山東省德州市平原中英文實驗中學2025屆生物高三上期末聯(lián)考模擬試題含解析_第1頁
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文檔簡介

山東省德州市平原中英文實驗中學2025屆生物高三上期末聯(lián)考模擬試題注意事項1.考生要認真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.真核生物基因編碼區(qū)中的外顯子(編碼蛋白質的核苷酸序列)被內含子(不編碼蛋白質的核苷酸序列)間隔開,原核生物基因的編碼區(qū)無外顯子和內含子之分?;虮磉_過程中外顯子和內含子都能發(fā)生轉錄,模板鏈轉錄形成一條前體mRNA鏈,前體mRNA鏈中由內含子轉錄的片段被剪切后,再重新將其余片段拼接起來成為成熟的mRNA。下列敘述正確的是()A.mRNA可與多個核糖體結合同時合成多條肽鏈B.原核生物基因編碼區(qū)轉錄不需RNA聚合酶催化C.前體mRNA鏈經(jīng)蛋白酶剪切后成為成熟的mRNAD.外顯子中發(fā)生堿基對替換必然會導致性狀的改變2.下列關于細胞生命歷程的敘述,錯誤的是()A.受精卵、早期胚胎細胞和動物細胞的細胞核等具有全能性B.主流細胞衰老理論認為細胞衰老主要是因為生命活動產(chǎn)生自由基攻擊生物膜、DNA和蛋白質等,以及染色體兩端的端粒隨細胞分裂不斷縮短,使DNA序列受損而導致細胞衰老C.不當飲食和吸煙是致癌的主要因素,癌癥的發(fā)生還與心理狀態(tài)有關,維生素A、維生素C、胡蘿卜素和纖維素等具有抑制癌變的作用D.被病原體感染細胞的清除和細胞代謝受損或中斷引起的細胞死亡屬于細胞凋亡3.研究人員從真菌中提取到甲、乙、丙三種生長素類似物,分別測試在不同濃度條件下三種類似物對萵苣幼根生長的影響,結果如圖所示。下列敘述錯誤的是()A.在0~20ppm范圍內,甲對萵苣幼根的促進作用大于丙B.乙的濃度大于5ppm后,對萵苣幼根生長起抑制作用C.據(jù)圖推測,用50ppm的甲處理萵苣幼芽不一定抑制其生長D.甲、乙、丙對萵苣幼根生長的影響均具有兩重性4.2019年8月,英國科學家發(fā)現(xiàn)了草甘膦(一種除草劑)藥效具有晝夜節(jié)律性。研究人員找到了擬南芥中對草甘膦施用發(fā)生應答反應的基因,其中72%的草甘膦應答基因在清晨的表達達到峰值。研究者進一步研究發(fā)現(xiàn),在清晨噴施草甘膦對擬南芥的致死效果最好。下列有關敘述錯誤的是()A.該實驗表明清晨噴施草甘膦對清除田間雜草效果最好B.擬南芥植物體內的基因表達具有一定的晝夜節(jié)律性C.草甘膦通過干擾擬南芥基因的正常表達達到除草目的D.擬南芥生長具有晝夜節(jié)律性是長期自然選擇的結果5.為研究低溫和細胞分裂素對茄子光合作用有關指標的影響,實驗人員設計了如下實驗方案(實驗過程中光照和二氧化碳濃度適宜),結果如下表。下列有關分析中錯誤的是組別處理甲常溫+噴施蒸餾水18.699.190.153乙常溫+細胞分裂素溶液20.1712.580.168丙低溫+噴施蒸餾水10.742.750.053丁低溫+細胞分裂素溶液12.014.030.064A.低溫會導致葉綠素含量和氣孔導度降低B.細胞分裂素處理會導致葉綠素含量和氣孔導度增加C.細胞分裂素可緩解低溫對光合作用速率的抑制D.常溫下噴灑高濃度的細胞分裂素能進一步提高茄子的光合作用速率6.下列關于水稻植株相關激素的敘述正確的是()A.生長期水稻植株中細胞分裂素的合成只受相應基因的調控B.水稻植株的同一細胞膜上可能含有多種植物激素的受體C.水稻植株產(chǎn)生的乙烯對其它植物的果實沒有催熟作用D.水稻植株患惡苗病的原因是其體內產(chǎn)生了過多的赤霉素二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)人體血清白蛋白在肝臟中合成,是血漿中含量最豐富的蛋白質,在臨床上有著廣泛的用途。如圖為利用乳腺生物反應器和工程菌生產(chǎn)人血清白蛋白的操作流程。請回答下列問題:(1)①過程中,將人血清白蛋白基因導人綿羊受精卵和大腸桿菌所用的載體____________________(填“完全相同”“不完全相同”或“完全不相同”)。除血清白蛋白基因外,圖中的基因表達載體還必須含有__________________________________(至少答出3個結構名稱)。(2)進行④操作之前,需要對早期胚胎進行性別鑒定,常選取取囊胚期的__________細胞做DNA分析。對挑選出的雌性胚胎還可以采用__________技術提高胚胎利用率。上圖中涉及的胚胎工程技術有_______(3)利用①⑥過程生產(chǎn)人血清白蛋白時,常用反轉錄法獲取目的基因,請寫出用此法獲取人血清白蛋白基因的操作流程:_________________________________。由此獲得的蛋白B與蛋白A活性是否相同?請作出判斷并說明理由:__________,_____________________。8.(10分)番茄果實的成熟是一個復雜的過程,由復雜的基因網(wǎng)絡調控。請回答下列問題:(1)果實成熟的性狀是由成熟基因在_________酶的作用下,轉錄合成mRNA,進而以___________為原料,翻譯后加工成相應的蛋白質。