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文檔簡介
原核生物prokaryotes
真核微生物eukaryoticmicroorganisms
非細胞(xìbāo)微生物acellularmicroorganisms主要內(nèi)容:形態(tài)與大小,細胞結(jié)構(gòu)與功能,繁殖方式與生活史,分類等第二章微生物種類(zhǒnglèi)及形態(tài)結(jié)構(gòu)共一百四十頁原核(yuánhé)生物Prokaryotes
指一大類細胞核無核膜包裹,只有稱作為核區(qū)(nuclearregion)的裸露DNA的原始單細胞生物。包括:真細菌eubacteria
古細菌archaea共一百四十頁第一節(jié)原核(yuánhé)生物形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能真細菌
1.一般形態(tài)及細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)
2.放線菌
3.藍細菌
4.粘細菌
5.蛭弧菌
6.植原體、支原體、立克次氏體、螺原體和衣原體古生菌
1.概念的提出
2.細胞形態(tài)
3.細胞結(jié)構(gòu)共一百四十頁原核(yuánhé)微生物真細菌(xìjūn)(Eubacteria)古生菌(Archaea)一般細菌放線菌支原體、立克次氏體、衣原體等細胞無核膜包圍的,DNA裸露的一大類。共一百四十頁
一真細菌(xìjūn)一般形態(tài)(xíngtài)及細胞結(jié)構(gòu)放線菌藍細菌粘細菌蛭弧菌支原體、立克次氏體、螺旋體和衣原體共一百四十頁細菌
Bacteria細菌(xìjūn):是一類細胞細而短、結(jié)構(gòu)簡單、細胞壁堅韌、以二等分裂方式繁殖和水生性較強的原核微生物。在分類學上,細菌隸屬于原核生物界(Procaryotae)細菌門(Bacteriophyta)真細菌綱(Eubacteriae)真細菌亞綱(Eubacteria)
共一百四十頁細菌(xìjūn)形態(tài):球狀、桿狀、螺旋狀。自然界中桿菌最多,球菌次之,螺旋狀最少真細菌(xìjūn)(一)一般形態(tài)共一百四十頁真細菌(xìjūn)--球菌(coccus)形態(tài)根據(jù)(gēnjù)分裂方向及相互間連接方式又分為單球菌、雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌等。是分類的一個依據(jù)。右圖自上而下:雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌共一百四十頁真細菌(xìjūn)--球菌(coccus)形態(tài)淋病(lìnbìng)奈瑟氏球菌共一百四十頁真細菌(xìjūn)--球菌(coccus)形態(tài)
肺炎球菌
鏈球菌共一百四十頁真細菌--桿菌(gǎnjūn)(bacillus)形態(tài)細胞呈桿狀或圓柱形,一般其粗細(直徑)比較穩(wěn)定,而長度則常因培養(yǎng)時間、培養(yǎng)條件不同而有較大(jiàodà)變化。分:短桿狀、棒桿狀、梭狀、分枝狀、螺桿狀
桿菌的排列方式常因生長階段和培養(yǎng)條件而發(fā)生變化,一般不作為分類依據(jù)。共一百四十頁真細菌(xìjūn)--桿菌(bacillus)形態(tài)銅綠(tónglǜ)假單胞菌(綠膿桿菌)共一百四十頁
蠟狀芽孢(yábāo)桿菌真細菌(xìjūn)--桿菌(bacillus)形態(tài)
梭狀芽孢桿菌共一百四十頁真細菌(xìjūn)--桿菌(bacillus)形態(tài)破傷風梭菌當機體受到外傷,創(chuàng)口被污染,或分娩時使用不潔器械剪斷臍帶等,本菌可侵入,發(fā)芽繁殖,釋放毒素。發(fā)病后機體呈強直性痙攣、抽搐、可因窒息或呼吸衰竭死亡。據(jù)估計世界上每年約有100萬病例發(fā)生,死亡率在20%左右。在發(fā)展中國家,新生兒破傷風死亡率可高達90%。共一百四十頁真細菌(xìjūn)--螺旋菌(spirilla)形態(tài)弧菌(vibrio):螺旋周數(shù)不足一圈細菌螺菌(spirillum):2~6圈小型(xiǎoxíng)、堅硬的螺旋狀細菌螺旋體(spirochaeta):螺旋周數(shù)超6周,體長柔軟弧菌鞭毛偏端生,螺菌鞭毛兩端生共一百四十頁真細菌(xìjūn)--螺旋菌(spirilla)形態(tài)梅毒(méidú)密螺旋體
霍亂弧菌迂回螺菌共一百四十頁真細菌--異常(yìcháng)形態(tài)環(huán)境條件變化:培養(yǎng)時間過長,細胞衰老、營養(yǎng)缺乏、代謝物積累等物理化學因子刺激,阻礙細胞正常發(fā)育等可造成細胞異常(yìcháng)形態(tài)產(chǎn)生。共一百四十頁
真細菌(xìjūn)--大?。ㄒ驭蘭表示)如:E.Coli長2μm,寬0.5μm……………….1500個相當一粒芝麻長較大細菌,1997年在納米比亞海岸沉積物中發(fā)現(xiàn)的硫細菌(Thiomargaritanamibiensis)0.1~0.3mm,肉眼可見。較小細菌,1998年芬蘭學者E.O.Kajander發(fā)現(xiàn)引起尿結(jié)石的納米細菌(nanobacteria),直徑僅50nm,為E.Coli的1/10,與病毒大小類似(lèisì)。分裂緩慢,三天才分裂一次,是目前所知最小的具有細胞壁的細菌。共一百四十頁真細菌(xìjūn)--大?。ㄒ驭蘭表示)費氏刺骨(cìgǔ)魚菌(0.08mmx0.6mm)(Epulopisciumfishelsoni)1985年發(fā)現(xiàn))共一百四十頁真細菌--大小(dàxiǎo)(以μm表示)細菌(xìjūn)測量方法顯微鏡測微尺顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進行測算共一百四十頁影響測量因素(yīnsù):個體差異干燥、固定使菌縮短染色方法不同大小不同菌齡不同環(huán)境條件,如:滲透壓真細菌--大小(dàxiǎo)(以μm表示)共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)構(gòu)造模式圖
