檢驗(yàn)科茶堿（Theophyline）測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-XZ-003版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容2012新增作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20120301第1頁(yè)共4頁(yè)編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2012-03-01李永臣2012-03-01章林華2012-03-01茶堿（Theophyline）測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1、檢驗(yàn)申請(qǐng)臨床醫(yī)生需認(rèn)真填寫檢驗(yàn)申請(qǐng)單。2、標(biāo)本采集與處理2.1受檢者準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。2.2容器準(zhǔn)備：潔凈干燥試管。2.3標(biāo)本采集：常規(guī)靜脈采血。2.4抗凝劑選擇：無(wú)。2.5標(biāo)本的標(biāo)記：送檢單和血標(biāo)本試管上在整個(gè)過(guò)程中應(yīng)有統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.6標(biāo)本保存條件2.6.1血清標(biāo)本應(yīng)在8h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),若不能，則試管應(yīng)加蓋，2-8℃保存。2.6.2超過(guò)48h不能檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)置-20℃以下保存。測(cè)定前先融化并混勻。2.6.3已完成測(cè)定的標(biāo)本至少保存7d。2.7標(biāo)本的完整性：如發(fā)生標(biāo)本遺失、原始標(biāo)本管破裂，均應(yīng)有完整的說(shuō)明記錄。2.8標(biāo)本的運(yùn)送/外送2.8.1標(biāo)本的運(yùn)送必須與檢驗(yàn)申請(qǐng)單同時(shí)進(jìn)行。2.8.2運(yùn)送必須包括運(yùn)送記錄，并保存運(yùn)送記錄至少30d。3、標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)3.1少于0.5ml的全血標(biāo)本，或少于0.2ml的血清。3.2對(duì)于測(cè)定和吸樣有干擾的標(biāo)本，如：嚴(yán)重渾濁或粘稠度很大。3.3無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。4、方法原理采用熒光偏振免疫分析法。樣品中氨茶鹼和熒光素標(biāo)記氨茶鹼與一定量氨茶鹼抗體發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)，當(dāng)熒光素標(biāo)記氨茶鹼與氨茶鹼抗體量恒定時(shí)，反應(yīng)平衡后結(jié)合狀態(tài)的熒光素標(biāo)記的氨茶鹼與待測(cè)標(biāo)本中氨茶鹼量成反比。經(jīng)激發(fā)光作用下發(fā)射出的熒光經(jīng)過(guò)偏振儀形成偏振光，其強(qiáng)度與熒光素受激發(fā)時(shí)分子轉(zhuǎn)動(dòng)的速度呈反比。因此，待測(cè)標(biāo)本中氨茶鹼越少，與抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的量越少，熒光偏振程度越強(qiáng)。通過(guò)偏振光的檢測(cè)可以得出樣品中氨茶鹼的量。5、試劑及其他用品準(zhǔn)備5.1試劑盒名稱/產(chǎn)品號(hào)5.2試劑盒來(lái)源：美國(guó)雅培公司試劑5.3試劑盒保存：2-8℃保存?zhèn)溆?.4試劑盒準(zhǔn)備：2-8℃保存?zhèn)溆?.5試劑盒主要成分：熒光素標(biāo)記的氨茶鹼;抗氨茶鹼抗體;緩沖液等5.6其他用品準(zhǔn)備：反應(yīng)杯、清潔液、蒸餾水、一次性使用的樣品吸管。6、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品：采用美國(guó)雅培公司提供定標(biāo)液和質(zhì)控品采用美國(guó)雅培公司提供的定標(biāo)液和質(zhì)控品。