2025年山東省武城縣第一中學(xué)高三第七次模擬生物試題試卷含解析

2025年山東省武城縣第一中學(xué)高三第七次模擬生物試題試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于酶和酶促反應(yīng)的敘述，正確的是（）A．酶的基本組成單位是氨基酸或脫氧核苷酸B．酶促反應(yīng)都需要ATP供能C．一種酶只能催化一種底物的反應(yīng)D．一定溫度范圍內(nèi)，溫度升得越高，酶變性的速率也越快2．下圖是“比較過(guò)氧化氫在不同條件下的分解”實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是（）A．1號(hào)與2號(hào)對(duì)照，說(shuō)明加熱能提高酶的活性B．1號(hào)與4號(hào)對(duì)照，可以驗(yàn)證酶具有高效性C．3號(hào)和4號(hào)裝置應(yīng)置于90°C水浴中進(jìn)行D．pH、溫度等是3號(hào)與4號(hào)的無(wú)關(guān)變量3．下列關(guān)于細(xì)胞癌變的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．細(xì)胞癌變與基因突變有關(guān)B．正常人體內(nèi)癌變的細(xì)胞不會(huì)凋亡C．細(xì)胞癌變后，物質(zhì)交換速率會(huì)變快D．癌變的細(xì)胞有的會(huì)產(chǎn)生甲胎蛋白、癌胚抗原等物質(zhì)4．近期，我國(guó)湖北及世界部分地區(qū)爆發(fā)了由新型冠狀病毒（2019-nCOV）引發(fā)的肺炎，這種病毒傳染性極強(qiáng)，經(jīng)科學(xué)家對(duì)分離出的病毒進(jìn)行研究，確定它的具體結(jié)構(gòu)如下圖。下列說(shuō)法正確的是（）A．2019-nCOV與T2噬菌體一樣，遺傳物質(zhì)不穩(wěn)定，容易發(fā)生突變B．刺突糖蛋白可能與宿主細(xì)胞特異性受體的識(shí)別和介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞有關(guān)C．研究發(fā)現(xiàn)，2019-nCOV在體外環(huán)境中可存活5天，說(shuō)明它的生命活動(dòng)可以離開(kāi)細(xì)胞D．2019-nCOV與細(xì)胞膜上的特定位點(diǎn)結(jié)合進(jìn)而入侵細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞膜有控制物質(zhì)進(jìn)出的功能5．如圖是某些細(xì)胞器的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．①是高爾基體，在植物細(xì)胞中與細(xì)胞壁的形成有關(guān)B．②是線粒體，是真核生物有氧呼吸的主要場(chǎng)所C．③是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成和加工的“車間”D．④是葉綠體，是所有植物細(xì)胞進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所6．某學(xué)生利用性狀分離比的模擬實(shí)驗(yàn)探究人類紅綠色盲的遺傳規(guī)律，下列敘述中錯(cuò)誤的是（）A．需要準(zhǔn)備三種不同顏色的彩球，分別標(biāo)記B、b、Y表示XB、Xb、YB．若甲桶內(nèi)裝有B、b兩種彩球數(shù)量各10個(gè)，則乙桶內(nèi)裝有兩種彩球的數(shù)量均可超過(guò)10個(gè)，且必有一種是Y彩球C．通過(guò)女性色盲與男性正?；榕溥@組模擬實(shí)驗(yàn)可得出人類紅綠色盲具有隔代交叉遺傳的特點(diǎn)D．每次抓取小球統(tǒng)計(jì)后，應(yīng)將彩球放回原來(lái)的小桶內(nèi)，重復(fù)抓取50—100次7．我國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，當(dāng)有稻瘟病菌入侵水稻時(shí)，在光照條件下，水稻體內(nèi)的LHCB5蛋白第24位的蘇氨酸就會(huì)發(fā)生磷酸化，加速向葉綠體中積累，經(jīng)過(guò)一系列的變化，會(huì)誘發(fā)活性氧的產(chǎn)生。在活性氧作用下，葉綠體內(nèi)專門的抗稻瘟病基因表達(dá)后，水稻抗稻瘟病的能力會(huì)提高，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．陰雨連綿、光照不足的天氣更易暴發(fā)稻瘟病B．抗稻瘟病基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄、翻譯形成LHCB5蛋白C．葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)不都由葉綠體基因控制合成D．LHCB5蛋白的功能變化與它的結(jié)構(gòu)變化有關(guān)8．（10分）下列關(guān)于高等動(dòng)物和人體生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．甲亢病人體內(nèi)，促甲狀腺激素釋放激素的含量低于正常值B．神經(jīng)細(xì)胞處于靜息電位時(shí)，細(xì)胞外K+濃度高于細(xì)胞內(nèi)K+濃度C．注射血漿白蛋白可促進(jìn)組織液的吸收以減輕病人水腫癥狀D．B淋巴細(xì)胞在分化成漿細(xì)胞的過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)的高爾基體增多二、非選擇題9．（10分）Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚眙干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖（圖中數(shù)字序號(hào)表示的是相關(guān)過(guò)程）。請(qǐng)回答:（1）過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時(shí)期。