臨床科研方法-俞守義

臨床科研(kēyán)基本方法

共一百五十三頁學(xué)習(xí)(xuéxí)篇共一百五十三頁一、提高(tígāo)心智生活水平

（自我教育能力）

從哲學(xué)觀點(diǎn)來說，所謂心智生活水平包括二個(gè)方面：

心靈(xīnlíng)生活——“心靈愉悅”，表示學(xué)習(xí)知識(shí)的樂趣心智生活

智力生活——“智力快樂”，表示運(yùn)用智力的樂趣共一百五十三頁二、科研(kēyán)意識(shí)培養(yǎng)科研機(jī)遇平等，結(jié)果不同！善于對(duì)事物(shìwù)的細(xì)微觀察好奇性

學(xué)—問—思—辨—行！共一百五十三頁三、培養(yǎng)強(qiáng)烈的創(chuàng)新(chuàngxīn)意識(shí)——民族生存(shēngcún)的靈魂，國(guó)家興旺的源泉！——個(gè)人事業(yè)不斷進(jìn)取的關(guān)鍵共一百五十三頁四、培養(yǎng)創(chuàng)新科研意識(shí)(yìshí)

——?jiǎng)?chuàng)新貫徹科研活動(dòng)的始終

設(shè)計(jì)(shèjì)創(chuàng)新方法理論成果藝術(shù)包裝營(yíng)銷方式、渠道管理體制共一百五十三頁

創(chuàng)新性是一切(yīqiè)科研工作的生命，是科學(xué)發(fā)展的動(dòng)力

臨床科研(kēyán)的創(chuàng)新性、科學(xué)性與求異思維共一百五十三頁（一）創(chuàng)新(chuàngxīn)的本質(zhì)

在人類物質(zhì)文明、精神文明(jīnɡshénwénmínɡ)的一切領(lǐng)域，一切層面上能先于他人，見人所未見，思人所未思，行人所未行，從而獲得人類文明的新發(fā)展、新突破。共一百五十三頁

（二）創(chuàng)新(chuàngxīn)的思想源泉

是求異思維，敏于生疑，敢于存疑，勇于質(zhì)疑(zhìyí)。由此就能不斷地產(chǎn)生新異的、多彩的、多元的發(fā)展性、創(chuàng)新性、突破性的新構(gòu)思、新思想、新思維。共一百五十三頁（三）科學(xué)(kēxué)的本質(zhì)

是人類世世代代以每個(gè)人的有限認(rèn)識(shí)能力，去探究無限的外界客觀存在和客觀規(guī)律的一個(gè)永無止境的過程?？茖W(xué)又總是后人(hòurén)不斷發(fā)現(xiàn)前人認(rèn)識(shí)中的缺陷、不足、錯(cuò)誤，并予以修正、補(bǔ)充，乃至推翻其中某些錯(cuò)誤結(jié)論而前進(jìn)、而發(fā)展的。共一百五十三頁（四）科學(xué)精神(jīngshén)的內(nèi)涵包含五大要素：客觀的依據(jù)理性的懷疑(huáiyí)多元的思考平權(quán)的爭(zhēng)論實(shí)踐的檢驗(yàn)

“疑”字是核心，是關(guān)鍵。理性的懷疑，不疑不會(huì)有異，無異不會(huì)有新。只有：生疑→存疑→質(zhì)疑，才能有新發(fā)現(xiàn)，新發(fā)明。求異思維從孩童期培養(yǎng)。共一百五十三頁五、科學(xué)精神(jīngshén)，“疑”為核心客觀依據(jù)理性懷疑(huáiyí)多元思考平權(quán)爭(zhēng)論實(shí)踐檢驗(yàn)疑為核心敏于生疑敢于質(zhì)疑勇于質(zhì)疑娃娃抓起共一百五十三頁六、求異思維(sīwéi)是創(chuàng)新源泉逆向思維(sīwéi)異位反思自主思維排憂思維共一百五十三頁七、文化底蘊(yùn)是生疑(shēnɡyí)的物質(zhì)基礎(chǔ)

共一百五十三頁八、創(chuàng)新(chuàngxīn)與繼承的關(guān)系創(chuàng)新是最佳(zuìjiā)的繼承繼承為了更好的創(chuàng)新共一百五十三頁緒論(xùlùn)篇共一百五十三頁

一、醫(yī)學(xué)(yīxué)研究的概念

疾病(jíbìng)健康認(rèn)識(shí)并掌握客觀規(guī)律采取增進(jìn)健康防治疾病的一切探索性措施防止促進(jìn)共一百五十三頁研究(yánjiū)目的(mùdì)完成具體工作方案最大效益本專業(yè)知識(shí)、相關(guān)專業(yè)知識(shí)流行病學(xué)、生物統(tǒng)計(jì)學(xué)、社會(huì)科學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等基本原理方法理論層次邏輯層次分析綜合哲學(xué)層次歸納演繹感性認(rèn)識(shí)理性認(rèn)識(shí)最小代價(jià)臨床科研設(shè)計(jì)示意圖經(jīng)驗(yàn)層次二、科研設(shè)計(jì)共一百五十三頁循證醫(yī)學(xué)(yīxué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)(yīxué)的比較基礎(chǔ)（病理(bìnglǐ)、生理）理論知識(shí)指導(dǎo)（個(gè)人）臨床經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)指導(dǎo)客觀（實(shí)驗(yàn)）證據(jù)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)循證醫(yī)學(xué)三、循證醫(yī)學(xué)共一百五十三頁循證醫(yī)學(xué)(yīxué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)(yīxué)的特征比較合格臨床醫(yī)生：臨床經(jīng)驗(yàn)與相關(guān)技能是必要條件，但非充分條件；累積(lěijī)經(jīng)驗(yàn)，掌握疾病機(jī)理是必要的，但未經(jīng)嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)研究的“臨床經(jīng)驗(yàn)和“理論”不能作為指導(dǎo)臨床實(shí)踐的充分依據(jù)；依據(jù)病理生理學(xué)原理進(jìn)行診斷，有時(shí)可能有誤；非系統(tǒng)臨床經(jīng)驗(yàn)是判斷預(yù)后、療效及評(píng)價(jià)的可靠途徑；掌握發(fā)病機(jī)制和病理生理原理足以指導(dǎo)臨床實(shí)踐；循證醫(yī)學(xué)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)共一百五十三頁循證醫(yī)學(xué)(yīxué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)(yīxué)的特征比較掌握獨(dú)立準(zhǔn)確評(píng)價(jià)證據(jù)的方法，對(duì)正確認(rèn)識(shí)和引用某些文獻(xiàn)的研究結(jié)論至關(guān)重要！成本(chéngběn)—效益是考慮診療的重要因素。熟練的技能與臨床經(jīng)驗(yàn)是指導(dǎo)實(shí)踐的基礎(chǔ)，可以評(píng)價(jià)新的診療方法；較少考慮成本—效益與衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)。循證醫(yī)學(xué)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)共一百五十三頁四、臨床流行病學(xué)(liúxínɡbìnɡxué)定義

現(xiàn)代流行病學(xué)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)設(shè)計(jì)把基本原理和方法引入采用嚴(yán)密(yánmì)的測(cè)量醫(yī)學(xué)經(jīng)濟(jì)學(xué)研究領(lǐng)域評(píng)價(jià)醫(yī)學(xué)社會(huì)學(xué)

結(jié)局病因患者個(gè)體患者群體診斷醫(yī)學(xué)事件的從擴(kuò)大到藉以探索治療等診治研究特性研究（研究）預(yù)后臨床基礎(chǔ)學(xué)科預(yù)防共一百五十三頁五、醫(yī)學(xué)(yīxué)科研特點(diǎn)

人道主義問題應(yīng)該(yīnggāi)前瞻性研究混雜因素多執(zhí)行研究的人多依從性問題標(biāo)準(zhǔn)化的處理措施不易保證多中心多層次問題宜采用序貫實(shí)驗(yàn)方法（一）臨床醫(yī)學(xué)科研特點(diǎn)共一百五十三頁（二）基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研特點(diǎn)結(jié)構(gòu)與功能假設(shè)的提出機(jī)理的驗(yàn)證結(jié)論的科學(xué)性（依據(jù)）結(jié)果的重復(fù)性設(shè)計(jì)(shèjì)的嚴(yán)密性操作的正確性樣本的代表性共一百五十三頁（三）預(yù)防醫(yī)學(xué)科研特點(diǎn)宏觀為主宏觀與微觀相結(jié)合調(diào)查的代表性（抽樣合理性）干預(yù)的客觀性統(tǒng)計(jì)(tǒngjì)處理恰當(dāng)結(jié)論的重復(fù)性方法的先進(jìn)性共一百五十三頁科研(kēyán)設(shè)計(jì)篇共一百五十三頁前言共一百五十三頁只有(zhǐyǒu)經(jīng)過正規(guī)科研設(shè)計(jì)才能得出正確結(jié)論1.傷寒:1880年由艾伯發(fā)現(xiàn)(fāxiàn)發(fā)現(xiàn)(fāxiàn)傷寒桿菌，16年后(1896年)開始廣泛應(yīng)用，但過了66年(1962年)，才由南斯拉夫傷寒全國(guó)委員會(huì)通過現(xiàn)場(chǎng)(實(shí)驗(yàn))流行病學(xué)的研究方法，才作出適當(dāng)評(píng)價(jià)。2.卡介苗:1921年問世，30年后(1951年)經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)，才作出肯定結(jié)論。共一百五十三頁3.脊灰苗:1909年發(fā)現(xiàn)病原體，45年后（1954年）其疫苗問世，經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)，才作出肯定評(píng)價(jià)。4.百日咳:1900年發(fā)現(xiàn)病原體(痰涂片)，用甲醛滅活制成疫苗，初期的研究結(jié)論互相矛盾，46年后(1946年)經(jīng)大規(guī)模現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查1萬人，嚴(yán)格分組，最終證實(shí)其效果。5.英年早逝:2006年，一位權(quán)威性的作者誤報(bào)：中關(guān)村、北大、清華科研人員的平均年齡為53歲(2004年全國(guó)(quánɡuó)普查的平均年齡為73歲)。共一百五十三頁一、科研設(shè)計(jì)(shèjì)的一個(gè)基本原理

