2023-2024學(xué)年北京市高二綜合測生物生物試題02（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE3北京市2023-2024學(xué)年高二綜合測試卷02（滿分100分，時間90分鐘）第一部分（選擇題共30分）本部分共15題，每題2分，共30分。在每題列出的四個選項中，選出最符合題目要求的一項。1．在一些傳統(tǒng)食品的制作過程中，滅菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列說法正確的是（）A．葡萄制作果酒過程中，葡萄用清水沖洗后需用70%的酒精消毒B．金華火腿制作過程中鹽腌等防腐措施能抑制微生物生長繁殖C．制作泡菜時泡菜壇要密封，主要目的是避免外界雜菌的污染D．泡菜腌制過程中，通常用加入抗生素的方法來抑制雜菌〖答案〗B〖祥解〗1、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～25℃；反應(yīng)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。3、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃。【詳析】A、發(fā)酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒過程中，葡萄用清水沖洗后瀝干即可，A錯誤；B、金華火腿制作過程中鹽腌等防腐措施能抑制微生物生長繁殖，這是因為食鹽的主要成分是NaCl，當(dāng)細(xì)胞的鹽濃度過高就會導(dǎo)致微生物細(xì)胞失水，從而失去活性，B正確；C、制作泡菜時泡菜壇要密封，主要目的是提供無氧環(huán)境，使得乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，C錯誤；D、制作泡菜時，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸鹽還原菌和其他雜菌。乳酸菌可使蔬菜發(fā)酵，能有效控制發(fā)酵過程，抑制其他菌類和微生物生長，它保存有大量維生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的營養(yǎng)易被人體吸收利用。鹽濃度高以及酒精可抵制雜菌生長，防止泡菜發(fā)霉、變質(zhì)，所以我們在泡菜水中要加鹽和白酒來抑制雜菌而非添加抗生素，D錯誤。故選B。2．小曲白酒以大米、大麥、小麥等為原料，以小曲為發(fā)酵劑釀造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧微生物霉菌、兼性厭氧型微生物酵母菌，還有乳酸菌、醋酸菌等細(xì)菌。釀酒的原理主要是酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精。傳統(tǒng)釀造工藝流程如圖所示。關(guān)于小曲白酒的釀造過程，下列敘述錯誤的是（）A．若發(fā)酵壇密封不嚴(yán)可能會導(dǎo)致酒變酸B．蒸熟的原料立即加入糟醅后密封可高效進行酒精發(fā)酵C．糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖D．釀造白酒的過程也是微生物生長繁殖的過程〖答案〗B〖祥解〗1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃?！驹斘觥緼、釀造過程中應(yīng)在無氧條件下進行，若密封不嚴(yán)，會導(dǎo)致醋酸菌在有氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生醋酸而使酒變酸，A正確；B、蒸熟并攤晾的原料需要冷卻后才可加入糟醅，不能馬上密封，需要提供氧氣先讓糟醅中的好氧型霉菌將原料中的淀粉糖化，以及讓酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖，B錯誤；C、糖化過程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶將淀粉分解為葡萄糖，C正確；D、釀造白酒的過程也是酵母菌等微生物利用糧食中的物質(zhì)進行生長繁殖的過程，D正確。故選B。3．微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。下列關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)的敘述錯誤的是（）A．采用平板劃線法和稀釋涂布平板法均可分離酵母菌B．可用濕熱滅菌法對培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進行滅菌C．通過接種環(huán)連續(xù)蘸取菌液在固體培養(yǎng)基表面劃線的操作，可將菌種逐步稀釋D．完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將接種后的平板進行培養(yǎng)〖答案〗C〖祥解〗微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、對于微生物進行分離的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，A正確；B、可用濕熱滅菌法（通常是高壓蒸汽滅菌法）對培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進行滅菌，B正確；C、通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，該過程中只蘸取一次菌液，C錯誤；D、完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板（和一個未接種的平板）倒置培養(yǎng)，D正確。故選C。4．某種物質(zhì)A（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解A．研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株。圖中③將M中的菌液稀釋一定倍數(shù)后，取0．1mL涂布到平板上，初步估測搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2．4x108個。相關(guān)敘述正確的是（

）

A．實驗時，淤泥及盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌B．乙中需要加瓊脂和物質(zhì)A等，實驗需設(shè)平行重復(fù)實驗，無需另外設(shè)置空白對照C．③接種方法為稀釋涂布平板法，涂布時用涂布器蘸取菌液均勻涂布于平板上D．若乙平板上菌落數(shù)平均為240個，則接種的菌液的稀釋倍數(shù)為105〖答案〗D〖祥解〗分析題圖：①為淤泥取樣進行稀釋，②為接種到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，④為挑取單菌落接種，⑤在以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進一步篩選出高效降解A的菌株?！驹斘觥緼、實驗時，要從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株，則圖①為淤泥取樣進行稀釋，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，淤泥中有菌種，因此不能進行滅菌處理；盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，A錯誤；B、識圖分析可知，③是稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，因此乙為固體培養(yǎng)基，需要加瓊脂和物質(zhì)A等，為了提高準(zhǔn)確度，實驗需設(shè)平行重復(fù)實驗，且需要另外設(shè)置空白對照，檢測培養(yǎng)基配制是否合格，B錯誤；C、③接種方法為稀釋涂布平板法，接種工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，應(yīng)該將菌液用微量移液管加入到培養(yǎng)基中，用涂布器進行均勻涂抹，C錯誤；D、若乙平板上長出的菌落數(shù)平均為240個，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，根據(jù)搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個，在每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，則有240×a÷0.1=2.4×108，則稀釋倍數(shù)a=105，D正確。故選D。5．工業(yè)污水中含有的多環(huán)芳烴類化合物（僅含C、H元素）會造成農(nóng)田土壤污染。研究人員按照如圖所示的流程從受污染的農(nóng)田土壤中分離得到能高效降解多環(huán)芳烴類化合物的細(xì)菌菌株。下列敘述錯誤的是（

）A．甲、乙培養(yǎng)基中應(yīng)以多環(huán)芳烴類化合物為唯一碳源B．步驟①接種操作需要在酒精燈火焰附近進行C．步驟②中應(yīng)用涂布器從甲中蘸取菌液均勻涂布于培養(yǎng)基乙表面D．步驟③中應(yīng)從降解圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落進行挑選〖答案〗C〖祥解〗圖示表示科研人員從被多環(huán)芳烴類化合物污染的土壤中分離出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株的主要步驟。培養(yǎng)基甲和乙中加入多環(huán)芳烴類化合物作為唯一碳源，其目的是篩選出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株。【詳析】A、該研究的目的是從被多環(huán)芳烴類化合物污染的土壤中分離出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株，所以甲、乙培養(yǎng)基中應(yīng)以多環(huán)芳烴類化合物為唯一碳源，A正確；B、為了能篩選出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株、防止雜菌污染，在進行步驟①培養(yǎng)的接種操作時，需要在酒精燈火焰附近進行，B正確；C、步驟②是采用稀釋涂布平板法接種并分離高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株（目的菌），應(yīng)先用微量移液器從甲中取0.1mL菌液滴加到培養(yǎng)基乙的表面，再用涂布器將菌液均勻涂布于培養(yǎng)基乙的表面，C錯誤；D、透明圈直徑與菌落直徑比值越大，說明目的菌降解多環(huán)芳烴類化合物的效果越好，因此步驟③應(yīng)從降解圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落進行挑選菌株并培養(yǎng)，D正確。故選C。6．三白草和魚腥草二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被中醫(yī)用作“藥對”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到雜種細(xì)胞，并實現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，操作如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．①過程可利用鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液來完成B．②過程通常在低滲溶液中采用PEG融合法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，其特有功能喪失，但結(jié)構(gòu)不變D．圖中所示的生產(chǎn)流程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性，但未體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性〖答案〗D〖祥解〗圖示為三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程，其中①為去除細(xì)胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③脫分化形成愈傷組織，④提取代謝產(chǎn)物?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此過程①三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程中要利用纖維素酶和果膠酶水解細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液會殺死細(xì)胞，A錯誤；B、過程②通常在等滲或略高滲溶液中，不能用低滲溶液，不然原生質(zhì)體會吸水漲破；可以采用化學(xué)法（PEG融合法）或物理法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，B錯誤；C、植物細(xì)胞的脫分化就是讓已分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞——愈傷組織的過程，因此雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，其特有功能喪失，結(jié)構(gòu)也發(fā)生改變，C錯誤；D、圖中過程②原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性；將雜種細(xì)胞培育成一個完整的新的植物體的過程才體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，故圖中所示的生產(chǎn)流程沒有體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，D正確。故選D。7．紫杉醇是細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物，對多種癌癥有較好治療效果?？蒲腥藛T為獲得更多紫杉醇，嘗試?yán)弥参锝M織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列敘述正確的是（