細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)一般結(jié)構(gòu):CW、CM、擬核、CP特殊結(jié)構(gòu):鞭毛、芽孢、莢膜等細胞壁(cellwall):
細胞最外一層堅韌厚實的外被,主要由肽聚糖構(gòu)成。作用:1)維持外形,提高機械強度2)為細胞生長、分裂、運動必需3)阻礙抗生素、蛋白酶等大分子進入4)抗原性、對抗生素和噬菌體的敏感性共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CW共一百四十頁革蘭氏染色(rǎnsè)與CW細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CW丹麥醫(yī)生C.Gram(革蘭)于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細菌的染色方法。共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CW革蘭氏染色(rǎnsè)與CW1、初染:堿性染料結(jié)晶紫初染2、媒染:加碘液。提高染料和細胞間的相互作用使二者結(jié)合得更牢固。3、脫色:酒精或丙酮。脫色后將結(jié)晶紫保留在細胞內(nèi)的為革蘭氏陽性細菌,而陰性細菌的結(jié)晶紫被洗掉,細胞呈無色。4、復(fù)染:用一種與結(jié)晶紫具有不同顏色的堿性染料對涂片進行復(fù)染。沙黃使原來無色的革蘭氏陰性細菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革蘭氏陽性細菌繼續(xù)保持深紫色共一百四十頁特征G–G+強度疏松堅韌厚度薄,5~10nm厚,20~80nm肽聚糖層數(shù)少,1~3層多,多達50層肽聚糖含量少(10~20%)高(50~90%)磷壁酸-+外膜+-類脂質(zhì)含量較高一般無蛋白質(zhì)含量較高無
革蘭氏陽性和陰性細菌(xìjūn)細胞壁構(gòu)造上的比較共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--革蘭氏染色機制革蘭氏染色機制C.Gram1884發(fā)明的鑒別方法。主要(zhǔyào)依據(jù)CW結(jié)構(gòu)不同。結(jié)晶紫初染,碘媒染形成不溶的結(jié)晶紫-碘復(fù)合物。G+因CW厚,肽聚糖交聯(lián)密,乙醇脫色使孔緊密,不含脂類不被乙醇溶解,故為紫色;G-正相反。共一百四十頁
革蘭氏陽性和陰性(yīnxìng)細菌細胞壁構(gòu)造上的比較共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G+CW厚(20~80nm),化學成分簡單(jiǎndān),含90%肽聚糖和10%磷壁酸。共一百四十頁肽聚糖(peptidoglycan)真細菌細胞壁特有成分,如:金葡菌肽聚糖厚20~80nm,40層左右(zuǒyòu)的網(wǎng)格分子交集覆蓋細胞上。細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--G+CWG+肽聚糖立體結(jié)構(gòu)
四肽尾肽橋聚糖:NAG和NAMNAG:N-乙酰葡糖胺NAM:N-乙酰胞壁酸雙糖單位中的β-1,4-糖苷鍵很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解,從而引起細菌因肽聚糖細胞壁的“散架”而死亡。肽聚糖共一百四十頁肽聚糖三部分組成:雙糖單位:NAG和NAM以β-1,4-糖苷鍵連接。溶菌酶水解此位點.四肽尾或四肽側(cè)鏈:四個aa,L型與D型交替連接。L-AlaD-GluL-LysD-Ala肽橋:Gly五肽連接兩個四肽尾細菌肽聚糖100多種,主要(zhǔyào)是肽橋有變化。G+肽聚糖單體(dāntǐ)構(gòu)造目前所知的肽聚糖已超過100種,在這一“肽聚糖的多樣性”中,主要的變化發(fā)生在肽橋上。共一百四十頁磷壁酸(teichoicacid)G+CW特有的酸性多糖,主要(zhǔyào)甘油磷酸或核糖醇磷酸。細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G+CW壁磷壁酸:與肽聚糖共價結(jié)合,含量與培養(yǎng)基有關(guān)。
可用稀酸或稀堿提取。膜磷壁酸:跨越肽聚糖層與CM交聯(lián)。含量與培養(yǎng)條件關(guān)系不大。又叫脂磷壁酸??捎?5%熱酚水提取,也可用熱水從脫脂的凍干細菌中提取。共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--G+CW磷壁酸(teichoicacid)主要(zhǔyào)功能1、磷酸的負電荷提高細胞周圍的Mg2+濃度,保證細胞膜上需要Mg2+合成酶活性2、貯藏磷3、增強某些致病菌對宿主的粘連、避免白細胞吞噬及抗補體4、噬菌體特異吸附受體,賦予G+特異表面抗原5、調(diào)節(jié)細胞內(nèi)自溶素活力,防止細胞自溶共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--G-
