《白砂糖中47種農(nóng)藥殘留量測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（征求意見稿）

2T/GXAQXXXX—XXXX白砂糖中47種農(nóng)藥殘留量測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法警告：實(shí)驗(yàn)中所使用的溶劑和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均為有毒有害化合物，其溶液配制應(yīng)在通風(fēng)柜中進(jìn)行，操作時(shí)應(yīng)按規(guī)定要求佩戴防護(hù)器具，避免接觸皮膚和衣物。本文件規(guī)定了白砂糖中47種農(nóng)藥殘留量的制樣和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本文件適用于白砂糖中乙草胺、甲草胺、莠滅凈、阿特拉津、保棉磷、丁草胺、硫線磷、多菌靈、克百威、氯蟲苯甲酰胺、異噁草酮、噻蟲胺、氰草津、二嗪磷、樂果、呋蟲胺、敵草隆、滅線磷、吡氟禾草靈、地蟲硫磷、噻唑膦、氯吡嘧磺隆、環(huán)嗪酮、吡蟲啉、水胺硫磷、甲基異硫磷、硝磺草酮、滅多威、異丙甲草胺、久效磷、氧樂果、甲拌磷、甲基硫環(huán)磷、辛硫磷、抗玡威、丙環(huán)唑、苯嘧磺草胺、西瑪津、甲磺草胺、蟲酰肼、丁噻隆、噻蟲嗪、甲基托布津、抗倒酯、氟苯蟲酰胺、甲咪唑煙酸、殺螟丹共47種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1農(nóng)藥殘留pesticideresidue農(nóng)藥使用后一定時(shí)期內(nèi)沒有被分解完全而殘留于收獲物的農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物等的總稱。4原理樣品粉碎后經(jīng)1%乙酸乙腈溶液提取，同時(shí)加入內(nèi)標(biāo)溶液，提取液用氮?dú)獯蹈桑?.1%乙酸乙腈溶液-水（50:50）混合溶液復(fù)溶，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定，內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。5試劑和材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為色譜純，水符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。5.1試劑3T/GXAQXXXX—XXXX乙腈丙酮5.2溶液配制0.05%甲酸水溶液（含10mmol/mL甲酸銨）：取甲酸0.5mL，甲酸銨0.63g，加水1000mL使溶解。0.05%甲酸甲醇溶液（含10mmol/mL甲酸銨）：取甲酸0.5mL，甲酸銨0.63g，加甲醇1000mL使溶解。1%乙酸乙腈溶液：取乙酸10mL，加乙腈稀釋至1000mL。0.1%乙酸乙腈溶液-水（50:50）：取乙酸1mL，加乙腈稀釋至1000mL，再加水1000mL，混勻。5.3材料0.22μm尼龍濾膜。離心管：15mL、50mL。容量瓶：5mL、10mL。5.4標(biāo)準(zhǔn)品5.4.1農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)品乙草胺、甲草胺、莠滅凈、阿特拉津、保棉磷、丁草胺、硫線磷、多菌靈、克百威、氯蟲苯甲酰胺、異噁草酮、噻蟲胺、氰草津、二嗪磷、樂果、呋蟲胺、敵草隆、滅線磷、吡氟禾草靈、地蟲硫磷、噻唑膦、氯吡嘧磺隆、環(huán)嗪酮、吡蟲啉、水胺硫磷、甲基異硫磷、硝磺草酮、滅多威、異丙甲草胺、久效磷、氧樂果、甲拌磷、甲基硫環(huán)磷、辛硫磷、抗玡威、丙環(huán)唑、苯嘧磺草胺、西瑪津、甲磺草胺、蟲酰肼、丁噻隆、噻蟲嗪、甲基托布津、抗倒酯、氟苯蟲酰胺、甲咪唑煙酸、殺螟丹，濃度均為0.1mg/mL?；蚪?jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。5.4.2同位素內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品氘代莠去津、氘代倍硫磷，濃度均為0.05mg/mL?；蚪?jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。5.5標(biāo)準(zhǔn)溶液制備5.5.1混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備液的制備精密量取各單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液（0.1mg/mL）各0.1mL，置于同一10mL容量瓶中，加入丙酮0.2mL，用乙腈稀釋至刻度，混勻。5.5.2內(nèi)標(biāo)溶液的制備精密量取內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mL，置于5mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，混勻。5.5.3混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)曲線溶液的制備精密量取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.02mL、0.05mL、0.1mL、0.25mL、0.5mL、0.75mL、1.0mL分別置于10mL容量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液0.1mL，用0.1%乙酸乙腈溶液-水（50:50）混合溶液稀釋至刻度，搖勻。濃度分別為2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL。6儀器和設(shè)備4T/GXAQXXXX—XXXX超高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源，多反應(yīng)檢測(cè)（MRM）模式。電子天平：感量為0.01mg。離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于6000r/min。渦旋振蕩器。粉碎機(jī)。移液器和槍頭。7試樣的制備取適量空白或供試白砂糖，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎研磨。