基藍被無氧呼吸產(chǎn)生的[H]還原D．濾紙上B管子葉藍色深度恢復(fù)的原因是子葉進行有氧呼吸將亞甲基藍氧化2．人體細胞內(nèi)的Lon蛋白酶能分解損壞的蛋白質(zhì)，保護并維持線粒體的功能，但是隨著細胞的衰老，Lon蛋白酶的含量下降。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．衰老的細胞水分減少導致細胞核的體積縮小B．衰老的細胞內(nèi)線粒體的功能下降，消耗的氧氣增多C．衰老的細胞細胞膜的通透性改變、多種酶的活性降低D．靜脈注射Lon蛋白酶能增強細胞分解損壞的蛋白質(zhì)的能力，延緩細胞衰老3．下列關(guān)于實驗的敘述正確的是A．觀察人體口腔上皮細胞的線粒體時，用健那綠染色前需要先用鹽酸處理B．在“生物體維持pH穩(wěn)定的機制”的實驗中，清水組和緩沖液組都可作為對照組C．不可用綠色植物成熟葉肉細胞進行細胞失水和吸水的觀察實驗D．可用澄清的石灰水檢驗CO2的生成，來探究酵母菌的呼吸方式4．圖是某基因的局部示意圖，下列敘述正確的是（）A．ACA可稱為一個密碼子B．DNA分子的多樣性與①②有關(guān)C．限制酶切割該基因時應(yīng)作用于⑤處D．對該基因進行PCR擴增時，解旋酶作用于④處5．某實驗小組為了探究細胞膜的通透性，將小鼠肝細胞在體外培養(yǎng)一段時間后，檢測培養(yǎng)液中的氨基酸、葡萄糖和尿素含量（在原培養(yǎng)液中沒有尿素），發(fā)現(xiàn)它們的含量發(fā)生了明顯的變化（如圖），以下分析合理的是（）A．隨培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)液中尿素含量升高，推測其是細胞代謝的產(chǎn)物B．隨培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)液中葡萄糖和氨基酸含量降低，這肯定是協(xié)助擴散的結(jié)果C．培養(yǎng)液中的氨基酸一定是協(xié)助擴散進入細胞，其主要作用是合成蛋白質(zhì)D．轉(zhuǎn)氨酶是肝細胞內(nèi)參與蛋白質(zhì)代謝的一類酶，正常情況下這類酶不會排出胞外，若在細胞培養(yǎng)液中檢測到該類酶，則一定是胞吐作用排出的6．某課題組為研究不同的植物生長調(diào)節(jié)劑對菠菜根系活力的影響，進行了相關(guān)實驗，結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）注：DA-6、CSN、NAA、IBA代表不同的植物生長調(diào)節(jié)劑A．植物生長調(diào)節(jié)劑具有容易合成。原料廣泛、效果穩(wěn)定等優(yōu)點B．實驗結(jié)果表明，植物生長調(diào)節(jié)劑對菠菜根系活力的作用具有兩重性C．實驗結(jié)果表明，不同植物生長調(diào)節(jié)劑對菠菜根系活力的影響有差異D．在實驗期間，隨處理時間延長，所有菠菜根系活力都表現(xiàn)為先增強后減弱的趨勢7．新型冠狀病毒刺突蛋白（spike）位于病毒囊膜表面，是已知最大的病毒表面蛋白。病毒通過刺突蛋白與宿主細胞受體結(jié)合進而進入宿主細胞。下列相關(guān)敘述，合理的是（）A．刺突蛋白在病毒的核糖體中合成B．用于消毒的醫(yī)用酒精可以使病毒表面蛋白脫水變性，從而使病毒失活C．病毒通過囊膜與細胞膜融合后以主動運輸方式進入宿主細胞D．只有人細胞膜上才有新型冠狀病毒的受體，所以它只感染人類8．（10分）新型冠狀病毒感染的肺炎疫情發(fā)生以來，全國人民同舟共濟、眾志成城，打贏了一場沒有硝煙的疫情阻擊戰(zhàn)，經(jīng)研究，該病毒是一種單股正鏈RNA病毒，其在宿主細胞內(nèi)的增殖過程如圖所示。下列說法中正確的是（）A．由圖示可知，＋RNA和-RNA上都含有決定氨基酸的密碼子B．過程②消耗的嘧啶核苷酸數(shù)等于過程④消耗的嘌呤核苷酸數(shù)C．可利用抗生素類藥物抑制新型冠狀病毒在宿主細胞內(nèi)的增殖D．新型冠狀病毒和HIV的增殖過程都需要RNA復(fù)制酶的作用二、非選擇題9．（10分）水稻穗粒數(shù)可影響水稻產(chǎn)量。研究者篩選到一株穗粒數(shù)異常突變體，并進行了相關(guān)研究。（1）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA序列，可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并隨機插入到被侵染植物的__________中，導致被插入的基因功能喪失。研究者用此方法構(gòu)建水稻突變體庫，并從中篩選到穗粒數(shù)異常突變體。（2）研究者分別用EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶處理突變體的總DNA，用HindⅢ處理野生型的總DNA，處理后進行電泳，使長短不同的DNA片段分離。電泳后的DNA與DNA分子探針（含放射性同位素標記的T-DNA片段）進行雜交，得到如圖所示放射性檢測結(jié)果。①由于雜交結(jié)果中_____________________，表明T-DNA成功插入到水稻染色體基因組中。（注：T-DNA上沒有EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶的酶切位點）②不同酶切結(jié)果，雜交帶的位置不同，這是由于_____________________________不同。③由實驗結(jié)果判斷突變體為T-DNA單個位點插入，依據(jù)是____________________。（3）研究者用某種限制酶處理突變體的DNA（如下圖所示），用_______將兩端的黏性末端連接成環(huán)，以此為模板，再利用圖中的引物________組合進行PCR，擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列。經(jīng)過與野生型水稻基因組序列比對，確定T-DNA插入了2號染色體上的B基因中。（4）研究發(fā)現(xiàn)，該突變體產(chǎn)量明顯低于野生型，據(jù)此推測B基因可能_____（填“促進”或“抑制”）水稻穗粒的形成。（5）育種工作者希望利用B基因，對近緣高品質(zhì)但穗粒數(shù)少的低產(chǎn)水稻品系2進行育種研究，以期提高其產(chǎn)量，下列思路最可行的是（_________）。a．對水稻品系2進行60Co照射，選取性狀優(yōu)良植株b．培育可以穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)入B基因的水稻品系2植株c．將此突變體與水稻品系2雜交，篩選具有優(yōu)良性狀的植株10．（14分）真核生物基因中通常有內(nèi)含子（位于編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)的非編碼DNA片段)，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機制。有人利用RT-PCR技術(shù)（mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA再進行PCR擴增)，獲得了牛的G基因，導入到大腸桿菌中，成功表達出G蛋白（一種免疫蛋白）。請回答下列問題：（1）RT-PCR過程需要的酶有_____________；在進行PCR擴增時需要設(shè)計_________種引物。（2）RT-PCR的產(chǎn)物經(jīng)過BamHⅠ、EcoRⅠ雙酶切后，與經(jīng)過同樣雙酶切得到的PBV載體連接，該操作程序?qū)儆赺________，也是基因工程的核心步驟。與單一酶切相比，雙酶切具有的優(yōu)點是________________（答出兩點）。（3）若要檢測G基因是否翻譯出G蛋白，可采用的分子水平的檢測方法是_________________。（4）有人從牛的基因組文庫中獲得了G基因，同樣以大腸桿菌作為受體細胞卻未得到G蛋白，其原因是________________。11．（14分）轉(zhuǎn)基因生物培育成功的關(guān)鍵是保證目的基因在受體中的正常表達或抑制特定基因的表達。在這個過程中，根據(jù)獲得的目的基因不同、采取的措施不同等，培育時選擇的方法也不相同。回答下列相關(guān)問題：（1）利用乳腺生物反應(yīng)器獲得胰島素的過程中，為保證通過反轉(zhuǎn)錄法獲得的胰島素基因能正常表達，在構(gòu)建基因表達載體時需將獲得的含目的基因的片段連接在__________之間，然后通過_________的方法將基因表達載體導入__________________中。（2）為降低耐除草劑轉(zhuǎn)基因水稻通過花粉傳播而引起的環(huán)境生物安全問題，一是利用轉(zhuǎn)入的耐除草劑基因的位置進行控制，如__________________；二是將耐除草劑基因拆分為兩部分，只有兩部分片段同時存在才具有耐除草劑的特性，請?zhí)岢隹尚械拇胧篲___________________________________。（3）下圖中插入顛倒的轉(zhuǎn)錄區(qū)的目的是__________________，其原理可能是顛倒的轉(zhuǎn)錄區(qū)與轉(zhuǎn)錄區(qū)形成的RNA通過_________原則形成雙鏈而無法使轉(zhuǎn)錄區(qū)形成的RNA與核糖體結(jié)合。12．酸奶及果汁的生產(chǎn)過程中常用到生物技術(shù)，請回答有關(guān)問題：（1）酸奶是以牛奶為原料，經(jīng)過消毒、添加有益菌發(fā)酵后，再冷卻灌裝的一種營養(yǎng)保健品。生產(chǎn)過程中把溫度控制在80℃將鮮牛奶煮15min，采用的是_______方法，不僅能有效地消毒，而且使牛奶中營養(yǎng)成分不被破壞。起發(fā)酵作用的微生物主要是_______，發(fā)酵中牛奶相當于其培養(yǎng)基，就環(huán)境因素來說，不僅溫度要適宜且還需要創(chuàng)造_______環(huán)境。（2）某種果汁生產(chǎn)過程中，如用果膠酶處理可顯著增加產(chǎn)量，其主要原因是果膠酶水解果膠使___________。（3）人們通常從腐爛的水果上分離產(chǎn)果膠酶的微生物，其依據(jù)是：_______。為了獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落，通常采用的分離方法是_______。（4）為了提高果膠酶的穩(wěn)定性和處理的連續(xù)性，可采用_______技術(shù)處理果膠酶，如常用的吸附法。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