共一百五十三頁基本原理

必須盡量(jǐnliàng)使實(shí)驗(yàn)效應(yīng)(effect)是處理因素(treatmentfactor)所引起，即:

T→e共一百五十三頁二、臨床(línchuánɡ)科研設(shè)計(jì)的兩個(gè)基本原則

(一)兩組間非處理因素(yīnsù)均衡一致原則用公式表示如下：

共一百五十三頁基本原則的公式(gōngshì)表示T1+N1Te1+Ne1T2+N2Te2+Ne2N1=N2

T1T2:處理(chǔlǐ)因素Te1Te2:

T產(chǎn)生的效應(yīng)

N1N2:非處理應(yīng)素Ne1Ne2:N產(chǎn)生的效應(yīng)共一百五十三頁例1食管癌的病因(bìngyīn)研究(病例對(duì)照研究)

居住年限病例組人數(shù)對(duì)照組人數(shù)合計(jì)10~25~30~35~>40合計(jì)1117311960138123026195113823475738111276西安市食管癌病例(bìnglì)與對(duì)照居住年限的均衡性檢驗(yàn)

χ2=4.81，P＞0.05共一百五十三頁例2新生兒黃疸是否與母親(mǔqīn)臨產(chǎn)時(shí)

使用催產(chǎn)素有關(guān)？

1972年～1986年?duì)幷?4年，6篇支持，6篇反對(duì)。臺(tái)灣婦產(chǎn)科一位學(xué)者從1986年5月～12月按下列標(biāo)準(zhǔn)從就診病人中選取206例合格(hégé)病例，進(jìn)行各種條件嚴(yán)格控制的前瞻性研究。

共一百五十三頁------研究(yánjiū)對(duì)象與研究(yánjiū)方法1．納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)隊(duì)列研究設(shè)計(jì)應(yīng)規(guī)定(guīdìng)明確的納入與排除研究標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：孕婦健康、胎兒足月、經(jīng)陰道生產(chǎn)，胎兒為單胎頭位，新生兒出生后至少能在嬰兒室觀察5天。排除標(biāo)準(zhǔn)：有溶血性疾病與低體重嬰兒。共一百五十三頁根據(jù)產(chǎn)婦(chǎnfù)的生產(chǎn)情況，206例分成三組:Ⅰ組：60例，完全由催產(chǎn)素導(dǎo)產(chǎn)；實(shí)際為暴露組，為暴露I組。

Ⅱ組：95例，自然生產(chǎn)加催產(chǎn)素催產(chǎn)；實(shí)際也是暴露組，為暴露II組。

Ⅲ組：51例，完全為自然產(chǎn)程，未用催產(chǎn)素，這為非暴露組。2．分組共一百五十三頁3．給藥方式(fāngshì)

靜脈點(diǎn)滴給藥，用含電解質(zhì)的溶液溶解(róngjiě)催產(chǎn)素，催產(chǎn)素濃度為5U/500ml。

共一百五十三頁------結(jié)果(jiēguǒ)

三組研究對(duì)象的均衡性

作者把三個(gè)組之間可能影響研究結(jié)果的主要變量作了比較(bǐjiào)，結(jié)果表明這些影響因素在三組之間無顯著差異（P＞0.05）（表1）。

共一百五十三頁表1三組(sānzǔ)之間主要變量的比較

變量I組II組III組性別（男/女）嬰兒體重（均數(shù)，g）孕期（周）母乳喂養(yǎng)（％）Apgar記分（1min/5min）器械助產(chǎn)率（％）硬膜外麻醉地美露AFP（ng/ml）28/32322840.1608.9/9.6282212634744/51327040.9558.7/9.3352311247825/26328639.9668.8/9.53312109288共一百五十三頁2.三組新生兒總血清(xuèqīng)膽紅素水平（計(jì)量資料）比較三組新生兒出生后第一、第三(dìsān)、第五天的總血清膽紅素，用ｔ檢驗(yàn)處理，未見顯著差異（P＞0.05）（表2）。

共一百五十三頁表2三組(sānzǔ)新生兒的血清總膽紅素（10mg/dl，x±S）

時(shí)間Ⅰ組Ⅱ組Ⅲ組第一天第二天第三天4.9±1.59.2±2.29.9±2.85.1±1.79.1±3.09.1±3.44.9±1.49.6±2.510.0±3.3共一百五十三頁3.三組新生兒高膽紅血癥比例的比較(bǐjiào)（計(jì)數(shù)資料）

如果把1次或多次的血膽紅素值≧10mg/dl作為高膽紅素血癥，則三組新生兒之間的高膽紅血癥的比例，用χ2檢驗(yàn)(jiǎnyàn)無顯著差異。如果把這個(gè)“界線”定為≧12mg/dl或≧15mg/dl，三組之間仍然沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＞0.05）（表3）。共一百五十三頁表3三組(sānzǔ)新生兒高膽紅血癥的發(fā)生率

血清膽紅素Ⅰ組（N＝60）Ⅱ組（N＝95）Ⅲ組（N＝50）人數(shù)%人數(shù)%人數(shù)%≧10≧12≧153917364.028.03.35634359.036.03.22617352.034.06.0共一百五十三頁------結(jié)論(jiélùn)由上述結(jié)果，作者認(rèn)為如果(rúguǒ)生產(chǎn)過程中，使用的催產(chǎn)素量不多，輸入的溶液又含有電解質(zhì)，也即如上述研究中的給藥方式，則新生兒高膽紅血癥與應(yīng)用催產(chǎn)素?zé)o關(guān)。共一百五十三頁根據(jù)(gēnjù)設(shè)計(jì)原則提出的四種設(shè)計(jì)模式T與N四種(sìzhǒnɡ)不同關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案﹡T1+N1e1+n1

﹡T2+N2e2+N2

﹡(正確)共一百五十三頁②T與N四種不同(bùtónɡ)關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案﹡T1+N1e1+n1﹡T2+N2e2+N2﹡(正確)共一百五十三頁③T與N四種不同(bùtónɡ)關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案﹡T1+N1e1+n1﹡T2+N2e2+N2

共一百五十三頁④T與N四種(sìzhǒnɡ)不同關(guān)系的臨床設(shè)計(jì)方案﹡T1+N1e1+n1

﹡T2+N2e2+N2

共一百五十三頁(二)對(duì)照、隨機(jī)、重復(fù)原則對(duì)照：是研究工作成敗之關(guān)鍵；對(duì)照組、試驗(yàn)組必須保持均衡(jūnhéng)一致！可比性；是控制各種混雜因素的基本手段；正確的對(duì)照組可以平衡非處理因素對(duì)結(jié)果（e）的影響，使處理因素（T）的效應(yīng)（e）充分表現(xiàn)出來，即T→e。共一百五十三頁隨機(jī)(suíjī)采用隨機(jī)化原則來分組、干預(yù)，是使各組間非處理因素均衡一致的主要方法，也是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理的基礎(chǔ)；可以(kěyǐ)減少各種主、客觀因素造成的偏倚，減少系統(tǒng)誤差，從而提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性（即效度）；也是防止各種混雜因素的重要手段之一；隨機(jī)不等于隨意。共一百五十三頁重復(fù)(chóngfù)按對(duì)照組和試驗(yàn)組都必須要保證一定的樣本含量，以控制隨機(jī)誤差，從而提高實(shí)驗(yàn)(shíyàn)的精確度（即信度）。

?