a)取粉碎后的供試樣品，作為供試試樣；b)取粉碎后的空白樣品，作為空白試樣。8分析步驟8.1提取取白砂糖樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎研磨成粉末，取約2g，精密稱定，置50mL離心管中，分別精密加入內(nèi)標(biāo)溶液20μL和1%乙酸乙腈溶液10mL，渦旋5min，靜置，取上清液經(jīng)0.22μm濾膜濾過，棄去初濾液約3.5mL,精密量取續(xù)濾液5mL置15mL離心管中，氮?dú)獯抵两?，?.1%乙酸乙腈溶液-水（50:50）混合溶液定容至1mL，渦旋3min使溶解，以6000r/min離心5min，取上清液，作為試樣溶液，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。8.2基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)曲線溶液的制備取空白樣品除不加內(nèi)標(biāo)溶液外，其余按照“8.1”項(xiàng)下操作至“氮?dú)獯抵两伞?，精密加入?.5.3”項(xiàng)下各標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液各1mL，渦旋3min使溶解，以6000r/min離心5min，取上清液，作為基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)曲線溶液，濃度分別為2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、75ng/mL、100 ng/mL。以測(cè)得特征離子色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)（氘代莠去津）峰面積的比值為縱坐標(biāo)，基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線。求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。8.3測(cè)定8.3.1液相色譜參考條件a)色譜柱：島津GIST-AQUPLCC18色譜柱(2.1mm×150mm，3.0μm)，或相當(dāng)者；b)流動(dòng)相：A為0.05%甲酸水溶液甲酸銨），梯度洗脫條件見表1；c)流速：0.35mL/min；d)柱溫：40℃;e)進(jìn)樣量：5μL。表1液相色譜梯度洗脫條件A，%B，%05T/GXAQXXXX—XXXXA，%B，%55008.3.2質(zhì)譜參考分析條件f)離子源：電噴霧（ESI）源；g)掃描方式：磺草酮、甲磺草胺、氟苯蟲酰胺為負(fù)離子模式；其余物質(zhì)為正離子模式；h)檢測(cè)方式：分時(shí)間段的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（每一物質(zhì)采集保留時(shí)間前后1分鐘）；i)霧化氣流量：3L/min；j)加熱器流量：10L/min；k)干燥器流量：10L/min；l)接口溫度：300℃;m)脫溶劑溫度：526℃;n)DL管溫度：250℃;o)加熱塊溫度：400℃。p)化合物參考監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞能量等參數(shù)見附錄A。8.3.3測(cè)定法8.3.3.1定性測(cè)定每種被測(cè)組分選擇1個(gè)母離子，2個(gè)以上子離子，在相同實(shí)驗(yàn)條件下，樣品中待測(cè)物質(zhì)的保留時(shí)間，與基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間偏差在±5%之內(nèi)；且樣品中各組分定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較，偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測(cè)物?；|(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)曲線溶液總離子流圖見附錄B。表2使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法定性時(shí)相對(duì)離子豐度最大容許誤差>50%>20%至50%>10%至20%8.3.3.2定量測(cè)定取試樣溶液和基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)曲線溶液，作多點(diǎn)校準(zhǔn)，內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。試樣溶液中待測(cè)組分的響應(yīng)值均應(yīng)在測(cè)定方法的線性范圍內(nèi)。8.4空白實(shí)驗(yàn)除不加試樣外，均按上述測(cè)定步驟進(jìn)行。9結(jié)果計(jì)算和表述試樣中農(nóng)藥的殘留量按公式（1）計(jì)算。6T/GXAQXXXX—XXXXX=…………………（1）式中：X──試樣中農(nóng)藥殘留量的數(shù)值，單位為微克每千克(μg/kgc──根據(jù)各農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的供試品溶液中農(nóng)藥的濃度，單位為微克每升(μg/Lf──供試品溶液的稀釋倍數(shù),單位為毫升（mL）；m──供試品取樣量，單位為克（g）。10檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度10.1靈敏度本方法的檢測(cè)限、定量限見附錄C。10.2準(zhǔn)確的本方法的回收率見附錄C。10.3精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率應(yīng)符合附錄D的要求。7T/GXAQXXXX—XXXX化合物參考監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞能量等參數(shù)表A.148種農(nóng)藥的質(zhì)譜參數(shù)Q1（V）31234567898T/GXAQXXXX—XXXXQ1（V）39T/GXAQXXXX—XXXXQ1（V）3注：每一種農(nóng)藥的第一行為定量離子，第二行為定性離子。T/GXAQXXXX—XXXX基質(zhì)匹配混合標(biāo)準(zhǔn)物