該題是一道關(guān)于呼吸作用實驗分析題，呼吸作用的實質(zhì)是氧化分解有機物，釋放能量。有氧呼吸的總反應(yīng)式：C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+能量（大量）；無氧呼吸的總反應(yīng)式：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量（少量）。【詳解】A、實驗中加水淹沒子葉、抽氣，在水面上覆蓋適量石蠟油，創(chuàng)設(shè)無氧環(huán)境，A正確；B、A管放入的是煮熟的蠶豆子葉，高溫處理子葉細胞酶已失活，不能進行呼吸作用，所以A管子葉37℃保溫后不變色，B正確；C、保溫后B管子葉細胞進行無氧呼吸，產(chǎn)生的[H]能使亞甲基藍還原，B管子葉藍色變淺，C正確；D、取出子葉放在濾紙上，創(chuàng)設(shè)有氧環(huán)境，通過子葉有氧呼吸將還原的亞甲基藍氧化，使濾紙上B管子葉藍色變深，D錯誤。故選D?！军c睛】本實驗將實驗過程和實驗結(jié)果全部呈現(xiàn)出來，要求學生分析A、B兩試管中的子葉顏色發(fā)生變化及不變色的原因。另外，題干中有“亞甲基藍氧化態(tài)為藍色，還原態(tài)后為無色”的信息提示，能起到引導學生辨別答題方向的作用。2、C【解析】

