2025屆黑龍江省雙鴨山市第三十一中學(xué)高三生物第一學(xué)期期末統(tǒng)考模擬試題含解析

2025屆黑龍江省雙鴨山市第三十一中學(xué)高三生物第一學(xué)期期末統(tǒng)考模擬試題注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．圖示是針對植物幼苗所做的實驗，相關(guān)敘述正確的是（）A．①②說明苗尖端產(chǎn)生生長素促進生長B．③中生長素以主動轉(zhuǎn)運的方式進入明膠C．①②③④展示的是鮑森?詹森的實驗D．②中發(fā)生了生長素的橫向運輸和極性運輸2．下列關(guān)于實驗材料及用法的敘述，正確的是（）A．提取菠菜葉光合色素時，需加入少許二氧化硅、碳酸鈣和70%乙醇B．觀察花生子葉細(xì)胞的脂肪顆粒時，需用95%乙醇洗去多余的蘇丹Ⅲ染液C．涂布法分離細(xì)菌時，要將保存在50%乙醇中的玻璃刮刀放在酒精燈火焰上灼燒D．進行組織培養(yǎng)時，自然生長的莖可先后放入70%乙醇、5%次氯酸鈉和無菌水中消毒3．下列與生物變異和進化有關(guān)的敘述，正確的是（）A．同源染色體上非姐妹染色單體交叉互換會導(dǎo)致染色單體上的基因重組B．染色體變異只發(fā)生在減數(shù)分裂過程中C．突變?yōu)樯镞M化提供原材料，是生物變異的根本來源D．隔離是形成新物種的必要條件，也是生物進化的必要條件4．由于人為或自然因素使東北虎種群的自然棲息地被分割成很多片段，導(dǎo)致其種群密度下降甚至走向滅絕。棲息地片段化將會A．有利于東北虎個體的遷入、遷出及個體間的交流B．使東北虎的捕食更方便，利于其生存與繁衍C．使東北虎種群活動空間變小，種內(nèi)斗爭加劇D．使東北虎繁殖加快，進而增加種群的遺傳多樣性5．瘦肉精是一種可以用來提高瘦肉率的藥物，其作用機理是抑制脂肪合成、促進脂肪分解和轉(zhuǎn)化、促進蛋白質(zhì)合成、實現(xiàn)動物營養(yǎng)再分配。據(jù)此推測，瘦肉精對細(xì)胞器的作用可能是（）A．使高爾基體的活動加強，使溶酶體的活動減弱B．使高爾基體的活動減弱，使溶酶體的活動加強C．使核糖體的活動加強，使某些內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的活動減弱D．使核糖體的活動減弱，使某些內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的活動加強6．下列關(guān)于生物膜模型建立的過程描述，錯誤的是A．對細(xì)胞膜的研究是從結(jié)構(gòu)特點---膜的流動性開始的B．生物膜模型的建立和完善應(yīng)用了提出假說的科學(xué)方法C．小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞融合實驗表明細(xì)胞膜具有流動性D．桑格和尼克森提出的流動鑲嵌模型為大多數(shù)人所接受二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某二倍體植物莖的高矮有高莖、中等高莖、矮莖三種情況，由基因A和a控制，a基因能表達(dá)某種物質(zhì)抑制赤霉素合成，基因型中有一個a表現(xiàn)為中等高莖，有兩個及以上a表現(xiàn)為矮莖。該植物花色有白色、紅色、紫色三種，其花色合成途徑如下圖，其中B基因的存在能夠抑制b基因的表達(dá)：（1）選取某純合白花和純合紫花植株雜交，F(xiàn)1花色表現(xiàn)為______________________________，F(xiàn)1自交，若F2代表現(xiàn)型有兩種，則親代白花基因型為___________________；若F2代表現(xiàn)型有三種，其表現(xiàn)型及比值為_________________。（2）某純合紫花高莖植株與純合紅花矮莖植株雜交，F(xiàn)1中出現(xiàn)了矮莖植株，究其原因可能有以下三種情況：①該植株A基因發(fā)生了基因突變②外界環(huán)境影響導(dǎo)致性狀發(fā)生了改變③該植株可能是Aaa的三體，為了確定該植株形成的原因，使該植株與親代純合紅花矮莖植株雜交：若F2代__________________________，則該植株可能是基因突變引起；若F2代___________________，則該植株可能是外界環(huán)境影響引起；若F2代____________________，則該植株可能是Aaa的三體。8．（10分）下圖1表示研究人員為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株進行的相關(guān)實驗流程，其中透明圈是微生物在固體培養(yǎng)基上消耗特定營養(yǎng)物質(zhì)形成的。圖2、圖3是研究纖維素酶的最適溫度和熱穩(wěn)定性的結(jié)果。