高考總復習生物（人教版）課件第十二單元生物技術實踐第39講微生物的培養(yǎng)與應用

生物技術實踐第十二單元第39講微生物的培養(yǎng)與應用1．微生物的分離和培養(yǎng)。2.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。3.某種微生物數(shù)量的測定。4.微生物在其他方面的應用。欄目導航考點一培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術

考點二微生物的篩選和計數(shù)

1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對___________的不同需求，配制出供其___________的營養(yǎng)基質。(2)營養(yǎng)組成：一般都含有__________________和無機鹽。此外，還需要滿足微生物生長對________、氧氣以及_______________的要求。(3)種類：按照物理性質可分為________培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基?？键c一培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術營養(yǎng)物質生長繁殖水、碳源、氮源pH特殊營養(yǎng)物質液體2．無菌技術(1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止____________的方法。(2)關鍵：防止___________的入侵。(3)不同對象的無菌操作方法(連線)雜菌污染外來雜菌3．大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基①操作步驟稱量滅菌倒平板②倒平板的方法及注意事項a．請用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程：__________________。b．甲、乙、丙中的滅菌方法是____________。c．丁中的操作需要等待________________才能進行。丙→乙→甲→丁灼燒滅菌平板冷卻凝固(2)純化大腸桿菌的方法①純化培養(yǎng)原理：想方設法在培養(yǎng)基上得到________________________的肉眼可見的________，即可獲得較純的菌種。②純化大腸桿菌的關鍵步驟：________。③常用的微生物接種方法有兩種a．平板劃線法：是通過____________在瓊脂固體培養(yǎng)基表面___________的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。b．_______________法：是將菌液進行一系列的____________，然后將____________的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。由一個細胞繁殖而來菌落接種接種環(huán)連續(xù)劃線稀釋涂布平板梯度稀釋不同稀釋度(3)菌種的保存方法①對于頻繁使用的菌種，可以采用____________的方法。②對于需要長期保存的菌種，可以采用___________的方法。臨時保藏甘油管藏1．消毒和滅菌的比較項目條件結果常用方法應用范圍消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部的部分對人體有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源滅菌強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬工具高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器的滅菌2.純化微生物的接種方法項目平板劃線法稀釋涂布平板法原理通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基上。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，即菌落將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)操作較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延適用范圍適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌走出微生物培養(yǎng)的4個誤區(qū)(1)平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同①第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。②每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。③劃線結束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中菌落的數(shù)目往往比實際數(shù)目“低”。這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。而顯微計數(shù)法由于不能區(qū)分死菌與活菌，故所得數(shù)值可能比實際值“偏高”。(3)平板劃線法只適用于微生物的提純，不適用于微生物的計數(shù)，并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純。(4)倒平板的溫度一般在50℃左右適宜，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。平板冷卻凝固后需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成培養(yǎng)基污染。1．(2016·全國卷Ⅲ)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用____________對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是____________________________________________________。(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有_________________和_____________________。分離純化時應挑選出_____________的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在－20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的_________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。無菌水泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落鑒別乳酸菌中和產生的乳酸(或酸)

具有透明圈甘油解析：(1)分離純化乳酸菌時，由于泡菜濾液中菌的濃度高，因此需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，其目的是將聚集在一起的乳酸菌分散成單個細胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單菌落。(2)乳酸菌代謝過程中可產生乳酸，若在培養(yǎng)基中加入碳酸鈣，則碳酸鈣既可以中和乳酸，又可以在乳酸菌菌落的周圍出現(xiàn)明顯透明圈．據(jù)此可以用于乳酸菌的鑒別。(3)乳酸菌在－20℃長期保存時，為了避免水結冰產生冰晶損傷細胞，在菌液中常需要加入一定量的甘油。2．(2013·全國卷Ⅱ)臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或_________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋，用________________________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板。劃線稀釋涂布(或涂布)

