2023-2024學(xué)年遼寧省沈陽市郊聯(lián)體高二下學(xué)期5月期中生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1遼寧省沈陽市郊聯(lián)體2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期5月期中試題考試范圍：選擇性必修三考試時間：75分鐘；注意事項：1．答題前填寫好自己的姓名、班級、考號等信息2．請將〖答案〗正確填寫在答題卡上一、單項選擇題（共15小題，每小題2分，共計30分。在每小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求的）1.酸筍是制作食品“螺螄粉”的靈魂，深受廣大消費者喜愛。傳統(tǒng)酸筍的制作流程與泡菜類似，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.將采購的竹筍進行預(yù)處理時需要對其進行嚴(yán)格滅菌處理B.發(fā)酵過程中的酸性環(huán)境會抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖C.制作過程使用的鹽水需經(jīng)煮沸冷卻，加入壇中沒過蔬菜D.山泉水浸泡時適當(dāng)加入上一批次的發(fā)酵液可加快發(fā)酵〖答案〗A〖祥解〗制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來進行發(fā)酵的。發(fā)酵期間，乳酸會不斷積累。泡菜在腌制過程中會有亞硝酸鹽產(chǎn)生?！驹斘觥緼、竹筍中含有發(fā)酵的天然菌種，故不能對采摘后的竹筍進行滅菌，否則會殺死發(fā)酵的天然菌種，A錯誤；B、發(fā)酵過程中會產(chǎn)生乳酸，乳酸呈酸性，酸性環(huán)境會抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖，B正確；C、制作過程使用的鹽水要先煮沸滅菌后再冷卻，加入壇中沒過蔬菜，造成無氧環(huán)境，C正確；D、因為上一批次的發(fā)酵液中含有大量的發(fā)酵菌種，故適當(dāng)加入上一批次的發(fā)酵液可加快發(fā)酵進程，D正確。故選A。2.在牛、羊等反芻動物的瘤胃中生活著多種微生物，其中有能分解纖維素的微生物。某科研團隊按照如圖所示的流程分離瘤胃中的纖維素分解菌，實驗中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，并在剛果紅培養(yǎng)基平板上篩選到有透明降解圈的菌落。下列敘述錯誤的是（）注：①②③表示相應(yīng)操作。A.培養(yǎng)基表面均加入一層無菌的石蠟主要是為防止雜菌的污染B.甲培養(yǎng)基中唯一的碳源是纖維素，則該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基C.分離瘤胃中纖維素分解菌的方法可以是稀釋涂布平板法或平板劃線法D.圖中降解圈的大小與纖維素酶活性有關(guān)，菌落a降解能力最強〖答案〗A〖祥解〗剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但與纖維二糖和葡萄糖無法發(fā)生這種反應(yīng)。在含有纖維素的培養(yǎng)基中添加剛果紅，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，復(fù)合物無法形成，培養(yǎng)基中就會出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈?！驹斘觥緼、反芻動物的瘤胃中不含氧氣，其中存在的纖維素分解菌適宜在無氧條件下生存和繁殖，因此培養(yǎng)基表面覆蓋無菌的石蠟主要是為了保證培養(yǎng)的無氧環(huán)境，A錯誤；B、為了篩選纖維素分解菌，需要以纖維素為唯一碳源，能夠分解纖維素的微生物能夠生存，不能分解纖維素的微生物因無法獲得碳源而死亡，因此甲培養(yǎng)基中唯一的碳源是纖維素，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，B正確；C、微生物接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法，分離瘤胃中纖維素分解菌的方法可以是稀釋涂布平板法或平板劃線法，C正確；D、纖維素分解菌能分解纖維素是因為其可以產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶的活性越高，對纖維素的分解效果越好，以這些菌為中心的透明圈的直徑與菌落直徑的比值越大，據(jù)圖比較菌落a的降解能力最強，D正確。故選A。3.為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組設(shè)計了如下的實驗過程。敘述正確的是（）A.過程①獲得的原生質(zhì)體應(yīng)用無菌水培養(yǎng)B.過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生D.原生質(zhì)體雖無細(xì)胞壁但仍保持細(xì)胞全能性〖答案〗D〖祥解〗由圖可知，①表示用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③均表示再分化過程?！驹斘觥緼、原生質(zhì)體在無菌水中會吸水漲破，因此過程①獲得的原生質(zhì)體應(yīng)用等滲溶液培養(yǎng)，A錯誤；B、植物組織培養(yǎng)時，生長素與細(xì)胞分裂素用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向：生長素與細(xì)胞分裂素比例適中時，有利于愈傷組織的形成；生長素/細(xì)胞分裂素比例較高時，利于根的分化；生長素/細(xì)胞分裂素比例較低時，利于芽的分化，因此②誘導(dǎo)芽分化時，需要提高細(xì)胞分裂素的比例，B錯誤；C、③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗，此時細(xì)胞壁已經(jīng)形成，不需要使用秋水仙素，C錯誤；D、原生質(zhì)體無細(xì)胞壁，但由于含有一整套的遺傳物質(zhì)，故具有全能性，D正確。故選D。4.人參皂苷是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生愈傷組織并進行細(xì)胞融合，以提高人參皂苷的產(chǎn)率。下列敘述錯誤的是（）A.細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁B.高Ca2+—高pH溶液可促進細(xì)胞融合C.融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞D.雜交細(xì)胞可能具有生長快速的優(yōu)勢〖答案〗C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)?！驹斘觥緼、在細(xì)胞融合前，必須先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，A正確；B、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合有物理法和化學(xué)法，用高Ca2+—高pH溶液可促進細(xì)胞融合，B正確；C、融合的細(xì)胞中有人參根-人參根細(xì)胞、人參根-胡蘿卜根細(xì)胞、胡蘿卜根-胡蘿卜根細(xì)胞，只有人參根-胡蘿卜根細(xì)胞才是雜交細(xì)胞，C錯誤；D、雜交細(xì)胞含兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，可能具有生長快速的優(yōu)勢，D正確。故選C。5.植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞工程中所用技術(shù)或方法與原理不完全相符的是（）A.植物組織培養(yǎng)獲得幼苗和單克隆抗體技術(shù)制備抗體－－細(xì)胞的全能性B.纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體－－酶的專一性C.原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞－－細(xì)胞膜流動性D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)獲得相應(yīng)產(chǎn)品一－細(xì)胞增殖〖答案〗A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性和全能性，動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性?！驹斘觥緼、植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，單克隆抗體的制備的原理是細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞的增殖，A錯誤；B、植物細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠，用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁制備原生質(zhì)體，利用了酶的專一性，B正確；C、用物理法或者化學(xué)法使得原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合，利用了細(xì)胞膜具有一定的流動性的特點，C正確；D、紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)目的是獲得更多細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物，其原理只涉及細(xì)胞增殖，D正確。故選A。6.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列敘述錯誤的是（）A.在添加了尿素的馬鈴薯培養(yǎng)基上篩選出能分解尿素的細(xì)菌B.培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，需從分子水平及個體水平進行篩選C.胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選D.制備單克隆抗體時，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞〖答案〗A〖祥解〗1、單克隆抗體制備的兩次篩選：①利用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞(去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞)：②進行抗體檢測，篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。2、胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選，此時胚胎應(yīng)發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段。