（標(biāo)準(zhǔn)差）?x

(標(biāo)準(zhǔn)誤)=

N（樣本量）共一百五十三頁三、臨床(línchuánɡ)科研設(shè)計(jì)的三要素

臨床科研一般(yībān)是觀察或闡明某個(gè)或某些研究因素作用于研究對(duì)象而產(chǎn)生的效應(yīng)或影響。因此，它的主要組成必然是:

研究因素研究對(duì)象三大要素

研究效應(yīng)/影響共一百五十三頁（一）研究(yánjiū)因素根據(jù)研究目的而施加于研究對(duì)象并能產(chǎn)生效果的因素為研究因素/處理(chǔlǐ)因素。反之，與研究目的無關(guān)的其他因素都叫非處理(chǔlǐ)因素（如個(gè)體特征，環(huán)境特征，氣候特征等）。共一百五十三頁

1.研究因素的內(nèi)容：

(1)外界強(qiáng)加于研究因素的，如生物因素、理化因素、營(yíng)養(yǎng)、藥物。

(2)研究因素本身就具有的某些特征，如性別、年齡、體重。

(3)研究對(duì)象體內(nèi)環(huán)境產(chǎn)生的有害因素，如遺傳、代謝、心理。

(4)醫(yī)生給予的干預(yù)因素。

2.研究因素的構(gòu)成：?jiǎn)我蛩?、多因素及不同水?/p>

3.研究因素的強(qiáng)度(qiángdù)

4.研究因素的實(shí)施方法共一百五十三頁(二)研究(yánjiū)對(duì)象研究對(duì)象：是指研究因素作用的客體。選擇研究對(duì)象是一個(gè)十分重要的問題（1）正常人，在研究某項(xiàng)正常人指標(biāo)或評(píng)價(jià)預(yù)防措施的效果時(shí)常用（2）病人

1.確定診斷標(biāo)準(zhǔn)，盡量采用客觀指標(biāo)。如病理學(xué)、微生物學(xué)、免預(yù)學(xué)、X線、心電圖、內(nèi)窺鏡、斷層掃描等

2.多次核實(shí)(héshí)診斷

3.規(guī)定對(duì)象的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

4.確定對(duì)象的數(shù)量、分組的方法

5.對(duì)象的代表性

6.注意對(duì)象的病情，堅(jiān)持采用輕癥患者的標(biāo)準(zhǔn)

7.用志愿者要慎重共一百五十三頁例1：“血管內(nèi)皮功能障礙對(duì)胰島細(xì)胞分泌(fēnmì)功能的影響”……研究對(duì)象:

納入條件年齡(niánlíng)：35－55歲無高血壓和糖尿病史無心、肝、腎及其他疾病

排除條件高血糖

II型糖尿病史糖耐量減低/空腹血糖正常

肥胖：按WHO1998年診斷標(biāo)準(zhǔn)：體重指數(shù)（BMI）正常<25BMI<超重/肥胖糖尿?。喊碬HO1990年II型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。例2：經(jīng)常吸煙——平均至少1支/日，持續(xù)>1年偶然吸煙——平均<1支/日，持續(xù)>1年戒煙——停止吸煙>

1年共一百五十三頁(三)效應(yīng)和觀察(guānchá)指標(biāo)效應(yīng)：是指研究因素作用于研究對(duì)象產(chǎn)生的結(jié)果，及觀察結(jié)果的指標(biāo)。1選擇指標(biāo)的條件

(1)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性

(2)指標(biāo)的客觀性，如隨機(jī)(suíjī)分組、采用多人盲法讀X片等

(3)指標(biāo)的準(zhǔn)確性（accuracy）、精確性（precision）即重復(fù)性

(4)指標(biāo)的靈敏性（sensitivity）

(5)指標(biāo)的特異性（specificity）

(6)指標(biāo)數(shù)量適宜，主要采用能反映效應(yīng)本質(zhì)的指標(biāo)

(7)明確各項(xiàng)指標(biāo)觀察的統(tǒng)一要求，如觀察方法、時(shí)間、間隔、次數(shù)、期限、記錄方法等共一百五十三頁四、臨床(línchuánɡ)科研設(shè)計(jì)模式（一）臨床科研種類(zhǒnglèi)

1.觀察性研究（observationalstudies)2.試驗(yàn)性研究(experimentalstudies)，即臨床試驗(yàn)（clinicaltrials)。

3.多學(xué)科多中心研究（multiple-centerstudies）共一百五十三頁(二)臨床科研方法(fāngfǎ)匯總（1）觀察性研究設(shè)計(jì)病例報(bào)告描述性研究病例分析（臨床研究初級(jí)階段）經(jīng)驗(yàn)總結(jié)觀察性研橫斷面研究究設(shè)計(jì)病例對(duì)照研究分析性研究（臨床研究深入階段(jiēduàn)）

隊(duì)列研究共一百五十三頁

病例(bìnglì)與對(duì)照不匹配成組匹配病例對(duì)照研究病例與對(duì)照匹配配對(duì)研究套式病例對(duì)照研究前瞻性

歷史性雙向性隊(duì)列(duìliè)研究共一百五十三頁

過去現(xiàn)在(xiànzài)將來收集隊(duì)列(duìliè)隨訪

收集隊(duì)列隨訪

回顧性前瞻性

雙向性隊(duì)列研究

共一百五十三頁（2）試驗(yàn)性研究(yánjiū)設(shè)計(jì)

臨床研究的試驗(yàn)性研究即臨床試驗(yàn)，實(shí)際上可以把它看成是一種特殊類型的隊(duì)列研究。所不同的是研究者可以設(shè)計(jì)對(duì)照組和治療(zhìliáo)組并隨機(jī)化分組。

依據(jù)設(shè)計(jì)對(duì)照組的方法不同，臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案可分為六種共一百五十三頁①隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)(shíyàn)（RCT）

符合標(biāo)準(zhǔn)的研究對(duì)象研究對(duì)象隨機(jī)分組（合格對(duì)象）

有效試驗(yàn)(shìyàn)組(實(shí)驗(yàn)措施）無效有效對(duì)照組(對(duì)照措施）無效

共一百五十三頁②隨機(jī)對(duì)照雙盲試驗(yàn)(shìyàn)（RCBT）

共一百五十三頁③交叉(jiāochā)試驗(yàn)（COD）

試驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)有效 （A組）措施無效研究合格隨機(jī)對(duì)象(duìxiàng)對(duì)象(duìxiàng)分組對(duì)照組對(duì)照有效（B組）措施無效

對(duì)照組對(duì)照有效（A組）措施無效 試驗(yàn)組試驗(yàn)有效（B組）措施無效洗脫期

共一百五十三頁④自身前后(qiánhòu)對(duì)照試驗(yàn)

有效研究(yánjiū)合格試驗(yàn)對(duì)象對(duì)象措施無效有效對(duì)照措施無效洗脫期共一百五十三頁⑤非隨機(jī)同期(tóngqī)對(duì)照試驗(yàn)

（NRCCS）和歷史對(duì)照試驗(yàn)

這兩個(gè)試驗(yàn)的共同點(diǎn)是：對(duì)照組并非由隨機(jī)化方法決定，而是依據(jù)不同的地點(diǎn)、不同的時(shí)間來選擇。前者是指在不同醫(yī)院間選擇，后者是指不同時(shí)期的前后對(duì)照。這些對(duì)照組的選擇常存在(cúnzài)選擇性偏倚，兩組間的基線狀況往往不一致，從而影響結(jié)果的正確性，所以應(yīng)用受到限制。共一百五十三頁⑥序貫試驗(yàn)(shìyàn)不事先確定樣本含量；一個(gè)試驗(yàn)一對(duì)受試者參加；實(shí)驗(yàn)結(jié)束(jiéshù)立即進(jìn)行結(jié)果分析；待可下結(jié)論時(shí)立即停止試驗(yàn)。共一百五十三頁具體分析步驟如下：試驗(yàn)前制定以下試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)：①有效標(biāo)準(zhǔn)SF/FS=r1=2時(shí)為有效，試驗(yàn)藥可以接受（應(yīng)用）②無效(wúxiào)標(biāo)準(zhǔn)SF/FS=r0=1時(shí)為無效，試驗(yàn)藥不能接受③試驗(yàn)結(jié)果的假陽性率ɑ和假陰性率β不應(yīng)>5%，即ɑ=0.05，β=0.05共一百五十三頁表1冠心寧與某對(duì)照藥對(duì)心絞痛療效(liáoxiào)的結(jié)果病歷號(hào)試驗(yàn)藥對(duì)照藥結(jié)果病歷號(hào)試驗(yàn)藥對(duì)照藥結(jié)果1優(yōu)差SF9優(yōu)差SF2優(yōu)差SF10優(yōu)差SF3差優(yōu)FS11優(yōu)差SF4優(yōu)差SF12優(yōu)差SF5優(yōu)差SF13優(yōu)差SF6優(yōu)差SF14優(yōu)差SF7差優(yōu)FS15優(yōu)差SF8優(yōu)差SF共一百五十三頁繪制序貫試驗(yàn)邊界圖：根據(jù)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)①②③可在方格坐標(biāo)紙上繪出序貫試驗(yàn)邊界圖?？v坐標(biāo)Y為SF數(shù)，橫坐標(biāo)為n=SF+FS數(shù)。接受界限(jièxiàn)（上限）U：y=a+b×n拒絕界限（下限）U：y=-a+b×n共一百五十三頁共一百五十三頁（三）多學(xué)科或多中心(zhōngxīn)協(xié)作研究1.多學(xué)科研究是提高研究水平的有效方法，也是現(xiàn)代研究發(fā)展方向。2.多中心研究是指在不同地區(qū)、不同單位，同時(shí)開展某一項(xiàng)研究，以提高研究結(jié)果的論證強(qiáng)度。

