安心對(duì)垂體后葉素所致實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的保護(hù)作用

1/1安心對(duì)垂體后葉素所致實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的保護(hù)作用安心對(duì)垂體后葉素所致實(shí)驗(yàn)性心肌缺血的保護(hù)作用【關(guān)鍵詞】安心；,,心肌缺血；,,垂體后葉素摘要：

目的觀察安心改善心肌缺血的作用。

方法采用垂體后葉素（PIT）所致大鼠心肌缺血模型，監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖；小鼠腹腔注射PIT，測(cè)定血清脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）以及磷酸肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）的活性。

結(jié)果安心能明顯緩解PIT所致大鼠心電圖T波的改變。

在PIT所致小鼠心肌缺血模型中，安心能增加SOD的活性，降低血清LDH，CK，MDA的活性。

結(jié)論安心對(duì)PIT所致的心肌缺血有較好的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：

安心；心肌缺血；垂體后葉素ProtectiveEffectofAnxinonPituitrin-inducedMyocardialIschemicInjuryAbstract：

ObjectiveToobserveprotectiveeffectsofAnxin,acomplexofChinesemedicine,onmyocardialischemicinjury.MethodsTheelectrocardiograph(ECG)wasobservedinmyocardialischemiaratsinducedbypituitrin(PIT)throughlingualvein;thecontentsofMDA,SOD,CKandLDHinserumwereassayed,respectively,inmyocardialischemiamicewhichpituitrinwasperitonealinjected.ResultsHigh(2.8g/kg)，medium(1.4g/kg)doseofAnxincouldobviouslyrelievetheECGchangescausedbypituitrin-inducedmyocardialischemiainrats.ThethresholddoseofAnxin(4g/kg,2g/kg)decreasedCK,LDH,MDAproductionandincreasedSODactivityintheserumofmice.ConclusionAnxinpossessestheprotectiveeffectonmyocardialischemiainducedbyPIT.Keywords：

Anxin;Myocardialischemia;Pituitrin心肌缺血是指供應(yīng)給心肌的血液不能滿足需要時(shí)，導(dǎo)致缺氧，代謝改變，功能障礙，甚至心肌結(jié)構(gòu)破壞的病理狀態(tài)［1］。

中藥治療心肌缺血取得一定的進(jìn)展，其特點(diǎn)為療效高、毒副作用小。

安心是以中醫(yī)臨床實(shí)踐為基礎(chǔ)研制出中藥復(fù)方制劑，由人參RadixGinseng，丹參RadixSalviaeMiltiorrhizae，苦參RadixSophoraeFlavescentis，玉竹RhizomaPolygonatiOdorati，仙靈脾HerbaEpimedii，麥冬RadixOphiopogonis，澤蘭HerbaLycop，葶藶子SemenLepidh8味中藥組成。

本研究采用垂體后葉素（PIT）所致動(dòng)物心肌缺血模型，觀察安心改善心肌缺血的作用。

現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法1.1儀器BL420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟）；北京普析通用TU1810紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。

1.2受試藥物及試劑安心的制備：

人參、丹參、苦參、玉竹、仙靈脾、麥冬、澤蘭、葶藶子8味中藥共同煎煮3次，2h/次，濾過(guò)，合并濾液，濃縮成稠膏，真空低溫干燥，粉碎，過(guò)篩，成粉，用時(shí)配制成所需濃度。

陽(yáng)性對(duì)照藥：

步長(zhǎng)穩(wěn)心顆粒（批號(hào)051002），山東步長(zhǎng)制藥有限公司產(chǎn)品。

試劑：

垂體后葉素（PIT）由上海禾豐制藥有限公司出品（批號(hào)5E20009）。

本實(shí)驗(yàn)所用脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）以及磷酸肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒，均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3動(dòng)物及分組1.3.1動(dòng)物20～22g雄性昆明種小鼠，200～220g，雄性Wistar大鼠，均購(gòu)自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心，合格證號(hào)：

20030001。

1.3.2分組及給藥將小鼠50只，隨機(jī)分為6組，每組10只。

正常組ig等體積蒸餾水；陽(yáng)性藥物組ig步長(zhǎng)穩(wěn)心顆粒溶液(6g/kg)；受試藥物高、中、低劑量組ig安心溶液（4，2，1g/kg)。

各組給藥1次/d，共計(jì)14d。

將大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只。

模型組ig等體積蒸餾水；陽(yáng)性藥物組ig步長(zhǎng)穩(wěn)心顆粒溶液(4.2g/kg)；受試藥物高、中、低劑量組ig安心溶液（2.8，1.4，0.7g/kg)。

各組給藥1次/d，共計(jì)14d。

1.4方法1.4.1垂體后葉素導(dǎo)致大鼠T波改變的實(shí)驗(yàn)［2］末次給藥后30min，將大鼠用25%烏拉坦（1.2g/kg）腹腔注射麻醉，仰臥固定，記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖。

5min后舌下靜脈注射垂體后葉素0.5U/kg，在10s內(nèi)推完。

分別記錄注射前（0s）及注射后第15，30s及1，2，5，10min的心電圖，觀察T波的變化。

1.4.2安心對(duì)PIT致小鼠心肌缺血CK，LDH，SOD，MDA影響的實(shí)驗(yàn)?zāi)┐谓o藥后1h，模型組和安心高、中、低劑量組動(dòng)物腹腔注射PIT，劑量為20U/kg，正常組腹腔注射等容積生理鹽水。