【詳析】A、篩選出能分解尿素的細(xì)菌需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選，馬鈴薯培養(yǎng)基上含有氮源，不能用其添加尿素來篩選能分解尿素的細(xì)菌，A錯誤；B、培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，在將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，需要從分子水平上鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入、穩(wěn)定存在和表達，還需要通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂棉鈴蟲來從個體水平上確定目的基因是否賦予了棉花抗蟲特性和評估其抗性程度，從而篩選出有較好抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。所以，培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，需從分子水平及個體水平進行篩選，B正確；C、胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選，挑取質(zhì)量好，活性強的胚胎進行培養(yǎng)或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正確；D、制備單克隆抗體時，在篩選出雜交瘤細(xì)胞后，需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。上述篩選過程中涉及的抗體檢測屬于分子水平的篩選，所以，制備單克隆抗體時，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。7.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定、DNA片段擴增的敘述錯誤的是（）A.PCR技術(shù)是通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合B.新鮮的雞血、大蒜、洋蔥等都可作為DNA粗提取的實驗材料C.將出現(xiàn)白色絲狀物的溶液倒入離心管中離心，棄上清液取沉淀D.將DNA絲狀物加入二苯胺試劑，沸水浴加熱出現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗D〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色?！驹斘觥緼、PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)原理是DNA雙鏈復(fù)制，利用了DNA的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，A正確；B、新鮮的雞血、大蒜、洋蔥等都含有DNA，因而均可作為DNA粗提取的實驗材料，B正確；C、白色絲狀物中含有DNA分子，將出現(xiàn)白色絲狀物的溶液倒入離心管中離心，棄上清液取沉淀，沉淀物中就是白色絲狀物DNA分子，C正確；D、將DNA絲狀物溶于2mol/L的NaCl的溶液中，再加入二苯胺試劑，混勻后，沸水浴加熱條件下，會出現(xiàn)藍(lán)色，D錯誤。故選D。8.某細(xì)菌DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，經(jīng)Sau3AI處理后會形成4個大小不同的DNA片段。若是用BamHI處理，則只會形成2個大小不同的DNA片段。Sau3AI和BamHI的識別序列及切割位點如表所示。下列敘述不正確的是（）限制酶名稱識別序列及切割位點BamHIG↓GATCCSau3AI↓GATCA.上述兩種限制酶切割后可形成互補的黏性末端B.該DNA分子上有兩個BamHI的酶切位點C.黏性末端能通過T4DNA連接酶連接D.若用兩種酶共同處理，會形成6個大小不同的DNA片段〖答案〗D〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈DNA分子某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斘觥緼、BamHI和Sau3AI兩種限制酶切割后形成互補的黏性末端為GATC，A正確；B、該DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，用BamHI處理后，得到2個DNA片段，說明該DNA分子上有兩個BamHI的酶切位點，B正確；C、T4DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來，此外還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低，C正確；D、該DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，有2個BamHI的酶切位點，但是BamHI識別序列中包含Sau3AI的識別序列，所以同時用兩種酶共同處理，不會形成6個大小不同的DNA片段，D錯誤。故選D。9.科學(xué)家利用基因工程培育出了能產(chǎn)生乙肝病毒蛋白質(zhì)的西紅柿，被稱之為“西紅柿乙肝疫苗”。具體操作是：將乙肝抗原基因M導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后利用農(nóng)桿菌將M導(dǎo)入西紅柿細(xì)胞。實驗顯示小白鼠連續(xù)五周吃這樣的西紅柿，體內(nèi)產(chǎn)生了抗乙肝病毒的抗體，下列敘述錯誤的（）A.用PCR技術(shù)對M基因進行擴增，需要兩種引物B.含M的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌之前，需要用Ca2＋處理農(nóng)桿菌C.含M的重組Ti質(zhì)粒進入西紅柿細(xì)胞中后會插入到西紅柿染色體DNA上D.因為加熱會破壞有效蛋白，“西紅柿乙肝疫苗”需要生吃〖答案〗C〖祥解〗基因工程的基本操作步驟主要包括：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達?！驹斘觥緼、用PCR技術(shù)對M基因進行擴增，需要根據(jù)目的基因兩端堿基序列合成的兩種引物，A正確；B、含M的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌之前，需要用Ca2＋處理農(nóng)桿菌，使農(nóng)桿菌處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)，B正確；C、含M的重組Ti質(zhì)粒進入西紅柿細(xì)胞中后質(zhì)粒上的T-DNA會插入到西紅柿染色體DNA上，C錯誤；D、因為加熱會破壞有效蛋白，為減少高溫對蛋白質(zhì)的影響，“西紅柿乙肝疫苗”需要生吃，D正確。故選C。

10.下列有關(guān)DNA片段的擴增及電泳鑒定實驗的敘述，正確的是（）A.PCR緩沖液中一般要加Mg2+，用于激活DNA聚合酶B.瓊脂糖熔化后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置C.在凝膠中的DNA分子的遷移速率只與DNA分子大小有關(guān)D.為防止PCR產(chǎn)物溢出電泳槽，電泳緩沖液加入電泳槽時不能沒過凝膠〖答案〗A〖祥解〗1、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時內(nèi)復(fù)制出，上百萬份的DNA拷貝。2、利用PCR可以在體外進行DNA片段的擴增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實質(zhì)上就是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器，一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)?！驹斘觥緼、DNA聚合酶需要Mg2+激活，PCR緩沖液中一般要加Mg2+，用于激活DNA聚合酶，A正確；B、瓊脂糖熔化，要稍冷卻后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置，B錯誤；C、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，C錯誤；D、電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜，D錯誤。故選A。11.下列生物技術(shù)操作不會達成預(yù)期目標(biāo)的是（）A.將胰島素基因表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入酵母菌，篩選獲得產(chǎn)胰島素工程菌B.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｈ橄偌?xì)胞，培育產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛C.將體外改造后能識別特定癌細(xì)胞的T細(xì)胞回輸患者，進行癌癥治療D.將花青素代謝相關(guān)基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，獲得具有特定花色的植株〖答案〗B〖祥解〗轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組?；蛑亟M和基因突變、染色體變異均屬于可遺傳的變異；基因治療：指把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段?！驹斘觥緼、將含胰島素基因表達載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入酵母菌，經(jīng)過篩選可以獲得能生產(chǎn)胰島素的工程菌，A正確；B、將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?，可以培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛，如果導(dǎo)入奶牛乳腺細(xì)胞則不能達成預(yù)期目標(biāo)，B錯誤；C、將體外改造后能識別特定癌細(xì)胞的T細(xì)胞回輸患者，可以識別特定的癌細(xì)胞，從而進行癌癥治療，C正確；D、將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得具有特定花色的植株，D正確。故選B。12.HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。雞卵清蛋白是由輸卵管上皮細(xì)胞中卵清蛋白基因特異性表達后分泌至輸卵管內(nèi)，參與構(gòu)成雞蛋清的蛋白質(zhì)。下圖是利用基因工程技術(shù)制備HA蛋白雞輸卵管生物反應(yīng)器的過程。幾種可供選擇的限制酶識別序列如下，下列說法錯誤的是（）A.①為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶、4種游離的脫氧核苷酸等組分B.目的基因與雞卵清蛋白基因啟動子拼接前應(yīng)先在目的基因兩端分別引入HindⅢ和EcoRI的識別序列C.