衰老細胞的特征：（1）細胞內(nèi)水分減少，細胞萎縮，體積變小，但細胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；（2）細胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運輸功能降低；（3）細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。【詳解】A、衰老的細胞細胞核體積增大，A錯誤；B、衰老的細胞內(nèi)線粒體的功能下降，消耗的氧氣減少，B錯誤；C、衰老的細胞細胞膜的通透性改變，物質(zhì)運輸功能降低，多種酶的活性降低，C正確；D、Lon蛋白酶在細胞內(nèi)發(fā)揮作用，靜脈注射Lon蛋白酶屬于生物大分子，不進入細胞內(nèi)發(fā)揮作用，D錯誤。故選C。3、B【解析】健那綠屬于活體染色劑，染色前不需要用鹽酸處理，A項錯誤；在“生物體維持pH穩(wěn)定的機制”的實驗中，清水組和緩沖液組相互對照，都可作為對照組，B項正確；綠色植物成熟葉肉細胞的葉綠體位于原生質(zhì)層中，可根據(jù)細胞中綠色的位置判斷質(zhì)壁分離及復(fù)原，C項錯誤；酵母菌有氧和無氧條件下均可以產(chǎn)生二氧化碳，不能用澄清石灰水檢驗CO2是否生成來探究酵母菌的呼吸方式，但可以用澄清石灰水的渾濁情況判斷二氧化碳生成的多少，進而判斷酵母菌的呼吸方式，D項錯誤。4、C【解析】

分析題圖：圖中為某基因的局部示意圖，其中①為磷酸，②為脫氧核糖，③為含氮堿基，④為氫鍵，⑤為脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，⑥為核苷酸內(nèi)部的化學鍵。【詳解】A、密碼子位于mRNA上，因此圖中ACA不能稱為一個密碼子，A錯誤；B、DNA分子的穩(wěn)定性與①②有關(guān)，多樣性與③的排列順序有關(guān)，B錯誤；C、限制酶作用與⑤磷酸二酯鍵，C正確；D、對該基因進行PCR擴增時，不需要使用解旋酶，通過加熱使④氫鍵斷裂，D錯誤。故選C。5、A【解析】