CW肽聚糖外膜周質(zhì)空間(kōngjiān)外膜蛋白共一百四十頁1.肽聚糖1~2層肽聚糖(2~3nm),單體(dāntǐ)結(jié)構(gòu)與G+基本同。與G+差別:四肽尾第三個氨基酸為內(nèi)消旋二氨基庚二酸(m-DAP)沒有特殊肽橋,兩單體連接前一四肽尾的第四個氨基酸D-Ala羧基與后一個四肽尾第三氨基酸m-DAP氨基直接連接細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G-
CW共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G-
CW革蘭氏陰性菌肽聚糖共一百四十頁2.外膜
CW外,脂多糖、磷脂、脂蛋白組成。脂多糖(LPS):最外層(wàicénɡ),類脂A、核心多糖、O-抗原組成。
細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G-
CW共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G-
CW功能:類脂A是G–致病物質(zhì)內(nèi)毒素物質(zhì)基礎(chǔ)負電,與磷壁酸相似(xiānɡsì),吸附陽離子LPS結(jié)構(gòu)多變,決定Ag多樣性噬菌體表面吸附受體部分選擇性屏障共一百四十頁3.外膜蛋白如:脂蛋白(lipoprotein)共價鍵使外膜層牢固連接在肽聚糖內(nèi)壁層。孔蛋白(dànbái):36000蛋白亞基構(gòu)成的三聚體,中間1nm孔,控制抗生素進出。已知非特異孔蛋白(任何親水分子進出)和特異孔蛋白(幾種特異物質(zhì)進出)細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G-
CW共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--G-
CW孔蛋白(dànbái)(porins)對進入外膜層的物質(zhì)進行選擇。脂蛋白共一百四十頁4.周質(zhì)空間(kōngjiān)外膜和CM之間,12~15nm厚,膠狀。細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--G-
CW周質(zhì)空間共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--G-
CW周質(zhì)空間含許多周質(zhì)蛋白(periplasmicproteins)如:水解酶、合成酶、運送物質(zhì)(wùzhì)的結(jié)合蛋白、受體蛋白(與細胞趨化性有關(guān))。周質(zhì)蛋白提取:冷休克(滲透休克)法細菌放Tris-EDTA的20%蔗糖溶液保溫,質(zhì)壁分離,快速4℃,0.005MMgCl2稀釋降溫,離心。共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--特殊細菌(xìjūn)CW某些G+的分枝桿菌和諾卡氏菌:細胞壁含有大量霉菌酸(Mycolicacid-一種支鏈羥基(qiǎngjī)脂質(zhì))
(1)與感染能力有關(guān);(2)簡單染色很難使其著色
抗酸性染色:1)細胞與堿性復(fù)紅和苯酚的混合液一起加熱;
2)酸性酒精脫色;
3)美藍復(fù)染;陽性為紅色,陰性為藍色共一百四十頁細菌細胞結(jié)構(gòu)(jiégòu)--特殊細菌CW用抗酸性染色對宿主體內(nèi)的麻風及結(jié)核分枝桿菌病原體進行(jìnxíng)檢測共一百四十頁自發(fā)突變(tūbiàn)或人為得到缺壁細菌。細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CW缺陷細菌缺壁細菌實驗室或宿主體內(nèi)形成自然界長期進化形成——支原體缺壁突變——L-型細菌人工去壁
基本去盡原生質(zhì)體(G+)
部分去掉球狀體(G-)共一百四十頁1.L型細菌1935年英國Lister預(yù)防醫(yī)學研究所發(fā)現(xiàn)而得名。自發(fā)突變形成的CW缺損細菌,細胞膨大,對滲透壓敏感,能變形通過細菌濾器,“油煎蛋”菌落。專指實驗室或宿主自發(fā)突變、遺傳性狀穩(wěn)定(wěndìng)、CW缺陷菌細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CW缺陷細菌大腸桿菌、變形桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、分枝桿菌和霍亂弧菌等20多種細菌中均有發(fā)現(xiàn),被認為可能與針對細胞壁的抗菌治療有關(guān)。共一百四十頁2.原生質(zhì)體人為用溶菌酶除CW或青霉素抑制CW合成得CM包裹的球狀細胞,一般(yībān)G+特點:對環(huán)境條件變化敏感;即使有鞭毛,也不能運動;對噬菌體不敏感;外源基因容易導(dǎo)入;在適宜條件下能形成菌落細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CW缺陷細菌共一百四十頁3.球狀體同樣(tóngyàng)方法處理G-,殘留部分CW的球形體,比原生質(zhì)體抗性強。球狀體特點:(與原生質(zhì)體類似)無完整CW,球狀,滲透壓敏感,革蘭氏染色陰性無法運動,對噬菌體不敏感,比正常細菌易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì),是遺傳和原生質(zhì)體育種好材料細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CW缺陷細菌共一百四十頁支原體(Mycoplasma)自然選擇(zìránxuǎnzé),因其CM含甾醇,較高機械強度。