注意：上述兩種研究方式必須事先要嚴(yán)格統(tǒng)一研究的各項(xiàng)規(guī)定、方法、指標(biāo)、要求、時(shí)間(shíjiān)等，否則，將失去意義。共一百五十三頁

南方醫(yī)科大學(xué)研究生開題(kāití)論證報(bào)告書共一百五十三頁

學(xué)科專業(yè)：研究方向：課題名稱：課題來源：研究生姓名：導(dǎo)師姓名職務(wù)：研究時(shí)間：論證日期：

共一百五十三頁一、課題名稱（包括分題）二、選題依據(jù)（國(guó)內(nèi)外研究概況、水平和發(fā)

展趨勢(shì)(qūshì)，開展此課題研究的設(shè)想、特色或創(chuàng)新之處，主要參考文獻(xiàn)目錄和出處。

三、研究目的意義共一百五十三頁四、研究?jī)?nèi)容(nèiróng)指標(biāo)、技術(shù)路線及擬采取的研究方法（論述方法學(xué)的先進(jìn)性、可能性及可靠性）五、主要技術(shù)關(guān)鍵及解決途徑（包括協(xié)作要求）六、研究進(jìn)度及預(yù)期達(dá)到的指標(biāo)共一百五十三頁七、課題研究(yánjiū)的支撐條件（具備的研究(yánjiū)條件、估算該題的工作量及所需經(jīng)費(fèi)）八、參加論證人員（姓名、職務(wù)、工作單位）九、專家論證意見（對(duì)該課題的科學(xué)性、先進(jìn)性及可行性進(jìn)行評(píng)價(jià)，提出“同意開題或不同意開題”的結(jié)論性意見）共一百五十三頁國(guó)家(guójiā)自然基金申請(qǐng)書共一百五十三頁T2DM易感基因PPARGC1分子(fēnzǐ)機(jī)制及遺傳與環(huán)境交互作用的研究共一百五十三頁報(bào)告(bàogào)正文（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容（4000-8000字）1、項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)（研究意義、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及發(fā)展動(dòng)態(tài)分析，需結(jié)合科學(xué)研究發(fā)展趨勢(shì)來論述科學(xué)意義；或結(jié)合國(guó)民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展中迫切需要解決的關(guān)鍵問題來論述其應(yīng)用前景。附主要參考文獻(xiàn)目錄）

研究意義

T2DM是一種由遺傳因素與環(huán)境因素聯(lián)合作用而導(dǎo)致機(jī)體以慢性高血糖為特征的一類增齡性、內(nèi)分泌、代謝異常綜合癥，為胰島素分泌不足或胰島素抵抗或兩者兼有所致。是最常見的一類慢性代謝性疾病(jíbìng)，嚴(yán)重威脅現(xiàn)代人類的生活質(zhì)量，據(jù)WHO資料統(tǒng)計(jì)T2DM患者共一百五十三頁

近5000萬人，高居世界第二位，僅次于美國(guó)。按此計(jì)算，我國(guó)因T2DM所造成的直接經(jīng)濟(jì)損失和醫(yī)療負(fù)擔(dān)十分驚人。以上提示其對(duì)我國(guó)人民健康影響日趨嚴(yán)重。因此，預(yù)防和控制糖尿病已乘務(wù)當(dāng)今預(yù)防醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重要課題。然而迄今為止，糖尿病的確病因尚未充分闡明，其遺傳病因?qū)W十分復(fù)雜。為此開展我國(guó)的T2DM發(fā)生的分子機(jī)制，尋找致病易感基因。將為進(jìn)一步開展功能基因研究，從基因角度及闡明2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制和2型糖尿病的分子診斷，為基因預(yù)測(cè)提供科學(xué)依據(jù)和理論基礎(chǔ)；從遺傳與環(huán)境的交互作用(zuòyòng)的關(guān)系出發(fā)，探索其致病因素作用(zuòyòng)；無疑對(duì)闡明其病因及其發(fā)病機(jī)理，以至有效預(yù)防、控制、干預(yù)和治療糖尿病的發(fā)生發(fā)展都具有重要的意義。共一百五十三頁學(xué)術(shù)價(jià)值：

近年，隨著分子生物學(xué)理論及技術(shù)的發(fā)展，尤其是人類基因組計(jì)劃研究迅速進(jìn)展和突破、基因定位技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的積累及統(tǒng)計(jì)分析方法的進(jìn)步，使得2型糖尿病的分子遺傳學(xué)研究有了長(zhǎng)足進(jìn)展。闡明參與2型糖尿病的易感基因種類、特征及機(jī)制是2型糖尿病分子遺傳學(xué)研究的目標(biāo)之一。目前比較常用的是采用候選基因的功能區(qū)或非功能區(qū)多態(tài)標(biāo)記進(jìn)行群體關(guān)聯(lián)分析，或是采用隨機(jī)DNA位點(diǎn)或候選基因的高雜合度非功能區(qū)多態(tài)標(biāo)記進(jìn)行家系分析。2型糖尿病受到遺傳基因與環(huán)境條件的雙重調(diào)控(diàokònɡ)。不同遺傳背景的人群糖尿病易感性的主效基因可能有較大的差異。以往在不同群體進(jìn)行易感基因的關(guān)聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)，同一易感基因在不同群體中作用具有差異性。所以對(duì)于在其他人群所發(fā)現(xiàn)的易感共一百五十三頁

基因，在中國(guó)北方人中重新評(píng)價(jià)就顯得非常必要，探討易感基因的分子機(jī)制在T2DM發(fā)病中的作用及其影響更有其特定的價(jià)值。研究遺傳與環(huán)境因素的交互作用，可以進(jìn)一步探討其致病的作用因素，為尋找(xúnzhǎo)致病線索提供依據(jù)。共一百五十三頁國(guó)內(nèi)外研究(yánjiū)現(xiàn)狀及發(fā)展動(dòng)態(tài)分析

國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)人們采取基因組掃描、連鎖(liánsuǒ)分析和遺傳關(guān)聯(lián)的研究策略，篩查研究出的T2DM候選基因大約有500多個(gè)，其中有一些多態(tài)性可能與糖尿病的發(fā)生有關(guān)。我國(guó)對(duì)T2DM已進(jìn)行近20個(gè)候選基因研究，發(fā)現(xiàn)至少10多個(gè)基因與T2DM有關(guān)聯(lián)。從國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的T2DM連鎖位點(diǎn)分布可看出：與T2DM可能連鎖的染色體位點(diǎn)分布非常廣泛。只找到位點(diǎn)，絕大多數(shù)位點(diǎn)尚未找到與T2DM相關(guān)的具體基因。位點(diǎn)不同人群、種族和國(guó)家重復(fù)性差。由此可見尋找中國(guó)人T2DM易感基因并探討其分子機(jī)制尤為重要。由于遺傳異質(zhì)性的存在，不同群體中分子遺傳學(xué)的研究結(jié)果很難得到重復(fù)。肝細(xì)胞中特異表達(dá)的過氧化物酶體共一百五十三頁增殖物的激活受體γ輔激活因子1（PPARGC1），在T2DM胰島素抵抗（IR）發(fā)生機(jī)制中起關(guān)鍵作用，作為轉(zhuǎn)錄輔激活因子，由于其參與糖代謝、脂代謝、線粒體能量代謝的調(diào)節(jié)，與T2DM的病理機(jī)制十分吻合。在T2DM患者中，其表達(dá)量的異常改變具有特征性的病理學(xué)意義，從分子生理角度上提示其是研究T2DM的機(jī)制和應(yīng)用治療的極好的切入靶點(diǎn)，被密切關(guān)注。為闡明PPARGC1在中國(guó)北方人群中與T2DM的風(fēng)險(xiǎn)貢獻(xiàn)，本研究采用基因組遺傳學(xué)研究方法對(duì)PPARGC1與T2DM分子遺傳機(jī)制進(jìn)行初步探索。由于基因組DNA序列在出生后幾乎(jīhū)不改變，使得闡明的DNA突變可以通過人群資料的分析說明其與疾病的關(guān)系。絕大多數(shù)T2DM為散發(fā)型，對(duì)于復(fù)雜的多基因疾病，從散發(fā)群體樣本出發(fā)，通過T2DM遺傳學(xué)研究中使用最廣泛的“病例-對(duì)照”研究尋找中國(guó)北方漢族人群中T2DM的易感基因成為可行性措施。共一百五十三頁