(2)研究發(fā)現(xiàn),C基因和N基因在果實成熟過程中起著重要的調控作用,現(xiàn)選取長勢一致的野生型植株(CCnn)、C基因純合突變株和N基因純合突變株若干,將后兩者突變株進行雜交:F1代表現(xiàn)型為__________________,F(xiàn)1進行自交,子代表現(xiàn)型為成熟:不成熟=3:13,則C基因和N基因的位置關系為________________________,若檢測F1的基因組成,需對F1進行___________,后代的表現(xiàn)型及比例為_________________________。(3)為了探究C基因和N基因的相關調控機制,科研人員做了如下研究。①用CRISPR/Cas9基因編輯工具,分別處理野生型,使C基因或N基因中堿基對改變,導致_______________,從而獲得果實均成熟延遲的C-CRISPR/Cas9突變株和N-CRISPR/Cas9突變株。②為進一步分析C-CRISPR/Cas9和N-CRISPR/Cas9突變株果實成熟延遲的原因,科研人員對不同品系植株中不同基因的表達情況進行分析,根據(jù)表達的強弱程度繪制出熱點圖(如圖),發(fā)現(xiàn)_________________等關鍵成熟基因在C突變株和N突變株中未表達,但在C-CRISPR/Cas9和N-CRISPR/Cas9中明顯表達,從而促進了果實的成熟。同時,可知其他成熟基因在野生型中也有明顯表達,從而表明調控果實成熟是由___________共同作用的結果。9.(10分)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值,只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。(1)為獲取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_____________合成總cDNA,然后以cDNA為模板,采用PCR技術擴增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向,請用箭頭在方框內標出另一條引物的位置及擴增方向。(2)啟動子通常具有物種及組織特異性,構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體,需要選擇的啟動子是_____________(填寫字母,單選)。A.人血細胞啟動子B.水稻胚乳細胞啟動子C.大腸桿菌啟動子D.農(nóng)桿菌啟動子(3)利用農(nóng)桿菌轉化水稻受體細胞的過程中,需添加酚類物質,其目的是____________。(4)人體合成的初始HSA多肽,需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結構才有活性。與途徑Ⅱ相比,選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優(yōu)勢是____________________________________。(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值,須確認rHSA與_________________的生物學功能一致。10.(10分)轉染是指利用一定手段使外源基因進入細胞中并穩(wěn)定表達的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉染,這在基因治療、疫苗研發(fā)和動物細胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應用前景?;卮鹣铝袉栴}。(l)腺病毒營____活,用作轉染的腺病毒載體上具有____識別和結合的部位,是外源基因在受體細胞中啟動表達的關鍵。(2)構建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割,可獲得相同的____,再用DNA連接酶恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的___。(3)通過腺病毒載體將藍色熒光基因轉染山羊耳緣成纖維細胞,利用藍色熒光直觀監(jiān)控細胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個成纖維細胞,培養(yǎng)至貼滿瓶壁時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為________。這時,重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入___等一些天然成分,以滿足細胞對營養(yǎng)物質的全面需求。11.(15分)番茄紅素具有一定的藥用價值,但普通番茄合成的番茄紅素易發(fā)生轉化(如圖甲),科學家設計了一種重組DNA(質粒三),該DNA能表達出雙鏈RNA(發(fā)卡),番茄細胞能識別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解,從而提高果實中番茄紅素的含量(如圖乙)。請分析回答下列問題:(1)在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技術,該技術的原理是________________________。