（2）過(guò)程②利用的技術(shù)是____________________，當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其_________分離出ES細(xì)胞。（3）過(guò)程③中獲取的目的基因是____________________，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建_______________________，構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用______________技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等。通測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用__________________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。10．（14分）下圖為基因工程操作步驟示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）從基因文庫(kù)中提取的目的基因通過(guò)_____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。與細(xì)胞內(nèi)同類酶相比，該技術(shù)所利用的DNA聚合酶所具有的特點(diǎn)是____________。（2）在過(guò)程①中，需______________酶將已切開(kāi)的載體DNA與目的基因結(jié)合成基因表達(dá)載體。載體DNA上必須要有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是_______________________。過(guò)程②中若選用的受體細(xì)胞為大腸桿菌，一般需用Ca2+進(jìn)行處理，其目的是_______________________。（3）若將病毒外殼蛋白基因?qū)虢湍妇虿溉閯?dòng)物細(xì)胞中，使之表達(dá)出病毒外殼蛋白（抗原），經(jīng)純化后而制得的疫苗可用于生產(chǎn)基因工程疫苗，接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更安全，從疫苗的結(jié)構(gòu)組成來(lái)看，其原因是_______________________________________________。11．（14分）透明質(zhì)酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)獲得新透明質(zhì)酸酶基因的過(guò)程，NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：（1）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時(shí)，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，其作用是__________________；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的_________________，對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列_______（有/沒(méi)有）專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來(lái)發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢(shì)，最可能的原因是________________。（2）透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對(duì)應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識(shí)別的核苷酸序列（6個(gè)核苷酸）為_(kāi)___________________。（3）人體細(xì)胞間質(zhì)有基膜粘連蛋白、多糖（如透明質(zhì)酸）、蛋白多糖等成分。鏈球菌等致病菌在侵染人體時(shí)，可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶。試分析透明質(zhì)酸酶在鏈球菌侵染過(guò)程中的作用是_________________，其意義可能是_____________________。12．酸奶及果汁的生產(chǎn)過(guò)程中常用到生物技術(shù)，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：（1）酸奶是以牛奶為原料，經(jīng)過(guò)消毒、添加有益菌發(fā)酵后，再冷卻灌裝的一種營(yíng)養(yǎng)保健品。生產(chǎn)過(guò)程中把溫度控制在80℃將鮮牛奶煮15min，采用的是_______方法，不僅能有效地消毒，而且使牛奶中營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。起發(fā)酵作用的微生物主要是_______，發(fā)酵中牛奶相當(dāng)于其培養(yǎng)基，就環(huán)境因素來(lái)說(shuō)，不僅溫度要適宜且還需要?jiǎng)?chuàng)造_______環(huán)境。（2）某種果汁生產(chǎn)過(guò)程中，如用果膠酶處理可顯著增加產(chǎn)量，其主要原因是果膠酶水解果膠使___________。（3）人們通常從腐爛的水果上分離產(chǎn)果膠酶的微生物，其依據(jù)是：_______。為了獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落，通常采用的分離方法是_______。（4）為了提高果膠酶的穩(wěn)定性和處理的連續(xù)性，可采用_______技術(shù)處理果膠酶，如常用的吸附法。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

