2025年山東省平邑縣曾子學校高三下學期第三次調(diào)研考試生物試題含解析

2025年山東省平邑縣曾子學校高三下學期第三次調(diào)研考試生物試題注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．蘇氨酸在相關(guān)酶的作用下，通過5步反應(yīng)合成異亮氨酸。當細胞中異亮氨酸濃度足夠高時，其與蘇氨酸脫氨酶結(jié)合，抑制酶活性；當異亮氨酸的濃度下降到一定程度時，異亮氨酸脫離蘇氨酸脫氨酶，抑制解除。反應(yīng)過程如下圖所示，相關(guān)敘述錯誤的是（）A．細胞中只要蘇氨酸脫氨酶活性正常就能合成異亮氨酸B．蘇氨酸與異亮氨酸分子結(jié)構(gòu)的差異體現(xiàn)在R基團上C．蘇氨酸脫氨酶與異亮氨酸結(jié)合后空間結(jié)構(gòu)改變，活性被抑制D．上述調(diào)節(jié)方式為負反饋調(diào)節(jié)機制，能有效避免物質(zhì)浪費2．下列有關(guān)ATP的敘述，錯誤的是（）A．線粒體中大量產(chǎn)生ATP時，一定伴隨著氧氣的消耗B．酵母菌只有在缺氧的條件下，其細胞質(zhì)基質(zhì)中才能形成ATPC．細胞內(nèi)ATP與ADP相互轉(zhuǎn)化的能量供應(yīng)機制是生物界的共性D．細胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體基質(zhì)可合成ATP，葉綠體基質(zhì)只消耗ATP3．某植物紅花和白花這對相對性狀同時受多對等位基因控制（如A、a；B、b；C、c……），當個體的基因型中每對等位基因都至少含有一個顯性基因時（即A_B_C_……）才開紅花，否則開白花?，F(xiàn)有甲、乙、丙、丁4個純合白花品系，相互之間進行雜交，雜交組合、后代表現(xiàn)型及其比例如下：根據(jù)雜交結(jié)果可知，本實驗中植物的花色至少受對等位基因的控制。A．2對 B．4對 C．3對 D．6對4．下列高中生物學實驗，不能在常溫條件下完成的是（）A．觀察根尖組織細胞的有絲分裂B．生物組織中還原糖的鑒定C．探究植物細胞的吸水和失水D．探究酵母菌細胞呼吸的方式5．下列關(guān)于利用胚胎工程技術(shù)培育試管牛的敘述，正確的是()A．胚胎移植可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的無性繁殖潛力B．使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應(yīng)C．通過注射促性腺激素等方法對良種母牛作超排卵處理D．通過假陰道法、電刺激法等方法對精子進行獲能處理6．下列關(guān)于多糖的敘述，正確的是（）A．淀粉、糖元、纖維素的基本單位都是葡萄糖B．淀粉、糖元、纖維素都能水解為麥芽糖C．淀粉、糖元、纖維素中葡萄糖的連接方式相同D．淀粉、糖元、纖維素都是單鏈結(jié)構(gòu)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）三孢布拉式霉菌是一種可產(chǎn)生胡蘿卜素的真菌，常用于胡蘿卜素的工業(yè)化生產(chǎn)。請回答：（1）胡蘿卜素是常用的食品色素，廣泛地用作食品、飲料、飼料的添加劑，除此以外，它還可以用于治療______。（寫出一點即可）（2）配制三孢布拉式霉菌的培養(yǎng)基時，需將pH調(diào)至______（填“酸性”或“中性”或“微堿性”）

