臨床體液及排泄物檢查操作規(guī)程

臨床體液及排泄物檢查操作規(guī)程

尿液檢驗(yàn)

尿常規(guī)檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

化學(xué)試帶法。

【試劑】

各型號(hào)尿液化學(xué)分析儀配套試帶。

【操作】

詳見自己實(shí)驗(yàn)室的尿液化學(xué)分析儀使用手冊(cè)。

【附注】

1.尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進(jìn)行8?10

項(xiàng)檢測(cè)（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽

素原、亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞）。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手

工方法，詳見有關(guān)資料。

2.必須了解所用試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。

3.要注意尿液化學(xué)分析儀測(cè)定結(jié)果與手工法的差異，

必要時(shí)用手工法復(fù)查。

4.尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)僅是一個(gè)過篩手段，當(dāng)?shù)鞍住?/p>

隱血、白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白"十”或以上)時(shí),

應(yīng)進(jìn)行鏡檢。

5.尿液顏色、透明度等一般性狀異常時(shí)也應(yīng)報(bào)告。

本一周氏(Bence-Jones)蛋白定性檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

熱沉淀反應(yīng)法。

【試劑】

1.200g/L磺基水楊酸溶液；

2.2mol/L醋酸鹽緩沖溶液(pH4.9±0.1)。

【操作】

1.先將尿液用磺基水楊酸法作蛋白定性檢查，如呈陰

性反應(yīng)，則可認(rèn)為尿液標(biāo)本中本一周氏蛋白陰性。

2.取透明尿液4ml于試管中，再加入醋酸鹽緩沖液1ml,

混勻后，放置56七水浴中15分鐘。如有渾濁或出現(xiàn)沉淀，

再將試管放入沸水中，煮沸3分鐘，觀察試管中渾濁或沉淀

的變化，如渾濁變清、渾濁減弱或沉淀減少，均提示本-周

氏蛋白陽(yáng)性。若煮沸后，渾濁增加或沉淀增多，表明此尿液

中還有其它蛋白質(zhì)，此時(shí)應(yīng)將試管從沸水中取出，立即過濾。

如濾液開始透明，溫度下降后渾濁，再煮沸時(shí)又透明，提示

本-周氏蛋白為陽(yáng)性。

【附注】

1.過多的本-周氏蛋白，在9CTC以上不易完全溶解，

故需與對(duì)照管比較，也可將尿液稀釋后再測(cè)。

2.煮沸過濾除去尿中白、球蛋白時(shí)，動(dòng)作要迅速，并

需保持高溫，否則本-周氏蛋白也會(huì)濾去。

尿乳糜定性檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【試劑】

1.乙酰(AR)；

2.蘇丹ni醋酸乙醇染色液或猩紅染色液。

【操作】

1.取尿5?10ml,加乙醛2?3ml,混合振搖后，使脂

肪溶于乙酸。靜置數(shù)分鐘后,2000r/min離心5min。

2.吸取乙醵與尿液的界面層涂片，加蘇丹ni醋酸乙醇

染色液或猩紅染色液1滴。

3.鏡檢觀察是否有紅色脂肪小滴。

【附注】

1.尿液中加少量飽和氫氧化鈉，再加乙醛，有助于澄

清。

2.將分離的乙醵層隔水蒸干，若留有油狀沉淀，也可

加蘇丹ni,鏡檢證實(shí)有無(wú)脂肪小滴。

尿膽色素原定性試驗(yàn)

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【試劑】

1.對(duì)二甲氨基苯甲醛試劑；

2.飽和醋酸鈉溶液；

3.氯仿；

4.正丁醇。

【操作】

1.在試管中，加入尿標(biāo)本2nli及對(duì)二甲氨基苯甲醛試

劑2ml,混合。

2.立即加飽和醋酸鈉溶液4ml,混合，加氯仿3ml,振

搖混合后，上層水溶液呈紅色者為陽(yáng)性反應(yīng)。

3.陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)用下法證實(shí)：如尿膽原含量多，用一次

氯仿不能完全抽提尿膽原，應(yīng)多次用氯仿抽提，直至氯仿層

呈淡粉紅色或無(wú)色為止，再觀察上層水溶液色澤。如上層水

溶液為紅色時(shí)，再加正丁醇4nli抽提，如水溶液仍呈紅色則

證實(shí)尿中膽色素元為陽(yáng)性。

【附注】

1.醋酸鈉溶液必須為飽和液。

2.當(dāng)尿膽色素原濃度太高時(shí)，應(yīng)將尿標(biāo)本稀釋25?100

倍。

3.尿液必須新鮮，不能久置。

尿苯丙酮酸定性試驗(yàn)