由圖可知，隨培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)液中葡萄糖和氨基酸含量降低，尿素含量增加。尿素是細胞中脫氨基作用的產(chǎn)物，通過細胞代謝產(chǎn)生?！驹斀狻緼、據(jù)圖可知，隨著時間的延長，葡萄糖和氨基酸的含量下降，尿素的含量增加；開始時培養(yǎng)液沒有尿素，培養(yǎng)一段時間后出現(xiàn)尿素，說明尿素是細胞的代謝產(chǎn)物，A正確；B、培養(yǎng)液中葡萄糖和氨基酸含量降低，這是主動運輸?shù)慕Y(jié)果，B錯誤；C、培養(yǎng)液中的氨基酸是通過主動運輸?shù)姆绞竭M入細胞，因為氨基酸是蛋白質(zhì)的基本單位，所以培養(yǎng)液中的氨基酸進入細胞后的主要作用是合成蛋白質(zhì)，C錯誤；D、轉(zhuǎn)氨酶是肝細胞內(nèi)參與氨基酸分解與合成的一類酶，故正常情況下該酶存在于細胞內(nèi)，現(xiàn)在培養(yǎng)液中檢測到，說明該酶從細胞中排出，可推測細胞受損使細胞膜通透性增加，D錯誤。故選A。【點睛】分析題圖實驗結(jié)果獲取信息是解題的突破口，分析實驗結(jié)果獲取結(jié)論的能力是本題考查的重點。6、B【解析】

分析題圖：實驗結(jié)果表明，施加植物生長調(diào)節(jié)劑的實驗組根系的活力均大于對照組，不同植物生長調(diào)節(jié)劑對菠菜根系活力的影響有差異；在實驗期間，隨處理時間延長，所有菠菜根系活力都表現(xiàn)為先增強后減弱的趨勢?！驹斀狻緼、植物生長調(diào)節(jié)劑具有容易合成、原料廣泛、效果穩(wěn)定等優(yōu)點，A正確；B、實驗結(jié)果表明，第1天、4天、7天的實驗結(jié)果均體現(xiàn)出，施加植物生長調(diào)節(jié)劑的實驗組根系的活力均大于對照組，僅體現(xiàn)了促進作用并未體現(xiàn)出兩重性，B錯誤；C、從圖中實驗結(jié)果可以看出，4種植物生長調(diào)節(jié)劑對菠菜根系活力的影響有差異，C正確；D、根據(jù)實驗結(jié)果，單獨分析4種植物生長調(diào)節(jié)劑中的任何一種的作用效果，均可看出，隨處理時間延長，菠菜根系活力都表現(xiàn)為先增強后減弱的趨勢，D正確。故選B。7、B【解析】

病毒是一種個體微小，結(jié)構(gòu)簡單，只含一種核酸（DNA或RNA），必須在活細胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細胞型生物。【詳解】A、新型冠狀病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)，刺突蛋白是當病毒進入宿主細胞后，利用宿主細胞中的物質(zhì)和能量在宿主細胞的核糖體中合成的，A錯誤；B、新型冠狀病毒是一種非細胞生命形態(tài)，它由一個核酸長鏈和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成，用于消毒的醫(yī)用酒精可以使病毒表面蛋白脫水變性，從而使病毒失活，B正確；C、由于細胞膜具有一定的流動性，病毒通過囊膜與細胞膜融合后以胞吞方式進入宿主細胞，C錯誤；D、有報道寵物狗和貓也確診了新型冠狀肺炎，說明新型冠狀病毒也能感染動物，D錯誤；故選B?！军c睛】結(jié)合病毒的結(jié)構(gòu)特征分析題意是解題的關(guān)鍵。8、B【解析】