請回答下列問題：（1）本實驗中，選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源，這是因為______。（2）篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為______，并在配制培養(yǎng)基時加入瓊脂作為______。篩選時應(yīng)選擇D/d較大的菌株，因為這一指標(biāo)值越大說明_________越強。（3）研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35～65℃的不同溫度條件下保溫2h，再取上述溫度處理的和未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液，在______℃條件下測定纖維素酶的催化速率，計算______。（4）生產(chǎn)中使用該纖維素酶時，最好將溫度控制在40℃左右，原因是______。9．（10分）含有限制酶的細(xì)胞中通常還具有相應(yīng)的甲基化酶，這兩種酶對DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對DNA序列進行修飾，使限制酶不能對這一序列進行識別和切割?；卮鹣铝袉栴}：（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是從_____________生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中需要使用DNA連接酶的是_____________（填“基因組文庫”、“cDNA文庫”或“基因組文庫和cDNA文庫”）。（2）為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因，可用的技術(shù)是_____________。目的基因獲取之后，需要進行_____________，此步驟是基因工程的核心。（3）用酵母菌合成的人胰島素和利用細(xì)菌合成的人胰島素在空間結(jié)構(gòu)上存在一定差異，其原因是_____________。（4）含有某種限制酶的細(xì)胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破壞細(xì)胞自身的DNA，其原因可能有①_____________；②_____________。10．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。11．（15分）水稻葉片寬窄受細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞寬度的影響，為探究水稻窄葉突變體的遺傳機理，科研人員進行了實驗。（1）科研人員利用化學(xué)誘變劑處理野生型寬葉水稻，可誘發(fā)野生型水稻的DNA分子中發(fā)生堿基對的__________________________，導(dǎo)致基因突變，獲得水稻窄葉突變體。（2）測定窄葉突變體和野生型寬葉水稻的葉片細(xì)胞數(shù)目和單個細(xì)胞寬度，結(jié)果如圖所示。該結(jié)果說明窄葉是由于__________________，而不是____________________所致。（3）將窄葉突變體與野生型水稻雜交，F(xiàn)1均為野生型，F(xiàn)1自交，測定F2水稻的_______________，統(tǒng)計得到野生型122株，窄葉突變體39株。據(jù)此推測該性狀受___________對等位基因的控制，且窄葉性狀是____________性狀。（4）研究發(fā)現(xiàn)，窄葉突變基因位于2號染色體上?？蒲腥藛T推測2號染色體上已知的三個突變基因可能與窄葉性狀出現(xiàn)有關(guān)。這三個突變基因中堿基發(fā)生的變化如下表所示。突變基因ⅠⅡⅢ堿基變化C→CGC→TCTT→C蛋白質(zhì)與野生型分子結(jié)構(gòu)無差異與野生型有一個氨基酸不同長度比野生型明顯變短由上表推測，基因Ⅰ的突變沒有發(fā)生在____________________序列，該基因突變________________（填“會”或“不會”）導(dǎo)致窄葉性狀。基因Ⅲ突變使蛋白質(zhì)長度明顯變短，這是由于基因Ⅲ的突變導(dǎo)致________________________。（5）隨機選擇若干株F2窄葉突變體進行測序，發(fā)現(xiàn)基因Ⅱ的36次測序結(jié)果中該位點的堿基35次為T，基因Ⅲ的21次測序結(jié)果中該位點均為堿基TT缺失。綜合上述實驗結(jié)果判斷，窄葉突變體是由于基因____________________發(fā)生了突變。（6）F2群體野生型122株，窄葉突變體39株，仍符合3:1的性狀分離比，其原因可能是________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

