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微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量控制技術(shù)主要內(nèi)容培養(yǎng)基制備、使用、貯存中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基質(zhì)量控制2010版藥典附錄實(shí)例(培養(yǎng)基質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得影響)CHP與USP得異同點(diǎn)同行得方法介紹新技術(shù)部分菌種在培養(yǎng)基上得典型特征
培養(yǎng)基制備過(guò)程中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基得水化培養(yǎng)基水化時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物得生長(zhǎng);配制培養(yǎng)基最常用得溶劑就是純化水,不能含有任何可能抑制或影響微生物生長(zhǎng)得物質(zhì);培養(yǎng)基制備過(guò)程中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基得溶解在培養(yǎng)基分裝滅菌前,各成分應(yīng)溶解均勻,使用電爐等設(shè)備煮沸培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)用小火加熱,并邊加熱邊攪拌,避免培養(yǎng)基焦化或爆沸溢出。培養(yǎng)基制備過(guò)程中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基得滅菌已配制好得培養(yǎng)基必須立即滅菌濕熱滅菌必須嚴(yán)格控制滅菌溫度和時(shí)間培養(yǎng)基制備過(guò)程中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基得pH微生物必須在適宜得pH范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特性。調(diào)整培養(yǎng)基得pH,應(yīng)用1mol/LNaOH或1mol/LHCl調(diào)整pH,一般滅菌前比最終pH高0、2~0、3。培養(yǎng)基制備過(guò)程中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基得保溫滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長(zhǎng)時(shí)間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過(guò)度滅菌,影響培養(yǎng)基得營(yíng)養(yǎng)成分或選擇性效果。培養(yǎng)基使用過(guò)程中得注意事項(xiàng)培養(yǎng)基得接種平板在接種使用時(shí),表面必須無(wú)明顯潮濕水珠;對(duì)于保存得培養(yǎng)基,需待溫度回復(fù)至室溫后才可使用,并且使用前應(yīng)檢查;培養(yǎng)基貯存過(guò)程中得注意事項(xiàng)干燥培養(yǎng)基應(yīng)遵循先入先出得原則;貯存于陰涼干燥處,避免強(qiáng)光直射;10大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了,稍作休息大家有疑問(wèn)的,可以詢問(wèn)和交流培養(yǎng)基貯存過(guò)程中得注意事項(xiàng)
已配制得培養(yǎng)基建議平板傾注后立即使用;在平板上標(biāo)上制備日期和/或有效期和名稱;固體培養(yǎng)基滅菌后得再融化只允許一次;實(shí)例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)未校正pH時(shí),不同廠家得TSI培養(yǎng)基產(chǎn)硫化氫強(qiáng)度不一;校正pH7、5后,各培養(yǎng)基硫化氫反應(yīng)均有改善,不同廠家得TSI培養(yǎng)基產(chǎn)硫化氫強(qiáng)度仍不相同;實(shí)例三糖鐵培養(yǎng)基(TSI)由于培養(yǎng)基pH太低,本身就就是黃色,細(xì)菌生長(zhǎng)后下層仍為黃色,而斜面變?yōu)槌燃t色,易誤判斷為下層“變?yōu)辄S色”。由此定為發(fā)酵菌,造成誤判;培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)
培養(yǎng)基適用性檢查計(jì)數(shù)培養(yǎng)基
控制菌檢查用培養(yǎng)基
計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查對(duì)照培養(yǎng)基系指按培養(yǎng)基處方特別制備、質(zhì)量?jī)?yōu)良得培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)基適用性檢查。由中國(guó)藥品生物制品檢定所研制及分發(fā)。計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌
白色念珠菌黑曲霉
白色念珠菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查
結(jié)果判定
被檢培養(yǎng)基上得菌落平均數(shù)對(duì)照培養(yǎng)基上得菌落平均數(shù)菌落形態(tài)大小應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基上得菌落一致
計(jì)數(shù)培養(yǎng)基≥70%
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查
促生長(zhǎng)能力抑制能力指示能力
檢查項(xiàng)目控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查增菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查:分別接種不大于100cfu得試驗(yàn)菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定得培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)。與對(duì)照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌應(yīng)生長(zhǎng)良好。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查:取試驗(yàn)菌各0、1ml(含菌數(shù)50~100cfu)分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定得培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基生長(zhǎng)得菌落大小形態(tài)特征應(yīng)一致。控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查培養(yǎng)基抑制能力檢查:接種不少于100cfu得試驗(yàn)菌于被檢培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定得培養(yǎng)溫度及最長(zhǎng)時(shí)間下培養(yǎng),試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長(zhǎng)??刂凭鷻z查用培養(yǎng)基適用性檢查固體培養(yǎng)基指示能力檢查:取試驗(yàn)菌各0、1ml(含菌數(shù)不大于100cfu)分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定得培養(yǎng)溫度及時(shí)間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌生長(zhǎng)得菌落形態(tài)、大小、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查液體培養(yǎng)基指示能力檢查:分別接種不大于100cfu得試驗(yàn)菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中,在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定得培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)。與對(duì)照培養(yǎng)基管比較,被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌生長(zhǎng)情況、指示劑反應(yīng)等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。培養(yǎng)基質(zhì)量控制(2010版藥典)
實(shí)驗(yàn)室配制得培養(yǎng)基得常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目pH適用性檢查試驗(yàn)定期得穩(wěn)定性檢查以確定有效期培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP得異同點(diǎn))計(jì)數(shù)培養(yǎng)基得適用性檢查:CHPUSP菌種得選擇大腸埃希菌銅綠假單胞菌結(jié)果判定比值大于70%1/2—2
培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基大豆消化酪素培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖培養(yǎng)基酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)
培養(yǎng)基質(zhì)量控制(CHP與USP得異同點(diǎn))控制菌檢查用培養(yǎng)基得適用性檢查:CHP與USP方法基本一致,檢查用培養(yǎng)基不同。
同行得方法介紹培養(yǎng)基質(zhì)量控制理化試驗(yàn)方法包括測(cè)定培養(yǎng)基得pH值和凝膠強(qiáng)度微生物學(xué)方法包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基同行得方法介紹固體培養(yǎng)基定量質(zhì)控采用傾注平板法、涂布法、劃線法(半定量法)、改良得Miles-Misra法等測(cè)定生長(zhǎng)情況;定性質(zhì)控評(píng)價(jià)目標(biāo)微生物非目標(biāo)微生物接種以后得生長(zhǎng)情況;同行得方法介紹液體培養(yǎng)基采用定量稀釋法,用目標(biāo)菌和雜菌得混合菌株評(píng)價(jià)選擇性增菌培養(yǎng)基得選擇性;利用OD值評(píng)價(jià)液體培養(yǎng)基生長(zhǎng)率;同行得方法介紹
分值計(jì)算質(zhì)量比較新技術(shù)介紹BioBall就是一個(gè)很小得水溶性球狀物,包含了數(shù)量精確得微生物個(gè)體,她可以使微生物質(zhì)控中得定量控制達(dá)到非常高得精確度。新技術(shù)介紹
BioBall目前可以提供超過(guò)25種菌株;可應(yīng)用于培養(yǎng)基質(zhì)控、方法驗(yàn)證等需要定量質(zhì)控得各個(gè)領(lǐng)域;新技術(shù)介紹BioBallSingleShot提供1次精確接種量BioBallMultiShot-550提供10次精確接種量新技術(shù)介紹BioBallSingleShot每個(gè)BioBallSing
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