）A．配置培養(yǎng)基時，添加適量的植物生長調(diào)節(jié)劑和凝固劑B．細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞C．用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，利于原生質(zhì)體融合D．采用非胚性愈傷組織的目的是通過器官發(fā)生途徑再分化成植株〖答案〗B〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)的過程:離體的植物組織。器官或細(xì)胞(外植體)脫分化形成愈傷組織愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、該，不需要培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，不需要添加凝固劑，A錯誤；B、細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞，B正確；C、用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁為了將愈傷組織分散成單個細(xì)胞，C錯誤；D、采用非胚性愈傷組織的目的是通過體細(xì)胞發(fā)生途徑再分化成植株，D錯誤。故選B。8．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（）A．動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞B．從細(xì)胞株中分離出特殊性質(zhì)的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)獲得細(xì)胞系C．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成單層細(xì)胞D．能連續(xù)傳代的細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，但不一定有異倍體核型、接觸抑制〖答案〗B〖祥解〗1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、細(xì)胞株和細(xì)胞系（1）細(xì)胞株：是指從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，能夠繁殖50代左右。（2）細(xì)胞系：是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，分為連續(xù)細(xì)胞系和有限細(xì)胞系，其中連續(xù)細(xì)胞系是指能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系，是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系，大多數(shù)具有異倍體核型，有的是惡性細(xì)胞系，具有異體致癌性，有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性，但保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌；有限細(xì)胞系是指不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。二倍體細(xì)胞一般為有限細(xì)胞系?！驹斘觥緼、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理即是細(xì)胞增殖，可獲得大量自身健康細(xì)胞，用于檢測有毒物質(zhì)等，A正確；B、通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株，細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系，B錯誤；C、由于接觸抑制，動物細(xì)胞培養(yǎng)時只能形成單層細(xì)胞，C正確；D、連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，有的獲得了不死性（癌變），但保留接觸抑制現(xiàn)象，大多數(shù)具有異倍體核型，D正確。故選B。9．研究表明，髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2（TREM2）是一種免疫抑制受體，在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因此，TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免疫療法的療效。下圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列說法正確的是（

）A．步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗體的雜交瘤細(xì)胞B．經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞既能分泌TREM2抗體又可無限增殖C．步驟③和④的培養(yǎng)孔中均含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理都是抗原一抗體雜交D．步驟⑥和植物組織培養(yǎng)均需使用二氧化碳培養(yǎng)箱進行大規(guī)模培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。【詳析】A、步驟①向小鼠注射TREM2蛋白，讓小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；步驟⑤向小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞，目的是獲得單克隆抗體，A正確；B、經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞才能既能分泌TREM2抗體又可無限增殖，B錯誤；C、步驟③的培養(yǎng)孔中含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理是抗原-抗體雜交，步驟④的培養(yǎng)孔中含有特定的培養(yǎng)基，依據(jù)的原理是雜交瘤細(xì)胞能分泌抗體，C錯誤；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中二氧化碳用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值，而植物組織培養(yǎng)的過程中不需要二氧化碳培養(yǎng)箱，D錯誤。故選A。10．利用治療性克隆技術(shù)治療胰島功能異常型糖尿病患者的基本流程如圖所示，下列敘述正確的是（

）A．胚胎干細(xì)胞可以取自囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團B．細(xì)胞培養(yǎng)需要含有95%氧氣和5%二氧化碳的氣體條件C．該流程利用了細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植和胚胎移植技術(shù)D．患者對注入的胰島細(xì)胞會產(chǎn)生免疫排斥〖答案〗A〖祥解〗治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞)，用于治療?！驹斘觥緼、囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞具有全能性，可以作為胚胎干細(xì)胞，A正確；B、細(xì)胞培養(yǎng)需要含有95%的空氣和5%的二氧化碳的氣體條件，B錯誤；C、此流程中沒有利用胚胎移植技術(shù)，C錯誤；D、培養(yǎng)的健康胰島細(xì)胞是由患者自身的胚胎干細(xì)胞發(fā)育而成，患者對注入的胰島細(xì)胞不發(fā)生免疫排斥，D錯誤。故選A。11．如圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，有關(guān)分析錯誤的是（）

A．應(yīng)用1中的卵母細(xì)胞常取自卵巢，并可直接用于融合B．應(yīng)用2常用雌性激素處理供體1，目的是使其超數(shù)排卵C．應(yīng)用3一般選擇桑葚胚或囊胚進行分割D．應(yīng)用4體現(xiàn)了動物細(xì)胞的全能性〖答案〗C〖祥解〗1、應(yīng)用1用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用2用到了體外受精技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用3用到了胚胎分割技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用4用到了胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。2、細(xì)胞的全能性是指經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生完整有機體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性?！驹斘觥緼、應(yīng)用1用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，用到的卵母細(xì)胞常取自卵巢，但是需要在體外培養(yǎng)到MⅡ中期才能用于融合，A錯誤；B、應(yīng)用2用到了體外受精技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，常用外源促性腺激素處理供體1，目的是目的是使其超數(shù)排卵，B錯誤；C、應(yīng)用3用到了胚胎分割技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，一般選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進行分割，C正確；D、應(yīng)用4用到了胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，因為培養(yǎng)的目的是需要的組織和器官，而不是個體或其他各種細(xì)胞，所以不能體現(xiàn)動物細(xì)胞的全能性，D錯誤。故選C。12．關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗，下列說法錯誤的是（

）A．過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進行是為了防止DNA降解B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)D．將粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑DNA被染成藍(lán)色〖答案〗D〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斘觥緼、低溫時DNA酶的活性較低，過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進行是為了防止DNA降解，A正確；B、DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水，且溶解度較高，B正確；C、粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)，因此為了獲得純度較高的DNA需要進一步提純，C正確；D、將粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后經(jīng)過水浴加熱可發(fā)現(xiàn)DNA被染成藍(lán)色，D錯誤。故選D。13．HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。雞卵清蛋白是由輸卵管上皮細(xì)胞中卵清蛋白基因特異性表達后分泌至輸卵管內(nèi)，參與構(gòu)成雞蛋清的蛋白質(zhì)。下圖是利用基因工程技術(shù)制備HA蛋白雞輸卵管生物反應(yīng)器的過程。幾種可供選擇的限制酶識別序列如下，下列說法錯誤的是（