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

三氯化鐵法。

【試劑】

1.100g/L三氯化鐵液；

2.磷酸鹽沉淀劑。

【操作】

1.尿液4ml加磷酸鹽沉淀劑1ml,混勻，靜置3nlin,

如出現(xiàn)沉淀，可用濾紙過濾或離心除去。

2.濾液中加入濃鹽酸2?3滴和100g/L三氯化鐵溶液

2?3滴，每加1滴立即觀察顏色變化。以尿液顯藍(lán)綠色并持

續(xù)2~4nlin,為陽(yáng)性。

【附注】

1.尿中若含酚類藥物（如水楊酸制劑）及氯丙嗪，也

可與氯化鐵結(jié)合顯色，試驗(yàn)前應(yīng)停用此類藥物。膽紅素也可

造成假陽(yáng)性。

2.小兒出生后6周內(nèi)不易查出。故于出生6周后檢查

為宜。

3.大多數(shù)苯丙酮尿癥患者的尿液可出現(xiàn)陽(yáng)性。但約

1/4?1/2病例可能會(huì)漏檢

4.亦可采用2,4-二硝基苯朋法。

尿沉渣檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液（最好采集清晨中段尿）。

【方法】

顯微鏡檢查法。

【操作】

1.取刻度離心管，倒入混合后的新鮮尿液10ml,1500r/

min離心5mino

2.棄去上層清液，留下0.2ml沉渣，輕搖離心管，使

尿沉渣有形成分充分混勻。

3.取尿沉渣0.02ml,滴在載玻片上，用18mmX18mm的

蓋玻片覆蓋。

4.鏡檢觀察，用10X10鏡頭，觀察其中有形成分的全

貌及管型。用10X40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成分及計(jì)算數(shù)量，

應(yīng)觀察10個(gè)視野所見最低和最高值，記錄結(jié)果。管型用高

倍鏡鑒定，但計(jì)數(shù)數(shù)量按低倍鏡觀察20個(gè)視野，算出一個(gè)

視野的平均值，記錄結(jié)果。尿結(jié)晶和鹽類數(shù)量以每一高倍視

野+、2+、3+、4+報(bào)告。

【附注】

1.清晨空腹第一次尿（一般情況應(yīng)采集中段尿），應(yīng)在

lh內(nèi)送檢。

2.見到各種上皮細(xì)胞也應(yīng)報(bào)告，報(bào)告方式參照白細(xì)胞。

3.亦可采用染色尿沉渣鏡檢。

尿沉渣定量檢查

【標(biāo)本】

新鮮晨尿。

【方法】

一小時(shí)尿沉渣計(jì)數(shù)法。

【操作】

1.標(biāo)本收集：患者先排尿棄去，準(zhǔn)確收集3h尿液于

干燥容器內(nèi)送檢（標(biāo)本留取時(shí)間5:30?8：30）o

2.準(zhǔn)確測(cè)量3h尿量，充分混合。取混勻尿液10ml,置

刻度離心管中，1500r7min離心5min,用吸管吸棄上層尿液

9ml,留下1ml,充分混勻。吸取混勻尿液1滴，注于血細(xì)胞

計(jì)數(shù)板內(nèi)。細(xì)胞共數(shù)10個(gè)大方格，管型共數(shù)20個(gè)大方格。

最終計(jì)算出紅細(xì)胞/h、白細(xì)胞/h、管型/h。

【附注】

1.尿液應(yīng)新鮮，PH應(yīng)在6以下。

2.尿液比重最好在1.026以上。

3.如尿液中含多量磷酸鹽時(shí)，應(yīng)加少量稀醋酸液（切

勿加多），使其溶解；含大量尿酸鹽時(shí)，應(yīng)加溫使其溶解。

4.亦可采用尿沉渣定量分析板或尿沉渣自動(dòng)分析儀進(jìn)

行尿沉渣定量檢查，詳見有關(guān)資料。

絨毛膜促性腺激素檢測(cè)

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

金標(biāo)抗體檢測(cè)法。

【操作】

見試劑盒說明書。

【附注】

若質(zhì)控點(diǎn)和測(cè)定點(diǎn)均不呈現(xiàn)紅色，表示試劑失效。

糞便檢驗(yàn)