利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，退火溫度偏低、引物特異性差均可導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列D.基因表達載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法〖答案〗B〖祥解〗基因表達載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子等；啟動子是一段由特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出蛋白質(zhì)；終止子位于基因的下游，作用是終止轉(zhuǎn)錄，也是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段?！驹斘觥緼、圖中①以禽流感病毒RNA形成目的基因DNA過程，為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，逆轉(zhuǎn)錄合成的是DNA，需要4種脫氧核苷酸作為原料，A正確；B、要使目的基因能夠與啟動子結(jié)合，目的基因應(yīng)連接在啟動子下游，并借助啟動子啟動轉(zhuǎn)錄過程，按照圖中啟動子上的箭頭方向推測，在重組質(zhì)粒中目的基因插入的位置位于BamHI和EcoRI限制酶切位點之間，故引物應(yīng)具有BamHI和EcoRI限制酶識別序列，B錯誤；C、PCR技術(shù)擴增目的基因時，若退火溫度偏低、則可能導(dǎo)致引物與非目的基因序列部分配對，進而擴增出非目的基因，引物特異性差也會導(dǎo)致和非目的基因序列部分配對，導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列，C正確；D、受體細(xì)胞為動物細(xì)胞時通常采用顯微注射法，因此基因表達載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法，D正確。故選B。13.科學(xué)家們已通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等。采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是（）①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列③藍(lán)色熒光蛋白基因的合成④表達出藍(lán)色熒光蛋白A.①②③④ B.④②①③ C.②③①④ D.②①③④〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→相應(yīng)基因的修飾改造或人工合成→相應(yīng)的表達。【詳析】蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→相應(yīng)基因的修飾改造或人工合成→相應(yīng)的表達，因此，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計→①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列→③藍(lán)色熒光蛋白基因的合成→④表達出藍(lán)色熒光蛋白，D正確，ABC錯誤。故選D。14.20世紀(jì)90年代，有一名19歲的姑娘患了白血病，需要進行骨髓移植。然而，她親人的骨髓配型并不適合她，在骨髓庫中也找不到合適配型的骨髓。她的父母通過“設(shè)計試管嬰兒”生下了一個配型適合她的嬰兒。在嬰兒出生2個月后，醫(yī)生就抽取嬰兒骨髓中的造血干細(xì)胞移植給她，她得救了。下圖是培育“試管嬰兒”的主要過程。下列敘述錯誤的是（）A.“設(shè)計試管嬰兒”需在③時進行遺傳學(xué)診斷B.該嬰兒能健康成長，她的造血干細(xì)胞也可能挽救其他貧血病患者C.“試管嬰兒”與“設(shè)計試管嬰兒”均需要符合國家相關(guān)規(guī)定D.“設(shè)計試管嬰兒”的技術(shù)不屬于“治療性克隆”，“試管嬰兒”與“設(shè)計試管嬰兒”均屬有性生殖〖答案〗A〖祥解〗試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)?！驹斘觥緼、“設(shè)計試管嬰兒”的目的是用于治療某些疾病，需在②胚胎移植前進行遺傳學(xué)診斷，A錯誤；B、該嬰兒能健康成長，只要供者和受者的主要HLA有一半以上相同，即可進行器官移植，因此該女嬰造血干細(xì)胞也能挽救其他貧血病患者，B正確；C、“試管嬰兒”與“設(shè)計試管嬰兒”均需要符合國家相關(guān)規(guī)定，C正確；D、“設(shè)計試管嬰兒”與“試管嬰兒”一樣，也是利用體外授精和胚胎移植的方法培育新生命，均屬于有性生殖，不屬于于“治療性克隆”，D正確。故選A。15.生物技術(shù)是以現(xiàn)代生命科學(xué)理論為基礎(chǔ)，在個體、細(xì)胞及分子水平上研究及制造產(chǎn)品或改造動物、植物、微生物等，并使其具有所期望的品質(zhì)和特性。下列敘述錯誤的是（）A.干細(xì)胞培養(yǎng)在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域前景廣泛，但也可能面臨安全性問題B.蛋白質(zhì)工程是在基因操作水平上改造或創(chuàng)造新的蛋白質(zhì)C.治療性克隆的研究與應(yīng)用必須受到相應(yīng)法律法規(guī)的規(guī)范限制D.生物武器主要影響人畜健康，對植物的影響不大〖答案〗D〖祥解〗干細(xì)胞：動物或人體內(nèi)保留的具有分裂和分化能力的細(xì)胞，在一定的條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。【詳析】A、干細(xì)胞培養(yǎng)在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域前景廣泛，但可能存在安全性問題，A正確；B、蛋白質(zhì)工程通過設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進而對基因進行操作來改造或創(chuàng)造新的蛋白質(zhì)，B正確；C、治療性克隆的研究與應(yīng)用必須受到相應(yīng)法律法規(guī)的規(guī)范限制，我國明令禁止生殖性克隆，C正確；D、生物武器對人畜、植物等均可能造成重大傷害，D錯誤。故選D。二、不定項選擇題（共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個選項中，至少有一項符合題目要求，全部選對的得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分）16.科學(xué)家借助載體將特定基因?qū)氩∪顺衫w維細(xì)胞，獲得類似胚胎干細(xì)胞的一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），通過誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化，可培育出所需器官進行自體移植。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.成纖維細(xì)胞和iPS細(xì)胞中所含基因相同，但表達的基因不完全相同B.iPS細(xì)胞分化成不同細(xì)胞的過程中，遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)種類都發(fā)生了變化C.正常情況下心肌細(xì)胞不能恢復(fù)成iPS細(xì)胞，說明細(xì)胞分化具有不可逆性D.利用iPS細(xì)胞分化形成的器官進行自體移植前，需適當(dāng)注射免疫抑制劑〖答案〗C〖祥解〗細(xì)胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程；細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達?！驹斘觥緼、據(jù)題意“科學(xué)家借助載體將特定基因?qū)氩∪说某衫w維細(xì)胞，獲得類似胚胎干細(xì)胞的一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）”可知，成纖維細(xì)胞和iPS細(xì)胞中所含基因不完全相同，A錯誤；B、iPS細(xì)胞分化成不同細(xì)胞的過程，實質(zhì)是基因的選擇性表達，故基因表達的產(chǎn)物—蛋白質(zhì)的種類發(fā)生了變化，但遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化，B錯誤；C、正常情況下，細(xì)胞的分化是不可逆的，一旦沿著一定方向分化，便不會返回原來的狀態(tài)。故心肌細(xì)胞不能恢復(fù)成iPS細(xì)胞，說明細(xì)胞分化具有不可逆性，C正確；D、依據(jù)題意“科學(xué)家借助載體將特定基因?qū)氩∪说某衫w維細(xì)胞，獲得類似胚胎干細(xì)胞的一種誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），通過誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化，可培育出所需器官進行自體移植”可知，利用iPS細(xì)胞分化形成的器官進行自體移植，可避免機體產(chǎn)生細(xì)胞免疫，無需注射免疫抑制劑，D錯誤。故選C。17.下列關(guān)于動物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是（）A.胚胎移植的實質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移B.抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）中單克隆抗體主要發(fā)揮靶向運輸作用C.卵子受精的標(biāo)志是卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以看到兩個第二極體D.原腸胚進一步擴大，會導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程叫做孵化〖答案〗AB〖祥解〗胚胎移植的生理基礎(chǔ)：（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。【詳析】A、胚胎移植中，受體對移入的外來胚胎基本上不會發(fā)生免疫排斥，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，胚胎移植的實質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，A正確；B、抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）是一類特殊的靶向生物藥劑，由抗體、連接頭和細(xì)胞毒性藥物三部分組成，其中，單克隆抗體作為高特異性和高親和力的組分，能夠識別和結(jié)合目標(biāo)腫瘤細(xì)胞表面的抗原，從而實現(xiàn)將細(xì)胞毒性藥物精確、高效地運輸至目標(biāo)腫瘤細(xì)胞內(nèi)，B正確；C、卵子受精的標(biāo)志是卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以看到兩個極體，一個第一極體，一個第二極體，C錯誤；D、囊胚進一步擴大，會導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程叫做孵化，D錯誤故選AB。