細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CW缺陷細菌共一百四十頁CW內(nèi)側(cè),柔軟、彈性、半透明,半透性薄膜,7~8nm,磷脂(20%~30%)+蛋白(50%~70%)電鏡下,暗-明-暗磷脂極性頭,疏水尾。證明:質(zhì)壁分離、選擇性染色(rǎnsè)、原生質(zhì)體破裂、電子顯微鏡觀察細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CM共一百四十頁共一百四十頁磷脂(línzhī)分子結(jié)構(gòu):有甘油磷脂和鞘磷脂兩種。細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CMCM組成--磷脂
甘油磷脂左到右分別是磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇鞘磷脂
磷脂分子共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CM非極性尾則由長鏈脂肪酸通過酯鍵連接在甘油(ɡānyóu)的C1和C2位上組成,其鏈長和飽和度因細菌種類和生長溫度而異。在極性頭的甘油3C上,不同種微生物具有不同的R基,如磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸或磷脂酰肌醇等。CM組成--磷脂共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CM在生理溫度下,脂肪酸末端排列成固定(gùdìng)的晶格。不飽和脂肪酸的雙鍵可導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)的變形。當磷脂分子中二者同時存在時,在一定條件下就阻礙了形成晶格結(jié)構(gòu)所需要的有秩序排列。膜的流動性很大程度上取決于不飽和脂肪酸的結(jié)構(gòu)和含量。細胞膜上長鏈脂肪酸的鏈長和飽和度因細菌種類和生長溫度而異,通常生長溫度要求越高的種,其飽和度也越高,反之則低。CM組成--磷脂共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CMCM組成(zǔchénɡ)--蛋白質(zhì)具運輸作用的整合蛋白(integralprotein)或內(nèi)在蛋白(intrinsicprotein)具酶促作用的周邊蛋白(peripheralprotein)或膜外蛋白(extrinsicprotein)共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CMCM組成--液態(tài)鑲嵌(xiāngqiàn)模型(fluidmosaicmodel)1)膜主體脂雙分子層2)流動性3)蛋白鑲嵌或貫穿或浮在表面4)不對稱性1972年,辛格(J.S.Singer)和尼科爾森(G.L.Nicolson)共一百四十頁由磷脂(línzhī)分子形成的雙分子膜中加入甾醇類物質(zhì)可以提高膜的穩(wěn)定性細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CM甾醇的一般結(jié)構(gòu)真核生物細胞膜中一般含有膽固醇等甾醇,含量為5%-25%。原核生物與真核生物的最大區(qū)別就是其細胞膜中一般不含膽固醇,而是含有hopanoid(藿烷類化合物)。共一百四十頁1)選擇(xuǎnzé)運輸2)維持滲透壓3)合成CW和糖被重要基地4)細胞產(chǎn)能場所5)鞭毛基體著生點和旋轉(zhuǎn)供能細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CMCM功能
不同種類細菌的膜在其結(jié)構(gòu)和功能方面存在很大差異。這種差異非常巨大且具有特征性,因此膜化學可被用于對細菌進行鑒定。
共一百四十頁間體(mesosome):CM內(nèi)折形成囊狀構(gòu)造(gòuzào)。多見于G+,與青霉素酶、DNA復(fù)制、分裂等有關(guān)細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CM共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CM細胞膜:對所有有生命的細胞來說是必需的,對細菌亦然(yìrán)!維持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)處于穩(wěn)定且高度有序狀態(tài)的物理屏障;細胞重要的代謝活動中心之一;構(gòu)成:磷脂,膜蛋白,甾醇類(細菌藿烷類化合物和真核生物膽固醇)共一百四十頁細胞質(zhì)(cytoplasm):除核區(qū)外的半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)總稱。含水量80%左右(zuǒyòu)。內(nèi)含物(inclusionbody):顆粒狀構(gòu)造,如:貯藏物、氣泡等。細菌細胞結(jié)構(gòu)(jiégòu)--CP和內(nèi)含物細胞質(zhì)主要成分為核糖體、貯藏物、多種酶類和中間代謝物、質(zhì)粒、各種營養(yǎng)物和大分子的單體等,少數(shù)細菌還有類囊體、羧酶體、氣泡或伴孢晶體等。共一百四十頁不同化學成分累積成的不溶沉淀顆粒,貯藏營養(yǎng)物。
糖原:E.Coli、芽孢桿菌、藍細菌等
碳源及能源
PHB:固氮菌、產(chǎn)堿菌、腸桿菌硫粒:紫硫細菌、絲硫細菌、貝氏硫桿菌