近年來，PPARGC1中基因突變與T2DM的關(guān)系，在丹麥、日本、法國(guó)高加索人群、Pima印度安人、英國(guó)、奧地利、德國(guó)和荷蘭人群中進(jìn)行了研究。雖然由于遺傳背景的差異(chāyì)，不同群體中得到的結(jié)果不完全一致，但多群體中PPARGC1與T2DM的發(fā)生整體上存在關(guān)聯(lián)，丹麥人群中使用聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈擴(kuò)增多態(tài)性（PCR-SSCP）方法結(jié)合測(cè)序驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)了七個(gè)突變位點(diǎn)：Ser74Leu，IVS2+52C>A，Asp475Asp，Gly482Ser，Thr528Thr，Thr612Met。其中Gly482Ser與T2DM有關(guān)聯(lián)。（EkJ,AndersonGetal,2001）日本人群中，通過PPARGC1基因掃描SNP后發(fā)現(xiàn)三個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)：IVS4-11T>C，Thr394Thr和Gly482Ser。Gly482Ser與T2DM有關(guān)聯(lián)以及The394Thr-Gly482Ser單體型與T2DM有關(guān)聯(lián)。（HaraK,TobeK,OkadaTetal,2002）,在Pima印度安人群中也證明了Gly482Ser突變與T2DM存在關(guān)聯(lián)。共一百五十三頁繼丹麥、日本及Pima印度安人后，本研究對(duì)此基因與中國(guó)北方人群的T2DM發(fā)病關(guān)系也進(jìn)行初步探索，并發(fā)現(xiàn)PPARGC1的Gly482Ser突變能顯著增加中國(guó)北方人群的T2DM發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，在男性中此趨勢(shì)更為顯著。由于此基因全面系統(tǒng)研究較少，基于前期遺傳學(xué)工作基礎(chǔ)，確證研究包括其突變基因?qū)δ艿挠绊懞瓦B接啟動(dòng)子調(diào)控區(qū)序列變異對(duì)表達(dá)的影響，從兩個(gè)(liǎnɡɡè)方面探討PPARGC1與T2DM中胰島素抵抗關(guān)系的研究仍為空白。T2DM既受遺傳因素的影響同時(shí)受環(huán)境因素的制約，傳統(tǒng)研究交互作用應(yīng)用的方法是病例對(duì)照研究，但應(yīng)用病例對(duì)照研究進(jìn)行基因—環(huán)境交合作用的研究需要很大的樣本量，同時(shí)一些潛在的因素可能會(huì)對(duì)研究結(jié)果有較大的影響。

近幾年來，研究者提出，可以用其他的研究方法進(jìn)行基因—環(huán)境交互作用的研究，例如無對(duì)照病例研究共一百五十三頁（case-only）,病例—親本研究（case-parentalstudy）等。它對(duì)于交合效應(yīng)的估計(jì)要比傳統(tǒng)病例對(duì)照(duìzhào)研究更精確，而且將有更大的把握度檢驗(yàn)交互作用的存在。同時(shí)，采用無對(duì)照(duìzhào)病例研究探索基因與環(huán)境交互作用，可以使研究的樣本量也成本顯著降低，另外，可以避免由于采用對(duì)照(duìzhào)可能引入的各種偏倚。無對(duì)照(duìzhào)病例研究也存在其自身的不足，首先，無對(duì)照(duìzhào)病例研究是基于交互作用的RR乘法模型的，它只能對(duì)交互作用是否偏離RR值乘法模型進(jìn)行檢驗(yàn)。其次，無對(duì)照病例研究假設(shè)遺傳與環(huán)境之間相互獨(dú)立，研究者也常常將這種假設(shè)作為默認(rèn)前提。但在有些情況下，這個(gè)假設(shè)不能成立。另外，從其統(tǒng)計(jì)分析的過程可以看出，無對(duì)照病例研究只能檢驗(yàn)基因與環(huán)境交互作用是否存在，并估計(jì)其交互效應(yīng)的大小。因?yàn)闆]有對(duì)照，無法估計(jì)遺傳和環(huán)境因素的主效應(yīng)。共一百五十三頁遺傳因素在2型糖尿病（T2DM）的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。T2DM是一種多基因病，其遺傳模式有主效基因、微效基因和單基因等模式。尋找T2DM易感基因的策略主要有基因組掃描、連鎖(liánsuǒ)分析和遺傳關(guān)聯(lián)研究。近年來，應(yīng)用這些遺傳學(xué)分析方法人們發(fā)現(xiàn)了一些與T2DM易感性關(guān)聯(lián)的染色體區(qū)域和基因，并取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展，但對(duì)于臨床實(shí)踐的要求仍然是杯水車薪，我們相信隨著分子遺傳學(xué)技術(shù)的發(fā)展和人類基因組計(jì)劃的完成，人們必將找出更多的與T2DM密切關(guān)聯(lián)的易感基因，為解釋和闡明T2DM的遺傳病理機(jī)制提供新的線索，指導(dǎo)糖尿病的預(yù)防和治療。雖然遺傳流行病學(xué)的證據(jù)提示2型糖尿病的發(fā)生具有較強(qiáng)的遺傳基礎(chǔ)，但因在最近10～20年內(nèi)人類的遺傳背景不會(huì)出現(xiàn)非常大的變化，糖尿病患病率的顯著增高只能用環(huán)境因素的變化來。目前，世界各國(guó)2型糖尿病患病共一百五十三頁率明顯增高的主要因素為生活方式的變化（如熱量攝入增加和體力活動(dòng)減少）所導(dǎo)致的超重和肥胖；在病因?qū)W上，生活方式的改變對(duì)糖尿病患病率的影響可歸結(jié)為環(huán)境因素的影響

在T2DM實(shí)際研究中，人們(rénmen)采用不同的基因與環(huán)境交互作用分析方法進(jìn)行研究。例如：病例對(duì)照研究，主要采用多因素Logistic回歸的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、單純病例研究、不完全病例對(duì)照研究、叉生分析法等。目前在實(shí)際研究中還存在一些問題，例如：基因易感性檢測(cè)的替代方法還存在一定的局限性；還需要進(jìn)一步加大估計(jì)交互作用的樣本量。但是隨著分子遺傳學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，基因與環(huán)境的交互作用必將成為研究T2DM的好方法。群體遺傳學(xué)統(tǒng)計(jì)分析方法，計(jì)算相應(yīng)遺傳信息量；進(jìn)行多因素群體遺傳學(xué)研究，了解T2DM基因與傳遞模式及在家族中遺傳傳遞規(guī)律。以候選基因?yàn)闃?biāo)記，與傳遞模式及在家族中遺傳傳遞規(guī)律。以候選基因?yàn)闃?biāo)記，共一百五十三頁2、項(xiàng)目研究?jī)?nèi)容、研究目標(biāo)以及擬解決(jiějué)的關(guān)鍵科學(xué)問題（此部分內(nèi)容為重點(diǎn)闡述）

項(xiàng)目的研究?jī)?nèi)容：

2型糖尿?。═2DM）發(fā)病率居世界第三位，屬多基因復(fù)雜性疾病，其發(fā)病機(jī)理受環(huán)境因素與遺傳因素的綜合作用且具有高度異質(zhì)性。為開展T2DM發(fā)病的分子機(jī)制研究，分離鑒定相關(guān)致病易感基因，進(jìn)行T2DM遺傳家系現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查(diàochá)工作。在中國(guó)北方地區(qū)收集200個(gè)T2DM和IGT遺傳家系、散發(fā)T2DM和IGT500人和健康500人份的血樣和環(huán)境因素資料。進(jìn)行家系遺傳和表型信息收集及血生化指標(biāo)測(cè)定工作，運(yùn)用擬對(duì)有關(guān)聯(lián)的編碼基因標(biāo)記按染色體分型，采用基因組改良掃描方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分型。對(duì)無關(guān)聯(lián)編碼基因標(biāo)記，選用相應(yīng)數(shù)量的微衛(wèi)星進(jìn)行特定染色體掃描，尋找疾病候選位點(diǎn)。共一百五十三頁

同時(shí)利用PCR—RFLP分子生物學(xué)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)方法驗(yàn)證已存在候選陽性基因PPARGC1的多態(tài)性。通過SAGE3.0等軟件對(duì)基因分型結(jié)果做兩點(diǎn)或多點(diǎn)的連鎖、連鎖不平衡分析及家系內(nèi)基因傳遞與分離的TDT分析，以便確定染色體不同位點(diǎn)與疾病(jíbìng)的相關(guān)性。為闡明T2DM病因及發(fā)病機(jī)理，指導(dǎo)臨床預(yù)防和治療提供重要依據(jù)。共一百五十三頁1、完成T2DM家系血樣、家系遺傳和表型信息的收集以及血生化指標(biāo)測(cè)定工作。2、證實(shí)易感基因突變的臨床意義的分子研究；case-control確定易感基因與疾病相關(guān)關(guān)系和風(fēng)險(xiǎn)數(shù)值；3、闡明2型糖尿病易感基因PPARGC1的分子機(jī)制及其對(duì)T2DM的影響；4、通過Logist回歸及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型及叉生分析進(jìn)行危險(xiǎn)因素的遺傳與環(huán)境的交互作用分析，根據(jù)數(shù)據(jù)具體情況采用(cǎiyòng)相對(duì)應(yīng)的分析方法；研究(yánjiū)目標(biāo)：共一百五十三頁5、通過群體關(guān)聯(lián)分析和家系傳遞分析進(jìn)行人群與T2DM遺傳易感性的研究；6、同時(shí)在家系研究方面進(jìn)行有益的探索，從分子(fēnzǐ)角度闡明2型糖尿病的發(fā)病機(jī)理，為2型糖尿病的基因預(yù)測(cè)提供科學(xué)依據(jù)。廣泛應(yīng)用于糖尿病的預(yù)防與治療，在條件允許的情況下應(yīng)用于臨床診斷。共一百五十三頁