18.某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細(xì)胞中目基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。下列說法正確的是（）A.據(jù)圖推斷，該團隊在將甲插入質(zhì)粒PO時，使用了E1、E2和E4這三種限制酶B.將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達C.為了獲得含有甲的轉(zhuǎn)基因牛，最終的操作環(huán)節(jié)為胚胎移植D.為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，可使用PCR方法進行鑒定〖答案〗BCD〖祥解〗1、基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。2、動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物?！驹斘觥緼、某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡稱為甲），據(jù)圖分析，選用產(chǎn)生不同黏性末端的兩種限制酶E1和E4進行切割，保證了甲的完整，并且保證融合基因和質(zhì)粒正確連接，A錯誤；B、L1基因和GFP基因連接在同一個啟動子和終止子之間，因此若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達，B正確；C、由于目前仍不能全體外培養(yǎng)，因此為了獲得含有甲的轉(zhuǎn)基因牛，最終的操作環(huán)節(jié)為胚胎移植，C正確；D、為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，可使用PCR方法進行鑒定目的基因甲是否存在，D正確。故選BCD。19.通過設(shè)計引物，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5'端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關(guān)敘述不正確的是（）A.在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、以及相關(guān)的酶等B.第2輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因C.引物中設(shè)計兩種限制酶識別位點有利于目的基因定向插入運載體D.第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/2〖答案〗ABD〖祥解〗PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，步驟包括高溫變性、復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術(shù)實現(xiàn)了目的基因的定點誘變。其技術(shù)原理是堿基互補配對原則?！驹斘觥緼、在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離脫氧核苷酸、Taq酶等，但不需要加入解旋酶，因為高溫可使DNA解旋，A錯誤；B、第2輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈不等長的突變基因，②較長，B錯誤；C、引物中設(shè)計兩種限制酶識別位點，可以配合載體的限制酶識別位點，幫助目的基因定向定點插入運載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，C正確；D、在第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA有2個，總DNA分子共8個，所以比例為1/4，D錯誤。故選ABD。20.實驗人員將一段外源DNA片段（包含約850個基因）與絲狀支原體（一種原核生物）的DNA進行重組后，植入大腸桿菌，制造出一種“新的生命”。該生物能夠正常生長、繁殖。下列有關(guān)該技術(shù)應(yīng)用的敘述中，錯誤的是（）A.轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以制造某些微生物，用于生產(chǎn)藥品、制造染料、降解有毒物質(zhì)等B.由于存在生殖隔離，因此人造生命進入自然界一般不會破壞生物多樣性C.轉(zhuǎn)基因技術(shù)還可用來增加啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期D.通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將玉米的α-淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中，可以防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播〖答案〗BC〖祥解〗根據(jù)題中“將一段外源DNA片段(包含約850個基因)與絲狀支原體(一種原核生物)的DNA進行重組后，植入大腸桿菌”，屬于基因工程，原理是基因重組?！驹斘觥緼、通過導(dǎo)入不同的目的基因，可用于生產(chǎn)藥品、制造染料、降解有毒物質(zhì)，A正確；B、“新的生命”是一個新的物種，由于其沒有天敵，進入自然界后，會破壞生物的多樣性，B錯誤；C、轉(zhuǎn)基因技術(shù)還可用來減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期，C錯誤；D、在轉(zhuǎn)基因研究工作中，科學(xué)家會采取很多方法防止基因污染，例如，我國科學(xué)家將來自玉米的-淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中，由于淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲藏使花粉失去活性，因而可以防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播，D正確。故選BC。三、非選擇題（共5小題，共55分）21.吃腐爛的水果可能會出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐或者更嚴(yán)重的癥狀，這可能與微生物代謝產(chǎn)生的毒素有關(guān)。某研究小組為了尋找腐爛的蘋果中可安全食用的區(qū)域，開展以下探究實驗。選取蘋果的腐爛部位、距離腐爛部位1cm和2cm的組織做實驗材料，檢測不同區(qū)域中微生物的種類和數(shù)量。已知蘋果的pH為3.5~4，操作流程如下圖?；卮鹣铝袉栴}：（1）根據(jù)題意，本實驗選用的接種方法是_____。（2）制備步驟③中的培養(yǎng)基，配方中應(yīng)含有水、氮源、無機鹽、_____，接種后的平板應(yīng)放在恒溫培養(yǎng)箱中_____培養(yǎng)。（3）每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，待菌落數(shù)目穩(wěn)定時統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少的原因是_____。（4）統(tǒng)計腐爛部位的菌落數(shù)目發(fā)現(xiàn)，青霉菌、曲霉菌等真菌的數(shù)量較多，細(xì)菌數(shù)目很少。細(xì)菌數(shù)目很少可能的原因_____（答出1點即可）。（5）分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，距離腐爛部位越遠(yuǎn)，微生物的數(shù)量越少；距離腐爛部位2cm的樣品中微生物數(shù)量極少。有人認(rèn)為，不能僅憑這個實驗就得出距離腐爛部位2cm的部分可安全食用的結(jié)論，還需要進一步補充檢測_____?！即鸢浮剑?）稀釋涂布平板法（2）①.碳源②.倒置/倒過來放置（3）兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落（4）細(xì)菌適宜在中性或弱堿性的環(huán)境中生長，蘋果呈酸性，不適合細(xì)菌生長/青霉菌產(chǎn)生的青霉素等抗生素抑制細(xì)菌的生長（5）檢測上述區(qū)域中微生物產(chǎn)生的毒素含量〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。（1）題圖可知，本實驗接種前有稀釋步驟，故該實驗選用的接種方法是稀釋涂布平板法。（2）雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機鹽；為防止水滴滴落后污染培養(yǎng)基，接種后的平板應(yīng)放在恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。（3）稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時，由于兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。（4）計腐爛部位的菌落數(shù)目發(fā)現(xiàn)，青霉菌、曲霉菌等真菌的數(shù)量較多，細(xì)菌數(shù)目很少，原因可能是：細(xì)菌適宜在中性或弱堿性的環(huán)境中生長，蘋果呈酸性，不適合細(xì)菌生長；由于青霉菌產(chǎn)生的青霉素等抗生素抑制細(xì)菌的生長，故青霉菌、曲霉菌等真菌的數(shù)量較多，細(xì)菌數(shù)目很少。（5）分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，距離腐爛部位越遠(yuǎn)，微生物的數(shù)量越少；距離腐爛部位2cm的樣品中微生物數(shù)量極少。有人認(rèn)為，不能僅憑這個實驗就得出距離腐爛部位2cm的部分可安全食用的結(jié)論，為了安全起見，還需要檢測上述區(qū)域中微生物產(chǎn)生的毒素含量。22.銀杏的次生代謝產(chǎn)物，如銀杏黃酮（具有抑制癌細(xì)胞增殖，擴張冠脈血管、增加冠脈血液流量和解除痙攣的作用）、銀杏內(nèi)酯（具有促進腦血微循環(huán)、抑菌抗炎的作用）等，一般從葉片中取得，但傳統(tǒng)栽植方法周期長、成本高、受環(huán)境影響大，無法很好滿足市場需求。因而利用組織培養(yǎng)技術(shù)，從愈傷組織中提取，具有一定的研究意義與應(yīng)用前景。請回答下列相關(guān)問題：（1）研究表明，選擇銀杏葉片比選擇胚作為外植體材料成功率更低，原因可能是誘導(dǎo)葉片脫分化形成愈傷組織的難度較大。