（3）將發(fā)酵后的三孢布拉式霉菌處理后研磨成粉末，加入______（填“石油醚”或“乙醇”或“丙酮”）萃取選擇該萃取劑的依據(jù)是：具有較髙的沸點·能夠充分溶解胡蘿卜素，并且______。（4）將提取的胡蘿卜素粗品通過______法進行鑒定，據(jù)上圖結(jié)果可判斷出樣品2中含有胡蘿卜素，判斷依據(jù)是____________。（5）研究者利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對三孢布拉氏霉菌的蛋白質(zhì)進行分離，為了消除蛋白質(zhì)分子原有電荷量對遷移率的影響，可在凝膠中加入______，原理是______，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質(zhì)分子的大小。8．（10分）圖1表示光合作用過程概要的模式圖，其中，①-④表示化學反應(yīng)，A-F代表物質(zhì)。圖2表示將某綠藻細胞懸浮液放入密閉的容器中，在保持一定的pH值和溫度時，給于不同條件時細胞懸浮液中溶解氧濃度變化的模式圖。據(jù)圖回答問題：（1）寫出下列反應(yīng)或物質(zhì)的名稱。②_____；D_____。（2）據(jù)圖2分析，該綠藻細胞的呼吸速率為_____微摩爾/分。（3）在圖2中乙處給予光照時，分析瞬間ATP的變化為_____；在丙處添加CO2時，分析短時間內(nèi)C5的變化為_____。（4）若在圖2中丁處給予光補償點（此時光合速率等于呼吸速率）的光照，則正確表示溶解氧變化的曲線是a～g中的_____。（5）若在圖2中丁處加入使光反應(yīng)停止的試劑，則正確表示溶解氧變化的曲線是a～g中的___________。（6）若在圖2中丁處給予適宜條件，使溶解氧的變化如圖中的b，預(yù)計1小時后，實際產(chǎn)生的氧氣量為_____微摩爾。9．（10分）回答下列（一）、（二）小題：（一）回答以菊花莖段為材料進行組織培養(yǎng)的有關(guān)問題：（1）在配制MS培養(yǎng)基時，通常先將各種藥品配制成濃度為配方5~10倍的__________，這樣配制的主要優(yōu)點是__________（A．便于低溫保存B．延長使用時間C．降低稱量誤差D．減少雜菌污染）。從培養(yǎng)基的作用看，在MS培養(yǎng)基中定量添加BA和NAA后的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。（2）從自然界中獲取的菊花莖段，須先用70%乙醇等進行消毒，最后用__________進行清洗。將莖段插入培養(yǎng)基的過程須在______中的酒精燈火焰旁進行，以保證無菌環(huán)境。（3）從帶芽的莖段上長出叢狀苗____________（填“需要”或“不需要”）經(jīng)歷脫分化，長出的叢狀苗需__________后，再轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。（4）實驗中選用BA和NAA而不用植物中存在的天然激素的原因是_____________________。（二）腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀，但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學家研發(fā)了以人5型腺病毒（Ad5）為載體的重組新冠疫苗，這是國內(nèi)第一個進入臨床試驗階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過程示意圖如下：回答下列問題：（1）在制備人腎上皮細胞系（293細胞）時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時間，細胞鋪滿培養(yǎng)瓶后不再分裂，這種現(xiàn)象稱為__________。出現(xiàn)此現(xiàn)象后，需用__________處理，得到細胞懸液，再進行__________培養(yǎng)，以獲得更多的293細胞。（2）新冠病毒為RNA病毒，其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上，因此在制備以上疫苗時需先通過___________過程獲得相應(yīng)的DNA。構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒，可使用雙酶切法，使之產(chǎn)生__________的粘性末端，以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將___________導入293細胞，從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。（3）檢測轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細胞內(nèi)表達，可檢測細胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的__________或抗原分子，若檢測抗原分子可用__________技術(shù)獲得特異性探針。10．（10分）苯丙酮尿癥是一種單基因遺傳病，由于PKU某因突變導致患者尿液中含有大量苯丙酮酸?；蚨c整合可替換特定某因用于該病治療，即將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因。簡要過程如下圖所示。請回答下列問題：注：圖中neoR為新霉素抗性基因，HB1和HB2為小鼠胚胎干細胞染色體DNA上突變的PKU基因兩側(cè)的一段DNA序列。（1）構(gòu)建重組載體時，需要根據(jù)_____________序列分別合成HB1'和HB2'，在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有_____________。此過程常用的工具酶有____________，neoR基因的作用是___________。（2）可用________技術(shù)將重組載體導入小鼠胚胎干細胞，誘導相應(yīng)區(qū)域互換，完成胚胎干細胞的基因改造。胚胎干細胞的特點有_________（答出兩點即可）。（3）現(xiàn)用完成基因改造后的胚胎干細胞進行個體生物學水平鑒定，寫出鑒定思路、結(jié)果及結(jié)論：___________________________。11．（15分）甲圖是某生態(tài)系統(tǒng)中部分生物之間的捕食關(guān)系示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖甲中未體現(xiàn)的生態(tài)系統(tǒng)成分有________，屬于次級生產(chǎn)者的為_______________。（2）圖甲中若青蛙被人大量捕捉，則短時間內(nèi)鼠和蜘蛛的數(shù)量變化分別為_________。（3）給農(nóng)作物施加了含32P標記的復(fù)合肥后，復(fù)合肥可為農(nóng)作物提供_________（填“無機物”或“有機物”）。檢測32P在蜘蛛和食草昆蟲體內(nèi)的放射性強度變化如圖乙所示，則A應(yīng)為___________。（4）在該生態(tài)系統(tǒng)的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)區(qū)，為提高經(jīng)濟效益和生態(tài)效益，可以利用動物的不同習性，設(shè)計多種________，還可以調(diào)整農(nóng)作物的________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】