(2)根據(jù)圖甲推知,轉錄出“發(fā)卡”的DNA片段實際上是兩個反向連接的________________基因,上述過程通過阻止該基因在細胞內的_______________(填“轉錄”或“翻譯”),提高了果實中番茄紅素的含量。(3)為保證圖中的片段A反向連接,處理已開環(huán)質粒所用的兩種限制酶是______________________。(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外側游離的磷酸基團。對已開環(huán)的質粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________,該DNA分子仍可以和目的基因連接,形成缺少___________個磷酸二酯鍵的重組質粒,隨后在細胞中被修復。(5)可利用___________________法將質粒三導入植物細胞。

參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、A【解析】

轉錄是以DNA的一條鏈為模板,按照堿基互補配對原則,合成RNA的過程?!驹斀狻緼、mRNA可與多個核糖體結合同時合成多條相同的肽鏈,提高蛋白質的合成速率,A正確;B、RNA聚合酶的作用是催化DNA轉錄為RNA,原核生物基因編碼區(qū)轉錄需要RNA聚合酶催化,B錯誤;C、蛋白酶是催化蛋白質水解,mRNA為核酸,不能被蛋白酶剪切,C錯誤;D、因遺傳密碼子的簡并性,外顯子中發(fā)生堿基對替換不一定導致性狀的改變,D錯誤。故選A。【點睛】答題關鍵在于從材料中獲取信息,并綜合運用轉錄翻譯等知識分析問題。2、D【解析】

1、細胞全能性是指已經(jīng)分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能。細胞具有全能性的原因是其具有發(fā)育成完整個體所需的全部遺傳物質。2、細胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變,其中原癌基因負責調節(jié)細胞周期,控制細胞生長和分裂的過程,抑癌基因主要是阻止細胞不正常的增殖。3、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程。細胞凋亡是生物體正常的生命歷程,對生物體是有利的,而且細胞凋亡貫穿于整個生命歷程。在成熟的生物體內,細胞的自然更新、被病原體感染的細胞的清除,是通過細胞凋亡完成的。4、細胞壞死是由外界環(huán)境因素引起的,屬于不正常的細胞死亡?!驹斀狻緼、受精卵、早期胚胎細胞和動物細胞的細胞核具有發(fā)育成完整個體所需的全部遺傳物質,因此均具有全能性,A正確;B、我們通常把異?;顫姷膸щ姺肿踊蚧鶊F稱為自由基。自由基攻擊生物膜的組成成分磷脂分子,還會攻擊DNA引起基因突變,攻擊蛋白質,使蛋白質活性下降,致使細胞衰老,B正確;C、易誘發(fā)生物發(fā)生基因突變并提高突變頻率的因素可分為三大類:物理因素、化學因素和生物因素。不當飲食和吸煙是致癌的主要因素,癌癥的發(fā)生還與心理狀態(tài)有關,維生素A、維生素C、胡蘿卜素和纖維素等具有抑制癌變的作用,C正確;D、細胞代謝受損或中斷引起的細胞死亡屬于細胞壞死,D錯誤。故選D。3、B【解析】