氮源:藍細菌的藻青素、藻青蛋白
磷源(異染粒):迂回螺菌、白喉(báihóu)棒桿菌、結(jié)核分枝桿菌細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物貯藏物(reservematerials)貯藏物共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物PHB:不溶水,尼羅蘭或蘇丹黑染色,貯藏能量、碳源、降低細胞(xìbāo)滲透壓。聚-β-羥丁酸(poly-β-hydroxybutyrate,PHB),
1929年被發(fā)現(xiàn),無毒、可塑、易降解,生產(chǎn)醫(yī)用塑料、生物降解塑料的好材料。巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)在含乙酸或丁酸的培養(yǎng)基中生長時,細胞內(nèi)貯藏的PHB可達其干重的60%。貯藏物(reservematerials)共一百四十頁多糖類:在真細菌(xìjūn)以糖原為多,I2染褐色。有的細菌積累淀粉顆粒,碘液染為深藍色。細菌細胞結(jié)構(gòu)(jiégòu)--CP和內(nèi)含物貯藏物(reservematerials)共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物異染粒:又叫迂回體,美藍或甲苯胺藍染為紅紫色,無機偏磷酸聚合物,線狀分子(fēnzǐ)。顆粒大小:0.5~1.0μm,貯藏物(reservematerials)作用:貯存磷和能量,降低滲透壓。共一百四十頁藻青素(cyanophycin):藍細菌中內(nèi)源性氮源,儲備能源(néngyuán),顆粒狀,Arg和Asp1:1的分支多肽。細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物貯藏物(reservematerials)分子量在25000~125000。共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物貯藏(zhùcáng)物(reservematerials)硫粒(sulfurglobules)一些化能自養(yǎng)菌通過氧化還原性的硫化物如H2S,硫代硫酸鹽等產(chǎn)能。環(huán)境中硫素豐富時,胞內(nèi)以折光性很強的硫粒形式積累硫元素。環(huán)境中還原性硫缺乏時硫粒被細菌重新利用。共一百四十頁1975年折疊螺旋體的趨磁細菌中發(fā)現(xiàn)。Fe3O4顆粒(kēlì),外包磷脂、蛋白或糖蛋白膜,大小均勻(20~100nm),每個菌有2~20個。趨磁細菌主要有:水生螺菌屬和嗜膽球菌屬。細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物磁小體(megnetosome)作用:導(dǎo)向,借鞭毛游向有利其生長環(huán)境。共一百四十頁細菌細胞結(jié)構(gòu)(jiégòu)--CP和內(nèi)含物MP實用前景,包括(bāokuò)生產(chǎn)磁性定向藥物或抗體,以及制造生物傳感器等。磁小體(megnetosome)共一百四十頁自養(yǎng)(zìyǎnɡ)菌中多角形或六角形,10nm,含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶,固定CO2作用細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物羧酶體(carboxysome)共一百四十頁無鞭毛(biānmáo)的水生光合菌中含有的囊狀內(nèi)含物。外層是2nm的蛋白膜。作用:調(diào)節(jié)細胞比重使細胞漂浮在最適水層,如:魚腥藍細菌屬、鹽桿菌屬等細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物氣泡(gasvocuoles)氣泡共一百四十頁細菌細胞(xìbāo)結(jié)構(gòu)--CP和內(nèi)含物氣泡(qìpào)(gasvocuoles)氣泡的膜只含Pr無磷脂。二種Pr相互交連,形成一堅硬的結(jié)構(gòu),耐受一定的壓力。膜的外表面親水,而內(nèi)側(cè)絕對疏水,故氣泡只能透氣而不能透過水和溶質(zhì)。共一百四十頁又叫核質(zhì)體、擬核、核基因組等,無核膜的原始細胞核結(jié)構(gòu)(jiégòu)。富爾根染色為紫色的形態(tài)不定,ds-DNA,少量蛋白結(jié)合,0.25~3mm長。功能:遺傳物質(zhì)細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CN共一百四十頁細菌(xìjūn)細胞結(jié)構(gòu)--CN共一百四十頁圓形或橢圓、厚壁、含水少、抗逆強的休眠體。無繁殖能力。耐熱、輻射、化學試劑,等不良環(huán)境。如:肉毒梭菌100℃5個小時以上殺死;芽孢抗uv一般是營養(yǎng)(yíngyǎng)細胞的一倍。細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--芽孢芽孢(spore)芽孢是細菌的休眠體,條件適宜可萌發(fā);多為桿菌,是分類學的重要指標;可通過芽孢染色在普通顯微鏡下觀察到。共一百四十頁細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--芽孢芽孢(yábāo)(spore)共一百四十頁芽孢(yábāo)形態(tài)隱生態(tài)(cryptobiosis):休眠期無任何代謝??纱婊疃嗄辏铋L在琥珀內(nèi)蜜蜂中保存(bǎocún)2500~4000萬年。
桿菌好氧芽孢桿菌屬厭氧梭菌屬