因此，往往選擇細(xì)胞生長分裂旺盛的部位作為外植體，但外植體也不能太嫩，因為太嫩的組織細(xì)胞雖細(xì)胞分裂較旺盛，但在_____時次氯酸鈉等藥品滲透也較快，在后續(xù)用_____多次沖洗也不易清除，導(dǎo)致細(xì)胞易失活甚至破裂。（2）為獲得銀杏的次生代謝產(chǎn)物，_____（填“需要”或“不需要”）走完如上述流程圖的全過程。有關(guān)做法是：可以將_____轉(zhuǎn)入到_____培養(yǎng)基中，進一步擴大培養(yǎng)，以提取有益次生代謝物，此做法的優(yōu)點有哪幾項_____。A．與培養(yǎng)基的結(jié)合更加充分B．受培養(yǎng)基中成分差異的影響較小C．對環(huán)境不敏感D．對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收更容易（3）此外，研究表明，用通氣較為不良的介質(zhì)封口，如塑料膜或玻璃紙，可以提升黃酮和內(nèi)酯的產(chǎn)量，可能原因是_____脅迫細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生次生代謝物?！即鸢浮剑?）①.消毒②.無菌水（2）①.不需要②.愈傷組織③.液體④.AD（3）低氧/缺氧〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。2、植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。（1）外植體也不能太嫩，因為太嫩的組織細(xì)胞雖細(xì)胞分裂較旺盛，但在消毒時次氯酸鈉等藥品滲透也較快，在后續(xù)用無菌水多次沖洗也不易清除，導(dǎo)致細(xì)胞易失活甚至破裂。（2）為獲得銀杏的次生代謝產(chǎn)物，不需要走完如上述流程圖的全過程?？梢詫⒂鷤M織轉(zhuǎn)入到液體培養(yǎng)基中，進一步擴大培養(yǎng)，以提取有益次生代謝物，在此過程中需要做到無菌操作。與固體培養(yǎng)基培養(yǎng)愈傷組織相比，液體培養(yǎng)基培養(yǎng)愈傷組織的優(yōu)點有：與培養(yǎng)基的結(jié)合更加充分、對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收更容易。故選AD。（3）研究表明，用通氣較為不良的介質(zhì)封口，如塑料膜或玻璃紙，可以提升黃酮和內(nèi)酯的產(chǎn)量，可能原因是低氧脅迫細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生次生代謝物。23.紅豆杉被稱作“植物界的大熊貓”，紫杉醇具有高抗癌活性。生產(chǎn)紫杉醇的傳統(tǒng)方法是從紅豆杉的樹皮和樹葉中提取，但野生紅豆杉是瀕危植物，此方法不利于對它們的保護。根據(jù)材料回答下列問題：（1）為提高紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中紫杉醇的產(chǎn)量，研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵酶基因（Bapt基因）的超表達載體，并將其導(dǎo)入紅豆杉細(xì)胞，其具體流程如下：①Bapt基因的獲?。禾崛〖t豆杉的mRNA，并通過逆轉(zhuǎn)錄得到其cDNA，利用PCR技術(shù)以圖1中的cDNA片段為模板擴增Bapt基因，需要的引物有_____（從A、B、C、D四種引物中選擇）。上述過程中，用1個圖1所示片段至少要經(jīng)過_____次循環(huán)，可獲得與Bapt基因等長的DNA單鏈。②構(gòu)建Bapt基因的超表達載體并將其導(dǎo)入受體細(xì)胞；在超量表達Bapt基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點（注：圖中所示限制酶切割后形成的黏性末端各不相同）如圖2所示。為使DNA片段能定向插入T-DNA中，可用PCR技術(shù)在DNA片段的兩端添加限制酶識別序列，M、N端添加的序列所對應(yīng)的限制酶分別是_____。③Bapt基因的檢測和鑒定。將受體細(xì)胞經(jīng)農(nóng)桿菌液浸泡，Bapt基因會隨T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體上，繼而進行植物細(xì)胞組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加入_____進行篩選。（2）PCR技術(shù)可用于目的基因的擴增，為確保準(zhǔn)確性，在設(shè)計PCR引物時必須注意：用于PCR的引物長度通常為20~30個核苷酸，過短會導(dǎo)致特異性差，過長則會使反應(yīng)體系有關(guān)步驟溫度提高，從而超過_____的最適溫度；引物3'端的堿基最佳選擇是_____（填“G和C”或“A和T”），這樣形成的堿基配對比較穩(wěn)定，引物的“_____”端（用5或3'作答），可以被修飾，如附加限制酶位點等；連續(xù)擴增4次后需要引物至少_____個。擴增完成以后，常采用_____法來鑒定PCR的產(chǎn)物〖答案〗（1）①.BC②.3③.Notl和Sacl④.潮霉素（2）①.TaqDNA聚合酶/耐高溫的DNA聚合酶②.G和C③.5'④.30⑤.瓊脂糖凝膠電泳〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。（1）①由于DNA的合成方向總是從子鏈的5'端向3'端延伸，由圖1可知，5'端對應(yīng)的引物分別是B和C；設(shè)計的引物決定了擴增產(chǎn)物的長度，第一個循環(huán)，引物與模板互補，此時變成兩個模板，但因為模板很長，沒有什么終止擴增，所以第一個循環(huán)擴增出來的新片段很長，第二個循環(huán)以新的長片段為模板進行，但新片段的一端是引物開頭的，所以第二個循環(huán)得到的片段就是我們需要的長度，但只是一條鏈，所以還不能分離出目的基因，第三個循環(huán)，當(dāng)以第二個循環(huán)得到的新片段為模板時，因為這個片段的長度就是需要擴增的長度，所以當(dāng)?shù)谌齻€循環(huán)完成時，這個片段是需要的長度，且是雙鏈DNA，這就得到了需要的目的基因，所以至少要3個循環(huán)才能產(chǎn)生雙鏈等長子代Bapt基因；②RNA聚合酶識別并與啟動子結(jié)合，啟動轉(zhuǎn)錄。Ti質(zhì)粒中的T-DNA將強啟動子和Bapt基因帶入紅豆杉細(xì)胞并整合到紅豆杉細(xì)胞染色體的DNA上。分析目的基因可知，不可以使用EcoRI、BamHI以及HindIII，所以Ti質(zhì)粒使用SacI和NotI，為使DNA片段能定向插入T-DNA中，啟動子在前，所以在DNA片段的M、N端添加的序列所對應(yīng)的限制酶分別是NotI和SacI。③據(jù)圖可知，Ti質(zhì)粒中標(biāo)記基因是潮霉素基因，加入目的基因后潮霉素基因被破壞，對Bapt基因的檢測時，培養(yǎng)基中加入潮霉素進行篩選，不能在該培養(yǎng)中生存的植物細(xì)胞是導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞。（2）PCR是一項體外擴增DNA的技術(shù)，該技術(shù)的前提是要有一對引物，引物可以通過堿基互補配對的方式與模板和子代DNA進行配對和連接，有特異性，故設(shè)計PCR引物時必須注意：用于PCR的引物長度通常為20~30個核苷酸，過短會導(dǎo)致特異性差；酶作用的發(fā)揮需要適宜的溫度，引物過長則會使反應(yīng)體系有關(guān)步驟溫度提高，從而超過耐高溫的DNA聚合酶的最適溫度；由于DNA分子中A和T之間有2個氫鍵，G和C之間有3個氫鍵，G和C含量越多，DNA越穩(wěn)定，故引物3端的堿基最佳選擇是G和C這樣形成的堿基配對比較穩(wěn)定。為了使擴增的目的基因與質(zhì)粒連接，需要在引物的5端加上Notl、Xbal限制酶識別序列，這是因為DNA子鏈的延伸是從引物的3’端開始的，即延伸方向是由5’→3’。連續(xù)擴增4次后需要引物至少30個，擴增結(jié)束后，常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。24.人溶菌酶是一種存在于人體體液中的堿性多肽，由130個氨基酸組成。研究發(fā)現(xiàn)，人乳中溶菌酶的含量高、活性強，破壞和溶解細(xì)菌的能力約為牛乳的300倍，是人乳不易變質(zhì)的主要原因。科研人員利用乳腺生物反應(yīng)器表達重組人溶菌酶，使生產(chǎn)出的牛奶含有高抑菌活性的溶菌酶，實現(xiàn)營養(yǎng)、藥用雙重功能?；卮鹣铝袉栴}：

（1）在構(gòu)建人溶菌酶基因的重組質(zhì)粒的過程中需要使用多種工具?；卮鹣铝袉栴}：①DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是_____。②DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制；質(zhì)粒DNA分子上有_____，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因便于篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。③表達載體含有啟動子，啟動子是位于基因首端的一段特殊DNA序列，是_____的部位，能驅(qū)動_____過程。（2）為實現(xiàn)人溶菌酶基因在牛乳腺細(xì)胞中表達，需要將人溶菌酶基因與_____等調(diào)控元件重組在一起，通過_____（方法）導(dǎo)入_____中，為保證移植的胚胎為雌性，取樣囊胚期的_____進行DNA分析，鑒定性別。（3）有人建議可用膀胱反應(yīng)器生產(chǎn)重組人溶菌酶，與乳腺生物反應(yīng)器相比，其優(yōu)點是不受_____限制（答出兩點）。〖答案〗（1）①.磷酸二酯鍵②.（一至多個）限制酶切位點③.RNA聚合酶識別和結(jié)合④.轉(zhuǎn)錄（2）①.乳腺中特異表達的基因的啟動子/乳腺蛋白基因的啟動子②.顯微注射法③.受精卵④.滋養(yǎng)層（細(xì)胞）（3）性別、年齡/時間〖祥解〗基因工程的基本操作程序：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與表達。（1）①目的基因片段與質(zhì)粒載體片段均是DNA片段，因此兩片段之間通過核苷酸形成磷酸二酯鍵連接。因此DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。②質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制、穩(wěn)定存在；質(zhì)粒DNA分子上有一個至多個限制酶切點，通過不同的限制酶對質(zhì)粒進行切割，以便插入外源DNA。③表達載體含有啟動子，啟動子位于目的基因首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA。（2）為實現(xiàn)人溶菌酶基因在牛乳腺細(xì)胞中表達，需要將人溶菌酶基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起，通過顯微注射法導(dǎo)入受精卵中，為保證移植的胚胎為雌性，需要取滋養(yǎng)層細(xì)胞進行DNA分子雜交檢測確定性別。（3）與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱反應(yīng)器生產(chǎn)重組人溶菌酶的優(yōu)點是尿液收集方便，且尿液中溶菌酶濃度高，提取方便，不受性別、年齡/時間的限制。25.棉鈴蟲和蚜蟲是常見的植物害蟲，為減少農(nóng)藥的使用量，我國科學(xué)家利用基因工程培育出一些能抵抗蟲害的植物新品種。Cry1A基因的表達產(chǎn)物對棉鈴蟲等鱗翅目昆蟲有較強的毒性，GNA基因的表達產(chǎn)物對蚜蟲等刺吸式口器的昆蟲有較強的毒性?？蒲腥藛T將Cry1A基因與GNA基因連接在一起，構(gòu)建了雙抗蟲基因的重組表達載體，并轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞，獲得了具有雙抗性的轉(zhuǎn)基因煙草，其部分過程如圖1所示，請分析并回答以下問題：