1.酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有生物催化作用的有機(jī)物，大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA。2.酶的特性有：（1）高效性：與無(wú)極催化劑相比具有高效性；（2）專一性：一種酶只能催化一種或者一類反應(yīng)的進(jìn)行；（3）需要溫和的條件：適宜的溫度和pH值。高溫、過(guò)酸或者過(guò)堿都會(huì)導(dǎo)致酶因變性而失活，低溫只能抑制酶的活性?！驹斀狻緼、由于酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或者RNA，因此酶的基本組成單位是氨基酸核糖核苷酸，A錯(cuò)誤；B、有些酶促反應(yīng)需要ATP供能，有些不需要，如蛋白質(zhì)在消化酶的作用下的水解反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、酶的專一性是指一種酶只能催化一種或者一類反應(yīng)的進(jìn)行，C錯(cuò)誤；D、在一定范圍內(nèi)溫度升得越高，酶變性的速率越快，D正確。故選D。2、D【解析】

1.實(shí)驗(yàn)組：經(jīng)過(guò)處理的組是實(shí)驗(yàn)組；對(duì)照組：未經(jīng)過(guò)處理的組是對(duì)照組。2.變量：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可以變化的因素稱為變量。自變量：想研究且可人為改變的變量稱為自變量；因變量：隨著自變量的變化而變化的變量稱為因變量；無(wú)關(guān)變量：在實(shí)驗(yàn)中，除了自變量外，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在一些可變因素，能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，這些變量稱為無(wú)關(guān)變量。自變量是可以人為直接改變或施加的變量，因變量是隨自變量變化而變化的量，只能觀察或測(cè)量獲得。要注意無(wú)關(guān)變量應(yīng)該相同且適宜，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要注意單一變量原則和對(duì)照原則。3.本實(shí)驗(yàn)中，分組對(duì)比，自變量可以是溫度（1和2）、催化劑的種類（3和4），因變量是過(guò)氧化氫的分解速度，通過(guò)氣泡產(chǎn)生的速度體現(xiàn)出來(lái)，無(wú)關(guān)變量有過(guò)氧化氫的量、酶的用量等?！驹斀狻緼、加熱能使過(guò)氧化氫分子從常態(tài)轉(zhuǎn)變成容易反應(yīng)的活躍狀態(tài)，不是降低反應(yīng)的活化能，A錯(cuò)誤；B、分析題圖實(shí)驗(yàn)可知，1號(hào)與4號(hào)的單一變量是有無(wú)加催化劑，說(shuō)明酶具有催化作用，B錯(cuò)誤；C、在90℃水浴中過(guò)氧化氫會(huì)分解產(chǎn)生氧氣，且溫度過(guò)高會(huì)影響酶的活性，故組別3號(hào)和4號(hào)實(shí)驗(yàn)不能置于90℃水浴中進(jìn)行，C錯(cuò)誤；D、組別3號(hào)與4號(hào)的單一變量是催化劑的種類，pH、溫度是無(wú)關(guān)變量，D正確。故選D。3、B【解析】

細(xì)胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變。癌細(xì)胞的主要特征：無(wú)限增殖；細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；細(xì)胞表面發(fā)生變化，細(xì)胞膜上的糖蛋白等減少，細(xì)胞間的黏著性降低，細(xì)胞易擴(kuò)散轉(zhuǎn)移；原癌基因主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的進(jìn)程；抑癌基因主要是阻止細(xì)胞不正常的增殖?！驹斀狻緼、細(xì)胞的癌變是原癌基因和抑癌基因突變導(dǎo)致的，A正確；B、正常人體內(nèi)癌變的細(xì)胞通過(guò)免疫監(jiān)控被效應(yīng)T細(xì)胞清除屬于細(xì)胞的凋亡，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞癌變后，細(xì)胞的新陳代謝加快，物質(zhì)交換速率變快，C正確；D、細(xì)胞在癌變的過(guò)程中，細(xì)胞膜的成分發(fā)生改變，有的產(chǎn)生甲胎蛋白、癌胚抗原等物質(zhì)，D正確。故選B。4、B【解析】