）

A．①為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶、4種游離的脫氧核苷酸等組分B．目的基因與雞卵清蛋白基因啟動子拼接前應(yīng)先在目的基因兩端分別引入HindⅢ和EcoRI的識別序列C．利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，退火溫度偏低、引物特異性差均可導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列D．基因表達載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法〖答案〗B〖祥解〗基因表達載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子等；啟動子是一段由特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出蛋白質(zhì)；終止子位于基因的下游，作用是終止轉(zhuǎn)錄，也是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段?！驹斘觥緼、圖中①以禽流感病毒RNA形成目的基因DNA過程，為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，逆轉(zhuǎn)錄合成的是DNA，需要4種脫氧核苷酸作為原料，A正確；B、目的基因兩端引入HindⅢ和EcoRI的識別序列，進而使目的基因能夠與雞卵清蛋白基因啟動子、載體正確連接，構(gòu)建基因表達載體，B錯誤；C、PCR技術(shù)擴增目的基因時，若退火溫度偏低、則可能導(dǎo)致引物與非目的基因序列部分配對，進而擴增出非目的基因，引物特異性差也會導(dǎo)致和非目的基因序列部分配對，導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列，C正確；D、受體細(xì)胞為動物細(xì)胞時通常采用顯微注射法，因此基因表達載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法，D正確。故選B。14．在構(gòu)建基因表達載體時，傳統(tǒng)方法常受限于限制酶識別序列?？蒲腥藛T研發(fā)了新的DNA重組方法:In-Fusion技術(shù)。該技術(shù)關(guān)鍵是要在目的基因兩端構(gòu)建與線性化質(zhì)粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，最終形成的重組質(zhì)粒會在受體細(xì)胞內(nèi)形成完整的重組序列。主要操作過程如圖示。下列敘述錯誤的是（

）A．推測In-Fusion酶的作用是識別同源序列、形成黏性末端、連接磷酸二酯鍵B．載體A端和B端的序列不同，可防止目的基因與質(zhì)粒反向連接及自身環(huán)化C．形成重組質(zhì)粒時，如果溫度遠(yuǎn)高于50℃，黏性末端的堿基不容易互補配對D．該技術(shù)無需識別特定切割位點，需識別目的基因與線性質(zhì)粒任意同源序列〖答案〗A〖祥解〗基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒?！驹斘觥緼、分析題意可知，本技術(shù)的過程是在目的基因兩端構(gòu)建與線性化質(zhì)粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，最終形成的重組質(zhì)粒會在受體細(xì)胞內(nèi)形成完整的重組序列推測In-Fusion酶的作用是識別同源序列、連接磷酸二酯鍵，不具有形成黏性末端的作用，A錯誤；B、若用限制酶切割后黏性末端相同，會導(dǎo)致自身環(huán)化和反向連接等，載體A端和B端的序列不同，可防止目的基因與質(zhì)粒反向連接及自身環(huán)化，B正確；C、據(jù)圖可知，重組質(zhì)粒形成時需要加入In-Fusion酶連接磷酸二酯鍵，且如果溫度遠(yuǎn)高于50℃，黏性末端的堿基不容易互補配對，C正確；D、分析題意，傳統(tǒng)方法常受限于限制酶識別序列，故科研人員研發(fā)了新的DNA重組方法:In-Fusion技術(shù)，結(jié)合圖示可知，該技術(shù)無需識別特定切割位點，但用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，故需識別目的基因與線性質(zhì)粒任意同源序列，D正確。故選A。15．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的比較，不合理的是（）A．蛋白質(zhì)工程的操作起點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計出相應(yīng)的基因，并借助基因工程實現(xiàn)B．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，蛋白質(zhì)工程最終還是要通過基因修飾或基因合成來完成C．當(dāng)?shù)玫娇梢员４姘肽甑母蓴_素后，在相關(guān)酶、氨基酸和適宜的溫度、pH條件下，干擾素可以大量自我合成D．基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的〖答案〗C〖祥解〗1、蛋白質(zhì)工程：指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。2、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；之后按照基因工程的一般步驟進行?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程的操作起點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測出相應(yīng)的基因序列，進而設(shè)計出相應(yīng)的基因，并借助基因工程實現(xiàn)，A正確；B、基因工程生產(chǎn)的自然界中已存在的蛋白質(zhì)不能完全符合人類需要，因此催生了蛋白質(zhì)工程，但由于基因決定蛋白質(zhì)，因此蛋白質(zhì)工程最終還是要通過基因修飾或基因合成來完成，B正確；C、干擾素作為一種表達產(chǎn)物，其化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)不具有自我合成的能力，C錯誤；D、基因工程產(chǎn)生的變異即為基因重組，目的基因轉(zhuǎn)入后便可以隨宿主的基因一同表達并遺傳給后代，蛋白質(zhì)工程最終也要通過基因來改造，因此蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異也可以遺傳，D正確。故選C。第二部分（非選擇題共70分）本部分共6題，共70分。16．糯米酒是具有中國特色的傳統(tǒng)酒種，其釀造過程中需要由酒曲中的根霉實現(xiàn)淀粉的糖化，由酵母菌實現(xiàn)酒精發(fā)酵。研究人員從幾種酒曲中進行了優(yōu)良根霉與酵母菌的篩選。請回答問題：(1)家庭釀造糯米酒時，需要將蒸熟的糯米與酒曲拌勻后放在容器中，在糯米中央挖一個洞，蓋好容器。通常一天后容器中就會出現(xiàn)大量液體，其中含有可溶性糖和酒精，液體中水的來源是根霉和酵母菌的有氧呼吸，水的產(chǎn)生是在有氧呼吸第階段發(fā)生的，該階段發(fā)生場所是。(2)為比較不同根霉產(chǎn)糖能力，將從酒曲中分離所得的5種根霉分別接種到等量蒸熟糯米中，24h后所得醪液體積大致相同，檢測醪液中糖量，結(jié)果如圖1．檢測結(jié)果表明，產(chǎn)糖能力最強的根霉是。(3)為比較不同酵母菌的發(fā)酵產(chǎn)酒精能力，將從酒曲中分離所得的5種酵母菌接種到等量葡萄糖液中，檢測發(fā)酵液因釋放導(dǎo)致的失重量，結(jié)果如圖2，產(chǎn)酒精能力最強的酵母菌是。(4)進一步研究發(fā)現(xiàn)，糖化過快的菌株并不適合釀酒，原因是發(fā)酵液中葡萄糖濃度過高會導(dǎo)致酵母菌?！即鸢浮?1)三線粒體內(nèi)膜(2)E-2(3)CO2Y-1(4)滲透失水〖祥解〗酵母菌是一類單細(xì)胞真菌，能以多種糖類作為營養(yǎng)物質(zhì)和能量的來源，因此在一些含糖量較高的水果、蔬菜表面經(jīng)?？梢园l(fā)現(xiàn)酵母菌的存在。酵母菌是兼性厭氧微生物，在無氧條件下能進行酒精發(fā)酵，可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長的重要因素，釀酒酵母的最適生長溫度約為28°C?！驹斘觥浚?）酵母菌有氧呼吸第三階段氧氣和[H]發(fā)生反應(yīng)生成水，發(fā)生在線粒體內(nèi)膜上。（2）據(jù)圖可知，根霉E-2總糖量和葡萄糖量最高，所以產(chǎn)糖能力最強的根霉是E-2。（3）酵母菌無氧條件下能進行酒精發(fā)酵，產(chǎn)生酒精和CO2，發(fā)酵液失重是因為發(fā)酵過程中CO2的釋放。據(jù)圖2可知酵母菌Y-1對應(yīng)的累計失重量最大，所以產(chǎn)酒精能力最強的酵母菌是Y-1。（4）發(fā)酵液中葡萄糖濃度過高會導(dǎo)致酵母菌滲透失水，這樣的菌株不適合釀酒。17．大麗輪枝菌侵染棉花導(dǎo)致其減產(chǎn)?？茖W(xué)家欲用芽孢桿菌對其進行生物防治。(1)培養(yǎng)基中的蛋白胨可為菌體生長提供和維生素等。將現(xiàn)有的芽孢桿菌ZY-17、ZY-109置于（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)。(2)在培養(yǎng)基平板中央分別放置大麗輪枝菌的菌絲塊，然后在菌絲塊對應(yīng)三角點分別滴加ZY-17和ZY-109的菌液，以接種的培養(yǎng)基為空白對照，進行“平板對峙實驗”，結(jié)果如圖1。①若在一個平板中完成圖1中三組平板對峙實驗，請在圖2中畫出實驗方案。②分析實驗結(jié)果可知ZY-17的抑菌效果較好，依據(jù)是：ZY-17處理后。(3)為探究ZY-17抑制大麗輪枝菌的方式，請?zhí)岢鲆粋€假設(shè)，該假設(shè)能用以下材料和設(shè)備加以驗證。主要實驗材料和設(shè)備：ZY-17、大麗輪枝菌、培養(yǎng)基、圓形濾紙小片、離心機和細(xì)菌培養(yǎng)箱?！即鸢浮?1)供氮源、碳源、無機鹽液體(2)不含菌體的培養(yǎng)基ZY-17處理后大麗輪枝菌的菌絲塊明顯小于ZY-109處理效果(3)假設(shè)ZY-17通過分泌相關(guān)物質(zhì)抑制大麗輪枝菌先用培養(yǎng)基分別培養(yǎng)ZY-17和大麗輪枝菌，一段時間后，將ZY-17及其培養(yǎng)基離心后取其上清液（含有ZY-17的分泌物），用圓形濾紙小片浸入其中，隨后將浸有ZY-17的分泌物接種到含大麗輪枝菌的培養(yǎng)基上，同時以只接種大麗輪枝菌的平板作為對照，置于細(xì)菌培養(yǎng)箱，一段時間后觀察，若含有圓形濾紙小片的平板上，大麗輪枝菌菌落明顯小于對照組，則說明假設(shè)成立〖祥解〗蛋白胨可為菌體生長提供氮源、碳源、無機鹽、維生素等營養(yǎng)。由圖可知，ZY-17處理后大麗輪枝菌的菌絲塊明顯小于ZY-109處理效果，說明ZY-17的抑菌效果較好?！驹斘觥浚?）蛋白胨可為菌體生長提供氮源、碳源、無機鹽、維生素等營養(yǎng)；菌體擴大培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基，有利于菌體與培養(yǎng)基充分接觸。（2）ZY-17和ZY-109的菌液中除菌體外為培養(yǎng)基，所以接種不含菌體的培養(yǎng)基為空白對照。①若在一個平板中完成圖1中三組平板對峙實驗，則可在培養(yǎng)基平板中央放置大麗輪枝菌的菌絲塊，然后分別在對應(yīng)三角點分別滴加ZY-17和ZY-109的菌液和不含菌體的培養(yǎng)基，其接種如下：