注：圖中PstI、KpnI、EcoRI、HindⅢ表示限制酶，不同限制酶切出的黏性末端均不同；Klenow能將黏性末端轉(zhuǎn)變?yōu)槠侥┒?。?）過程③將Cry1A基因與GNA基因相連，可選用_____（填“EcoliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）。（2）過程④應(yīng)該選用_____（填圖中限制酶）切割植物表達載體，以便與目的基因相連，形成重組表達載體。（3）讓農(nóng)桿菌侵染煙草葉片前，需要通過實驗篩選農(nóng)桿菌：將培養(yǎng)農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基倒平板后均分為A、B兩組，在A組培養(yǎng)基中涂布一定量的鏈霉素，在B組培養(yǎng)基中涂布等量的卡那霉素和鏈霉素。往A組培養(yǎng)基中接種適量農(nóng)桿菌，待長出菌落后，用影印法接種到B組培養(yǎng)基上，實驗結(jié)果如圖2，其中_____（填圖中對應(yīng)的數(shù)字）菌落對應(yīng)的農(nóng)桿菌可能是符合要求的，即含有_____的農(nóng)桿菌。（4）除了（3）使用的方法外，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，我國科學(xué)家還獨創(chuàng)了一種方法是_____。為了確認(rèn)目的基因在植物細(xì)胞中是否成功表達，從分子水平通常使用_____法進行檢測。（5）利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以培育出具有優(yōu)良性狀的生物，生產(chǎn)出人類所需要的產(chǎn)品。但轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題也一直備受關(guān)注。當(dāng)面對日常生活中與轉(zhuǎn)基因技術(shù)有關(guān)的話題時，我們需要理性地表明觀點和參與討論。下列屬于理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的是_____（填序號）。①轉(zhuǎn)基因食品中肯定含有毒性蛋白或過敏蛋白，會危害人體健康，必須禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用②要在清晰地了解轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理和操作規(guī)程的基礎(chǔ)上來討論轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)問題③要靠確鑿的證據(jù)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿媮硭伎嫁D(zhuǎn)基因技術(shù)的影響④要看到經(jīng)濟、文化和倫理道德觀念等的差異使人們對轉(zhuǎn)基因技術(shù)有不同的看法〖答案〗（1）T4DNA連接酶（2）EcoRI和HindⅢ（3）①.1、4②.重組表達載體/重組質(zhì)粒/重組DNA（4）①.花粉管通道法②.抗原—抗體雜交（5）②③④〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。（1）分析題意，過程①和②分別用不同的限制酶切割Cry1A基因與GNA基因，形成的黏性末端是不同的，故兩個基因無法直接相連，經(jīng)Klenow處理后，兩個基因片段一端的黏性末端變?yōu)槠侥┒?，E．coliDNA連接酶只能連接黏性末端，T4DNA連接酶可以連接黏性末端，也可以連接平末端，故過程③將Cry1A基因與GNA基因相連，應(yīng)選用T4DNA連接酶。（2）通過過程③得到的雙抗蟲基因（Cry1A基因+GNA基因）兩側(cè)分別是EcoRⅠ和HindⅢ切出的黏性末端，故過程④應(yīng)該選用EcoRⅠ和HindⅢ切割植物表達載體，形成和目的基因相同的黏性末端，以便讓植物表達載體與目的基因相連，形成重組表達載體。（3）讓農(nóng)桿菌侵染煙草葉片前，需要通過實驗篩選農(nóng)桿菌，獲得含有重組表達載體的農(nóng)桿菌。由于HindⅢ的切割位點在抗卡那霉素基因內(nèi)部，故含有重組表達載體的農(nóng)桿菌可以在含有鏈霉素的培養(yǎng)基上生長，不能在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上生長，據(jù)此分析可知，A組中1、4對應(yīng)的菌株為含有重組表達載體的農(nóng)桿菌，即符合要求的菌株。（4）除了（3）使用的方法外，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，我國科學(xué)家還獨創(chuàng)了一種方法是花粉管通道法。為了確認(rèn)目的基因在植物細(xì)胞中是否成功表達，即時是否表達出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，從分子水平通常使用抗原—抗體雜交法進行檢測。（5）①轉(zhuǎn)基因食品中肯定含有毒性蛋白或過敏蛋白，會危害人體健康，應(yīng)嚴(yán)格進行篩查和把控，而飛因噎廢食禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，①錯誤；②③轉(zhuǎn)基因技術(shù)是一把雙刃劍，最重要的是要科學(xué)合理的利用這項技術(shù)，要在清晰地了解轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理和操作規(guī)程的基礎(chǔ)上來討論轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)問題，要理性的看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，要靠確鑿的證據(jù)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿媮硭伎嫁D(zhuǎn)基因技術(shù)的影響，②③正確；④由于不同的人在經(jīng)濟、文化和倫理道德觀念等方面存在差異，所以不同的人對轉(zhuǎn)基因技術(shù)會有不同的看法，④正確。故選②③④。遼寧省沈陽市郊聯(lián)體2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期5月期中試題考試范圍：選擇性必修三考試時間：75分鐘；注意事項：1．答題前填寫好自己的姓名、班級、考號等信息2．請將〖答案〗正確填寫在答題卡上一、單項選擇題（共15小題，每小題2分，共計30分。在每小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求的）1.酸筍是制作食品“螺螄粉”的靈魂，深受廣大消費者喜愛。傳統(tǒng)酸筍的制作流程與泡菜類似，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.將采購的竹筍進行預(yù)處理時需要對其進行嚴(yán)格滅菌處理B.發(fā)酵過程中的酸性環(huán)境會抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖C.制作過程使用的鹽水需經(jīng)煮沸冷卻，加入壇中沒過蔬菜D.山泉水浸泡時適當(dāng)加入上一批次的發(fā)酵液可加快發(fā)酵〖答案〗A〖祥解〗制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來進行發(fā)酵的。發(fā)酵期間，乳酸會不斷積累。泡菜在腌制過程中會有亞硝酸鹽產(chǎn)生?！驹斘觥緼、竹筍中含有發(fā)酵的天然菌種，故不能對采摘后的竹筍進行滅菌，否則會殺死發(fā)酵的天然菌種，A錯誤；B、發(fā)酵過程中會產(chǎn)生乳酸，乳酸呈酸性，酸性環(huán)境會抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖，B正確；C、制作過程使用的鹽水要先煮沸滅菌后再冷卻，加入壇中沒過蔬菜，造成無氧環(huán)境，C正確；D、因為上一批次的發(fā)酵液中含有大量的發(fā)酵菌種，故適當(dāng)加入上一批次的發(fā)酵液可加快發(fā)酵進程，D正確。故選A。2.在牛、羊等反芻動物的瘤胃中生活著多種微生物，其中有能分解纖維素的微生物。某科研團隊按照如圖所示的流程分離瘤胃中的纖維素分解菌，實驗中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，并在剛果紅培養(yǎng)基平板上篩選到有透明降解圈的菌落。下列敘述錯誤的是（）注：①②③表示相應(yīng)操作。A.培養(yǎng)基表面均加入一層無菌的石蠟主要是為防止雜菌的污染B.甲培養(yǎng)基中唯一的碳源是纖維素，則該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基C.分離瘤胃中纖維素分解菌的方法可以是稀釋涂布平板法或平板劃線法D.圖中降解圈的大小與纖維素酶活性有關(guān)，菌落a降解能力最強〖答案〗A〖祥解〗剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但與纖維二糖和葡萄糖無法發(fā)生這種反應(yīng)。在含有纖維素的培養(yǎng)基中添加剛果紅，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，復(fù)合物無法形成，培養(yǎng)基中就會出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈?！驹斘觥緼、反芻動物的瘤胃中不含氧氣，其中存在的纖維素分解菌適宜在無氧條件下生存和繁殖，因此培養(yǎng)基表面覆蓋無菌的石蠟主要是為了保證培養(yǎng)的無氧環(huán)境，A錯誤；B、為了篩選纖維素分解菌，需要以纖維素為唯一碳源，能夠分解纖維素的微生物能夠生存，不能分解纖維素的微生物因無法獲得碳源而死亡，因此甲培養(yǎng)基中唯一的碳源是纖維素，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，B正確；C、微生物接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法，分離瘤胃中纖維素分解菌的方法可以是稀釋涂布平板法或平板劃線法，C正確；D、纖維素分解菌能分解纖維素是因為其可以產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶的活性越高，對纖維素的分解效果越好，以這些菌為中心的透明圈的直徑與菌落直徑的比值越大，據(jù)圖比較菌落a的降解能力最強，D正確。