分析題圖:三種類似物的不同濃度對萵苣幼根生長的影響,均體現(xiàn)了低濃度促進生長,高濃度抑制生長,即具有兩重性的特點,但是不同的植物器官對同一濃度的生長素類似物的敏感度不同,作用的效果也不同,據(jù)此答題?!驹斀狻緼、分析曲線圖可知,在0~20ppm范圍內,甲對萵苣幼根的促進作用大于丙,A正確;B、與生長素類似物濃度為0組比較可知,乙的濃度大于5ppm后,在一定的濃度范圍內仍然表現(xiàn)對萵苣幼根生長起促進作用,B錯誤;C、由于幼根對生長素類似物的敏感性大于幼芽,所以50ppm的生長素類似物對幼根生長為抑制作用,但對幼芽生長不一定為抑制作用,C正確;D、根據(jù)曲線圖分析:甲、乙和丙對萵苣幼根生長的影響均具有兩重性,D正確。故選B?!军c睛】本題通過考查植物激素的調節(jié),意在考查考生對于相關知識的理解和運用,特別要注意對曲線的分析。4、A【解析】

根據(jù)題意,由于72%的草甘膦應答基因在清晨的表達達到峰值,說明每天都如此,可見基因表達具有一定的節(jié)律性;生物的晝夜節(jié)律性是長期自然選擇的結果,有利于其適應環(huán)境?!驹斀狻緼、不同植物的晝夜節(jié)律性不一定相同,在清晨噴施草甘膦對擬南芥的致死效果最好,對其他植物的效果不一定最好,A錯誤;B、由于72%的草甘膦應答基因在清晨的表達達到峰值,說明每天都如此,可見基因表達具有一定的節(jié)律性,B正確;C、在大多數(shù)草甘膦應答基因表達的清晨使用草甘膦可有效殺死擬南芥,說明草甘膦是通過干擾擬南芥基因的正常表達達到除草目的,C正確;D、生物的晝夜節(jié)律性是長期自然選擇的結果,有利于其適應環(huán)境,D正確。故選A。5、D【解析】

從表格可知,甲和乙兩組的自變量是有無噴灑細胞分裂素,添加適量的細胞分裂素有助于提高光合速率;甲和丙兩組的自變量是溫度,低溫會抑制植物的光合速率;丙和丁兩組的自變量是有無噴灑細胞分裂素,噴灑適量的細胞分裂素,可緩解低溫對植物光合速率的抑制作用。【詳解】甲組與丙組對比可知,低溫會導致葉綠素含量和氣孔導度降低,A正確;甲組與乙組對比可知,細胞分裂素處理會導致葉綠素含量和氣孔導度增加,B正確;丁組與丙組對比可知,分裂素處理與低溫處理相比,葉綠素含量和氣孔導度有所增加,光合作用速率增大。說明細胞分裂素可緩解低溫對光合作用速率的抑制,C正確;表格中沒有不同濃度細胞分裂素的比較,無法說明常溫下噴灑高濃度的細胞分裂素能進一步提高茄子的光合作用速率,D錯誤。故選D。【點睛】在解答本題時,首先確定實驗的自變量和因變量,然后根據(jù)實驗的結果確定實驗結論。6、B【解析】【分析】激素名稱合成部位生理作用應用赤霉素主要是未成熟的種子、幼根和幼芽促進細胞伸長,從而引起植株增高;促進種子萌發(fā)和果實發(fā)育促進矮生性植物莖稈伸長;解除種子休眠,提早用來播種細胞分裂素主要是根尖促進細胞分裂和組織分化蔬菜貯藏中,常用它來保持蔬菜鮮綠,延長貯藏時間乙烯廣泛存在于多種植物的組織中,成熟的果實中更多促進果實成熟促進香蕉、鳳梨等果實成熟脫落酸根冠、萎蔫的葉片等,將要脫落的器官和組織