②由圖可知，ZY-17處理后大麗輪枝菌的菌絲塊明顯小于ZY-109處理效果，說明ZY-17的抑菌效果較好。（3）假設(shè)ZY-17通過分泌相關(guān)物質(zhì)抑制大麗輪枝菌。可先用培養(yǎng)基分別培養(yǎng)ZY-17和大麗輪枝菌，一段時間后，將ZY-17及其培養(yǎng)基離心后取其上清液（含有ZY-17的分泌物），用圓形濾紙小片浸入其中，隨后將浸有ZY-17的分泌物接種到含大麗輪枝菌的培養(yǎng)基上，同時以只接種大麗輪枝菌的平板作為對照，置于細(xì)菌培養(yǎng)箱，一段時間后觀察，若含有圓形濾紙小片的平板上，大麗輪枝菌菌落明顯小于對照組，則說明假設(shè)成立。18．花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因?？蒲腥藛T用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：(1)過程①所用的酶是。(2)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的，從而維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是的再生，進而經(jīng)過形成愈傷組織。(3)經(jīng)過②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的（填寫細(xì)胞器名稱）存在，可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(4)采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株1~4進行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1~4中一定是雜種植株的有。

雜種植株染色體數(shù)目材料染色體數(shù)花椰菜18黑芥16雜種植株128雜種植株226雜種植株330雜種植株424雜種植株534(5)進一步檢測獲得的雜種植株的染色體條數(shù)，結(jié)果如上表，除了紫外線處理使黑芥原生質(zhì)體染色體片段化導(dǎo)致染色體條數(shù)改變以外，雜種植株染色體條數(shù)在24-34范圍內(nèi)不等的原因可能是。(6)對雜種植株進行接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株?！即鸢浮?1)纖維素酶和果膠酶(2)滲透壓細(xì)胞壁脫分化(3)葉綠體(4)1、2、4(5)雜種細(xì)胞分裂過程中會丟失來自黑芥、花椰菜的部分染色體，有時會發(fā)生染色體易位(6)黑腐病菌〖祥解〗分析題圖：圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁的過程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株?！驹斘觥浚?）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，可采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。（2）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓以維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進而脫分化形成愈傷組織。（3）過程②使用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合后，需要篩選出融合的雜種細(xì)胞，可以通過觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（4）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段，黑芥含有堿基對為1000、1300和1500的片段，再生植株3只含有長度為300和600的片段，與花椰菜一致，而1、2、4既含有花椰菜DNA片段，又含有黑芥DNA片段，為雜種植株。（5）雜種細(xì)胞分裂過程中會丟失來自黑芥、花椰菜的部分染色體，有時會發(fā)生染色體易位，這使雜種植株染色體組成呈現(xiàn)多樣性，因此雜種植株染色體條數(shù)在24-34范圍內(nèi)不等。（6）對雜種植株進行個體水平上進行檢測，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀，即可篩選出具有高抗性的雜種植株。19．KLA是一類在細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的小分子抗癌肽，但其進入細(xì)胞的能力很弱。研究者利用噬菌體展示技術(shù)篩選靶向胰腺癌細(xì)胞的多肽，并利用該多肽對KLA進行改造，以提高其進入細(xì)胞的能力，進而增強其抗癌效果。(1)M13噬菌體是一種在大腸桿菌體內(nèi)的DNA病毒。以胰腺癌細(xì)胞特異性表達的B蛋白為靶點，設(shè)計不同DNA片段，插入M13噬菌體外殼蛋白基因中，并以融合蛋白的形式表達到噬菌體表面，從而獲得展示不同多肽的M13噬菌體庫。(2)將M13噬菌體庫與胰腺癌細(xì)胞共孵育，篩選靶向B蛋白的多肽，過程如圖。第一次洗脫的目的是洗去的噬菌體，對第二次洗脫獲得的噬菌體進行擴增，重復(fù)如圖過程。多輪淘選后，對篩選出的噬菌體進行DNA測序，并與比對，獲得靶向胰腺癌細(xì)胞的HMN多肽及TAP多肽的編碼序列。用熒光素標(biāo)記HMN及TAP多肽，分別與胰腺癌細(xì)胞混合，保溫后漂洗，檢測熒光強度，發(fā)現(xiàn)，因此選取HMN多肽進行后續(xù)實驗。利用基因工程技術(shù)獲得HMN-KLA融合多肽，發(fā)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞對融合多肽的攝取率顯著提高。(3)評估HMN-KLA融合多肽對胰腺癌細(xì)胞的影響，結(jié)果如圖。