糞便的顯微鏡檢查

【標(biāo)本】

新鮮糞便。

【方法】

直接涂片鏡檢法。

【操作】

1.潔凈玻片上加等滲鹽水1?2滴，選擇糞便的不正常

部分，或挑取不同部位的糞便做直接涂片（最好取大玻片，

制成涂片后，應(yīng)覆以蓋片。涂片的厚度以能透過印刷物字跡

為準(zhǔn)）檢查。

2.在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊，則在該涂片上滴加1滴碘

液，在高倍鏡下仔細(xì)鑒別，如仍不能決定時(shí)，可取全量糞便

濃縮法檢查。

隱血試驗(yàn)

【標(biāo)本】

新鮮糞便。

【方法】

免疫學(xué)檢測(cè)法。

【操作】

取一片潔凈干燥的載玻片，滴加2?3滴蒸偏水，取糞

便少許，調(diào)成均勻混懸液。取糞便隱血試紙條，按說明書操

作，將試紙條的反應(yīng)端浸濕。在5min內(nèi)觀察結(jié)果。以反應(yīng)

線及質(zhì)控線均呈藍(lán)色帶為陽(yáng)性。

【附注】

1.若兩條線均不顯色，說明試紙條失效。

2.本法由于間斷性出血或出血在糞便中分布不均等因

素，可造成假陰性結(jié)果。

3.本法由于藥物等原因，對(duì)正常人檢查有時(shí)會(huì)得到陽(yáng)

性結(jié)果。

4.亦可采用化學(xué)試帶法、鄰甲聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法

等。收集標(biāo)本前3日應(yīng)禁食動(dòng)物性食物及富含葉綠素食物、

鐵劑、中藥。但本法不受動(dòng)物血紅蛋白的干擾，試驗(yàn)前不須

禁食肉類。

糞膽素檢查

【標(biāo)本】

新鮮糞便。

【方法】

氯化高汞煮沸法。

【試劑】

飽和氯化高汞溶液。

【操作】

1.于小試管內(nèi)置糞便一小塊，加飽和氯化高汞溶液數(shù)

毫升。

2.將糞塊調(diào)勻，加熱煮沸3min,立即觀察顏色反應(yīng)。

【附注】

1.結(jié)果不易判定時(shí)，應(yīng)注意糞便顏色，必要時(shí)以鹽水

代替試劑做空白對(duì)照。

2.當(dāng)糞便顆粒經(jīng)煮沸后如有紅色又有綠色出現(xiàn)，說明

標(biāo)本內(nèi)既含糞膽素又含膽紅素，常見于腸炎、腹瀉等。

腦脊液檢驗(yàn)

潘氏(Pandy)球蛋白定性試驗(yàn)

【標(biāo)本】

新鮮腦脊液。

【試劑】

5%苯酚溶液(棕色瓶?jī)?nèi)保存)。

【操作】

取試劑2?3ml,置于小試管內(nèi)，用毛細(xì)滴管滴入腦脊液

1?2滴，襯以黑色背景，立即觀察結(jié)果，報(bào)告陰性或陽(yáng)性及

陽(yáng)性的程度。

細(xì)胞計(jì)數(shù)

【標(biāo)本】

新鮮腦脊液。

【試劑】

1.細(xì)胞計(jì)數(shù)板；

2.紅細(xì)胞稀釋液；

3.冰乙酸；

4.1%冰乙酸。

【操作】

1.細(xì)胞總數(shù)：

(1)澄清腦脊液：混勻后用滴管直接滴入計(jì)數(shù)池，計(jì)

數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)紅、白細(xì)胞數(shù)，其總和即為每u1的細(xì)胞

數(shù)。(如細(xì)胞較多，可計(jì)數(shù)一大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)X10)。

(2)渾濁或帶血腦脊液：用血紅蛋白吸管吸取混勻的

腦脊液20ul,加入含紅細(xì)胞稀釋液0.38ml的小試管內(nèi)，混

勻后滴入計(jì)數(shù)池內(nèi)，用低倍鏡計(jì)數(shù)4個(gè)大方格中的細(xì)胞總數(shù),

再乘以50即為每ul腦脊液的細(xì)胞總數(shù)。

2.白細(xì)胞數(shù)：

（1）非血性標(biāo)本：小試管內(nèi)放入冰乙酸1?2滴，轉(zhuǎn)動(dòng)

試管，使內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之，然后滴加混勻的腦脊液

3?4滴，數(shù)分鐘后，混勻充入計(jì)數(shù)池，按細(xì)胞總數(shù)操作中的

紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

（2）血性標(biāo)本：將混勻的腦脊液用1%冰乙酸溶液稀釋

后，按細(xì)胞總數(shù)操作中的紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)，結(jié)果X稀