結(jié)合題意和題圖分可知，蘇氨酸經(jīng)5步反應(yīng)合成異亮氨酸的過程，需要蘇氨酸脫氨酶，而該酶的活性受異亮氨酸含量的影響。異亮氨酸越多，越容易與該酶結(jié)合而抑制其活性，導致合成異亮氨酸合成減少，這是一種負反饋調(diào)節(jié)機制?！驹斀狻緼、異亮氨酸的合成不僅需要蘇氨酸脫氨酶，B→C、C→D、D→E、E→異亮氨酸也需要酶催化其反應(yīng)，A錯誤；B、不同氨基酸結(jié)構(gòu)的差異體現(xiàn)在R基團上，B正確；C、異亮氨酸濃度足夠高時會與蘇氨酸脫氨酶結(jié)合，空間結(jié)構(gòu)改變，活性被抑制，C正確；D、細胞內(nèi)的這種負反饋調(diào)節(jié)機制能有效避免物質(zhì)浪費，D正確。故選A。2、B【解析】

ATP的結(jié)構(gòu)簡式是A-P～P～P，其中A代表腺苷，T是三的意思，P代表磷酸基團。ATP和ADP的轉(zhuǎn)化過程中，能量來源不同：ATP水解釋放的能量，來自高能磷酸鍵的化學能，并用于生命活動；合成ATP的能量來自呼吸作用或光合作用。場所不同：ATP水解在細胞的各處。ATP合成在線粒體，葉綠體，細胞質(zhì)基質(zhì)?！驹斀狻緼、線粒體中大量產(chǎn)生ATP時為有氧呼吸的第三階段，一定伴隨著氧氣的消耗，A正確；B、酵母菌是兼性厭氧菌，有氧和無氧條件都能進行細胞呼吸，酵母菌在有氧和缺氧條件下，其細胞質(zhì)基質(zhì)都能形成ATP，B錯誤；C、細胞內(nèi)ATP與ADP相互轉(zhuǎn)化的能量供應(yīng)機制，是生物界的共性，C正確；D、細胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體基質(zhì)是細胞呼吸的場所，可合成ATP，葉綠體基質(zhì)是光合作用暗反應(yīng)場所，只消耗ATP，D正確。故選B。3、B【解析】

根據(jù)題意“當個體的基因型中每對等位基因都至少含有一個顯性基因時（即A_B_C_……）才開紅花，否則開白花”，若子代紅花占3/4，說明F1含一對等位基因，其它各對基因為顯性純合，若子代紅花占3/4×3/4=9/16，說明F1含兩對等位基因，其它各對基因為顯性純合，以此類推，根據(jù)乙×丙和甲×丁兩個雜交組合中，F(xiàn)2代中紅色個體占全部個體的比例為81/（81+175）=（3/4）4，可推知F1含有4對等位基因。【詳解】根據(jù)上述遺傳圖解可知，乙×丙和甲×丁兩個雜交組合中，F(xiàn)2代中紅色個體占全部個體的比例為81÷（81+175）=81÷256=（3/4）4，根據(jù)n對等位基因自由組合且完全顯性時，F(xiàn)2代中顯性個體的比例為（3/4）n，可判斷這兩個雜交組合中都涉及到4對等位基因，即本實驗中植物的花色至少受4對等位基因的控制，所以B正確，ACD錯誤。故選B。4、B【解析】

斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，產(chǎn)生磚紅色沉淀。斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉）?！驹斀狻緼、觀察根尖組織細胞的有絲分裂只要在常溫下進行即可，A錯誤；B、斐林試劑可用于鑒定還原糖，需要在水浴加熱的條件下，才能產(chǎn)生磚紅色沉淀，B正確；CD、探究植物細胞的吸水和失水、探究酵母菌細胞呼吸的方式都需要保持細胞活性，需在常溫下進行，CD錯誤。故選B。5、C【解析】