如圖結(jié)果表明，。(4)線粒體損傷可導(dǎo)致膜電位下降，釋放細(xì)胞色素C蛋白至細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，進而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。線粒體膜電位正常時，熒光染料M以紅色熒光聚集體的形式存在于線粒體中；膜電位下降時，染料M不能在線粒體中聚集，而以綠色熒光單體的形式存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。為驗證“融合多肽通過破壞線粒體誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡”，利用題目給定的材料和設(shè)備提出實驗思路。主要材料和設(shè)備：胰腺癌細(xì)胞、培養(yǎng)基、HMN-KLA融合多肽、染料M、顯微鏡〖答案〗(1)寄生(2)不能特異性結(jié)合設(shè)計的DNA片段用熒光素標(biāo)記HMN多肽的一組中熒光強度更強(3)HMN-KLA融合多肽對胰腺癌細(xì)胞活性的抑制作用較強，且隨著HMN-KLA融合多肽的濃度升高，對胰腺癌細(xì)胞的抑制作用增強(4)將胰腺癌細(xì)胞分成A、B兩組，A組細(xì)胞置于含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，B組置于不含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其他培養(yǎng)條件相同，并用染料M對兩組細(xì)胞進行染色，一段時間后用顯微鏡觀察兩組細(xì)胞中熒光染料M存在的部位。〖祥解〗噬菌體是一類病毒的統(tǒng)稱，它們主要的寄生目標(biāo)是特定的某些細(xì)菌，噬菌體的寄生可以導(dǎo)致細(xì)菌的破裂，因此被稱為噬菌體?！驹斘觥浚?）噬菌體是一類病毒的統(tǒng)稱，它們主要的寄生目標(biāo)是特定的某些細(xì)菌，因此M13噬菌體是一種寄生在大腸桿菌體內(nèi)的DNA病毒。（2）多種基因分別轉(zhuǎn)入不同噬菌體DNA上，表達出多種不同的多肽，要檢測哪個噬菌體能表達出與B蛋白特異性結(jié)合的多肽，需要將胰腺癌細(xì)胞與噬菌體混合，第一次洗脫掉的是不能特異性結(jié)合的，第二次是將與胰腺癌細(xì)胞B蛋白結(jié)合的洗脫下來，因此收集第二次洗脫液，提取篩選出的噬菌體DNA進行測序，并與所設(shè)計的DNA片段進行對比，獲得靶向胰腺癌細(xì)胞的HMN多肽及TAP多肽的編碼序列；用熒光素標(biāo)記HMN及TAP多肽，分別與胰腺癌細(xì)胞混合，保溫后漂洗，檢測熒光強度，若發(fā)現(xiàn)用熒光素標(biāo)記HMN多肽的一組中熒光強度更強，說明HMN多肽與乳腺癌細(xì)胞的相對結(jié)合力更強，因此選取HMN多肽進行后續(xù)實驗。（3）如圖分析可知，與其他三組相比，不同濃度下的HMN-KLA融合多肽處理下胰腺癌細(xì)胞活性均是最低的，且濃度越高，胰腺癌細(xì)胞活性越低，表明HMN-KLA融合多肽對胰腺癌細(xì)胞活性的抑制作用較強，且隨著HMN-KLA融合多肽的濃度升高，對胰腺癌細(xì)胞的抑制作用增強。（4）由題意可知，線粒體膜電位正常時，熒光染料M以紅色熒光聚集體的形式存在于線粒體中；膜電位下降時，染料M不能在線粒體中聚集，而以綠色熒光單體的形式存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，若要驗證“融合多肽通過破壞線粒體誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡”，可以將胰腺癌細(xì)胞分成A、B兩組，A組細(xì)胞置于含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，B組置于不含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其他培養(yǎng)條件相同，并用染料M對兩組細(xì)胞進行染色，一段時間后用顯微鏡觀察兩組細(xì)胞中熒光染料M存在的部位。20．閱讀以下材料，回答（1）~（5）題。“人造精子”“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。我國科研人員利用先進的胚胎操作技術(shù)，獲得小鼠“人造精子”的流程如圖1所示：目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過程中可能會成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時發(fā)生異常，跳過分裂期重新進入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍。流式細(xì)胞儀（FACS）可根據(jù)細(xì)胞中DNA含量對不同細(xì)胞進行分選，最終獲得單倍體胚胎干細(xì)胞。小鼠孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞具有一定的受精能力，將其注射到卵細(xì)胞中成功得到健康的小鼠。但是，運用這種技術(shù)獲得的小鼠成活率很低。研究人員發(fā)現(xiàn)小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞中H19和IG兩個基因的DNA甲基化水平要低于精子（甲基化能抑制這兩個基因的表達），隨著細(xì)胞培養(yǎng)時間延長，這兩個區(qū)域甲基化逐漸變少?；谶@些事實，科研人員又進一步設(shè)計實驗明顯提高了小鼠的成活率。“人造精子”由于其基因組的單倍體性，在體外幾乎能夠無限增殖且“受精”后能產(chǎn)生后代，可應(yīng)用于各種基因功能的研究。例如：正常二倍體的胚胎干細(xì)胞包含兩套完整的基因組，如果一條染色體上的基因發(fā)生隱性突變，另一條染色體上的基因可以彌補，就能保證細(xì)胞的正常生長。對于單倍體細(xì)胞來說，無論基因發(fā)生顯性突變或隱性突變，由于沒有備份基因來補償其功能的缺失，就會出現(xiàn)相應(yīng)的生理缺陷，進而得知該基因與這一生理功能相關(guān)。（1）文中提到的小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞有個染色體組，該類細(xì)胞可通過方式進行增殖，能夠長期傳代培養(yǎng)。已知小鼠Y染色體比X染色體短小，因此實驗無法獲得含Y染色體的單倍體胚胎干細(xì)胞，其原因可能是。（2）將利用同一小鼠獲得的孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞分別注射到不同卵細(xì)胞中，激活并啟動胚胎發(fā)育，成功得到多個健康小鼠。這些小鼠被稱為半克隆小鼠的原因是。（請從遺傳物質(zhì)的來源進行分析）（3）圖2為FACS檢測的結(jié)果，下列相關(guān)分析正確的是：A．c峰中細(xì)胞的DNA含量是b峰中的2倍，是a峰中的4倍B．a(chǎn)峰與b峰，b峰與c峰之間的細(xì)胞正進行DNA復(fù)制C．c峰中的細(xì)胞有處于分裂期的單倍體細(xì)胞D．a(chǎn)峰中的細(xì)胞是科研人員想要獲得的單倍體細(xì)胞（4）結(jié)合文中信息推測科研人員如何提高了半克隆小鼠的成活率。（5）基于文中信息，請從構(gòu)建基因突變小鼠模型、遺傳病的控制等角度分析“人造精子”可能具有的應(yīng)用價值（寫出一條即可）?！即鸢浮剑?）1有絲分裂Y染色體上的基因無法支持單倍體胚胎干細(xì)胞的存活/Y染色體上缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因（2）克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)全部來自同一個體，半克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來自同一個雄性個體（3）ABD（4）提高H19和IG基因的甲基化水平/抑制H19和IG基因的表達/敲除H19和IG基因（5）應(yīng)用價值1：可利用具有顯性突變基因的“人造精子”與卵細(xì)胞受精，構(gòu)建各種基因突變的小鼠模型庫，進而在個體水平上研究基因的功能。應(yīng)用價值2：若父親的精子存在基因缺陷，可利用能無限增殖且可供長時間修復(fù)操作、檢測、挑選的“人造精子”，進行突變基因的修復(fù)。（〖答案〗合理即可得分）〖祥解〗“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過程中可能會成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時發(fā)生異常，跳過分裂期重新進入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍?！驹斘觥浚?）小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞有一個染色體組，可通過有絲分裂方式進行增殖。小鼠Y染色體比X染色體短小，包含的基因信息不完整，無法支持單倍體胚胎干細(xì)胞的存貨，因此實驗無法獲得含Y染色體的單倍體胚胎干細(xì)胞。（2）克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來自單倍體干細(xì)胞，一半來自生殖細(xì)胞，全部來自同一個體。半克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來自同一個雄性個體。（3）由圖可知，a峰的DNA含量為20，b峰的DNA含量為40，c峰的DNA含量為80，c峰中細(xì)胞的DNA含量是b峰中的2倍，是a峰中的4倍。a峰與b峰，b峰與c峰之間的細(xì)胞正進行DNA復(fù)制。a峰的DNA含量為20是科研人員想要獲得的單倍體細(xì)胞。（4）題中信息“小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞中H19和IG兩個基因的DNA甲基化水平要低于精子（甲基化能抑制這兩個基因的表達），隨著細(xì)胞培養(yǎng)時間延長，這兩個區(qū)域甲基化逐漸變少。”所以可通過提高H19和IG基因的甲基化水平來提高半克隆小鼠的成活率。（5）“人造精子”可能具有的應(yīng)用價值可能有：構(gòu)建各種基因突變的小鼠模型庫，進而在個體水平上研究基因的功能；進行突變基因的修復(fù)等。21．大腸桿菌能進入實體瘤核心并保持較強活性，科研人員期望利用大腸桿菌構(gòu)建一種基因表達可控的工程菌，期望用于人體特定部位實體瘤的免疫治療。(1)科研人員利用溫度敏感型轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白構(gòu)建溫控表達的質(zhì)粒系統(tǒng)，如下圖。①利用來自λ噬菌體的溫度敏感型轉(zhuǎn)錄抑制因子Tcl42作為“開關(guān)”構(gòu)建溫控抑制元件，在（選填“λ噬菌體”、“大腸桿菌”或“人”）中具強活性的啟動子pLac可以使Tcl42持續(xù)性表達，抑制啟動子pRL；當(dāng)控溫至42℃時才開啟特定基因的表達。②Tcl42開關(guān)僅在加熱時瞬時激活特定基因，而免疫療法需要數(shù)周才能見效，所以設(shè)計了“基因電路”——一次短暫的溫度激活后可維持長期的基因表達。其核心基因包括重組酶Bxb1基因、分泌型αPD-L1蛋白基因（該蛋白可用免疫治療）等。請選擇相關(guān)選項完善該“基因電路”的技術(shù)路線：及質(zhì)粒，獲基因電路→受體菌37℃時，蛋白Tcl42抑制啟動子pRL→→免疫元件無功能（不表達αPD-L1）→→解除蛋白Tcl42對啟動子pRL的抑制→→→細(xì)菌合成GFP，并分泌大量αPD-L1。A、重組酶Bxb1基因不表達

