鹽堿化土壤作物品種篩選與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程

1鹽堿化土壤作物品種篩選與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了耐鹽堿作物品種萌發(fā)期、苗期耐鹽堿性鑒定、鑒定方法及耐鹽堿性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本文件適用于玉米、向日葵、大豆等耐鹽堿作物品種種質(zhì)資源的耐鹽堿性快速鑒定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3543農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)芽試驗(yàn)GB4404.1糧食作物種子第1部分：禾谷類3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1耐鹽堿saline-alkalinetolerance指作物在鹽堿脅迫下，其生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量形成對(duì)鹽堿脅迫的反應(yīng)能力。3.2鹽害指數(shù)saltinjuryindexofseedlings在鹽脅迫條件下，反映苗期鹽害率和鹽害程度的指標(biāo)4鑒定方法4.1萌發(fā)期耐鹽堿性鑒定4.1.1種子準(zhǔn)備種子純度、凈度、水分應(yīng)符合GB/T4404.1中對(duì)作物種子質(zhì)量的要求。種子發(fā)芽率大于95%，禁止包衣或拌種。挑選出籽粒飽滿一致的種子用5%次氯酸鈉浸泡15min消毒后，用蒸餾水沖洗晾干后置于培養(yǎng)皿15cm中。4.1.2脅迫處理將發(fā)芽紙放入培養(yǎng)皿中，注入混合鹽堿脅迫溶液，待發(fā)芽紙吸水飽和時(shí)，瀝去多余溶液，將種子均勻擺放在發(fā)芽紙上，種子間保持一定間距。每皿10粒種子。每隔1d用稱重法補(bǔ)存水分，保持各處理2相對(duì)濃度不變；在第3d重新更換一次相應(yīng)處理液，第7d天觀察種子發(fā)芽情況。按當(dāng)?shù)佧}漬化土壤鹽堿化土壤實(shí)際鹽分組成類型，采用NaCl、Na2SO4、NaHCO3三種單鹽混合比例按9:11:2配比。向日葵鹽堿脅迫濃度設(shè)置6個(gè)梯度，分別為：0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、100mmol/L、125mmol/L。4.1.3性狀調(diào)查將發(fā)芽皿放入光照培養(yǎng)箱中，在每24h提供8h光照條件下，25℃恒溫培養(yǎng)，第2d、4d、6d和8d調(diào)查發(fā)芽種子數(shù)。4.1.4萌發(fā)期耐鹽堿率4.1.4.1相對(duì)發(fā)芽勢(shì)脅迫率相對(duì)發(fā)芽勢(shì)脅迫率按照公式（1）計(jì)算。Rge(%)=[(Cge-Tge)/Cge]×100(1)式中：Rge―相對(duì)發(fā)芽勢(shì)脅迫率，Cge―對(duì)照發(fā)芽勢(shì)，發(fā)芽處理后第5d統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽數(shù)，Tge―處理發(fā)芽勢(shì)，發(fā)芽處理后第5d統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽數(shù)。4.1.4.2相對(duì)發(fā)芽率脅迫率相對(duì)發(fā)芽率脅迫率按照公式（2）計(jì)算。Rgr(%)=[(Cgr-Tgr)/Cgr]×100(2)式中：Rgr―相對(duì)發(fā)芽率脅迫率，Cgr―對(duì)照發(fā)芽率，發(fā)芽處理后第7d統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽數(shù)，Tgr―處理發(fā)芽率，發(fā)芽處理后第7d統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽數(shù)。4.1.4.3相對(duì)根長(zhǎng)脅迫率相對(duì)根長(zhǎng)脅迫率按照公式（3）計(jì)算。Rrl(%)=[(Crl-Trl)/Crl]×100(3)式中：Rrl―相對(duì)根長(zhǎng)脅迫率，Crl―對(duì)照根長(zhǎng)，培養(yǎng)7d時(shí)測(cè)定，Trl―處理根長(zhǎng)，培養(yǎng)7d時(shí)測(cè)定。4.1.4.4相對(duì)鹽堿脅迫率相對(duì)鹽堿脅迫率按照公式（4）計(jì)算。RSA(%)=[(Rge+Rgr+Rrl)/3]×100(4)式中：RSA―相對(duì)鹽堿脅迫率4.2苗期耐鹽堿性鑒定34.2.1種子處理挑選出籽粒飽滿一致的種子用5%次氯酸鈉浸泡15min消毒后，用蒸餾水沖洗晾干后置于石英砂盆播內(nèi)。4.2.2水培準(zhǔn)備育種加速期培養(yǎng)法，挑選出發(fā)芽一直的夢(mèng)萌發(fā)期幼苗，置于事先準(zhǔn)備好的水培裝置內(nèi)中，每一個(gè)品種30株。4.2.3脅迫處理按當(dāng)?shù)佧}漬化土壤鹽堿化土壤實(shí)際鹽分組成類型，采用NaCl、Na2SO4、NaHCO3三種單鹽混合比例按9:11:2配比。向日葵鹽堿脅迫濃度設(shè)置6個(gè)梯度，分別為：0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、250mmol/L。玉米和大豆鹽堿脅迫濃度設(shè)置6個(gè)梯度，分別為：0mmol/L、25mmol/L、50mmol/L、75mmol/L、100mmol/L、125mmol/L。4.2.3抗逆指標(biāo)檢測(cè)4.2.3.1生理指標(biāo)可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游離脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指標(biāo)。4.2.3.2檢測(cè)方法參照《植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)》，從植株頂端連續(xù)向下取3片～4片葉片。5耐鹽堿性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)5.1苗期耐鹽堿率(i=0,1,2,.5)（5）式中：SS──苗期耐鹽堿率；STi──苗情類別；SNi──每類苗情株數(shù)；TN──檢測(cè)樣本總株數(shù)。5.2評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)耐鹽指數(shù)對(duì)材料萌發(fā)期耐鹽堿性評(píng)價(jià)，詳見下表1。4表1苗期鹽堿性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)0.0%～20%120.1%～40%240.1%～60%360.1%～80%480.1%～100%56綜合評(píng)價(jià)6.1因子確定對(duì)種子萌發(fā)期發(fā)芽率、萌發(fā)指數(shù)、耐鹽堿率和苗期葉片中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游離脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，確定耐鹽堿性評(píng)價(jià)指標(biāo)。6.2評(píng)價(jià)方法6.3隸屬度確定運(yùn)用隸屬函數(shù)法對(duì)關(guān)鍵特征因子各指標(biāo)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，然后計(jì)算隸屬函數(shù)值。反隸屬函數(shù)值計(jì)算公式:式中：Xi──各指標(biāo)測(cè)定值；Xmin──各測(cè)定指標(biāo)的最小值；Xmax──各測(cè)定指標(biāo)的最大值。當(dāng)某一指標(biāo)與玉米耐鹽堿性成正相關(guān)時(shí)，用公式（1當(dāng)某一指標(biāo)與玉米耐鹽堿性成負(fù)相關(guān)時(shí)，則6.4權(quán)重確定采用標(biāo)準(zhǔn)差系數(shù)法，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差系數(shù)，歸一化后得到每個(gè)指標(biāo)的權(quán)重系數(shù)。