胚胎移植時，通常需用促性腺激素處理供體，使之超數(shù)排卵，受體需同期發(fā)情處理。體外受精主要操作步驟有卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能，采集方法有假陰道法、手握法和電刺激法等，獲能方法有培養(yǎng)法和化學法，獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細胞在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斀狻緼.胚胎移植中的胚胎是通過人工體外授精獲得的，屬于有性生殖，A錯誤；B.受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此無需使用免疫抑制劑，B錯誤；C.用促性腺激素對良種奶牛進行注射處理，可促使其超數(shù)排卵，C正確；D.收集精子的方法有假陰道法、手握法和電刺激法，對精子進行獲能處理方法包括培養(yǎng)法和化學誘導法，D錯誤。6、A【解析】

多糖的種類及其分布和功能：種類分子式分布生理功能多糖淀粉（C6H10O5）n植物細胞淀粉是植物細胞中儲存能量的物質(zhì)纖維素纖維素是細胞壁的組成成分之一糖元動物細胞糖元是動物細胞中儲存能量的物質(zhì)【詳解】A、淀粉、糖元、纖維素都是多糖，基本單位都是葡萄糖，A正確；B、淀粉、糖元、纖維素都能水解為葡萄糖，B錯誤；C、淀粉、糖元、纖維素都是由葡萄糖組成的，但是三者中葡萄糖的數(shù)量和連接方式都有所不同，C錯誤；D、淀粉、糖元、纖維素都不是單鏈，D錯誤。故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、因缺乏維生素A而引起的各種疾病，如：夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等酸性石油醚不與水混溶紙層析樣品2具有與標準樣對應(yīng)的色帶1SDSSDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)—SDS混合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量【解析】

1.蘿卜素的提?。?/p>

（1）胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑。

（2）胡蘿卜素的提取來源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提??；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中荻得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。

（4）實驗流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃?。ㄊ兔眩^濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

2.凝膠電泳法：

（1）原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。

（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

（3）分離過程：在一定pH下，使蛋白質(zhì)基團帶上正電或負電；加入帶負電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小?！驹斀狻浚?）胡蘿卜素是常用的食品色素，廣泛地用作食品、飲料、飼料的添加劑，除此以外，它還可以用于治療因缺乏維生素A而引起的各種疾病，如：夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等；

（2）在三孢布拉氏霉菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中，為其提供氮源的成分是玉米蛋白水解物和豆粕。在制備該培養(yǎng)基的過程中，滅菌之前應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；

（3）萃取胡蘿卜素選用石油醚，其原因是石油醚具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶；

（4）提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析法進行鑒定，據(jù)圖示結(jié)果可判斷出樣品2中含有胡蘿卜素，判斷依據(jù)是樣品2具有與標準樣對應(yīng)的色帶1；

（5）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對三孢布拉氏霉菌的蛋白質(zhì)進行分離，為了消除蛋白質(zhì)分子原有電荷量對遷移率的影響，可在凝膠中加入SDS，原理是SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)-SDS混合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質(zhì)分子的大小。本題考查了胡蘿卜素的提取的有關(guān)知識，要求考生識記胡蘿卜素的特點和理化性質(zhì)，識記從生物材料中提取某些特定成分的原理、方法及注意事項，能結(jié)合所學的知識準確答題。8、水的光解NADPH（[H]）2.5增加減少de750【解析】