中含量多抑制細胞分裂,抑制植物的生長,也能抑制種子的萌發(fā);促進葉和果實的衰老和脫落落葉或棉鈴在未成熟前的大量脫落【詳解】A、植物激素的合成也受環(huán)境因子變化的影響,A錯誤;B、同一植物細胞上可能含有多種激素的受體,其生命活動受多種激素的共同調節(jié),B正確;C、水稻植株產(chǎn)生的乙烯對其它植物的果實也有催熟作用,C錯誤;D、植物激素是植物體內產(chǎn)生的對植物生長發(fā)育具有調節(jié)作用的微量有機物,水稻植株本身產(chǎn)生的赤霉素不會很多,D錯誤。故選B。二、綜合題:本大題共4小題7、不完全相同啟動子、終止子、標記基因、復制原點滋養(yǎng)層胚胎分割早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植先從肝臟細胞中提取血清白蛋白mRNA,再在逆轉錄酶的催化作用下得到血清白蛋白cDNA否血清白蛋白是分泌蛋白,需要內質網(wǎng)和高爾基體加工后才具有生物活性;大腸桿菌是細菌,細胞內沒有內質網(wǎng)和高爾基體,無法對其進行加工,故蛋白B與蛋白A活性不同【解析】

分析圖示:①是基因表達載體的構建,②⑥是將目的基因導入受體細胞,③早期胚胎培養(yǎng),④胚胎移植,⑤是胚胎培養(yǎng)到個體發(fā)育過程?!驹斀狻浚?)①過程中,將人血清白蛋白基因導人綿羊受精卵和大腸桿菌所用的載體不完全相同;除血清白蛋白基因外,圖中的基因表達載體還必須含有啟動子、終止子、標記基因、復制原點。(2)進行④操作之前,需要對早期胚胎進行性別鑒定,常選取取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞做DNA分析;對挑選出的雌性胚胎還可以采用胚胎分割技術提高胚胎利用率;上圖中涉及的胚胎工程技術有早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植。(3)利用①⑥過程生產(chǎn)人血清白蛋白時,常用反轉錄法獲取目的基因,用此法獲取人血清白蛋白基因的操作流程:先從肝臟細胞中提取血清白蛋白mRNA,再在逆轉錄酶的催化作用下得到血清白蛋白cDNA;由此獲得的蛋白B與蛋白A活性不同,因為血清白蛋白是分泌蛋白,需要內質網(wǎng)和高爾基體加工后才具有生物活性;大腸桿菌是細菌,細胞內沒有內質網(wǎng)和高爾基體,無法對其進行加工,故蛋白B與蛋白A活性不同?!军c睛】本題結合轉基因克隆羊的培育過程圖,考查基因工程的原理及技術的相關知識,要求考生識記基因工程的原理、工具及操作過程;識記動物細胞培養(yǎng)的過程及培養(yǎng)條件。8、RNA聚合酶氨基酸不成熟非同源染色體上的非等位基因測交成熟:不成熟=1:3基因突變ACS2、ACS4、ACO1多對成熟基因【解析】