識圖分析可知，①②兩組實驗的自變量是錫箔罩住的植物幼苗的部位不同，因變量是幼苗是否出現(xiàn)向光性彎曲生長，①組錫箔罩住幼苗的尖端，單側(cè)光照射后幼苗出現(xiàn)直立生長，②組錫箔罩住幼苗尖端一下的部位，單側(cè)光照射后出現(xiàn)向光性彎曲生長，說明尖端是感光的部位。③④組實驗的自變量是插入尖端以下的材料不同，因變量是幼苗是否出現(xiàn)向光性彎曲生長，③組實驗尖端以下插入明膠塊，單側(cè)光照射下引起尖端生長素發(fā)生橫向運輸，背光側(cè)多于向光側(cè)，然后生長素透過明膠塊傳遞到尖端以下的部分，背光側(cè)多于向光側(cè)，引起彎曲生長，④組實驗尖端以下插入云母片，云母片阻斷生長素的運輸，因此尖端產(chǎn)生的生長素不能運輸?shù)郊舛艘韵?，幼苗不生長?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析可知，①②說明苗尖端是感光的部位，A錯誤；B、③中生長素以擴散的方式進入明膠，B錯誤；C、鮑森?詹森的實驗只是引入了瓊脂片，證明了尖端產(chǎn)生的影響可以通過瓊脂片，沒有涉及①②兩組實驗，也沒有引入云母片，C錯誤；D、在實驗②中的尖端發(fā)生了生長素的橫向運輸，在尖端以下發(fā)生了生長素的極性運輸，D正確。故選D。2、D【解析】

酒精是有機物，是一種很好的溶劑，能與水與任意比例互溶，能溶解許多物質(zhì)，所以常用乙醇來溶解植物色素或其它的有機物。提取綠葉中色素用95%酒精溶解色素，鑒定花生子葉切片中脂肪時用50%酒精洗去浮色，使用目的不同?！驹斀狻緼、提取菠菜葉光合色素時，需加入少許二氧化硅（研磨充分）、碳酸鈣（保護葉綠素）和95%乙醇（溶解、提取色素），A錯誤；B、觀察花生子葉細(xì)胞的脂肪顆粒時，需用50%乙醇洗去多余的蘇丹Ⅲ染液，B錯誤；C、涂布法分離細(xì)菌時，要將保存在75%乙醇中的玻璃刮刀放在酒精燈火焰上灼燒，C錯誤；D、進行組織培養(yǎng)時，自然生長的莖可先后放入70%乙醇浸泡、再放入5%次氯酸鈉中浸泡和無菌水中清洗（消毒），D正確。故選D。3、A【解析】

現(xiàn)代生物進化理論：種群是生物進化的基本單位，生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組，自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成。在這個過程中，突變和基因重組產(chǎn)生生物進化的原材料，自然選擇使種群的基因頻率定向改變并決定生物進化的方向，隔離是新物種形成的必要條件。【詳解】A、同源染色體上非姐妹染色單體交叉互換會導(dǎo)致基因重組，A正確；B、染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異和染色體數(shù)目變異，有絲分裂和減數(shù)分裂過程都能發(fā)生染色體變異，B錯誤；C、基因突變和染色體變異統(tǒng)稱為突變，生物變異的根本來源是基因突變，C錯誤；D、隔離是新物種形成的必要條件，不是生物進化的必要條件，D錯誤。故選A?！军c睛】本題考查變異的類型和現(xiàn)代生物進化理論的主要內(nèi)容，要求考生識記現(xiàn)代生物進化理論的主要內(nèi)容，區(qū)分三種可遺傳的變異。4、C【解析】

棲息地的碎片化造成小種群，會減少個體間交配繁殖的機會，導(dǎo)致物種有滅絕的可能，生物多樣性減少?！驹斀狻緼.棲息地片段化會阻礙動物個體的遷入和遷出，阻礙基因交流，A錯誤；B.棲息地片段化會造成小種群，減小個體間交配繁殖的機會，B錯誤；C.棲息地片段化會使動物種群活動空間變小，種內(nèi)斗爭加劇，C正確；D.小種群內(nèi)部近親繁殖會使種群的遺傳多樣性下降，D錯誤。5、C【解析】