擬解決(jiějué)的關(guān)鍵科學(xué)問題：1.進(jìn)行本課題工作所面臨的最主要的問題，就是采用什么樣的策略進(jìn)行易感基因篩查工作，國(guó)內(nèi)外此領(lǐng)域的研究者經(jīng)過多年經(jīng)驗(yàn)，目前認(rèn)為，對(duì)于多基因復(fù)雜性疾病，其最主要的易感基因研究策略不能單純效仿單基因疾病或單表型形狀決定基因的尋找模式。

2.T2DM發(fā)病過程中，每個(gè)基因參與發(fā)病程度不等，大多數(shù)基因以微效基因模式參與其中，每個(gè)基因只是賦予個(gè)體某種程度的易感性，就每個(gè)易感基因而言均非發(fā)病所必須；而且，個(gè)基因可能通過各自不同的途徑或發(fā)揮不同作用參與發(fā)病過程；最后，各基因致病效應(yīng)之累積結(jié)合環(huán)境因子的作用構(gòu)成個(gè)體的T2DM的易感性。共一百五十三頁3.由于其主要以散發(fā)的形式在群體(qúntǐ)中流行，并且本質(zhì)的病因?qū)W起源各異，因此，基于經(jīng)典家系資料樣本利用分子標(biāo)記進(jìn)行連鎖分析定位克隆的策略是不夠妥當(dāng)?shù)摹Ａ硗猓捎诖蠖鄶?shù)T2DM的發(fā)病年齡集中在中青年以后，并且有增齡性的發(fā)生趨勢(shì)，由于人類的整體壽命的上限限制，多代患者間同時(shí)存在T2DM發(fā)生的幾率很低。因此，從風(fēng)險(xiǎn)等位基因在多代間的傳遞規(guī)律上分析基因的T2DM易感性，也是受到限制的，一般情況不只能進(jìn)行到2代間分子標(biāo)記的傳遞研究。4.“病例—對(duì)照”研究是預(yù)防醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中流行病學(xué)的經(jīng)典研究策略，不同于經(jīng)典遺傳學(xué)的理論，它研究的是在現(xiàn)實(shí)群體中，某種疾病相關(guān)的環(huán)境因素或遺傳性內(nèi)因的暴露和該疾病的人群分布狀態(tài)，通過該策略，最終擬解決的問題，是該人群不同程度下暴露的環(huán)境因素或遺傳性內(nèi)因與疾病的關(guān)系，并且希望得到的是適合于指導(dǎo)本人群中絕大多數(shù)人進(jìn)行疾病預(yù)防和早期干預(yù)的信息。共一百五十三頁5.對(duì)于人群中現(xiàn)實(shí)存在的復(fù)雜多基因疾病的易感基因篩查，由于該疾病的特點(diǎn)，決定了預(yù)防醫(yī)學(xué)學(xué)科和生物學(xué)學(xué)科的相互滲透(shèntòu)和結(jié)合。應(yīng)運(yùn)而生地，基于隨機(jī)群體中收集的T2DM患者和正常NGT對(duì)照人群資料進(jìn)行“病例—對(duì)照”研究，是現(xiàn)代國(guó)際上尋找人群中的T2DM分子病因?qū)W因素的主流策略。同時(shí)考慮遺傳與環(huán)境交互作用的影響。6.目前研究認(rèn)為，除了T2DM中的主效基因模式類型外，研究其易感基因時(shí)采用相關(guān)分析比連鎖分析更有效，但由于連鎖不平衡僅存在于染色體上極窄的區(qū)域內(nèi)（在混合人群中，連鎖不平衡的范圍僅為2.5-10kb），因此要想通過基于連鎖不平衡的相關(guān)分析進(jìn)行基因組掃描，遺傳標(biāo)志的密度需要在5-20kb才能保證所有的易感基因均被檢測(cè)到，這要求分布于整個(gè)基因組的極高密度的遺傳標(biāo)志，目前所認(rèn)識(shí)的遺傳標(biāo)志中，只有單核苷酸多態(tài)性（SNP）符合這一要求。共一百五十三頁7.由于相關(guān)分析所需的樣本量較大，因而整個(gè)掃描工作的工作量將會(huì)非常巨大，這就要求遺傳標(biāo)志的檢測(cè)功能自動(dòng)化進(jìn)行，SNP的檢測(cè)手段正是朝著這一方向發(fā)展，因而極有可能成為未來研究糖尿病等多基因疾病相關(guān)基因的重要工具。8.SNP作為有效的研究工具，是指染色體基因組水平上單個(gè)核苷酸變異引起的DNA序列多態(tài)性。在人群中的發(fā)生頻率大于1%。SNPs包含(bāohán)了基因組已知多態(tài)性的80%-90%是最常見的遺傳變異類型。遺傳的選擇壓力導(dǎo)致SNP在單個(gè)基因及整個(gè)基因組中的分布是不均勻的，在基因編碼區(qū)大約有200,000個(gè)SNPs，稱cSNPs，與蛋白質(zhì)功能有關(guān)，在非編碼區(qū)的SNPs稱ucSNPs。非編碼區(qū)的SNP比編碼區(qū)的SNP多。共一百五十三頁擬采取(cǎiqǔ)的研究方案：

1、本研究考慮到T2DM屬于多基因復(fù)雜性疾病，并且以散發(fā)為主的特征，以散發(fā)群體篩查為主導(dǎo)，小家系進(jìn)行垂直驗(yàn)證為輔助參考，進(jìn)行T2DM易感基因的關(guān)聯(lián)篩查和驗(yàn)證工作。T2DM以候選基因?yàn)闃?biāo)記，采用基因組改良(gǎiliáng)掃描方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分型。2、擬對(duì)有關(guān)聯(lián)編碼基因標(biāo)記按染色體分型，可通過PCR-RFLP方法電泳定型在8%聚丙烯酰胺凝膠上電泳定型、銀染、酶切，確定基因型。對(duì)無關(guān)聯(lián)編碼基因標(biāo)記，選用相應(yīng)數(shù)量的微衛(wèi)星進(jìn)行特定染色體的掃描，來尋找疾病候選位點(diǎn)?；蚍中徒Y(jié)果通過遺傳學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件SAGE3.0、Genehunter2.0、Allegro等軟件作兩點(diǎn)或多點(diǎn)的連鎖和連鎖不平衡分析和家系內(nèi)基因傳遞和分離的TDT分析，以便確定染色體不同位點(diǎn)與疾病的相關(guān)性，并通過LOD分?jǐn)?shù)高低定位某些排序有高概率的位點(diǎn)基因共一百五十三頁3、按DM的病因?qū)W，除需要精細(xì)定位，還需要有可靠的群體case-control驗(yàn)證。所有擬定的候選易感基因，需要進(jìn)行良好匹配，有足夠數(shù)量的case-control驗(yàn)證和比較，進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)檢查有否人群代表性。有良好的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控，以保證實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定，數(shù)據(jù)可靠。采用傳統(tǒng)的連鎖和連鎖不平衡分析方法進(jìn)行遺傳學(xué)統(tǒng)計(jì)分析。有完整父母信息的可用TDT方法進(jìn)行分離分析傳遞不平衡檢測(cè)。4、采用Logist回歸及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型及叉生分析進(jìn)行危險(xiǎn)因素(yīnsù)的遺傳與環(huán)境的交互作用分析。根據(jù)數(shù)據(jù)具體情況采用相對(duì)應(yīng)的分析方法。共一百五十三頁研究方法1、本研究中涉及的尋找疾病易感基因的策略人類基因組計(jì)劃完成后，基因組DNA序列明確將簡(jiǎn)化識(shí)別疾病易感基因的步驟。候選克隆技術(shù)正成為復(fù)雜形狀(xíngzhuàn)基因克隆的一種快捷高效的策略。目前研究糖尿病相關(guān)基因常用的技術(shù)是基因組掃描和連鎖分析，連鎖分析適用于分析基因型與表型有較密切關(guān)系，且疾病表型較單一的致病基因，而對(duì)于以多個(gè)微效基因?yàn)樘卣鞯腡2DM易感基因的定位克隆不太適用。一般認(rèn)為：研究T2DM等多遺傳因素及環(huán)境因素參與的復(fù)雜性疾病時(shí)，采用基因群體的基因組SNP“case-control”關(guān)聯(lián)分析，特別是基于連鎖不平衡（linkagedisequilibrium,LD）的關(guān)聯(lián)分析比連鎖分析更有效。關(guān)聯(lián)分析是基于群體中無親緣關(guān)系的病例組和表現(xiàn)型正常的對(duì)照組在某個(gè)遺傳標(biāo)記位點(diǎn)上會(huì)出現(xiàn)不同的頻率而設(shè)計(jì)的。通過兩者頻率的不同，就能推測(cè)所研究的共一百五十三頁

