不同工藝白金膠囊對(duì)慢性不可預(yù)知應(yīng)激所致小鼠抑郁癥的影響

1/1不同工藝白金膠囊對(duì)慢性不可預(yù)知應(yīng)激所致小鼠抑郁癥的影響不同工藝白金膠囊對(duì)慢性不可預(yù)知應(yīng)激所致小鼠抑郁癥的影響摘要：

目的評(píng)價(jià)不同工藝制備的白金膠囊治療慢性不可預(yù)知應(yīng)激所致小鼠抑郁癥的藥效。

方法采用慢性不可預(yù)知應(yīng)激制備小鼠抑郁模型。

實(shí)驗(yàn)小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性藥組、工藝品1（傳統(tǒng)工藝）大劑量組、工藝品1小劑量組、工藝品2（精制工藝）大劑量組、工藝品2小劑量組，各藥物組小鼠予相應(yīng)劑量灌胃給藥。

通過(guò)測(cè)定小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間、懸尾不動(dòng)時(shí)間兩個(gè)行為學(xué)指標(biāo)考察白金膠囊傳統(tǒng)工藝和精制工藝的抗抑郁作用；通過(guò)測(cè)定小鼠自主活動(dòng)和體質(zhì)量考察受試藥物是否具有中樞興奮性或改變動(dòng)物機(jī)體的機(jī)能狀態(tài)的作用。

結(jié)果模型組和工藝品2大、小劑量組小鼠游泳不動(dòng)時(shí)間分別為（138.2740.70）s、（100.0134.75）s、（88.1530.62）s，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P關(guān)鍵詞：

白金膠囊；傳統(tǒng)工藝；精制工藝；慢性不可預(yù)知應(yīng)激；抑郁癥；小鼠DOI：

10.3969/j.issn.1005-5304.2016.01.015中圖分類(lèi)號(hào)：

R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：

A文章編號(hào)：

1005-5304（2016）01-0065-04EffectsofDifferentProcessesofBaijinCapsuleonTreatmentofMicewithChronicUnpredictableStress-inducedDepressionNIBo-ran，LINLong-fei，ZHANGHui，NIJian（BeijingUniversityofChineseMedicine，Beijing100029，China）Abstract：

ObjectiveToevaluatetheefficacyofdifferentprocessesofBaijinCapsuletotreatmentofmicewithchronicunpredictablestress-induceddepression.MethodsChronicunpredictablestresswasusedtoestablishdepressionmicemodels.Experimentalmiceweredividedintothefollowinggroupsaccordingtobodymass：

modelgroup，positivemedicinegroup，artwareone（traditionalprocess）high-doseandlow-dosegroups，andartware（refiningprocess）twohigh-doseandlow-dosegroups.Allmedicationgroupsweregivenrelevantmedicineforgavage.Bydetectingthetwobehaviorindexes，immobilitytimeofswimmingandtailsuspensionofmice，theanti-depressioneffectsoftraditionalprocessandrefiningprocessofBaijinCapsulewereinvestigated.Bydetectingautonomicactivitiesandbodymass，testedmedicinewasexaminedforfunctionstateofcentralexcitationandchanginganimalbody.ResultsThetimesforautomaticactivitiesofBaijinCapsuleinthemodelandartware（refiningprocess）twohigh-doseandlow-dosegroupswere（138.2740.70）s，（100.0134.75）sand（88.1530.62）s，respectively，withstatisticalsignificance（Pwithoutstatisticalsignificance.ConclusionRefiningprocessofBaijinCapsulecaneffectivelybeusedtotreatmicewithchronicunpredictablestress-induceddepression，andtheefficacyissuperiortothetraditionalprocess.Keywords：

BaijinCapsule；traditionalprocess；refiningprocess；chronicunpredictablestress；depression；mice抑郁癥是一種常見(jiàn)的大腦功能紊亂性疾病，為慢性反復(fù)發(fā)作的腦疾病，曾被喻為心理疾病中的感冒。