1.溶酶體是“消化車間”，內(nèi)部含有多種水解酶，能分解衰老、損傷的細(xì)胞器，吞噬并殺死侵入細(xì)胞的病毒或病菌。被溶酶體分解后的產(chǎn)物，如果是對細(xì)胞有用的物質(zhì)，細(xì)胞可以再利用，廢物則被排出細(xì)胞外。溶酶體中的水解酶是蛋白質(zhì)，在核糖體上合成。1．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成和加工有關(guān)，也是脂質(zhì)合成的“車間”；2．核糖體是細(xì)胞內(nèi)合成蛋白質(zhì)的場所，被稱為“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”；3．高爾基體本身不能合成蛋白質(zhì)，但可以對蛋白質(zhì)進行加工分類和包裝，植物細(xì)胞分裂過程中，高爾基體與細(xì)胞壁的形成有關(guān)；【詳解】A、由分析可知，高爾基體、溶酶體與瘦肉精的作用機理無關(guān)，A錯誤；B、同理，高爾基體、溶酶體與瘦肉精的作用機理無關(guān)，B錯誤；C、結(jié)合瘦肉精的作用機理可知，核糖體是蛋白質(zhì)的合成場所，因此核糖體的活動加強；脂肪是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的，而瘦肉精能夠抑制脂肪合成，因此某些內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的活動減弱，C正確；D、同理分析可知，瘦肉精會使核糖體的活動加強，使某些內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的活動減弱，D錯誤。故選C?！军c睛】本題結(jié)合違禁動物藥品“瘦肉精”的作用機理，考查了細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能等相關(guān)知識，熟知相關(guān)細(xì)胞器的分布和功能并能再結(jié)合瘦肉精的作用機理來分析問題是解題的關(guān)鍵！6、A【解析】本題考查生物膜結(jié)構(gòu)的探索歷程，要求考生掌握生物膜結(jié)構(gòu)的探索歷程中不同科學(xué)家的研究貢獻，學(xué)習(xí)科學(xué)家相應(yīng)的研究方法和嚴(yán)謹(jǐn)態(tài)度。對細(xì)胞膜的研究是從細(xì)胞膜對不同物質(zhì)的通透性不一樣開始的，最后才認(rèn)識到細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點---具有一定的流動性，A錯誤；生物膜模型的建立和完善應(yīng)用了提出假說的科學(xué)方法，B正確；小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞融合實驗表明細(xì)胞膜具有流動性，且流動速度受溫度影響，C正確；桑格和尼克森提出的流動鑲嵌模型為大多數(shù)人所接受，D正確。二、綜合題：本大題共4小題7、白花BBDD白花：紅花：紫花=12∶1∶3全為矮莖中等高莖∶矮莖=1∶1中等高莖∶矮莖=1∶5【解析】

孟德爾在做兩對雜交實驗的時候，發(fā)現(xiàn)F2的分離比為9∶3∶3∶1。提出性狀是由基因控制的，并且兩對等位基因獨立遺傳。F1在形成配子時，等位基因分離，非等位基因自由組合，產(chǎn)生四種不同的配子，進而雌雄配子結(jié)合得到F2分離比9∶3∶3∶1。本題花色遺傳是自由組合定律的變式應(yīng)用，即兩對等位基因決定同一種性狀，如白花（B_D_、B_dd）、紫花（bbD_）、紅花（1bbdd）。生物的表型通常是由基因型決定的，但是也受環(huán)境的影響。鑒定植株的基因型，通常采用測交法，即與隱性植株進行雜交，測交可以檢測待測個體產(chǎn)生配子的類型及比例。若矮莖植株為aa，則與矮莖植株測交，表現(xiàn)型為矮莖；若矮莖植株為Aa，則說明其受環(huán)境因素影響，測交結(jié)果為中等高莖∶矮莖=1∶1；若矮莖植株為Aaa，Aaa產(chǎn)生的配子及比例為A∶aa∶Aa∶a=1∶1∶2∶2，則測交后代表現(xiàn)型及比例為中等高莖（Aa）∶矮莖（aa或aaa或Aaa）=1∶5?！驹斀狻浚?）純合白花的基因型為BBDD或BBdd，純合紫花的基因型為bbDD，讓白花和紫花植株雜交，F(xiàn)1基因型為BbDD或BbDd，花色表現(xiàn)為白花。F1自交，若F1的基因型為BbDD,則后代表現(xiàn)型為白花（B_D_）和紫花（bbDD），共兩種表現(xiàn)型；若F1的基因型為BbDd,則后代表現(xiàn)型為12白花（9B_D_、3B_dd）、3紫花（3bbD_）、1紅花（1bbdd），共三種表現(xiàn)型。（2）某純合紫花高莖植株（AAbbDD）與純合紅花矮莖植（aabbdd）株雜交，雜交后代為AabbDd（中等高莖紫花），但F1中出現(xiàn)了矮莖植株，說明基因組成中含有aa，使該植株與親代純合紅花矮莖植株（aabbdd）雜交：若F2代全為矮莖，說明原植株不含A基因，則該植株可能是基因突變引起；若F2代中等高莖∶矮莖=1∶1，說明原F1植株含有A基因（Aa），則該植株可能是外界環(huán)境影響引起；若F2代中等高莖（Aa）∶矮莖（aa或aaa或Aaa）=1∶5，則該植株可能是Aaa的三體，因為Aaa產(chǎn)生的配子及比例為A∶aa∶Aa∶a=1∶1∶2∶2?！军c睛】熟練運用自由組合定律是解答本題的關(guān)鍵，另外，解答本類題目時，審題是關(guān)鍵，題干中會提供很多可用的信息，如矮莖的三種原因分析也可以為解題提供思路。8、蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會聚集較多的纖維素分解菌唯一碳源凝固劑單體菌體產(chǎn)生的纖維素酶活性50酶活性殘留率該溫度下，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時間持久，且酶活性相對較高【解析】