7、適用儀器Architecti1000SR美國(guó)雅培公司8、操作步驟裝載試劑→實(shí)驗(yàn)校準(zhǔn)→輸入工作表→質(zhì)控→加載樣本→測(cè)定操作→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。9、主要分析參數(shù)反應(yīng)類型：熒光偏振免疫分析法報(bào)告單位：μg/ml10、結(jié)果計(jì)算分析儀內(nèi)部能自動(dòng)對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行計(jì)算11、可報(bào)告范圍和異常值處理(超出檢測(cè)范圍)根據(jù)臨床需求確定是否稀釋重測(cè)。12、操作性能12.1精密度:3份氨茶鹼質(zhì)控標(biāo)本分別檢測(cè)20d,每天2次,得CV<5.0(%)。12.2準(zhǔn)確度：在兩份已知濃度的氨茶鹼標(biāo)本中分別加入正常人血清或血漿，平均回收率為97.0±0.9%。12.3特異性：干擾率均＜10%。12.4靈敏度：最低濃度可以檢測(cè)至0μg/ml。12.5可報(bào)告范圍:檢測(cè)范圍<40μg/ml。12.6方法的有限性及干擾因素（尚無(wú)）。13、室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則與失控限13.1每星期或更換新瓶或新批號(hào)試劑時(shí)做室內(nèi)質(zhì)控。13.2根據(jù)每批號(hào)質(zhì)控品的均值及失控線，作Levey-Jennings控制圖。質(zhì)控結(jié)果如超過(guò)失控線，查找原因糾正。14、當(dāng)校準(zhǔn)或質(zhì)控結(jié)果達(dá)不到預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)的糾正措施14.1檢查試劑：核對(duì)批號(hào)，有無(wú)受污染的可能。14.2檢查校準(zhǔn)品：核對(duì)批號(hào)，新復(fù)溶應(yīng)確認(rèn)復(fù)溶容量，以往的應(yīng)確認(rèn)保存是否可靠，儀器中校準(zhǔn)品位置是否正確，同一校準(zhǔn)品的其它項(xiàng)目本次校準(zhǔn)是否有效。14.3檢查質(zhì)控品：核對(duì)批號(hào)，新復(fù)溶的應(yīng)確認(rèn)復(fù)溶容量，以往的應(yīng)確認(rèn)保存是可靠的，儀器中質(zhì)控品位置是否正確。同一質(zhì)控品的其它項(xiàng)目本次測(cè)定是否在控。14.4檢查儀器工作是否正常，電壓是否正常。14.5檢查其他因素15、當(dāng)檢驗(yàn)系統(tǒng)（儀器）不能正常工作時(shí)應(yīng)采取的補(bǔ)救措施15.1立即報(bào)告室主任,及時(shí)聯(lián)系維修工程師。15.2由另一臺(tái)同類儀器替代使用。首先應(yīng)做定標(biāo)、質(zhì)控，再進(jìn)行標(biāo)本的檢測(cè)。15.3如果沒有替代儀器，應(yīng)根據(jù)儀器恢復(fù)（修復(fù)）工作的時(shí)間決定。15.3.1如果8h內(nèi)恢復(fù)，則通知發(fā)報(bào)告單處亮出與此項(xiàng)目有關(guān)的報(bào)告單延期到第二天上午發(fā)出的文字告示牌，做好檢測(cè)的準(zhǔn)備工作，連續(xù)工作直至報(bào)告單完成。15.3.2如果當(dāng)天不能恢復(fù)工作，則通知發(fā)報(bào)告單處亮出與此項(xiàng)目有關(guān)的報(bào)告單延期兩天發(fā)出的文字告示牌，待測(cè)的標(biāo)本分離血清加蓋置4℃保存，當(dāng)儀器修復(fù)后馬上檢測(cè).16、參考值/參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平10～20μg/ml,應(yīng)視病情及時(shí)間的具體情況而不同。17、臨床意義 作為支氣管哮喘等防治藥物濃度監(jiān)測(cè)的指標(biāo)，防止藥物過(guò)量。18、結(jié)果審核與相關(guān)項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果必須經(jīng)過(guò)認(rèn)真審核來(lái)確認(rèn)此檢測(cè)結(jié)果是可靠的，審核通過(guò)應(yīng)有審核者簽