題圖是解答本題的切入點，從圖1可知，①光能的吸收，②水的光解，③ATP個合成，④暗反應(yīng)，A是水，B是氧氣，C是CO2，D是NADPH，E是ATP，F(xiàn)是糖類。從圖2分析可知，光照之前只進行呼吸作用，只需根據(jù)氧氣吸收的總量比時間即可計算出呼吸速率。光照影響光合作用的光反應(yīng)過程，它能促進ATP的生成和水的光解；在丙處添加CO2時，要考慮到二氧化碳影響的是光合作用的暗反應(yīng)中的二氧化碳的固定。丁點以后，若曲線不變，則表示光合作用等于呼吸作用強度；若曲線上升，則表示光合作用大于呼吸作用強度；如果曲線下降，則表示光合作用小于呼吸作用或只進行呼吸作用?！驹斀狻浚?）由圖1可知①應(yīng)是色素吸收光能，②是水的光解，③是ADP形成ATP的過程，④是光合作用的暗反應(yīng)，物質(zhì)D是水的光解形成的，并且要參與暗反應(yīng)應(yīng)是[H]。（2）在光照開始之前，細胞只進行呼吸作用，呼吸作用第一階段的場所為細胞質(zhì)基質(zhì)，第二、三兩階段發(fā)生在線粒體中；在0～4分細胞吸收的氧氣的值=210-200=10微摩爾，因此該綠藻細胞的呼吸速率=10÷4=2.5微摩爾/分。（3）在乙處給予光照時，此時光合作用的光反應(yīng)產(chǎn)生ATP增加，光反應(yīng)的場所為葉綠體的類囊體薄膜。在丙處添加CO2時，會促進暗反應(yīng)的二氧化碳的固定，從而導致C5的數(shù)量減少，而C3的數(shù)量增多。（4）如果丁處是光補償點，則此時的呼吸作用強度與光合作用強度相同故氧氣的量不會增加，應(yīng)是曲線d。（5）若在丁處加入光反應(yīng)抑制劑，此時綠藻細胞不能進行光合作用，只能進行呼吸作用，又恢復(fù)到0～4分時的狀態(tài)，并且呼吸速率不變，因此e可以表示溶解氧變化的曲線。（6）實際產(chǎn)生的氧氣量應(yīng)是凈氧氣量和呼吸作用消耗的氧氣量，由圖可知每分鐘的凈氧氣產(chǎn)生量是（290-260）/（12-9）=10微摩爾/分，由第（2）問可知呼吸作用消耗的氧氣量是每分鐘2.5微摩爾/分，故產(chǎn)生的氧氣量是每分鐘12.5微摩爾/分，在1h內(nèi)共產(chǎn)生12.5×60=750微摩爾/分。本題考查了影響光合作用和呼吸作用的環(huán)境因素，意在考查考生能從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力；理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。9、母液C發(fā)芽（生芽）無菌水超凈臺不需要分株BA和NAA是人工合成激素，植物沒有相關(guān)分解酶，作用時間長，效果明顯接觸抑制胰蛋白酶傳代逆轉(zhuǎn)錄不同重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒mRNA單克隆抗體制備【解析】

1、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織、器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，最后長出完整植株（新植體）。2、植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。3、動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。4、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（一）（1）MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和有機成分組成，也可將大量元素、微量元素和有機成分分別配制成濃度為配方的5~10倍的母液，用時稀釋，這樣配制的主要優(yōu)點是降低稱量誤差（即C）。MS培養(yǎng)基中定量添加BA和NAA后的培養(yǎng)基屬于發(fā)芽培養(yǎng)基，MS培養(yǎng)基中定量添加NAA后的培養(yǎng)基屬于生根培養(yǎng)基。（2）從自然界中獲取的菊花莖段，須先用70%乙醇等進行消毒，再放入5%次氯酸鈉溶液浸泡，然后用另一5%次氯酸鈉溶液浸泡，最后在超凈臺中用無菌水清洗，將莖的切斷培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中。（3）從帶芽的莖段上長出叢狀苗不需要經(jīng)歷脫分化，長出的叢狀苗需要分株后，再轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。（4）實驗中使用的是人工合成的BA和NAA，是由于植物沒有相關(guān)分解酶，作用時間長，效果明顯。（二）（1）細胞鋪滿瓶壁時，會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，此時需要胰蛋白酶處理，得到細胞懸液，再進行傳代培養(yǎng)，已獲得更多的細胞。（2）新冠病毒是單鏈的RNA病毒，而質(zhì)粒是雙鏈的DNA，因此需要將RNA通過逆轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)的DNA才能拼接到質(zhì)粒上。構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒，使用雙酶切法產(chǎn)生不同的粘性末端，這樣可以避免目的基因和質(zhì)粒自身連接以及目的基因和質(zhì)粒反向連接，提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒導入受體細胞293細胞內(nèi)。（3）基因的表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程，因此檢測目的基因是否在人體細胞內(nèi)表達，可檢測細胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的mRNA或抗原分子，檢測抗原分子的方法是抗原-抗體雜交法，可用單克隆抗體制備技術(shù)獲得特異性探針。本題考查植物組織培養(yǎng)、動物細胞培養(yǎng)和基因工程的基本操作程序等相關(guān)知識，要求考生能運用所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查。10、HB1和HB2的堿基啟動于、終止子限制酶、DNA連接酶鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞顯微注射能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分化。將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功?！窘馕觥?/p>

結(jié)合題圖可知，互換后的小鼠染色體DNA，與小鼠染色體DNA比較，HB1和HB2的堿基分別替換成了重組載體的HB1'和HB2'，并且增加了重組載體的neoR為新霉素抗性基因，原來突變的PKU基因，替換成了正常的PKU基因?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析，構(gòu)建重組載體時，需要根據(jù)小鼠染色體DN