涂布(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A___________；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B_______________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_____________________________________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________________________。(4)根據(jù)上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素__________。敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌A解析：(1)將細菌接種到固體培養(yǎng)基上的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)由(1)獲取的致病菌單菌落，經過適當稀釋，用涂布法接種至固體培養(yǎng)基表面進一步培養(yǎng)。(3)在檢測致病菌對抗生素的敏感性實驗中，若含A種抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明周圍的致病菌死亡，該致病菌對A種抗生素敏感；若含B種抗生素的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明致病菌對B種抗生素不敏感；若含C種抗生素的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A的弱；若含D種抗生素的濾紙片周圍透明圈也比含A的小，說明A、B、C、D四種抗生素的殺菌效果最顯著的為A。透明圈中出現(xiàn)的菌落為耐藥菌。(4)根據(jù)(3)中分析，為達到抗菌目的最好選用抗生素A。3．環(huán)境有毒物質多聚聯(lián)苯難以降解，科研人員從自然界中篩選獲得了只能降解利用多聚聯(lián)苯的細菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。請回答下列問題：(1)②中培養(yǎng)目的菌株應在_______________(填“選擇培養(yǎng)基”或“鑒別培養(yǎng)基”)中加入______________作為碳源。如果要測定②中活細菌數(shù)量，常采用___________________法。(2)④的作用為____________，微生物在④中不生長，在⑤中生長，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于_________________________________________________________________________；使用稀釋涂布平板法或平板劃線法可以在⑥上獲得________。采用固體平板培養(yǎng)細菌時進行________(填“倒置”或“正放”)培養(yǎng)是為了____________________________________________________。(3)如何比較不同菌株降解多聚聯(lián)苯能力的大??？________________________________________________________________________________________________。選擇培養(yǎng)基多聚聯(lián)苯稀釋涂布平板對照④的培養(yǎng)基沒有加入多聚聯(lián)苯作為碳源，⑤培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為碳源單菌落倒置防止皿蓋上形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基用多聚聯(lián)苯濃度相同的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)濃度相同的不同菌株，一定時間后，測定培養(yǎng)液中多聚聯(lián)苯的含量解析：(1)為篩選出只能利用多聚聯(lián)苯的細菌菌落，應在②(選擇培養(yǎng)基)中加入多聚聯(lián)苯作為碳源。常采用稀釋涂布平板法進行細菌的計數(shù)。(2)微生物在④中不生長，在⑤中生長，說明④的作用為對照，④的培養(yǎng)基沒有加入多聚聯(lián)苯作為碳源，⑤培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為碳源。用稀釋涂布平板法或平板劃線法可以篩選出單菌落。細菌培養(yǎng)時平板倒置的原因是防止皿蓋上形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。(3)設計檢測不同菌株降解多聚聯(lián)苯能力大小的實驗時，要特別注意單一變量原則和對照原則，即應該用多聚聯(lián)苯濃度相同的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)濃度相同的不同菌株，一定時間后，測定培養(yǎng)液中多聚聯(lián)苯的含量。1．土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)考點二微生物的篩選和計數(shù)項目詳細內容實驗原理(1)能合成________的細菌才能分解尿素(2)配制以________為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細菌就是能分解尿素的細菌數(shù)量統(tǒng)計(1)______________法(顯微鏡下用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板)(2)間接計數(shù)法：__________________實驗流程土壤取樣→配制土壤溶液和制備培養(yǎng)基→___________→涂布平板與培養(yǎng)→菌落________脲酶尿素直接計數(shù)稀釋涂布平板法系列稀釋計數(shù)復合酶C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖(2)纖維素分解菌的篩選①原理纖維素分解菌↓紅色復合物透明圈②篩選方法：__________染色法，即通過是否產生__________來篩選纖維素分解菌。③培養(yǎng)基：以__________為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。剛果紅透明圈纖維素④實驗流程土壤取樣：富含________的環(huán)境

↓選擇培養(yǎng)：用________________培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度