遺傳標(biāo)記和某個(gè)遺傳病易感位點(diǎn)之間是否存在因果關(guān)系或連鎖不平衡。

此領(lǐng)域內(nèi)目前被更多數(shù)人接受的理論基礎(chǔ)(jīchǔ)為“常見疾病—-常見變異”假說（commondisease,commonvariant,CDCV），該假說認(rèn)為，T2DM等常見疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)，主要由基因組常見變異積累造成，而非依賴于罕見的稀有基因組變異，后者在單基因疾病多多基因疾病中的主效基因模式中占主要地位。

常見疾病多由一種以上基因異常及致病環(huán)境因子呈正性或負(fù)性相互作用而引起。每個(gè)微效基因只賦予個(gè)體某種程度的易感性，就每個(gè)易感基因而言均非發(fā)病所必需。因此，單純依靠連鎖分析的方法進(jìn)行復(fù)雜性疾病易感基因的尋找和定位時(shí)，基于CDCV的理論假設(shè)其檢驗(yàn)的效能相對(duì)偏低，其最終很難在群體中得到相對(duì)一致的結(jié)果。共一百五十三頁

1）連鎖不平衡和單體型分析

連鎖不平衡是指相鄰基因座位上等位基因的非隨機(jī)相關(guān)，也就是指：當(dāng)不同位點(diǎn)的等位基因以單體型組合形式出現(xiàn)的幾率高于隨機(jī)分布而同時(shí)出現(xiàn)的幾率時(shí)，那么稱這兩個(gè)位點(diǎn)處于連鎖不平衡狀態(tài)。用公式描述和衡量LD如下：假設(shè)相鄰基因座位1和2，座位1的等位基因?yàn)镸，m，其頻率分別為PM，Pm；座位2的等位基因?yàn)镹，n，其頻率分別為PN，Pn；等位基因M和N在同一染色體上同時(shí)出現(xiàn)的理論頻率為PM×PN，而實(shí)際出現(xiàn)的頻率為PMN，那么，連鎖不平衡的D值為PMN-PM×PN。LD的存在，可以歸因?yàn)閮煞N因素：一是由突變產(chǎn)生的多態(tài)性而形成，之后由于重組的發(fā)生，兩位點(diǎn)間的LD程度逐漸減低；另一種是由于分子標(biāo)記物理距離(jùlí)的靠近，由于發(fā)生重組的概率降低，而呈現(xiàn)出高LD的共一百五十三頁

表現(xiàn)。但值得注意的是，靠得很近的分子標(biāo)記間并非總呈現(xiàn)出強(qiáng)的LD，相反，也有數(shù)據(jù)顯示，對(duì)于距離較遠(yuǎn)的分子標(biāo)記間也存在LD的狀態(tài)。此外，一部分LD也可能由于遺傳漂變和群體混雜而產(chǎn)生。LD的度量有多種不同的方法，大多數(shù)都應(yīng)用于雙等位基因的配對(duì)檢驗(yàn)。目前常用的兩種配對(duì)檢驗(yàn)方法為連鎖不平衡系數(shù)（coefficientoflinkagediseruiligrium，D′）和r2。它們的取值范圍都是從0（連鎖平衡）到1（完全連鎖不平衡）。

分子標(biāo)記間LD存在，是繼續(xù)進(jìn)行標(biāo)記間單體型塊（haplotypeblock）構(gòu)建的前提條件。同一條染色體上的單體型結(jié)構(gòu)，可被劃分為一系列彼此分離的單體型塊，其大小為3-92kb左右。這些單體型塊被重組熱點(diǎn)所分割，其內(nèi)部重組率很低，處于高LD的狀態(tài)。

基于此理論基礎(chǔ)，如果單體型塊的結(jié)構(gòu)在基因組中普遍存在，那么基于群體的“病例-對(duì)照(duìzhào)”關(guān)聯(lián)研究所共一百五十三頁

需要的SNP數(shù)量將大為縮小，并且還能在后續(xù)的分析中，體現(xiàn)功能性等位基因效應(yīng)的相互疊加，無論是作為非功能的分子標(biāo)志，還是作為有功能的等位基因的組合，其都具有更可持續(xù)推廣的應(yīng)用效力而被作為目前最常見的工具而得到廣泛應(yīng)用。

定義單體型塊的方法很多，目前大多數(shù)學(xué)者更傾向于利用配對(duì)的連鎖不平衡系數(shù)D′以確定重組熱點(diǎn)，因?yàn)闇y(cè)量重組似乎更符合單體型塊的本質(zhì)，并且，利用配對(duì)連鎖不平衡系數(shù)D′更合適于雙等位基因。2）連鎖不平衡、傳遞不平衡（transmissiondisequilibriumtest，TDT）和關(guān)聯(lián)研究

將連鎖不平衡應(yīng)用于大規(guī)模的關(guān)聯(lián)研究或針對(duì)特定染色體區(qū)段(qūduàn)，甚至針對(duì)單基因的進(jìn)行系統(tǒng)性SNP掃描分析，可用尋找和定位復(fù)雜性疾病的致病基因。連鎖不平共一百五十三頁衡狀態(tài)的存在，既可能提示繼續(xù)進(jìn)行單倍體塊分析的可能性，本身也預(yù)示可能起基因組區(qū)域附近存在功能性的突變位點(diǎn)。連鎖不平衡分析和關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果是互通的。

傳遞不平衡檢驗(yàn)是基于家系樣本的另一種形式的關(guān)聯(lián)研究。由于在群體關(guān)聯(lián)研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，各環(huán)節(jié)都有可能影響數(shù)據(jù)分析的準(zhǔn)確性，特別是研究群體的選擇最為重要。基于散發(fā)群體的關(guān)聯(lián)研究雖然有上述提到的策略優(yōu)勢(shì)，但是先證者效應(yīng)、種族差異以及群體性別、年齡結(jié)構(gòu)的差異，都可能出現(xiàn)所謂的“群體分層”，從而導(dǎo)致某基因位點(diǎn)與疾病存在相關(guān)的假陽性結(jié)果。傳遞不平衡不依賴于有群體分層可能的散發(fā)人群，而在相對(duì)背景一致的家系中進(jìn)行研究。選擇一個(gè)受累家庭內(nèi)對(duì)照組。發(fā)現(xiàn)可以關(guān)聯(lián)時(shí)，運(yùn)用TDT需要測(cè)定患者及其父母標(biāo)記物基因型。它是基于尋找假定(jiǎdìng)的致疾病等位基因由雜合子父母?jìng)鬟f給患病子女的不平衡傳遞性，而推測(cè)致病共一百五十三頁基因是否存在的方法。可以結(jié)合散發(fā)群體的研究結(jié)果進(jìn)行回顧性傳遞規(guī)律驗(yàn)證研究。

在關(guān)聯(lián)研究中，如果某一因素可增加某疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，而該因素在疾病人群中的頻率高于正常人群，可認(rèn)為該因素與疾病相關(guān)聯(lián)。關(guān)聯(lián)研究中，主要關(guān)注基于LD的間接關(guān)聯(lián)分析，其基本原理為：如果某致病基因座與遺傳標(biāo)記（多態(tài)性的等位基因）存在強(qiáng)的LD關(guān)系，那么可以通過比較遺傳標(biāo)記在患者于正常個(gè)體(gètǐ)間差異，最終得到該致病基因座在疾病發(fā)生中相對(duì)危險(xiǎn)度。

3)2型糖尿病的多為點(diǎn)單倍體遺傳分析

單倍體型是傾向于共同遺傳的一組緊密連鎖的等位基因，可用于精細(xì)定位人類疾病基因。我們所有的染色體共一百五十三頁

均成對(duì)出現(xiàn)，一對(duì)染色體中每條分別來自父母一方，上面的基因及其排列順序雖一致，但其序列并不相同。例如，每1000個(gè)核苷酸就存在一個(gè)單核苷酸多態(tài)性，因而區(qū)分來源于父母親的變異體是可能的，稱為父源或母源的等位基因。對(duì)父源或母源等位基因的區(qū)分使人類的疾病基因得以通過連鎖分析定位到染色體某一位置上。在產(chǎn)生精子和卵子的生殖細(xì)胞中，父母源染色體配對(duì)并交換部分DNA片段，發(fā)生重組過程。重組之后，染色體稱為福怒雙親等位基因的混合體。重組更多的發(fā)生在距離較遠(yuǎn)的DNA序列之間，因此，通過衡量疾病基因與已知位置序列之間的重組頻率可以(kěyǐ)定位疾病基因。重組的另一結(jié)果是同一染色體上某些區(qū)段的序列傾向于共同遺傳，共一百五十三頁稱為連鎖不平衡的現(xiàn)象。這樣一組極少被重組打破的等位基因，構(gòu)成單倍體型，在人類基因組中，單倍體型大小約為60000bp左右，可能包含的SNP位點(diǎn)約60個(gè)。單倍體型可被用于精細(xì)定位疾病等位基因，一個(gè)導(dǎo)致遺傳疾病的新突破總是發(fā)生在一個(gè)群體已有的單倍體型之內(nèi)，經(jīng)過幾代傳遞，重組事件可能發(fā)生在此單倍體型之內(nèi)，但疾病等位基因仍然與最近的SNP組合在一起(yīqǐ)遺傳，如果此單倍體型可以在一組病人中鑒定，在單倍體型內(nèi)分型等位基因便可以使一個(gè)保守區(qū)域得以鑒定，此保守區(qū)域與致病基因指向同一染色體區(qū)段。由于SNP標(biāo)記具有非常準(zhǔn)確的定位致病基因的潛力，因而科學(xué)家有興趣構(gòu)建整個(gè)人類基因組單倍體圖譜。