B、菌體升溫至42℃時C、用不同的限制酶、DNA連接酶分別處理溫控抑制元件、重組元件、免疫元件D、啟動子p7啟動熒光蛋白GFP基因、αPD-L1基因的轉(zhuǎn)錄E、重組酶Bxb1基因表達，進而引起啟動子p7兩側(cè)發(fā)生重組(2)科研人員用處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，從而將“基因電路”質(zhì)粒導(dǎo)入菌體內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)、涂布后，篩選（選項），由此成功構(gòu)建用于免疫治療的溫控工程菌（EcT）。A、含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上形成的菌落

B、具有綠色熒光的菌落C、同時具有A和B特征的菌落

D、具有A或B特征的菌落均可(3)使用聚焦超聲（FUS）裝置，可以使動物特定范圍的組織快速升溫至42℃，從而實現(xiàn)體內(nèi)微生物治療的溫度控制。為驗證上述溫控工程菌的治療腫瘤效果，選取若干組生理狀態(tài)相近的小鼠，經(jīng)過7天的成瘤建模后，分別進行如下處理，并檢測記錄小鼠體內(nèi)腫瘤體積。第1組：注射生理鹽水，2天后FUS處理；第2組：注射溫控工程菌，2天后FUS處理。請評價并完善實驗方案。最終證明溫控工程菌可被FUS處理局部激活，并具有持續(xù)性腫瘤免疫治療效果。(4)若期望將上述溫控工程菌用于臨床實驗，還需利用小鼠開展方面的研究?！即鸢浮?1)大腸桿菌CABED(2)Ca2+A(3)該實驗方案無法排除改造后的溫控工程菌在未熱激活狀態(tài)對腫瘤生長的影響，應(yīng)增設(shè)溫控工程菌在未熱激活狀態(tài)的對照組(4)溫控工程菌或溫控工程菌+FUS對哺乳動物重要臟器（肝、腎、神經(jīng)系統(tǒng)等）的影響；與現(xiàn)行臨床藥物相比，效果是否具有優(yōu)勢；溫控工程菌在非FUS處理部位是否有非特異性激活〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥浚?）①“基因電路”的技術(shù)路線實驗的目的是利用溫度敏感型轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白構(gòu)建溫控表達的大腸桿菌質(zhì)粒系統(tǒng)，因此，使Tcl42持續(xù)性表達的具強活性的啟動子pLac應(yīng)該來自大腸桿菌。②“基因電路”的技術(shù)路線要起作用，第一步要構(gòu)建“基因電路”，因此要先用不同的限制酶、DNA連接酶分別處理溫控抑制元件、重組元件、免疫元件及質(zhì)粒，使這些元件能夠連接成“基因電路”；依題意，當(dāng)溫度不到42℃時具強活性的啟動子pLac可以使Tcl42持續(xù)性表達，抑制啟動子pRL，則與其構(gòu)成一個表達單位的重組酶Bxb1基因不表達。重組酶的作用位點在免疫元件中，重組酶Bxb1基因不表達，則αPD-L1不表達，免疫元件無功能；當(dāng)控溫至42℃時解除蛋白Tcl42對啟動子pRL的抑制，重組酶Bxb1基因表達，進而引起啟動子p7兩側(cè)發(fā)生重組，啟動子p7啟動熒光蛋白GFP基因、αPD-L1基因的轉(zhuǎn)錄。從而使細(xì)菌合成GFP，并分泌大量αPD-L1。綜合以上分析，“基因電路”的技術(shù)路線是：C、用不同的限制酶、DNA連接酶分別處理溫控抑制元件、重組元件、免疫元件及質(zhì)粒，獲基因電路→受體菌37℃時，蛋白Tcl42抑制啟動子pRL→A、重組酶Bxb1基因不表達→免疫元件無功能（不表達αPD-L1）→B、菌體升溫至42℃時→解除蛋白Tcl42對啟動子pRL的抑制→E、重組酶Bxb1基因表達，進而引起啟動子p7兩側(cè)發(fā)生重組→D、啟動子p7啟動熒光蛋白GFP基因、αPD-L1基因的轉(zhuǎn)錄→細(xì)菌合成GFP，并分泌大量αPD-L1。（2）在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后將“基因電路”質(zhì)粒導(dǎo)入菌體內(nèi)。依題意，重組的質(zhì)粒中帶有抗四環(huán)素的抗性基因，因此，可含有四環(huán)素的培養(yǎng)基來篩選含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，能在該培養(yǎng)基上形成的菌落就是成功構(gòu)建用于免疫治療的溫控工程菌菌落，A符合題意，BCD不符合題意。故選A。（3）依題意，該實驗的目的是驗證上述溫控工程菌的治療腫瘤效果，但若按照題意實驗，則無法排除改造后的溫控工程菌在未熱激活狀態(tài)對腫瘤生長的影響，因此，應(yīng)增設(shè)一組溫控工程菌在未熱激活狀態(tài)的對照組。（4）若期望將上述溫控工程菌用于臨床實驗，則還要檢驗工程菌的優(yōu)勢、作用效果、安全性等方面的影響實驗。因此，還需利用小鼠開展溫控工程菌或溫控工程菌+FUS對哺乳動物重要臟器（肝、腎、神經(jīng)系統(tǒng)等）的影響；與現(xiàn)行臨床藥物相比，效果是否具有優(yōu)勢；溫控工程菌在非FUS處理部位是否有非特異性激活方面的研究。北京市2023-2024學(xué)年高二綜合測試卷02（滿分100分，時間90分鐘）第一部分（選擇題共30分）本部分共15題，每題2分，共30分。在每題列出的四個選項中，選出最符合題目要求的一項。1．在一些傳統(tǒng)食品的制作過程中，滅菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列說法正確的是（）A．葡萄制作果酒過程中，葡萄用清水沖洗后需用70%的酒精消毒B．金華火腿制作過程中鹽腌等防腐措施能抑制微生物生長繁殖C．制作泡菜時泡菜壇要密封，主要目的是避免外界雜菌的污染D．泡菜腌制過程中，通常用加入抗生素的方法來抑制雜菌〖答案〗B〖祥解〗1、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～25℃；反應(yīng)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。3、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷４姿峋淖钸m生長溫度為30～35℃?！驹斘觥緼、發(fā)酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒過程中，葡萄用清水沖洗后瀝干即可，A錯誤；B、金華火腿制作過程中鹽腌等防腐措施能抑制微生物生長繁殖，這是因為食鹽的主要成分是NaCl，當(dāng)細(xì)胞的鹽濃度過高就會導(dǎo)致微生物細(xì)胞失水，從而失去活性，B正確；C、制作泡菜時泡菜壇要密封，主要目的是提供無氧環(huán)境，使得乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，C錯誤；D、制作泡菜時，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸鹽還原菌和其他雜菌。