球菌芽孢八疊球菌屬
螺菌孢螺菌屬等細菌特殊構(gòu)造--芽孢芽孢(spore)產(chǎn)芽孢菌共一百四十頁細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--芽孢芽孢(yábāo)(spore)芽孢構(gòu)造模式芽孢菌芽孢囊:產(chǎn)芽孢菌的營養(yǎng)細胞外殼芽孢
孢外壁:脂蛋白,透性差芽孢衣:疏水角蛋白皮層:芽孢肽聚糖、DPA-Ca核心芽孢壁:肽聚糖芽孢質(zhì)膜:磷脂與蛋白芽孢質(zhì):
DPA-Ca、E核區(qū):DNA共一百四十頁皮層(pícéng)(cortex):芽孢占36%~60%,含芽孢肽聚糖,可被溶菌酶水解。7%~10%吡啶二羧酸鈣鹽(DPA-Ca),不含磷壁酸,滲透壓高。核心(core):
含水低(10%~25%),利于抗熱、抗化學物質(zhì)、酶失活。除DPA-Ca外,其他與一般細胞類似。細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--芽孢芽孢(spore)共一百四十頁意義:1)分類、鑒定重要形態(tài)指標;2)便于篩選產(chǎn)芽孢菌,高溫(gāowēn)處理3)菌種保存4)消毒滅菌指標細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--芽孢芽孢(spore)共一百四十頁少數(shù)芽孢(yábāo)菌產(chǎn)生堿溶性晶體-δ內(nèi)毒素,為伴孢晶體。18種aa組成,殺200多種鱗翅目昆蟲,生物殺蟲劑。細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--芽孢伴孢晶體(parasporalcrystal)特點:不溶于水,對蛋白酶類不敏感;容易溶于堿性溶劑。共一百四十頁如何殺蟲????當鱗翅目昆蟲幼蟲吃進去時,在腸道迅速溶解(中腸pH為9.0-10.5),吸附于上皮細胞,引起滲透性喪失,腸道穿孔,腸道中的堿性溶液進入血液,后者pH升高(shēnɡɡāo),昆蟲全身麻痹而死亡細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--芽孢伴孢晶體(parasporalcrystal)共一百四十頁細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--芽孢伴孢晶體(jīngtǐ)(parasporalcrystal)共一百四十頁蘇云金芽孢(yábāo)桿菌(Bacillusthuringiensis)Bt生物殺蟲劑的研究與應(yīng)用:細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--芽孢伴孢晶體(parasporalcrystal)將毒蛋白克隆到植物中構(gòu)建基因工程抗蟲作物;研究如何提高Bt殺蟲劑的生產(chǎn)與應(yīng)用水平液體或固體發(fā)酵生產(chǎn)菌體在農(nóng)田直接施用;共一百四十頁細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--芽孢伴孢晶體(jīngtǐ)(parasporalcrystal)共一百四十頁細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--芽孢伴孢晶體(jīngtǐ)(parasporalcrystal)共一百四十頁Bt生物殺蟲劑的生產(chǎn)和應(yīng)用(yìngyòng)中存在的相關(guān)問題:噬菌體感染嚴重影響發(fā)酵生產(chǎn)的正常進行;Bt殺蟲劑在野外大規(guī)模使用時,日光的紫外線破壞其殺蟲晶體蛋白,顯著影晌殺蟲效果。黑色素具有防紫外線,抗噬菌感染的特性,將細菌產(chǎn)生的黑色素用于Bt殺蟲劑的生產(chǎn)和應(yīng)用,或直接構(gòu)建能自身產(chǎn)生黑色素的Bt工程菌株,細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--芽孢伴孢晶體(parasporalcrystal)共一百四十頁孢囊(cyst,固氮菌產(chǎn)生)、粘液(zhānyè)孢(myxospore,粘球菌產(chǎn)生)、蛭孢囊(bdellocyst,蛭弧菌產(chǎn)生)、外生孢子(exospore,嗜甲基細菌和紅微菌)等。細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--其它休眠構(gòu)造其它休眠構(gòu)造共一百四十頁細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--其它休眠構(gòu)造其它(qítā)休眠構(gòu)造粘液孢子(myxospore)粘細菌(myxobacteria)產(chǎn)生共一百四十頁細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--其它休眠構(gòu)造其它(qítā)休眠構(gòu)造孢囊(cyst)]棕色固氮菌(Azotobactervinelandii)共一百四十頁CW外厚度不定的膠狀物質(zhì),與遺傳、環(huán)境等相關(guān)。按無固定層次、層次厚薄可分為:莢膜(capsule)、微莢膜(Microcapsule)、粘液(zhānyè)層(slimelayer)、菌膠團(zoogloea)。
在壁上有固定層層次厚:大莢膜包在單細胞層次?。何⑶v膜糖被松散,未固定:粘液層包在細胞群:菌膠團細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--糖被糖被(glycocalyx)共一百四十頁細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--糖被糖被(glycocalyx)--作為(zuòwéi)分類鑒定的依據(jù)