故選A。3.為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組設(shè)計了如下的實驗過程。敘述正確的是（）A.過程①獲得的原生質(zhì)體應(yīng)用無菌水培養(yǎng)B.過程②需提高生長素的比例以促進芽的分化C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生D.原生質(zhì)體雖無細(xì)胞壁但仍保持細(xì)胞全能性〖答案〗D〖祥解〗由圖可知，①表示用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③均表示再分化過程?！驹斘觥緼、原生質(zhì)體在無菌水中會吸水漲破，因此過程①獲得的原生質(zhì)體應(yīng)用等滲溶液培養(yǎng)，A錯誤；B、植物組織培養(yǎng)時，生長素與細(xì)胞分裂素用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向：生長素與細(xì)胞分裂素比例適中時，有利于愈傷組織的形成；生長素/細(xì)胞分裂素比例較高時，利于根的分化；生長素/細(xì)胞分裂素比例較低時，利于芽的分化，因此②誘導(dǎo)芽分化時，需要提高細(xì)胞分裂素的比例，B錯誤；C、③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗，此時細(xì)胞壁已經(jīng)形成，不需要使用秋水仙素，C錯誤；D、原生質(zhì)體無細(xì)胞壁，但由于含有一整套的遺傳物質(zhì)，故具有全能性，D正確。故選D。4.人參皂苷是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生愈傷組織并進行細(xì)胞融合，以提高人參皂苷的產(chǎn)率。下列敘述錯誤的是（）A.細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁B.高Ca2+—高pH溶液可促進細(xì)胞融合C.融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞D.雜交細(xì)胞可能具有生長快速的優(yōu)勢〖答案〗C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)?！驹斘觥緼、在細(xì)胞融合前，必須先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，A正確；B、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合有物理法和化學(xué)法，用高Ca2+—高pH溶液可促進細(xì)胞融合，B正確；C、融合的細(xì)胞中有人參根-人參根細(xì)胞、人參根-胡蘿卜根細(xì)胞、胡蘿卜根-胡蘿卜根細(xì)胞，只有人參根-胡蘿卜根細(xì)胞才是雜交細(xì)胞，C錯誤；D、雜交細(xì)胞含兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，可能具有生長快速的優(yōu)勢，D正確。故選C。5.植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞工程中所用技術(shù)或方法與原理不完全相符的是（）A.植物組織培養(yǎng)獲得幼苗和單克隆抗體技術(shù)制備抗體－－細(xì)胞的全能性B.纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體－－酶的專一性C.原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞－－細(xì)胞膜流動性D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)獲得相應(yīng)產(chǎn)品一－細(xì)胞增殖〖答案〗A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性和全能性，動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性?！驹斘觥緼、植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，單克隆抗體的制備的原理是細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞的增殖，A錯誤；B、植物細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠，用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁制備原生質(zhì)體，利用了酶的專一性，B正確；C、用物理法或者化學(xué)法使得原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合，利用了細(xì)胞膜具有一定的流動性的特點，C正確；D、紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)目的是獲得更多細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物，其原理只涉及細(xì)胞增殖，D正確。故選A。6.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列敘述錯誤的是（）A.在添加了尿素的馬鈴薯培養(yǎng)基上篩選出能分解尿素的細(xì)菌B.培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，需從分子水平及個體水平進行篩選C.胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選D.制備單克隆抗體時，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞〖答案〗A〖祥解〗1、單克隆抗體制備的兩次篩選：①利用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞(去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞)：②進行抗體檢測，篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。2、胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選，此時胚胎應(yīng)發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段?！驹斘觥緼、篩選出能分解尿素的細(xì)菌需要在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選，馬鈴薯培養(yǎng)基上含有氮源，不能用其添加尿素來篩選能分解尿素的細(xì)菌，A錯誤；B、培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，在將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，需要從分子水平上鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入、穩(wěn)定存在和表達，還需要通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂棉鈴蟲來從個體水平上確定目的基因是否賦予了棉花抗蟲特性和評估其抗性程度，從而篩選出有較好抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。所以，培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，需從分子水平及個體水平進行篩選，B正確；C、胚胎移植前，需對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選，挑取質(zhì)量好，活性強的胚胎進行培養(yǎng)或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正確；D、制備單克隆抗體時，在篩選出雜交瘤細(xì)胞后，需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。上述篩選過程中涉及的抗體檢測屬于分子水平的篩選，所以，制備單克隆抗體時，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。7.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定、DNA片段擴增的敘述錯誤的是（）A.PCR技術(shù)是通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合B.新鮮的雞血、大蒜、洋蔥等都可作為DNA粗提取的實驗材料C.將出現(xiàn)白色絲狀物的溶液倒入離心管中離心，棄上清液取沉淀D.將DNA絲狀物加入二苯胺試劑，沸水浴加熱出現(xiàn)藍(lán)色〖答案〗D〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色?！驹斘觥緼、PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)原理是DNA雙鏈復(fù)制，利用了DNA的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，A正確；B、新鮮的雞血、大蒜、洋蔥等都含有DNA，因而均可作為DNA粗提取的實驗材料，B正確；C、白色絲狀物中含有DNA分子，將出現(xiàn)白色絲狀物的溶液倒入離心管中離心，棄上清液取沉淀，沉淀物中就是白色絲狀物DNA分子，C正確；D、將DNA絲狀物溶于2mol/L的NaCl的溶液中，再加入二苯胺試劑，混勻后，沸水浴加熱條件下，會出現(xiàn)藍(lán)色，D錯誤。故選D。8.某細(xì)菌DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，經(jīng)Sau3AI處理后會形成4個大小不同的DNA片段。若是用BamHI處理，則只會形成2個大小不同的DNA片段。Sau3AI和BamHI的識別序列及切割位點如表所示。下列敘述不正確的是（）限制酶名稱識別序列及切割位點BamHIG↓GATCCSau3AI↓GATCA.上述兩種限制酶切割后可形成互補的黏性末端B.該DNA分子上有兩個BamHI的酶切位點C.黏性末端能通過T4DNA連接酶連接D.