乳酸菌可使蔬菜發(fā)酵，能有效控制發(fā)酵過程，抑制其他菌類和微生物生長，它保存有大量維生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的營養(yǎng)易被人體吸收利用。鹽濃度高以及酒精可抵制雜菌生長，防止泡菜發(fā)霉、變質(zhì)，所以我們在泡菜水中要加鹽和白酒來抑制雜菌而非添加抗生素，D錯誤。故選B。2．小曲白酒以大米、大麥、小麥等為原料，以小曲為發(fā)酵劑釀造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧微生物霉菌、兼性厭氧型微生物酵母菌，還有乳酸菌、醋酸菌等細(xì)菌。釀酒的原理主要是酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精。傳統(tǒng)釀造工藝流程如圖所示。關(guān)于小曲白酒的釀造過程，下列敘述錯誤的是（）A．若發(fā)酵壇密封不嚴(yán)可能會導(dǎo)致酒變酸B．蒸熟的原料立即加入糟醅后密封可高效進行酒精發(fā)酵C．糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖D．釀造白酒的過程也是微生物生長繁殖的過程〖答案〗B〖祥解〗1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃?！驹斘觥緼、釀造過程中應(yīng)在無氧條件下進行，若密封不嚴(yán)，會導(dǎo)致醋酸菌在有氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生醋酸而使酒變酸，A正確；B、蒸熟并攤晾的原料需要冷卻后才可加入糟醅，不能馬上密封，需要提供氧氣先讓糟醅中的好氧型霉菌將原料中的淀粉糖化，以及讓酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖，B錯誤；C、糖化過程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶將淀粉分解為葡萄糖，C正確；D、釀造白酒的過程也是酵母菌等微生物利用糧食中的物質(zhì)進行生長繁殖的過程，D正確。故選B。3．微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。下列關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)的敘述錯誤的是（）A．采用平板劃線法和稀釋涂布平板法均可分離酵母菌B．可用濕熱滅菌法對培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進行滅菌C．通過接種環(huán)連續(xù)蘸取菌液在固體培養(yǎng)基表面劃線的操作，可將菌種逐步稀釋D．完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將接種后的平板進行培養(yǎng)〖答案〗C〖祥解〗微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。【詳析】A、對于微生物進行分離的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，A正確；B、可用濕熱滅菌法（通常是高壓蒸汽滅菌法）對培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進行滅菌，B正確；C、通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，該過程中只蘸取一次菌液，C錯誤；D、完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板（和一個未接種的平板）倒置培養(yǎng)，D正確。故選C。4．某種物質(zhì)A（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解A．研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株。圖中③將M中的菌液稀釋一定倍數(shù)后，取0．1mL涂布到平板上，初步估測搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2．4x108個。相關(guān)敘述正確的是（

）

A．實驗時，淤泥及盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌B．乙中需要加瓊脂和物質(zhì)A等，實驗需設(shè)平行重復(fù)實驗，無需另外設(shè)置空白對照C．③接種方法為稀釋涂布平板法，涂布時用涂布器蘸取菌液均勻涂布于平板上D．若乙平板上菌落數(shù)平均為240個，則接種的菌液的稀釋倍數(shù)為105〖答案〗D〖祥解〗分析題圖：①為淤泥取樣進行稀釋，②為接種到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，④為挑取單菌落接種，⑤在以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進一步篩選出高效降解A的菌株。【詳析】A、實驗時，要從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株，則圖①為淤泥取樣進行稀釋，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，淤泥中有菌種，因此不能進行滅菌處理；盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，A錯誤；B、識圖分析可知，③是稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，因此乙為固體培養(yǎng)基，需要加瓊脂和物質(zhì)A等，為了提高準(zhǔn)確度，實驗需設(shè)平行重復(fù)實驗，且需要另外設(shè)置空白對照，檢測培養(yǎng)基配制是否合格，B錯誤；C、③接種方法為稀釋涂布平板法，接種工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，應(yīng)該將菌液用微量移液管加入到培養(yǎng)基中，用涂布器進行均勻涂抹，C錯誤；D、若乙平板上長出的菌落數(shù)平均為240個，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，根據(jù)搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個，在每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，則有240×a÷0.1=2.4×108，則稀釋倍數(shù)a=105，D正確。故選D。5．工業(yè)污水中含有的多環(huán)芳烴類化合物（僅含C、H元素）會造成農(nóng)田土壤污染。研究人員按照如圖所示的流程從受污染的農(nóng)田土壤中分離得到能高效降解多環(huán)芳烴類化合物的細(xì)菌菌株。下列敘述錯誤的是（