由圖可以看出，新型冠狀病毒（2019-nCOV）由RNA、刺突糖蛋白、包膜蛋白和核衣殼蛋白組成。病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，必需寄生在活細(xì)胞內(nèi)繁殖?！驹斀狻緼、2019-nCOV的遺傳物質(zhì)為RNA，單鏈結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易發(fā)生突變，T2噬菌體為DNA病毒，不容易發(fā)生突變，A錯(cuò)誤；B、糖蛋白具有識(shí)別功能，故刺突糖蛋白可能與宿主細(xì)胞特異性受體的識(shí)別和介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞有關(guān)，B正確；C、病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其生命活動(dòng)離不開(kāi)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞膜控制物質(zhì)進(jìn)出的功能是相對(duì)的，2019-nCOV入侵細(xì)胞，并不能說(shuō)明細(xì)胞膜有控制物質(zhì)進(jìn)出的功能，D錯(cuò)誤。故選B。本題結(jié)合新型冠狀病毒（2019-nCOV）的結(jié)構(gòu)，考查病毒的基礎(chǔ)知識(shí)。5、D【解析】

本題結(jié)合模式圖，考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，重點(diǎn)考查細(xì)胞器的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記細(xì)胞中各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)、分布和功能，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，分析題圖：圖中①是高爾基體，②是線粒體，③是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，④是葉綠體?！驹斀狻緼、①是高爾基體，在植物細(xì)胞中與細(xì)胞壁的形成有關(guān)，A正確；B、②是線粒體，是真核生物有氧呼吸的主要場(chǎng)所，B正確；C、③是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成和加工的“車間”，C正確；D、④是葉綠體，是綠色植物細(xì)胞進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所，并不是所有植物細(xì)胞都含有葉綠體，如根部細(xì)胞不含葉綠體，D錯(cuò)誤。故選：D。6、C【解析】

本題考查模擬基因分離定律的實(shí)驗(yàn)，要求考生掌握基因分離的實(shí)質(zhì)，明確實(shí)驗(yàn)中所用的小桶、彩球和彩球的隨機(jī)結(jié)合所代表的含義；其次要求考生掌握性狀分離比的模擬實(shí)驗(yàn)的原理，注意實(shí)驗(yàn)過(guò)程中相關(guān)操作的細(xì)節(jié)，保證每種配子被抓取的概率相等?！驹斀狻緼、需要準(zhǔn)備三種不同顏色的彩球，分別標(biāo)記B、b、Y表示XB、Xb、Y，A正確；

B、若甲桶內(nèi)裝有B、b兩種彩球數(shù)量各10個(gè)，則乙桶內(nèi)裝有兩種彩球的數(shù)量均可超過(guò)10個(gè)，且必有一種是Y彩球，B正確；

C、通過(guò)女性色盲XbXb與男性XBY正常婚配后代男XbY患病、女XBXb正常，這組模擬實(shí)驗(yàn)不能得出人類紅綠色盲具有隔代交叉遺傳的特點(diǎn)，C錯(cuò)誤；

D、為了保證每種配子被抓取的概率相等，每次抓取小球統(tǒng)計(jì)后，應(yīng)將彩球放回原來(lái)的小桶內(nèi)，重復(fù)抓取50-100次，減少實(shí)驗(yàn)的誤差，D正確。

故選C。7、B【解析】

根據(jù)題意可知，當(dāng)有稻瘟病菌入侵水稻時(shí)，在有光條件下，水稻體內(nèi)的LHCB5蛋白發(fā)生磷酸化，加速向葉綠體中積累，經(jīng)過(guò)一系列的變化，會(huì)誘發(fā)活性氧的產(chǎn)生。在活性氧作用下，葉綠體內(nèi)專門的抗稻瘟病基因表達(dá)后，水稻抗稻瘟病的能力會(huì)提高，說(shuō)明水稻具有抗稻瘟病的能力?！驹斀狻緼、LHCB5蛋白第24位的蘇氨酸發(fā)生磷酸化需要光照條件，陰雨連綿、光照不足的天氣LHCB5蛋白發(fā)生磷酸化受阻，活性氧產(chǎn)生的少，抗稻瘟病基因表達(dá)量少，所以水稻更易暴發(fā)稻瘟病，A正確；B、LHCB5蛋白不屬于抗稻瘟病基因的產(chǎn)物，抗稻瘟病基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄、翻譯形成抗稻瘟病的蛋白，B錯(cuò)誤；C、葉綠體是半自主復(fù)制的細(xì)胞器，葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)不都由葉綠體基因控制合成，也有受細(xì)胞核基因控制形成的，C正確；D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定功能，故LHCB5蛋白的功能變化與它的結(jié)構(gòu)變化有關(guān)，D正確。故選B。8、B【解析】