釋倍數(shù)。

3.細(xì)胞分類：

（1）直接分類法：白細(xì)胞計(jì)數(shù)后，將低倍鏡換成高倍

鏡，直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計(jì)數(shù)單個(gè)核細(xì)胞

（包括淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞）和多核細(xì)胞，應(yīng)數(shù)100個(gè)白細(xì)

胞，并以百分率表示。若白細(xì)胞少于100個(gè)，應(yīng)直接寫出單

核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字。

（2）染色分類法：如直接分類不易區(qū)分細(xì)胞時(shí)，可將

腦脊液離心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清1滴，推片制

成均勻薄膜，置室溫或37七溫箱內(nèi)待干，進(jìn)行瑞氏染色后用

油鏡分類。

如見有不能分類的細(xì)胞，應(yīng)另行描述報(bào)告。

【附注】

1.腦脊液常規(guī)包括一般性狀檢查、潘氏(Pandy)球蛋

白定性試驗(yàn)及細(xì)胞計(jì)數(shù)。

2.計(jì)數(shù)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行。

3.細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)注意新型隱球菌與白細(xì)胞的區(qū)別。

4.計(jì)數(shù)池用后，應(yīng)用75%乙醇消毒60min。

漿膜腔積液檢查

漿膜粘蛋白定性試驗(yàn)(Rivalta反應(yīng))

【標(biāo)本】

新鮮漿膜腔積液。

【試劑】

冰醋酸。

【操作】

取100ml量筒，加蒸鐳水100ml,滴入冰醋酸0.1ml(PH

3?5),充分混勻，靜止數(shù)分鐘，將穿刺液靠近量筒液面逐

滴輕輕滴下，在黑色背景下，觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其

下降速度等，報(bào)告陰性或陽(yáng)性及陽(yáng)性的程度。

細(xì)胞學(xué)檢查

【標(biāo)本】

新鮮漿膜腔積液。

【操作】

1.細(xì)胞總數(shù)及有核細(xì)胞計(jì)數(shù)

方法基本與腦脊液同，漏出液中有核細(xì)胞數(shù)量常在100

X107L以下；滲出液中有核細(xì)胞數(shù)量較多，常在500X107L

以上。

2.細(xì)胞分類：

穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心，用沉淀物涂片后以瑞氏染

色法進(jìn)行分類。必要時(shí)制備稍厚涂片，在干燥前放置乙醵乙

醇等量混合液中固定30min,用蘇木素-伊紅(HE)或巴氏

法染色查找癌細(xì)胞。

精液檢查

精子活動(dòng)率

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【操作】

取新鮮標(biāo)本混勻后，在溫?zé)岵Ｆ嫌酶弑剁R觀察100個(gè)

精子，計(jì)數(shù)活動(dòng)精子與不活動(dòng)精子的比例，計(jì)算精子活動(dòng)的

百分率。

【附注】

如室溫低于10℃時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本先放入37七溫育5?lOmin

后鏡檢。

精子活力

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【操作】

取上述新鮮濕片標(biāo)本，觀察精子的活動(dòng)力，以。級(jí)至IV

級(jí)報(bào)告。

精子計(jì)數(shù)

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【試劑】

精子稀釋液。

【操作】

1.于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38nli，吸液化精液20ul,

加入稀釋液內(nèi)搖勻。

2.充分搖勻后，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)，靜置1?2min,

待精子下沉后，以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

3.如精子數(shù)少，可計(jì)數(shù)2個(gè)大方格內(nèi)精子數(shù)，數(shù)得總

數(shù)乘10萬(wàn)即為每毫升精液內(nèi)精子數(shù)，再換算成X107L報(bào)告。

4.如精子數(shù)多，可計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)精子數(shù)，加6個(gè)

零，即為每ml精液內(nèi)精子數(shù)再換算成X107L報(bào)告。

【附注】

1.收集精液前應(yīng)避免性生活3~7天，精液宜用清潔干

燥之小瓶收集，避孕套內(nèi)的精液不宜采集。收集精液標(biāo)本后

應(yīng)在一小時(shí)內(nèi)檢查，冬季應(yīng)注意保溫。

2.出現(xiàn)一次異常結(jié)果，應(yīng)隔一周后復(fù)查，反復(fù)查2?3

次方能得出比較正確的結(jié)果。

3.如低倍鏡、高倍鏡檢查均無(wú)精子，應(yīng)將精液離心沉

淀后再涂片檢查，如兩次均無(wú)精子，報(bào)告“無(wú)精子”。

精子形態(tài)觀察

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【試劑】

革蘭或瑞氏染液。

【操作】

革蘭或瑞氏染色后用油鏡觀察，報(bào)告異常精子的百分

比。

前列腺液檢查

【標(biāo)本】

新鮮