據(jù)圖分析，新型冠狀病毒由+RNA和蛋白質(zhì)組成，其中+RNA可以通過翻譯過程形成蛋白質(zhì)，即圖中①、③過程表示翻譯；②、④表示+RNA的復(fù)制過程，其先合成-RNA，再合成+RNA。【詳解】A、由過程①和③過程可知，+RNA能指導蛋白質(zhì)的合成，而-RNA不能，因此可判斷+RNA上有決定氨基酸的密碼子，而-RNA上沒有，A錯誤；B、過程②和④都要遵循堿基互補配對原則，因此過程②消耗的嘧啶核苷酸的數(shù)量與過程④消耗的嘌呤核苷酸的數(shù)量相等，B正確；C、抗生素類藥物主要作用于細菌，不能抑制病毒的增殖，C錯誤；D、HIV是逆轉(zhuǎn)錄病毒，增殖過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，不需要RNA復(fù)制酶的作用，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、染色體DNA（或“核基因組”）突變體在不同限制酶處理時，均出現(xiàn)雜交帶，野生型無條帶，Ti質(zhì)粒有雜交帶不同酶切后含T-DNA的片段長度用三種不同限制酶處理都只得到一條雜交帶，而野生型無雜交帶DNA連接酶①、④促進b【解析】

本題考查基因工程的相關(guān)知識。電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。電泳技術(shù)就是利用在電場的作用下，由于待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而對樣品進行分離、鑒定或提純的技術(shù)?！驹斀狻浚?）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA序列，可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中，導致被插入的基因功能喪失。研究者用此方法構(gòu)建水稻突變體庫，并從中篩選到穗粒數(shù)異常突變體。

（2）①由于雜交結(jié)果中突變體在不同限制酶處理時，均出現(xiàn)雜交帶，野生型無條帶，Ti質(zhì)粒有雜交帶，表明T-DNA成功插入到水稻染色體基因組中。

②不同酶切結(jié)果，雜交帶的位置不同，這是由于不同酶切后含T-DNA的片段長度不同。

③由實驗結(jié)果判斷突變體為T-DNA單個位點插入，依據(jù)是用三種不同限制酶處理都只得到一條雜交帶，而野生型無雜交帶。

（3）研究者用某種限制酶處理突變體的DNA，用DNA連接酶將兩端的黏性末端連接成環(huán)，以此為模板，再利用圖中的引物①、④組合進行PCR，擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列。經(jīng)過與野生型水稻基因組序列比對，確定T-DNA插入了2號染色體上的B基因中。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，該突變體產(chǎn)量明顯低于野生型，據(jù)此推測B基因可能促進水稻穗粒的形成。

（5）育種工作者希望利用B基因，對近緣高品質(zhì)但穗粒數(shù)少的低產(chǎn)水稻品系2進行育種研究，以期提高其產(chǎn)量，可行的思路是培育可以穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)入B基因的水稻品系2植株，故選b。【點睛】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。10、逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（熱穩(wěn)定的DNA聚合酶）2構(gòu)建基因表達載體防止目的基因（或載體）自身連接；防止目的基因與運載體反向連接抗原—抗體雜交從基因組文庫獲取的G基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達出G蛋白【解析】

分析題文描述可知：本題綜合考查學生對基因工程的基本操作程序，特別是基因表達載體的構(gòu)建、目的基因的檢測與鑒定等相關(guān)知識的識記和理解能力?！驹斀狻浚?）RT-PCR過程，首先是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，此時需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與催化；其次是將cDNA進行PCR擴增，在擴增過程中不開Taq酶（熱穩(wěn)定的DNA聚合酶）的催化。在進行PCR擴增時需要設(shè)計2種引物，以便分別與兩條DNA模板鏈結(jié)合。（2）基因表達載體的構(gòu)建是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心步驟。與單一酶切相比，雙酶切具有的優(yōu)點是：防止目的基因或載體自身連接；防止目的基因與載體反向連接。（3）若要檢測G基因是否翻譯出G蛋白，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。（4）真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有內(nèi)含子；牛為真核生物，大腸桿菌屬于原核生物；原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機制。可見，從牛的基因組文庫中獲得的G基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達出G蛋白，因此以大腸桿菌作為受體細胞時未能得到G蛋白?！军c睛】本題的難點在于對（4）題的解答，其關(guān)鍵在于從題意中提取有效信息，即真核生物基因中通常有內(nèi)含子，原核生物基因中沒有內(nèi)含子，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機制。在此基礎(chǔ)上，從牛和大腸桿菌的基因結(jié)構(gòu)入手，分析從牛的基因組文庫中獲得的G基因，將其導入大腸桿菌細胞中卻未能得到G蛋白的原因。11、（乳腺蛋白基因的）啟動子和終止子顯微注射（發(fā)育為）雌性個體的受精卵將耐除草劑基因?qū)氲饺~綠體中將拆分后的基因分別導入不同的個體，獲得純合品系1和品系2，將兩者雜交獲得同時具有兩個片段的個體抑制轉(zhuǎn)錄區(qū)基因的表達堿基互補配對【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)