1、甲狀腺功能亢進(jìn)癥簡(jiǎn)稱“甲亢”，是由于甲狀腺合成釋放過(guò)多的甲狀腺激素，造成機(jī)體代謝亢進(jìn)和交感神經(jīng)興奮，引起心悸、出汗、進(jìn)食增多和體重減少的病癥。2、鉀離子主要維持細(xì)胞內(nèi)液滲透壓，鈉離子主要維持細(xì)胞外液滲透壓?！驹斀狻緼、甲亢病人體內(nèi)甲狀腺激素含量高于正常人，通過(guò)負(fù)反饋調(diào)節(jié)可抑制體內(nèi)促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素的分泌，所以甲亢病人體內(nèi)，促甲狀腺激素釋放激素的含量低于正常值，A正確；B、鉀離子主要維持細(xì)胞內(nèi)液滲透壓，神經(jīng)細(xì)胞處于靜息電位時(shí)，細(xì)胞外K+濃度低于細(xì)胞內(nèi)K+濃度，B錯(cuò)誤；C、注射血漿白蛋白會(huì)提高血漿滲透壓，促進(jìn)組織液的吸收以減輕病人水腫癥狀，C正確；D、B淋巴細(xì)胞在分化成漿細(xì)胞的過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)的高爾基體增多，以利于抗體的加工和分泌，D正確。故選B。本題綜合考查內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)、神經(jīng)調(diào)節(jié)、激素調(diào)節(jié)等知識(shí)，要求考生掌握內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)，識(shí)記神經(jīng)調(diào)節(jié)、體溫調(diào)節(jié)的具體過(guò)程，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記層次的考查。二、非選擇題9、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（正常的）Rag2基因含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體（正常的）Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對(duì)序列或遺傳信息）DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】

題圖分析：圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過(guò)程圖解，其中①表示核移植過(guò)程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程，③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療?！驹斀狻浚?）MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件，故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期，即過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。（2）過(guò)程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤，故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。（3）根據(jù)題干信息可知，過(guò)程③中獲取的目的基因是（正常的）Rag2基因，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體，構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對(duì)序列或遺傳信息）設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶，PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶（Taq酶）等。檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可采用抗原一抗體雜交法，即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。熟知圖中個(gè)步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵！掌握關(guān)于基因治療的各個(gè)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識(shí)是解答本題的另一關(guān)鍵！10、PCR耐高溫DNA連接鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)（或篩選出含目的基因的受體細(xì)胞）使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白，不具有遺傳物質(zhì)，不會(huì)出現(xiàn)病毒增殖和感染【解析】

基因工程的基本步驟：1、目的基因的獲??；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建；3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4、目的基因的檢測(cè)與鑒定。【詳解】（1）通常使用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR技術(shù)中應(yīng)用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特點(diǎn)是耐高溫。（2）DNA連接酶能將已切開(kāi)的載體DNA與目的基因連接起來(lái)形成磷酸二酯鍵；標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；由于未處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境DNA分子的能力較弱，所以常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)。（3）基因工程疫苗不含有遺傳物質(zhì)，可以引發(fā)機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)形成抗體和記憶細(xì)胞，但由于其不增殖和感染人體，比常規(guī)疫苗安全性更高。本題考查基因工程的操作步驟和應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)，旨在考查考生的理解能力。11、供重組DNA的鑒定和選擇（或鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)）磷酸二酯鍵沒(méi)有（毛霉、酵母菌）是真核細(xì)胞，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，能夠?qū)δ康幕虻谋磉_(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工-CTCGAG-或-GAGCTC-分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的主要成分（或分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸）破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵（或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì)）【解析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。分析圖解可知，圖中目的基因的中間存在NcoⅠ限制酶的切割位點(diǎn)，因此進(jìn)行重疊延伸PCR是為了防止限制酶NcoI破壞目的基因?！驹斀狻浚?）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時(shí)，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列沒(méi)有專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來(lái)發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢(shì)，因?yàn)槊购徒湍妇鸀檎婧松?，有?duì)目的基因表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，產(chǎn)生的透明質(zhì)酸酶是具有生物活