↓____________：制備系列稀釋液

↓涂布平板：將樣品涂布到___________________的培養(yǎng)基上

↓挑選產生________的菌落纖維素選擇培養(yǎng)基梯度稀釋鑒別纖維素分解菌透明圈(3)分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實驗中先用________培養(yǎng)基，再用________培養(yǎng)基。①選擇培養(yǎng)基為________培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長。②鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為________培養(yǎng)基，細菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法應用的就是鑒別培養(yǎng)基。選擇鑒別液體固體1．篩選分解尿素的細菌與分解纖維素的微生物的比較2．選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些化學物質依據(jù)某些微生物對某些物質或環(huán)境條件的嗜好、抗性而設計從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品依據(jù)微生物產生的某種代謝產物與培養(yǎng)基中的特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計鑒別不同種類的微生物伊紅－美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌3.統(tǒng)計菌體數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。②方法：用計數(shù)板計數(shù)。③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。③操作：設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。1．(2017·全國卷Ⅰ)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：(1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生__________。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源，原因是___________________________________________________________。但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是____________________________________________________________(答出兩點即可)。脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料(2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇_________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________________________________________________________________________________________。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_________________________________________________________________(答出兩點即可)。尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定解析：(1)能分解尿素的細菌體內應含有脲酶；能分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物，不能利用CO2來合成有機物，可用葡萄糖等有機物作為碳源。進入細菌體內的葡萄糖既能為細胞生命活動提供能量，又可為其他有機物的合成提供原料。(2)篩選可分解尿素的細菌，應選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，而能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，其他兩組不能起到篩選作用。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，這兩種物質既可為細菌生長提供無機營養(yǎng)，又可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH相對穩(wěn)定。2．(2014·全國卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_______________分解成_______________。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________________________。纖維二糖葡萄糖紅透明圈(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲＋＋＋＋－＋＋培養(yǎng)基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________________________________________________________________________________________。不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR—纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌解析：(1)纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復合物，但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。用含有剛果紅的纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，由于纖維素被分解，紅色復合物無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲未使用瓊脂，為液體培養(yǎng)基，不能用于分離單菌落。含有纖維素和剛果紅(CR)的培養(yǎng)基可分離和鑒別纖維素分解菌。3．(2018·河南六市聯(lián)考)微生物強化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術。以下是人們篩選、純化和擴大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請回答下列問題：(15分)(1)土壤是微生物的大本營，該類微生物應取自___________________________的土壤。(2)為篩選和純化該類微生物，從功能上分，應選用__________培養(yǎng)基。常用的接種方法是_______________和__________________________。長期被石油污染(含石油多的)選擇平板劃線法稀釋涂布平板法(3)接種后，應密封培養(yǎng)的原因是___________________________，培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時選取________________________就可獲得高效菌株。(4)擴大培養(yǎng)過程中需要對微生物進行計數(shù)。取0.2mL樣品，用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計三個平板，菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為_________個/mL。該統(tǒng)計結果_________(填“低于”“高于”)實際值。該類微生物是厭氧型的降油圈大的菌落1000

低于解析：(1)在長期被石油污染的土壤中生存下來的微生物，能降解石油，所以取樣時，應從含石油多的土壤中采集。(2)從功能上分，應選用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選和純化該類微生物；常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)該類微生物是厭氧微生物，接種后應密封培養(yǎng)；培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上可形成降油圈，降油圈越大．說明該處的微生物降解石油的能力越強，所以應選擇降油圈大的菌落進行培養(yǎng)以獲得高效菌株。(4)計算微生物的數(shù)量應取三個平板的平均值．即(200＋180＋220)÷0.2＝1000(個/mL)，該結果會低于實際值，因為當兩個或多個菌落連在一起時，平板上觀察到的只是單個菌落數(shù)。[網絡構建·答題必備]

1.無菌操作技術包括消毒和滅菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化學藥劑消毒和紫外線消毒等；滅菌包括灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。2．培養(yǎng)基的制備包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板等步驟，倒置平板的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水滴滴入培養(yǎng)基造成污染。3．大腸桿菌的純化包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法要求多次劃線，稀釋涂布平板法要求菌液要充分地稀釋。4．微生物的計數(shù)要求制作多個平板，且每個平板上能長出30～300個菌落。5．尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運用了選擇培養(yǎng)基，前者所用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。

1．(2016·全國卷Ⅰ，39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作無菌平板；③設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作；④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。[探究高考·模擬演練]回答下列問題：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于__________________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是___________。(2)步驟③中，實驗組的操作是__________________________________________________________________________。(3)若在某次調查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結果說明在此次調查中出現(xiàn)了_________________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法______________(填“正確”或“不正確”)。牛肉膏、蛋白胨瓊脂將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間污染不正確解析：(1)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的微生物提供氮源；制備固體培養(yǎng)基需加入瓊脂。(2)該實驗的目的是了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況，所以需在教室不同高度的位置分別用平板收集微生物即開蓋暴露一段時間。(3)該實驗中空白對照組不應出現(xiàn)菌落，若空白對照組出現(xiàn)了菌落，則說明此次調查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，實驗組的污染情況不能確定，故不能用實驗組與空白對照組菌落數(shù)的差值作為實驗結果，而應重新進行實驗。2．(2014·全國卷Ⅱ)為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是______________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_______________。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過___________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是__________________________________________。檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107

灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)示意圖A和B中，___________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_____________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高______________的利用率。B

溶解氧營養(yǎng)物質解析：(1)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，可依據(jù)是否產生菌落確定培養(yǎng)基的滅菌效果是否理想。由樣品中菌株數(shù)計算公式：(C÷V)×M知：1mL水樣中菌株數(shù)為(38÷0.1)