2h后采血，將血以3000r/min離心15min，分離血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)，測(cè)定血清中MDA的含量和SOD以及CK和LDH的活性。

2結(jié)果2.1安心對(duì)垂體后葉素導(dǎo)致大鼠T波改變的影響結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果表明，安心高、中劑量組在注射PIT后第15，30s及1，2，5，10min的T波抬高均明顯低于模型組（P＜0.01，P＜0.05），說(shuō)明安心高、中劑量組對(duì)垂體后葉素致大鼠心肌缺血有抵抗作用。

2.2安心對(duì)PIT致小鼠心肌缺血CK，LDH，SOD，MAD的作用結(jié)果見(jiàn)表2。

結(jié)果表明，模型組血清LDH，CK，MDA水平明顯高于正常組水平，血清SOD的活性顯著低于正常組，而安心高、中劑量組可以降低血清LDH，CK水平，且增高了SOD的活性，降低了MDA的含量（P＜0.01或P＜0.05）。

表1安心對(duì)PIT導(dǎo)致大鼠T波改變的影響（略）與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10表2安心對(duì)PIT致小鼠心肌缺血CK，LDH，SOD，MDA的作用（略）與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與正常組比較，##P＜0.01;n=103討論本文利用垂體后葉素導(dǎo)致心肌缺血模型評(píng)價(jià)中藥復(fù)方安心改善心肌缺血的藥理作用。

垂體后葉素（PIT）是從牛、豬等垂體后葉中提取的多肽物質(zhì)，內(nèi)含縮宮素及加壓素，加壓素能明顯使冠狀動(dòng)脈、毛細(xì)血管、小動(dòng)脈、小靜脈收縮［3］。

給大鼠舌下靜脈注射PIT后，可迅速使冠狀動(dòng)脈血管收縮痙攣，血氧供應(yīng)障礙，造成心肌缺血模型。

由于大鼠心電圖ST段極短，基本與T波融合，因此我們將注射PIT后T波抬高或下降幅度作為評(píng)價(jià)大鼠心肌缺血損傷程度的指標(biāo)。

心肌酶的釋放量是心肌損害程度的主要標(biāo)志，在一定程度上反映心肌病變程度。

急性心肌梗塞時(shí)，在心肌缺血缺氧壞死過(guò)程中，由于細(xì)胞腫脹，細(xì)胞膜的完整性受到破壞，膜對(duì)蛋白酶的通透性增加，酶由細(xì)胞內(nèi)釋出增多，使血清中酶活力增加［4］。

因此，LDH，CK的測(cè)定有助于急性心肌梗塞病程的判定［5］。

MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物，組織中MDA含量的變化能直接反映過(guò)氧化的程度，在一定程度上也能間接反映氧自由基的生成情況。

心肌缺血時(shí)，細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度增加，Ca2+可激活催化黃嘌呤脫氫酶轉(zhuǎn)變?yōu)辄S嘌呤氧化酶的蛋白水解酶，使黃嘌呤氧化酶的活性升高，加強(qiáng)黃嘌呤氧化酶生成氧自由基的途徑，而氧自由基引起的膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，又促使膜對(duì)Ca2+的通透性增加，進(jìn)一步加劇細(xì)胞內(nèi)鈣聚集，由此形成惡性循環(huán)，加速細(xì)胞內(nèi)一系列病理改變［6］。

因此，氧自由基產(chǎn)物增加既是心肌損傷的原因，也是反映心肌損傷程度的指標(biāo)。

SOD是機(jī)體防御新陳代謝及其他生命活動(dòng)中氧自由基損傷和破壞的抗氧化酶。

大量氧自由基生成及脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)是心肌缺血損傷的主要機(jī)制之一。

SOD在不同的內(nèi)環(huán)境下活性不同，對(duì)健康人而言，SOD含量與SOD活力成正比；冠心病患者心肌缺血、缺氧，致使自由基產(chǎn)生過(guò)多，脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，SOD活力水平明顯低于健康人［7］。

心肌缺血時(shí)氧自由基產(chǎn)生增多，氧自由基與不飽和脂肪酸反應(yīng)形成過(guò)氧化脂質(zhì)，過(guò)氧化酯質(zhì)進(jìn)一步分解成MDA，MDA可與蛋白質(zhì)的游離氨基及核酸等形成Schiff堿，而使生物大分子發(fā)生交聯(lián)，心肌細(xì)胞膜的完整性受到破壞，造成對(duì)機(jī)體的損傷。

本研究采用垂體后葉素復(fù)制的心肌缺血模型，觀察安心對(duì)其保護(hù)作用。

結(jié)果表明，安心能抑制觀察期間內(nèi)大鼠心電圖T波改變，尤其抑制心肌缺血模型大鼠造模后第15s時(shí)T波抬高。

提高小鼠血清SOD活性，降低血清LDH，CK，MDA含量。

結(jié)果提示復(fù)方安心對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌缺血模型有一定改善作用，為臨床治療提供了很好的理論依據(jù)。

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3.