體外培養(yǎng)細(xì)胞的條件

第第頁體外培養(yǎng)細(xì)胞的條件（1）營養(yǎng)需求·氨基酸————12種必需氨基酸（纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、組氨酸、酪氨酸、精氨酸、半胱氨酸）；10種非必需氨基酸；另外還需要谷氨酰胺，它在細(xì)胞代謝過程中有緊要作用，所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶合成的來源，同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)?！ぬ妓衔铩穷悺咸烟?；半乳糖；細(xì)胞對葡萄糖的汲取本領(lǐng)最高，半乳糖低?！o機(jī)鹽————鈉、鉀、鎂、磷、鈣等；·維生素————生物素、葉酸、核黃素、維生素C、維生素B12、吡哆醇等；·蛋白質(zhì)與肽————白蛋白、抑肽酶、胎球蛋白、纖粘連蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、生長因子；·脂肪酸和脂類物質(zhì)————亞油酸、油酸、膽固醇等；·微量元素————鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。（2）溫度常用的溫度是37°，但需要注意不同生物來源的組織細(xì)胞，最適合的培養(yǎng)溫度是不同的，且細(xì)胞耐低溫，不耐高溫。在生理溫度范圍內(nèi)，溫度與細(xì)胞生長率呈正相關(guān)。（3）滲透壓滲透壓的大小重要由培養(yǎng)基中各種鹽成分的濃度決議。細(xì)胞必需生活在與自身原生質(zhì)體等滲的環(huán)境中，若生存環(huán)境滲透壓高于自身，培養(yǎng)的細(xì)胞則有可能會(huì)面對脫水而亡，若生存環(huán)境滲透壓低于自身，培養(yǎng)的細(xì)胞則有可能面對吸水漲破而亡，但大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對滲透壓有肯定耐受性。人血漿滲透壓290mOsm/kg,可視為培養(yǎng)人體細(xì)胞的理想滲透壓。鼠細(xì)胞滲透壓在320mOsm/kg左右。對于培養(yǎng)大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，掌控培養(yǎng)基的滲透壓在260—320mOsm/kg的范圍為宜。（4）氣相體外細(xì)胞培養(yǎng)的氣相環(huán)境常由5%CO2與95%空氣構(gòu)成。其中O2參加細(xì)胞的能量代謝過程。CO2用于維持培養(yǎng)液的酸堿度。（5）pH適合大多數(shù)細(xì)胞生長的培養(yǎng)基pH在7.0—7.4之間，pH7.4的環(huán)境適合大多數(shù)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑，用以連續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低pH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的pH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色，pH值7.2—7.4時(shí)為紅色，適合細(xì)胞培養(yǎng)。（6）無毒無污染無毒和無菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的前提條件。在活體的細(xì)胞的解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)，可防范微生物或其他有害物質(zhì)的入侵，但細(xì)胞在體外培養(yǎng)中，缺乏機(jī)體免疫系統(tǒng)的保護(hù)從而失去對微生物的防范本領(lǐng)和對有害物質(zhì)的解毒本領(lǐng)。因此保證細(xì)胞的生長環(huán)境的無毒無污染