）A．甲、乙培養(yǎng)基中應(yīng)以多環(huán)芳烴類化合物為唯一碳源B．步驟①接種操作需要在酒精燈火焰附近進行C．步驟②中應(yīng)用涂布器從甲中蘸取菌液均勻涂布于培養(yǎng)基乙表面D．步驟③中應(yīng)從降解圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落進行挑選〖答案〗C〖祥解〗圖示表示科研人員從被多環(huán)芳烴類化合物污染的土壤中分離出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株的主要步驟。培養(yǎng)基甲和乙中加入多環(huán)芳烴類化合物作為唯一碳源，其目的是篩選出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株?！驹斘觥緼、該研究的目的是從被多環(huán)芳烴類化合物污染的土壤中分離出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株，所以甲、乙培養(yǎng)基中應(yīng)以多環(huán)芳烴類化合物為唯一碳源，A正確；B、為了能篩選出高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株、防止雜菌污染，在進行步驟①培養(yǎng)的接種操作時，需要在酒精燈火焰附近進行，B正確；C、步驟②是采用稀釋涂布平板法接種并分離高效降解多環(huán)芳烴類化合物的菌株（目的菌），應(yīng)先用微量移液器從甲中取0.1mL菌液滴加到培養(yǎng)基乙的表面，再用涂布器將菌液均勻涂布于培養(yǎng)基乙的表面，C錯誤；D、透明圈直徑與菌落直徑比值越大，說明目的菌降解多環(huán)芳烴類化合物的效果越好，因此步驟③應(yīng)從降解圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落進行挑選菌株并培養(yǎng)，D正確。故選C。6．三白草和魚腥草二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被中醫(yī)用作“藥對”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到雜種細(xì)胞，并實現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，操作如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．①過程可利用鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液來完成B．②過程通常在低滲溶液中采用PEG融合法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，其特有功能喪失，但結(jié)構(gòu)不變D．圖中所示的生產(chǎn)流程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性，但未體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性〖答案〗D〖祥解〗圖示為三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程，其中①為去除細(xì)胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③脫分化形成愈傷組織，④提取代謝產(chǎn)物?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此過程①三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程中要利用纖維素酶和果膠酶水解細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液會殺死細(xì)胞，A錯誤；B、過程②通常在等滲或略高滲溶液中，不能用低滲溶液，不然原生質(zhì)體會吸水漲破；可以采用化學(xué)法（PEG融合法）或物理法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，B錯誤；C、植物細(xì)胞的脫分化就是讓已分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞——愈傷組織的過程，因此雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，其特有功能喪失，結(jié)構(gòu)也發(fā)生改變，C錯誤；D、圖中過程②原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性；將雜種細(xì)胞培育成一個完整的新的植物體的過程才體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，故圖中所示的生產(chǎn)流程沒有體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，D正確。故選D。7．紫杉醇是細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物，對多種癌癥有較好治療效果?？蒲腥藛T為獲得更多紫杉醇，嘗試?yán)弥参锝M織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列敘述正確的是（

）A．配置培養(yǎng)基時，添加適量的植物生長調(diào)節(jié)劑和凝固劑B．細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞C．用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，利于原生質(zhì)體融合D．采用非胚性愈傷組織的目的是通過器官發(fā)生途徑再分化成植株〖答案〗B〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)的過程:離體的植物組織。器官或細(xì)胞(外植體)脫分化形成愈傷組織愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、該，不需要培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，不需要添加凝固劑，A錯誤；B、細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞，B正確；C、用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁為了將愈傷組織分散成單個細(xì)胞，C錯誤；D、采用非胚性愈傷組織的目的是通過體細(xì)胞發(fā)生途徑再分化成植株，D錯誤。故選B。8．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（）A．動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞B．從細(xì)胞株中分離出特殊性質(zhì)的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)獲得細(xì)胞系C．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成單層細(xì)胞D．能連續(xù)傳代的細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，但不一定有異倍體核型、接觸抑制〖答案〗B〖祥解〗1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、細(xì)胞株和細(xì)胞系（1）細(xì)胞株：是指從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，能夠繁殖50代左右。（2）細(xì)胞系：是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，分為連續(xù)細(xì)胞系和有限細(xì)胞系，其中連續(xù)細(xì)胞系是指能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系，是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系，大多數(shù)具有異倍體核型，有的是惡性細(xì)胞系，具有異體致癌性，有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性，但保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌；有限細(xì)胞系是指不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。二倍體細(xì)胞一般為有限細(xì)胞系?！驹斘觥緼、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理即是細(xì)胞增殖，可獲得大量自身健康細(xì)胞，用于檢測有毒物質(zhì)等，A正確；B、通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株，細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系，B錯誤；C、由于接觸抑制，動物細(xì)胞培養(yǎng)時只能形成單層細(xì)胞，C正確；D、連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，有的獲得了不死性（癌變），但保留接觸抑制現(xiàn)象，大多數(shù)具有異倍體核型，D正確。故選B。9．研究表明，髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2（TREM2）是一種免疫抑制受體，在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因此，TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免疫療法的療效。下圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列說法正確的是（

）A．步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗體的雜交瘤細(xì)胞B．經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞既能分泌TREM2抗體又可無限增殖C．步驟③和④的培養(yǎng)孔中均含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理都是抗原一抗體雜交D．步驟⑥和植物組織培養(yǎng)均需使用二氧化碳培養(yǎng)箱進行大規(guī)模培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斘觥緼、步驟①向小鼠注射TREM2蛋白，讓小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；步驟⑤向小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞，目的是獲得單克隆抗體，A正確；B、經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞才能既能分泌TREM2抗體又可無限增殖，B錯誤；C、步驟③的培養(yǎng)孔中含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理是抗原-抗體雜交，步驟④的培養(yǎng)孔中含有特定的培養(yǎng)基，依據(jù)的原理是雜交瘤細(xì)胞能分泌抗體，C錯誤；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中二氧化碳用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值，而植物組織培養(yǎng)的過程中不需要二氧化碳培養(yǎng)箱，D錯誤。故選A。10．利用治療性克隆技術(shù)治療胰島功能異常型糖尿病患者的基本流程如圖所示，下列敘述正確的是（

）A．胚胎干細(xì)胞可以取自囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團B．細(xì)胞培養(yǎng)需要含有95%氧氣和5%二氧化碳的氣體條件C．該流程利用了細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植和胚胎移植技術(shù)D．患者對注入的胰島細(xì)胞會產(chǎn)生免疫排斥〖答案〗A〖祥解〗治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞)，用于治療?！驹斘觥緼、囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞具有全能性，可以作為胚胎干細(xì)胞，A正確；B、細(xì)胞培養(yǎng)需要含有95%的空氣和5%的二氧化碳的氣體條件，B錯誤；C、此流程中沒有利用胚胎移植技術(shù)，C錯誤；D、培養(yǎng)的健康胰島細(xì)胞是由患者自身的胚胎干細(xì)胞發(fā)育而成，患者對注入的胰島細(xì)胞不發(fā)生免疫排斥，D錯誤。故選A。11．如圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，有關(guān)分析錯誤的是（）

A．應(yīng)用1中的卵母細(xì)胞常取自卵巢，并可直接用于融合B．應(yīng)用2常用雌性激素處理供體1，目的是使其超數(shù)排卵C．應(yīng)用3一般選擇桑葚胚或囊胚進行分割D．應(yīng)用4體現(xiàn)了動物細(xì)胞的全能性〖答案〗C〖祥解〗1、應(yīng)用1用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用2用到了體外受精技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用3用到了胚胎分割技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用4用到了胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。2、細(xì)胞的全能性是指經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生完整有機體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性。【詳析】A、應(yīng)用1用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，用到的卵母細(xì)胞常取自卵巢，但是需要在體外培養(yǎng)到MⅡ中期才能用于融合，A錯誤；B、應(yīng)用2用到了體外受精技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，常用外源促性腺激素處理供體1，目的是目的是使其超數(shù)排卵，B錯誤；C、應(yīng)用3用到了胚胎分割技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，一般選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進行分割，C正確；D、應(yīng)用4用到了胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，因為培養(yǎng)的目的是需要的組織和器官，而不是個體或其他各種細(xì)胞，所以不能體現(xiàn)動物細(xì)胞的全能性，D錯誤。故選C。12．關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗，下列說法錯誤的是（

）A．過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進行是為了防止DNA降解B．DNA