臨床上對(duì)抑郁癥的治療模式和方法分類(lèi)有很多，藥物治療是目前臨床上治療抑郁癥的重要手段，但由于抑郁癥發(fā)病的確切機(jī)制仍未完全明確，目前藥物治療僅在一定程度上有效，并不能治愈抑郁癥，而且抗抑郁藥的安全性問(wèn)題目前尚無(wú)法解決，WHO已將抗抑郁藥列為21世紀(jì)最需迫切開(kāi)發(fā)的藥物之一。

白金膠囊藥方來(lái)自臨床經(jīng)驗(yàn)方，在臨床上被用于治療肝氣郁結(jié)所致的抑郁癥，顯示出良好的療效[1]。

但傳統(tǒng)工藝制劑攜帶、服用不便，臨床順應(yīng)性較差，故將處方中各藥味分別精制，將其制成膠囊劑。

本研究以ICR小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用慢性不可預(yù)知應(yīng)激制備抑郁模型，以自主活動(dòng)、體質(zhì)量、懸尾不動(dòng)和強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間為指標(biāo)，評(píng)價(jià)白金膠囊傳統(tǒng)工藝與精制工藝的抗抑郁藥效，為制備工藝變更提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1實(shí)驗(yàn)材料1.1動(dòng)物雄性ICR小鼠120只，10周齡，體質(zhì)量18～22g，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)SCXK（京）2012-0001。

置于室溫（231）℃，24h晝夜循環(huán)光照條件下飼養(yǎng)，自由飲水取食。

1.2藥物和試劑郁金（批號(hào)20130601）、合歡花（批號(hào)20130901）、蜘蛛香（批號(hào)20130901），亳州市遠(yuǎn)光中藥飲片廠；白芍（批號(hào)201002298），北京同仁堂飲片有限責(zé)任公司；姜黃素對(duì)照品（批號(hào)110823-201004）、槲皮苷對(duì)照品（批號(hào)111538-200504）、芍藥苷對(duì)照品（批號(hào)110736-201136）、苯甲酸對(duì)照品（批號(hào)100419-201302），中國(guó)食品藥品檢定研究院；11-ethoxyviburtinal對(duì)照品，北京中醫(yī)藥大學(xué)高增平教授實(shí)驗(yàn)室提供，供含量測(cè)定用；白金膠囊工藝品1及2均為固體粉末（本實(shí)驗(yàn)室自制）配制成適宜濃度混懸液使用；陽(yáng)性藥物為鹽酸氯米帕明片，天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)110703，25mg/片。

乙腈、甲醇均為色譜純（Fisher公司），蒸餾水。

1.3儀器安捷倫1206高效液相色譜儀，AglientExtend-C18色譜柱（250mm4.6mm，5m），TU-1810紫外可見(jiàn)分光光度儀（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司），DZ-2BC型真空干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司），METTLER-AE240型電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），KQ3200DE型數(shù)控超聲波清洗儀（江蘇省昆山市超聲儀器有限公司），BT125D型電子天平（賽多利斯），小鼠自主活動(dòng)儀（MV1ZDMACHI.KIKAI.EEO.ZTD，TOKYO），小動(dòng)物行為分析系統(tǒng)（EthovisionXT9）。

2方法與結(jié)果2.1白金膠囊傳統(tǒng)工藝制備方法按處方比例，將郁金、合歡花、白芍、蜘蛛香以10倍量水提取3次，每次1.5h，合并提取液，濃縮，蒸干，得白金膠囊傳統(tǒng)工藝制品（工藝品1）。

采用高效液相色譜法（HPLC），以乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量10L，測(cè)定白金膠囊工藝品1中芍藥苷的含量為1.96%。

2.2白金膠囊精制工藝制備方法對(duì)處方中的各藥材分別單獨(dú)提取，繼而采用大孔樹(shù)脂技術(shù)進(jìn)行純化，并測(cè)定各提取物中指標(biāo)性成分的含量。