莢膜共一百四十頁細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--糖被糖被(glycocalyx)粘液(zhānyè)層菌膠團共一百四十頁多糖、多肽或蛋白組成功能:1)保護:免受干旱損傷、噬菌體吸附、宿主細胞吞噬2)貯藏養(yǎng)料3)透性屏障或離子交換系統(tǒng),免受重金屬離子毒害4)表面附著,如:引起齲齒的唾液鏈球菌和變異鏈球菌5)信息識別6)堆積(duījī)代謝廢物細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--糖被糖被(glycocalyx)共一百四十頁某些細菌體表(tǐbiǎo)長絲狀、波曲的蛋白附屬物,使細菌具運動功能。是分類上重要特征之一。細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--鞭毛鞭毛(flagellum
)暗視野顯微鏡觀察、鞭毛染色光學顯微鏡觀察、半固體穿刺接種、固體接種可以判斷是否有鞭毛鞭毛著生方式共一百四十頁細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--鞭毛鞭毛(biānmáo)(flagellum
)共一百四十頁
一端(yīduān)生一根:霍亂弧菌、蛭弧菌
端生一束:熒光假單孢菌一根:鼠咬熱螺旋體兩端生一束:紅色螺菌、蔓延螺菌腸桿菌科:大腸桿菌、傷寒沙門氏菌
周生方式芽孢桿菌科:枯草桿菌
側(cè)生:反芻月形單孢菌細菌特殊構(gòu)造(gòuzào)--鞭毛鞭毛(flagellum
)分類依據(jù)共一百四十頁鞭毛(biānmáo)運動機制:“旋轉(zhuǎn)論”(rotationtheory)
“揮鞭論”(bendingtheory)細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--鞭毛有關(guān)鞭毛運動的機制曾有過“旋轉(zhuǎn)論”(rotationtheory)和“揮鞭論”(bendingtheory)的爭議。1974年,美國學者西佛曼(M.Silverman)和西蒙(M.Simon)曾設(shè)計了一個“拴菌”試驗(tethered-cellexperiment),設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢牢“拴”在載玻片上,然后在光學顯微鏡下觀察細胞的行為。結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌是在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)(而非伸縮揮動),從而肯定了“旋轉(zhuǎn)論”是正確的。鞭毛(flagellum
)運動機制共一百四十頁細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--鞭毛鞭毛(biānmáo)(flagellum
)運動機制西佛曼(M.Silverman)和西蒙(M.Simon)的“拴菌”試驗(tethered-cellexperiment)共一百四十頁細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--鞭毛鞭毛(flagellum
)運動(yùndòng)方式細菌以推進方式做直線運動(逆時針方向旋轉(zhuǎn))以翻騰形式做短促轉(zhuǎn)向運動(順時針方向旋轉(zhuǎn))共一百四十頁纖細、中空、短直、數(shù)量多的蛋白附屬物功能(gōngnéng):附著物體表面結(jié)構(gòu)簡單,無基粒,菌毛蛋白亞基組成,250~300條/cell有菌毛的細菌以G-致病菌為多。細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--菌毛菌毛(fimbria)共一百四十頁細菌(xìjūn)特殊構(gòu)造--菌毛菌毛(fimbria)共一百四十頁與菌毛同,比菌毛長,數(shù)量少,一至幾根,一般(yībān)是G-雄性菌株功能:傳遞給受體遺傳物質(zhì);有的還是RNA嗜菌體特異吸附受體細菌特殊(tèshū)構(gòu)造--性菌毛性菌毛(pili)共一百四十頁一真細菌(xìjūn)菌絲狀生長和孢子繁殖的陸生性強的原核微生物。一般為G+。高(G+C)%(60~72)群。生長在含水低、營養(yǎng)充分的微堿土壤。土腥味主要是放線菌產(chǎn)生的土腥味素(geosmin)引起(yǐnqǐ)
70%抗生素與人關(guān)系密切:共生固氮酶、維生素、抗癌劑、免疫抑制劑等污水處理、甾體轉(zhuǎn)化、石油脫蠟(二)放線菌(actinomyces)共一百四十頁典型放線菌-鏈霉菌形態(tài)構(gòu)造2000年伯杰氏手冊記載509種。
基內(nèi)菌絲:色淺,較細具有吸收(xīshōu)營養(yǎng)和排泄廢物
氣生菌絲:基內(nèi)菌絲向空中延伸較粗
孢子絲:橫隔分裂產(chǎn)生孢子
一真細菌(xìjūn)(二)放線菌(actinomyces)鏈霉菌結(jié)構(gòu)模式共一百四十頁孢子絲形態(tài)(xíngtài)多樣,直、波曲、鉤狀、螺旋狀等,分類特征第一節(jié)真細菌(xìjūn)(二)放線菌(actinomyces)共一百四十頁一真細菌(xìjūn)(二)放線菌(actinomyces)共一百四十頁
無性孢子如:凝聚(níngjù)孢子,橫隔孢子繁殖方式孢囊孢子,分生孢子