分解纖維素的微生物的分離：

（1）實驗原理：

①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

（2）實驗過程：

土壤取樣：采集土樣時，應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境；

梯度稀釋：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度；

涂布平板：將樣品涂布于含剛果紅的鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上；

挑選產(chǎn)生中心透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍出現(xiàn)透明圈，從產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落上挑取部分細(xì)菌，并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在30～37℃條件下培養(yǎng)，可獲得較純的菌種?！驹斀狻浚?）由于蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會聚集較多的纖維素分解菌，故選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源。

（2）篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為唯一碳源；并在配制培養(yǎng)基時加入瓊脂作為凝固劑；應(yīng)篩選時應(yīng)選擇透明圈較大的菌株，因為這一指標(biāo)值越大說明單個菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強。

（3）研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時，首先將纖維素酶液置于35～65℃的不同溫度條件下保溫2h，再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液，并在50℃下測定纖維素酶的催化速率；計算酶活性殘留率。

（4）由圖可知：由于40℃時，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時間持久，且酶活性相對較高，故生產(chǎn)中使用該纖維素酶時，最好將溫度控制在40℃左右。【點睛】本題結(jié)合曲線圖主要考查微生物分離及培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的理解，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。9、原核基因組文庫和cDNA文庫PCR構(gòu)建基因表達(dá)載體酵母菌是真核生物，其細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對人胰島素進行加工，而細(xì)菌則不能細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA分子進行修飾【解析】

1、關(guān)于限制酶，考生可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。2、PCR技術(shù)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！驹斀狻浚?）目前，基因工程中使用的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建基因組文庫和cDNA文庫的過程中都需要使用DNA連接酶。（2）PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，利用該技術(shù)可以在短時間內(nèi)大量獲得目的基因?；蚬こ痰暮诵臉?gòu)建基因表達(dá)載體。（3）由于酵母菌是真核生物，其細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對核糖體上合成的人胰島素進行加工，而細(xì)菌屬于原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，因此不能對人胰島素進行修飾和加工。（4）含有某種限制酶的細(xì)胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破壞細(xì)胞自身的DNA，其原因可能有：①細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列；②甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA分子進行了修飾?！军c睛】本題考查基因工程的知識點，要求學(xué)生掌握基因工程的操作步驟，特別是掌握PCR擴增技術(shù)的過程，理解限制酶的來源和功能，這是該題考查的重點。另外理解原核生物與真核生物結(jié)構(gòu)的區(qū)別，這是解決第（3）問的關(guān)鍵。10、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠?！军c睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。11、增添、缺失、替換細(xì)胞數(shù)目減少而不是單個細(xì)胞寬度變窄（單株）葉片寬窄