若用兩種酶共同處理，會形成6個大小不同的DNA片段〖答案〗D〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈DNA分子某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斘觥緼、BamHI和Sau3AI兩種限制酶切割后形成互補的黏性末端為GATC，A正確；B、該DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，用BamHI處理后，得到2個DNA片段，說明該DNA分子上有兩個BamHI的酶切位點，B正確；C、T4DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來，此外還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低，C正確；D、該DNA分子上有4個Sau3AI的酶切位點，有2個BamHI的酶切位點，但是BamHI識別序列中包含Sau3AI的識別序列，所以同時用兩種酶共同處理，不會形成6個大小不同的DNA片段，D錯誤。故選D。9.科學(xué)家利用基因工程培育出了能產(chǎn)生乙肝病毒蛋白質(zhì)的西紅柿，被稱之為“西紅柿乙肝疫苗”。具體操作是：將乙肝抗原基因M導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后利用農(nóng)桿菌將M導(dǎo)入西紅柿細(xì)胞。實驗顯示小白鼠連續(xù)五周吃這樣的西紅柿，體內(nèi)產(chǎn)生了抗乙肝病毒的抗體，下列敘述錯誤的（）A.用PCR技術(shù)對M基因進行擴增，需要兩種引物B.含M的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌之前，需要用Ca2＋處理農(nóng)桿菌C.含M的重組Ti質(zhì)粒進入西紅柿細(xì)胞中后會插入到西紅柿染色體DNA上D.因為加熱會破壞有效蛋白，“西紅柿乙肝疫苗”需要生吃〖答案〗C〖祥解〗基因工程的基本操作步驟主要包括：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達?！驹斘觥緼、用PCR技術(shù)對M基因進行擴增，需要根據(jù)目的基因兩端堿基序列合成的兩種引物，A正確；B、含M的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌之前，需要用Ca2＋處理農(nóng)桿菌，使農(nóng)桿菌處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)，B正確；C、含M的重組Ti質(zhì)粒進入西紅柿細(xì)胞中后質(zhì)粒上的T-DNA會插入到西紅柿染色體DNA上，C錯誤；D、因為加熱會破壞有效蛋白，為減少高溫對蛋白質(zhì)的影響，“西紅柿乙肝疫苗”需要生吃，D正確。故選C。

10.下列有關(guān)DNA片段的擴增及電泳鑒定實驗的敘述，正確的是（）A.PCR緩沖液中一般要加Mg2+，用于激活DNA聚合酶B.瓊脂糖熔化后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置C.在凝膠中的DNA分子的遷移速率只與DNA分子大小有關(guān)D.為防止PCR產(chǎn)物溢出電泳槽，電泳緩沖液加入電泳槽時不能沒過凝膠〖答案〗A〖祥解〗1、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時內(nèi)復(fù)制出，上百萬份的DNA拷貝。2、利用PCR可以在體外進行DNA片段的擴增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實質(zhì)上就是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器，一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)。【詳析】A、DNA聚合酶需要Mg2+激活，PCR緩沖液中一般要加Mg2+，用于激活DNA聚合酶，A正確；B、瓊脂糖熔化，要稍冷卻后加入適量的核酸染料混勻，用來指示DNA遷移的位置，B錯誤；C、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)，C錯誤；D、電泳緩沖液加入電泳槽時，需要沒過凝膠1mm為宜，D錯誤。故選A。11.下列生物技術(shù)操作不會達成預(yù)期目標(biāo)的是（）A.將胰島素基因表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入酵母菌，篩選獲得產(chǎn)胰島素工程菌B.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｈ橄偌?xì)胞，培育產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛C.將體外改造后能識別特定癌細(xì)胞的T細(xì)胞回輸患者，進行癌癥治療D.將花青素代謝相關(guān)基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，獲得具有特定花色的植株〖答案〗B〖祥解〗轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組。基因重組和基因突變、染色體變異均屬于可遺傳的變異；基因治療：指把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段?！驹斘觥緼、將含胰島素基因表達載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入酵母菌，經(jīng)過篩選可以獲得能生產(chǎn)胰島素的工程菌，A正確；B、將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫眩梢耘嘤霎a(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛，如果導(dǎo)入奶牛乳腺細(xì)胞則不能達成預(yù)期目標(biāo)，B錯誤；C、將體外改造后能識別特定癌細(xì)胞的T細(xì)胞回輸患者，可以識別特定的癌細(xì)胞，從而進行癌癥治療，C正確；D、將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得具有特定花色的植株，D正確。故選B。12.HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。雞卵清蛋白是由輸卵管上皮細(xì)胞中卵清蛋白基因特異性表達后分泌至輸卵管內(nèi)，參與構(gòu)成雞蛋清的蛋白質(zhì)。下圖是利用基因工程技術(shù)制備HA蛋白雞輸卵管生物反應(yīng)器的過程。幾種可供選擇的限制酶識別序列如下，下列說法錯誤的是（）A.①為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶、4種游離的脫氧核苷酸等組分B.目的基因與雞卵清蛋白基因啟動子拼接前應(yīng)先在目的基因兩端分別引入HindⅢ和EcoRI的識別序列C.利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，退火溫度偏低、引物特異性差均可導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列D.基因表達載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法〖答案〗B〖祥解〗基因表達載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子等；啟動子是一段由特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出蛋白質(zhì)；終止子位于基因的下游，作用是終止轉(zhuǎn)錄，也是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段。【詳析】A、圖中①以禽流感病毒RNA形成目的基因DNA過程，為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，逆轉(zhuǎn)錄合成的是DNA，需要4種脫氧核苷酸作為原料，A正確；B、要使目的基因能夠與啟動子結(jié)合，目的基因應(yīng)連接在啟動子下游，并借助啟動子啟動轉(zhuǎn)錄過程，按照圖中啟動子上的箭頭方向推測，在重組質(zhì)粒中目的基因插入的位置位于BamHI和EcoRI限制酶切位點之間，故引物應(yīng)具有BamHI和EcoRI限制酶識別序列，B錯誤；C、PCR技術(shù)擴增目的基因時，若退火溫度偏低、則可能導(dǎo)致引物與非目的基因序列部分配對，進而擴增出非目的基因，引物特異性差也會導(dǎo)致和非目的基因序列部分配對，導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列，C正確；D、受體細(xì)胞為動物細(xì)胞時通常采用顯微注射法，因此基因表達載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤可以使用顯微注射法，D正確。故選B。13.科學(xué)家們已通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等。采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是（）①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列③藍(lán)色熒光蛋白基因的合成④表達出藍(lán)色熒光蛋白A.①②③④ B.④②①③ C.②③①④ D.②①③④〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→相應(yīng)基因的修飾改造或人工合成→相應(yīng)的表達?！驹斘觥康鞍踪|(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→相應(yīng)基因的修飾改造或人工合成→相應(yīng)的表達，因此，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計→①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列→③藍(lán)色熒光蛋白基因的合成→④表達出藍(lán)色熒光蛋白，D正確，ABC錯誤。故選D。14.20世紀(jì)90年代，有一名19歲的姑娘患了白血病，需要進行骨髓移植。然而，她親人的骨髓配型并不適合她，在骨髓庫中也找不到合適配型的骨髓。她的父母通過“設(shè)計試管嬰兒”生下了一個配型適合她的嬰兒。在嬰兒出生2個月后，醫(yī)生就抽取嬰兒骨髓中的造血干細(xì)胞移植給她，她得救了。下圖是培育“試管嬰兒”的主要過程。下列敘述錯誤的是（）A.“設(shè)計試管嬰兒”需在③時進行遺傳學(xué)診斷B.該嬰兒能健康成長，她的造血干細(xì)胞也可能挽救其他貧血病患者C.“試管嬰兒”與“設(shè)計試管嬰兒”均需要符合國家相關(guān)規(guī)定D.“設(shè)計試管嬰兒”的技術(shù)不屬于“治療性克隆”，“試管嬰兒”與“設(shè)計試管嬰兒”均屬有性生殖〖答案〗A〖祥解〗試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)?！驹斘觥緼、“設(shè)計試管嬰兒”的目的是用于治療某些疾病，需在②胚胎移植前進行遺傳學(xué)診斷，A錯誤；B、該嬰兒能健康成長，只要供者和受者的主要HLA有一半以上相同，即可進行器官移植，因此該女嬰造血干細(xì)胞也能