菌絲斷裂常見于液體培養(yǎng)一真細菌(xìjūn)(二)放線菌(actinomyces)共一百四十頁諾卡氏菌屬有營養(yǎng)菌絲,無氣生菌絲。營養(yǎng)菌絲成熟后,橫隔分裂產(chǎn)生(chǎnshēng)分生孢子。還有產(chǎn)生孢囊孢子的放線菌,具有孢囊產(chǎn)生游動孢子的放線菌一真細菌(xìjūn)(二)放線菌(actinomyces)共一百四十頁
固體培養(yǎng)基:菌落(jūnluò)干燥、不透明、致密、有色
液體培養(yǎng)基:培養(yǎng)液中球珠狀菌絲團使培養(yǎng)液清而不混一真細菌(xìjūn)(二)放線菌(actinomyces)群體特征:產(chǎn)生大量分枝和氣生菌絲(如:鏈霉菌)質(zhì)地緊密,與培養(yǎng)基結(jié)合緊,不易挑起不能產(chǎn)生大量菌絲(如:諾卡氏菌)粘著力低粉質(zhì),挑起易粉碎菌落共一百四十頁放線菌菌落(jūnluò)共一百四十頁一真細菌(xìjūn)無鞭毛、含葉綠素a、G—產(chǎn)氧光合作用的大型原核生物。通常3~10μm,最大60μm。細胞形態(tài)多樣,大體分:1)二分裂產(chǎn)生(chǎnshēng)的單細胞,如:粘桿藍細菌屬2)復(fù)分裂產(chǎn)生的單細胞,如:皮果藍細菌屬3)異形胞的菌絲,如:魚腥藍細菌屬4)無異形胞菌絲,如:顫藍細菌屬5)分枝狀菌絲,如:飛氏藍細菌屬(三)藍細菌(cyanobacteria))共一百四十頁構(gòu)造與G—相似(xiānɡsì),含葉綠素、藻膽素和固定CO2羧酶體。水生種類還有氣泡。內(nèi)含物有糖原、PHB、藍細菌肽(氮源貯藏物)、聚磷酸鹽等。一真細菌(xìjūn)(三)藍細菌(cyanobacteria))共一百四十頁一真細菌(xìjūn)(三)藍細菌(cyanobacteria))
藍細菌共一百四十頁幾種特化形式:異形胞:專司固氮功能,位于(wèiyú)細胞鏈中間或末端靜息孢子:形大、壁厚、色深的休眠細胞,富含貯藏物,抵御不良環(huán)境。鏈絲段:藻殖段,長細胞鏈斷裂而成的短鏈段,具繁殖功能。內(nèi)孢子:細胞內(nèi)形成球形或三角形的內(nèi)孢子,成熟后釋放,有繁殖功能。一真細菌(xìjūn)(三)藍細菌(cyanobacteria))共一百四十頁特點:分布廣。河流、湖泊、海洋等水體或與植物共生形態(tài)差異大細胞中有葉綠素a,進行產(chǎn)氧型光合作用營養(yǎng)簡單(jiǎndān),多數(shù)固氮能分泌粘液層,抵抗干旱有的有氣泡,使之漂浮在水體光線充足地方一真細菌(xìjūn)(三)藍細菌(cyanobacteria))共一百四十頁意義:藍細菌較古老,21億~17億年前形成,使地球從無氧到有氧,對好氧生物出現(xiàn)具有重大意義。重大經(jīng)濟價值,如:發(fā)菜念珠藍細菌、普通木耳念珠藍細菌、盤狀螺旋藍細菌、最大螺旋藍細菌等,后兩種被開發(fā)為“螺旋藻”產(chǎn)品。120多種有固氮作用不利(bùlì)方面:湖泊富營養(yǎng)化和海水赤潮,有的產(chǎn)毒素致癌。一真細菌(xìjūn)(三)藍細菌(cyanobacteria))共一百四十頁子實粘細菌,生活史包括:營養(yǎng)(yíngyǎng)細胞階段和休眠體。營養(yǎng)細胞桿狀、柔軟,除無堅硬CW外,其他與細菌類似。無鞭毛、G-。群體形成粘液層,通過固體表面滑行。營養(yǎng)缺乏時會形成子實體。第一節(jié)真細菌(xìjūn)四、粘細菌(Myxobacteria)土壤中常見的腐生菌。共一百四十頁一真細菌(xìjūn)(四)粘細菌(xìjūn)(Myxobacteria)子實體共一百四十頁寄生細菌的細菌,單細胞,弧形或逗號狀,有的螺旋狀;鞭毛一般偏端端生。生活史主要寄生和腐生(fǔshēng)兩個階段。一真細菌(xìjūn)(五)蛭弧菌(Bdellovibrio))共一百四十頁一真細菌(xìjūn)(五)蛭弧菌(hújūn)(Bdellovibrio))侵入宿主方式:猛烈撞擊宿主,附著宿主,然后鉆入周質(zhì)空間,喪失鞭毛。宿主膨脹,然后蛭弧菌勻稱分裂,裂解細胞。共一百四十頁細長、無鞭毛、柔軟,包括圓柱形體、軸索和外膜。二分裂(fēnliè)方式繁殖。共有五個屬,三個屬對人致病的有:疏螺旋體屬、密螺旋體屬和鉤端螺旋體屬分別引起回歸熱病、梅毒、鉤端螺旋體病。一真細菌(xìjūn)(六)螺旋體(Spirochaeta))共一百四十頁無CW,介于獨立生活和細胞(xìbāo)內(nèi)寄生間的最小型原核生物。人或動物的致病菌,有些是腐生種類。生活在污水、土壤或堆肥。侵染植物的稱為類支原體(Mycoplasma-likeorganisms,MLO)一真細菌(xìjūn)(七)支原體(Mycoplasma))共一百四十頁1.細胞很小,150~300nm,光鏡勉強可見2.CM含甾醇3.人工培養(yǎng)要求苛刻,“油煎蛋”菌落4.無CW,G-、形態(tài)易變、滲透壓敏感5.二分裂和出芽(chūyá)繁殖6.含血清、酵母膏和甾醇營養(yǎng)豐富培養(yǎng)基生長7.多數(shù)以糖類為能源,有氧或無氧進行氧化型或發(fā)酵型產(chǎn)能8.基因組小,為大腸桿菌的1/4~1/5,0.6~1.1Mb9.對抑制蛋白合成和破壞含甾體CM的抗生素敏感一真細菌(xìjūn)(七)支原體(Mycoplasma)特點)共一百四十頁一真細菌(xìjūn)(七)支原體(Mycoplasma))無CW,柔軟,可以通過(tōngguò)細菌濾器共一百四十頁1909年美國醫(yī)生(yīshēng)Ricketts發(fā)現(xiàn),專性寄生真核細胞的G-。一真細菌(xìjūn)(
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