轉錄的模板是DNA,產(chǎn)物是RNA;翻譯的模板是mRNA,產(chǎn)物是多肽?;蛲蛔冎窪NA中堿基對的增添、缺失和替換等引起基因結構的改變?!驹斀狻浚?)成熟基因轉錄時需要的酶是RNA聚合酶,翻譯的原料是氨基酸。(2)野生型植株的基因型為CCnn,C基因純合突變株的基因型為ccnn,N基因純合突變株的基因型為CCNN,將后兩者突變株進行雜交,F(xiàn)1代的基因型為CcNn,表現(xiàn)為不成熟,F(xiàn)1進行自交,子代表現(xiàn)型為成熟:不成熟=3:13,即9:3:3:1的變式,說明C基因和N基因位于兩對同源染色體上??梢詫1進行測交,野生型后代即C-nn占1/2×1/2=1/4,故成熟:不成熟=1:3。(3)①基因中堿基對改變屬于基因突變。②由圖可知,ACS2、ACS4、ACO1在在C突變株和N突變株中未表達,但在C-CRISPR/Cas9和N-CRISPR/Cas9中明顯表達,從而促進了果實的成熟。同時,可知其他成熟基因如PSY1、PDS、ZDS、C等成熟基因在野生型中也有明顯表達,從而表明調控果實成熟是由多對成熟基因共同作用的結果?!军c睛】本題需要考生根據(jù)3:13為9:3:3:1的變式推出兩對基因位于兩對同源染色體上,符合基因的自由組合定律。9、(12分)(1)總RNA(或mRNA)(2)B(3)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,有利于目的基因成功轉化(4)水稻是真核生物,具有膜系統(tǒng),能對初始rHSA多肽進行高效加工(5)HSA【解析】(1)合成總cDNA需提取細胞中所有的mRNA,然后通過逆轉錄過程獲得。采用PCR技術擴增HSA時,母鏈的方向是3'到5',子鏈的延伸方向是5'到3',兩條引物分別與模板鏈的5'端互補配對結合,引導子鏈延伸,故兩條引物延伸方向是相反的。(2)根據(jù)啟動子通常具有物種及組織特異性,在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA,需選擇水稻胚乳細胞的啟動子。(3)農(nóng)桿菌具有趨化性,即植物的受傷組織會產(chǎn)生一些糖類和酚類物質吸引農(nóng)桿菌向受傷組織集中轉化。研究證明,主要酚類誘導物為乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮,這些物質主要在雙子葉植物細胞壁中合成,通常不存在于單子葉植物中。水稻是單子葉植物,不能產(chǎn)生上述的酚類化合物,故在農(nóng)桿菌轉化水稻受體細胞的過程中,需要添加酚類化合物,吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,有利于目的基因的轉移。(4)水稻是真核生物,具有生物膜系統(tǒng),能對初始rHSA多肽進行加工才能形成正確的空間結構,獲得的HAS才有活性,而大腸桿菌是原核生物,細胞中不具有膜結構的細胞器,無法對初始rHSA多肽進行加工。(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值,需確認rHSA與天然的HSA的生物學功能是否一致?!究键c定位】基因工程的原理及技術;基因工程的操作程序;基因工程的應用【名師點睛】本題結合生成rHSA的實例考查目的基因的獲取、基因表達載體的構建、農(nóng)桿菌轉化法、受體細胞的選擇、目的基因的檢測與鑒定。解題關鍵是明確基因工程原理和操作程序等相關知識。10、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】

1、基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。構建基因表達載體時需要用同種限制酶切割目的基因和載體,以產(chǎn)生相同的末端,然后用DNA連接酶連接,恢復被切開的核苷酸之間的磷酸二酯鍵,RNA聚合酶能夠與啟動子識別并結合催化轉錄的進行,這是是外源基因在受體細胞中啟動表達的關鍵。2、動物細胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。【詳解】(1)腺病毒屬于動物病毒,其無細胞結構,營寄生生活,必須寄生于宿主的活細胞中才能繁殖;用作轉染的腺病毒載體上應具有RNA聚合酶識別和結合的部位啟動子,這樣才能驅動目的基因轉錄形成mRNA,最終合成相應的蛋白質。(2)構建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割,可以獲得相同的黏性末端或平末端,再用DNA連接酶恢復被限制酶切開的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)對山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個成纖維細胞,便于細胞與培養(yǎng)液充分接觸;培養(yǎng)至貼滿瓶壁時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為接觸抑制;這時重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進行傳代培養(yǎng);由于人們對動物細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質還沒有完全搞清楚,因此培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入血漿、血清等一些天然成分,以滿足細胞對營養(yǎng)物質的全面要求。【點睛】本

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