共一百五十三頁單倍體型分析對(duì)復(fù)雜遺傳病的易感基因連鎖分析具有重要作用，已成為不可缺少的通過連鎖分析精確定位致病基因的方法，在2型糖尿病等復(fù)雜遺傳疾病的易感基因精細(xì)定位方面得到廣發(fā)應(yīng)用。

2研究候選突變位點(diǎn)在家系中的垂直傳遞規(guī)律方法：使用的樣本為采集T2DM病例對(duì)照樣本的同時(shí)，同時(shí)收集的部分T2DM先證者的家系資料。家系入選的標(biāo)準(zhǔn)如下：1）入選的家系每個(gè)家系成員3人以上，包含1名T2DM的先證者在內(nèi)至少有2個(gè)以上診斷明確的T2DM患者，如先證者與其一個(gè)同胞為T2DM患者，即為符合入選標(biāo)準(zhǔn)的家系。2）入選家系收集的信息和標(biāo)本(biāoběn)包含兩代人以上，如先證者及其配偶與子女或先證者及其父母。家系結(jié)構(gòu)類型如圖1-1所示。電話約請(qǐng)先證者及其父、母、患者和未患者的同胞等其它家系成員，所有受試者均簽署知情同意書。于共一百五十三頁空腹12小時(shí)后，次日早晨進(jìn)行口服75克葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）分別測(cè)定0、30、60、120及180分鐘血糖、胰島素、空腹血糖。T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)WHO1999年標(biāo)準(zhǔn)。3）共采集120個(gè)家系，先證者為候選突變Gly482Ser的突變雜合子的家系被二篩挑選出來，進(jìn)行后續(xù)的家系傳遞研究，確定最終納入的核心(héxīn)小家系。共一百五十三頁臨床(línchuánɡ)信息和血生化指標(biāo)測(cè)定

依據(jù)1999年WHO糖尿病專家委員會(huì)制訂的糖尿病診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)：1）有糖尿病癥狀，并且任意血糖≧11.1mmol/l。2）空腹血糖≧7.0mmol/l。3）糖耐量試驗(yàn)餐后2小時(shí)血糖≧11.1mmol/l。OGTT按世界衛(wèi)生組織要求進(jìn)行。符合上述標(biāo)準(zhǔn)之一的患者(huànzhě)，在另一天重復(fù)上述檢查，若仍符合三條標(biāo)準(zhǔn)之一，即診斷為糖尿病。糖耐量試驗(yàn)服糖后2小時(shí)血糖≧7.8mmol/l，但又低于11.1mmol/l診斷為糖耐量減低。空腹血糖高于或等于6.1mmol/l，但又低于7.0mmol/l診斷為空腹葡萄糖受損。共一百五十三頁技術(shù)(jìshù)路線

考慮到T2DM屬于多基因復(fù)雜性疾病，并且以散發(fā)為主，所以，T2DM的易感基因的尋找不適合使用家系資料(zīliào)的連鎖分析。此外，T2DM的發(fā)病有增齡性變化的特征，所以從家系入手進(jìn)行傳遞不平衡檢驗(yàn)也不能作為首選研究策略。本研究采用四步法進(jìn)行T2DM易感基因的關(guān)聯(lián)篩查和驗(yàn)證工作，以散發(fā)群體篩查為主導(dǎo)，小家系進(jìn)行垂直驗(yàn)證為輔助參考，主要技術(shù)路線設(shè)計(jì)如下圖：共一百五十三頁T2DM診斷，樣本采集，流行病學(xué)(liúxínɡbìnɡxué)調(diào)查基因組DNA提取、生化指標(biāo)(zhǐbiāo)測(cè)定小樣本直接掃描PPARGC1編碼區(qū)和啟動(dòng)子區(qū)SNP，進(jìn)行預(yù)篩查，根據(jù)MAF、雜合度等信息，選擇進(jìn)入后續(xù)研究。小群體等位基因分型，進(jìn)行單基因遺傳學(xué)分析，根據(jù)HWE、分布顯著性、OnewayANOVA、LD及Logistic去除混雜后，選擇SNP進(jìn)入后續(xù)研究第一步第二步共一百五十三頁陽性SNP利用(lìyòng)核心小家系驗(yàn)證，通過傳導(dǎo)不平衡檢驗(yàn)和同胞對(duì)檢驗(yàn)分析去除人群分層后陽性突變位點(diǎn)在家系中的傳遞規(guī)律傳遞與環(huán)境因素的交互作用分析，尋找發(fā)病原因的證據(jù)：探索(tànsuǒ)PPARGC1的分子機(jī)制T2DM大群體中等位基因分型，進(jìn)行多因素分析，根據(jù)HWE檢驗(yàn)、分布顯著性、LD及單體型構(gòu)建，分析基因互作效應(yīng)，比較基因型間臨床指標(biāo)差異第三步第四步共一百五十三頁可行性分析(fēnxī)：

目前已完成北方125個(gè)家系及散發(fā)病例320名和正常對(duì)照320名的調(diào)查工作，獲取到血樣、提取出DNA，完成了生化指標(biāo)的檢測(cè)工作同時(shí)，進(jìn)行了環(huán)境、遺傳因素的調(diào)查也數(shù)據(jù)初步分析。驗(yàn)證了2個(gè)PPARGC1易感基因與T2DM關(guān)聯(lián)的多態(tài)性位點(diǎn)，同時(shí)做了家系傳遞(chuándì)分析及基因間交互作用的分析。正在補(bǔ)充完善家系資料及資料搜集工作。方法成熟、技術(shù)路線可行。前期的國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目的進(jìn)行為本研究積累一定的工作基礎(chǔ)。采樣過程中我們注意了醫(yī)學(xué)倫理問題：在目前的醫(yī)學(xué)工作中面臨諸多嚴(yán)峻的倫理問題，如遺傳信息的隱私權(quán)問題、基因組圖譜的信息使用與人的社會(huì)權(quán)利、基因組研究成果應(yīng)用的不可預(yù)測(cè)性等。我們已經(jīng)注意到這一問題，并提請(qǐng)哈爾濱科大學(xué)醫(yī)學(xué)理論委員會(huì)共一百五十三頁論證，最終獲得批準(zhǔn)(pīzhǔn)通過。因此我們?cè)陧?xiàng)目申請(qǐng)的過程中，已經(jīng)著手準(zhǔn)備妥善解決此問題，如果基金申請(qǐng)順利通過，我們有能力解決好次問題。并將嚴(yán)格實(shí)行知情同意制度，每位患者均簽署知情同意書，并與患者保持密切聯(lián)系，及時(shí)將研究成果向患者反饋，維護(hù)患者的權(quán)益。共一百五十三頁

本項(xiàng)目(xiàngmù)的特色與創(chuàng)新之處：

分子生物學(xué)與社會(huì)醫(yī)學(xué)研究方法相結(jié)合，遵循現(xiàn)代(xiàndài)社會(huì)醫(yī)學(xué)研究模式為本項(xiàng)目特色

近年，隨著分子生物學(xué)理論及技術(shù)的發(fā)展，尤其是人類基因組計(jì)劃研究迅速進(jìn)展和突破、基因定位技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的積累及統(tǒng)計(jì)分析方法的進(jìn)步，使得2型糖尿病的分子遺傳學(xué)研究有了長(zhǎng)足進(jìn)展。闡明參與2型糖尿病的易感基因種類、特性及機(jī)制是2型糖尿病分子遺傳學(xué)研究的目標(biāo)之一。目前比較常用的是采用候選基因的功能區(qū)或非功能區(qū)多態(tài)標(biāo)記進(jìn)行。本項(xiàng)目將從預(yù)防醫(yī)學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、社會(huì)醫(yī)學(xué)研究三個(gè)層次對(duì)北方地區(qū)T2DM的流行現(xiàn)狀、致病的遺傳、環(huán)境、社會(huì)因素的交互作用研究。進(jìn)而為使得T2DM的預(yù)防治療遵循現(xiàn)代社會(huì)醫(yī)學(xué)模式奠定基礎(chǔ)。共一百五十三頁

群體關(guān)聯(lián)分析，或是采用隨機(jī)DNA位點(diǎn)或候選基因的高雜合度非功能區(qū)多態(tài)標(biāo)記進(jìn)行家系分析。2型糖尿病受到遺傳基因與環(huán)境條件的雙重調(diào)控。不同遺傳背景的人群糖尿病易感性的主效基因可能有較大的差異。以往在不同群體進(jìn)行易感基因的關(guān)聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)，同以易感基因在不同群體中作用(zuòyòng)具有差異性。所以對(duì)于在其他人群所發(fā)現(xiàn)的易感基因，在