將純化后的各藥材提取物，按處方比例混勻即得白金膠囊精制工藝制品（工藝品2）。

2.2.1郁金提取精制工藝優(yōu)選及姜黃素含量測(cè)定通過(guò)正交試驗(yàn)篩選出郁金提取精制工藝為：

稱(chēng)取郁金，加入6倍量70%乙醇溶液，回流提取2次，每次1.5h，濾過(guò)，合并提取液，減壓濃縮至0.5g原藥材/mL，過(guò)S-8型大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.6g原藥材/mL樹(shù)脂，5BV水洗棄去，減壓回收80%乙醇洗脫液，濃縮干燥，備用。

按照2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》（一部）姜黃項(xiàng)下含量測(cè)定方法[2]，測(cè)定提取精制樣品中姜黃素的含量為3.63%。

2.2.2合歡花提取精制工藝優(yōu)選及槲皮苷和總黃酮含量測(cè)定正交試驗(yàn)篩選合歡花提取精制工藝為：

稱(chēng)取合歡花，加入12倍量70%乙醇溶液，回流提取2次，每次2h，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至0.2g原藥材/mL，過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.4g原藥材/mL樹(shù)脂，徑高比為1∶8，4BV水洗棄去，4BV10%乙醇洗棄去，減壓回收50%乙醇洗脫液，濃縮干燥，備用[3-4]。

采用HPLC，以乙腈-0.1%磷酸溶液（20∶80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為256nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量10L，測(cè)定提取精制的樣品中槲皮苷含量為16.59%。

采用AlCl3直接顯色法，以槲皮苷為對(duì)照品，檢測(cè)波長(zhǎng)為425nm，測(cè)定提取精制樣品中總黃酮的含量為30.62%。

2.2.3白芍提取精制工藝優(yōu)選及白芍總苷和芍藥苷含量測(cè)定正交試驗(yàn)篩選白芍提取精制工藝為：

稱(chēng)取白芍，加入14倍量70%乙醇溶液，回流提取3次，每次1.5h，濾過(guò)，合并提取液，減壓濃縮至0.2g原藥材/mL，過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.75g原藥材/mL樹(shù)脂，徑高比為1∶8，5BV水洗棄去，減壓回收50%乙醇洗脫液，濃縮干燥，備用。

采用HPLC，以乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量10L，測(cè)定提取精制樣品中芍藥苷的含量為36.38%。

采用NaOH水解法水解，采用HPLC，以甲醇-0.05mol/L磷酸氫二鉀-異丙醇-冰乙酸（87∶13∶4∶4）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，流速1.0mL/min，柱溫30℃，測(cè)定提取精制樣品中苯甲酸的含量，根據(jù)公式白芍總苷含量（%）=苯甲酸含量%480.27122.12，計(jì)算提取精制樣品中白芍總苷的含量為53.11%。

2.2.4蜘蛛香提取精制工藝優(yōu)選及11-ethoxyviburtinal含量測(cè)定正交試驗(yàn)篩選蜘蛛香提取精制工藝為：

稱(chēng)取蜘蛛香，加入12倍量70%乙醇溶液，回流提取2次，每次2h，濾過(guò)，合并提取液，減壓濃縮至0.2g原藥材/mL，過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱，上樣量為0.52g原藥材/mL樹(shù)脂，徑高比為1∶6，2BV30%乙醇洗棄去，減壓回收70%乙醇洗脫液，濃縮干燥，備用。

采用HPLC，以乙腈-水（40∶60）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為288nm，流速0.95mL/min，柱溫30℃，進(jìn)樣量10L，測(cè)定提取精制樣品中11-ethoxyviburtinal的含量為0.92%。

2.3分組雄性ICR小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d，按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性藥組、工藝品1大劑量組（4.12g/kg）、工藝品1小劑量組（1.37g/kg）、工藝品2大劑量組（2.15g/kg）、工藝品2小劑量組（0.72g/kg）。

除模型組小鼠為13只外，其余各組小鼠均為15只。

2.4造模采用慢性不可預(yù)知應(yīng)激制備小鼠抑郁模型。

應(yīng)激