檢驗科甘油三酯測定標準操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號：JYK-3-SH-025版本/修訂號：C/0主題內容生化室作業(yè)指導書生效日期：20110701第3頁共5頁編寫制定日期審核審核日期：核準執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清甘油三酯測定標準操作規(guī)程1檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清甘油三酯((縮寫TG)測定；組合項目申請：血脂測定。臨床醫(yī)生根據需要提出檢驗申請。2標本采集與處理2.1標本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗申請單和血標本試管標上統(tǒng)一且唯一的標識符。2.1.3急診標本采集后，在檢驗申請單上填寫標本采集時間。2.1.4標本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負責標本的接收并記錄標本的狀態(tài)，對不合格標本予以拒收。2.1.5下列標本為不合格標本2.1.5.1標本量不足：少于0.3ml的全血標本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血、嚴重渾濁的標本。2.1.5.3無法確認標本與申請單對應關系的。2.1.5.4其他如標識涂改、標本試管破裂等。2.2標本保存2.2.1接收標本后在30min內將標本離心分離出血清。2.2.2標本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定1天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定7天。-20℃可保存數(shù)月；-70℃至少可保存半年；應避免標本反復凍溶。為避免標本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內保存7天。2.3標本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹狀態(tài)。抽血前3天內避免高脂飲食，24小時內不飲酒。2.3.2不建議采集抗凝血標本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。EDTANa2(1mg／mL)抗凝。2.1.5抽血前最好停用影響血脂的藥物（如調脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數(shù)天或數(shù)周，否則應記錄用藥情況。2.1.6妊娠后期各項血脂都會增高，應在產后或終止哺乳后3個月查血才能反映基本血脂水平。3方法原理脂肪酶甘油三酯+H2O甘油+酯肪酸甘油激酶甘油+ATP甘油-3-磷酸+ADP甘油磷酸氧化酶甘油-3-磷酸+O2磷酸二羥丙酮+H2O2過氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+對氯苯酚醌染料+H2O醌染料在500nm有最大吸收，顏色的強度與血清中甘油三酯含量成正比。4試劑及其他用品4.1試劑：甘油三酯(GK-GPO-PAP法)試劑盒（貨號TG6160），由北京利德曼生化股份有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內穩(wěn)定14天。開蓋后避免污染。當試劑變混濁，或者試劑出現(xiàn)明顯的粉紅色，或空白吸光率>0.1時，表明試劑已變質，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準備。4.4試劑盒主要成分：組成濃度緩沖液40mmol/LPH=7.04-氨基安替比林0.25mmol/L酯肪酶>150U/L甘油激酶>0.4U/ml甘油磷酸氧化酶>1.5U/mlATP1mmol/L疊氮鈉0.05%過氧化物酶>5000U/L對氯苯酚25mmol/L穩(wěn)定劑5校準品與校準模式5.1校準品：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校準液（P/N442600），其甘油三酯濃度值可溯源至美國疾病預防與控制中心（CDC）標準參考材料。5.2校準類型和校準點數(shù)目：線性模式，1個校準點。5.3校準周期：校準間隔時間不限。但在：①更換試劑批號或出現(xiàn)質控漂移時；②儀器進行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進行一次校準。5.4校準液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校準液即開即用，無需特殊準備。6質控品與室內質控規(guī)則6.1質控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個不同水平未定值質控血清。6.2質控液重建方法：液態(tài)質控血清，即開即用，無需特殊準備。6.3質控品測定：在每一批標本中測定兩個水平質控血清各一次。6.4質控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內質控標準操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認重新回復到控制狀態(tài)后開始標本檢測。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器。8標本檢測步驟裝載試劑→進行校準→進行質控→輸入標本檢測項目→加載標本→標本測定→結果復核→報告。主要分析參數(shù)參見說明書。10結果計算血清TG濃度（mmol/L）＝×校準液TG濃度(mmol/L)儀器根據此公式自動給出每個標本測定結果。11檢驗結果的報告及范圍11.1結果的報告11.1.1結果經審核后，確認準確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標明結果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學信息。11.1.3如收到標本的質量可能對測定結果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：0.0～11.40mmol/L，超過此范圍的結果報告時必須附有證明該結果準確可靠的文字說明，例如：系根據標本稀釋后重復測定的結果。12操作性能12.1精密度：批內CV<5.0％，總CV<6％；12.2準確度：以參考方法(VANHANDEL法)定值的血清為校準品時，本法測定結果與VANHANDEL法基本一致。12.3靈敏度：甘油三酯為2mmol/L時,顯色吸光度A520nm為：0.141-0.186。12.4線性范圍：0.0～11.40mmol/L。12.5方法的有限性及干擾因素12.5.1血清中游離甘油也可參與此測定反應，一般人血清中游離甘油約占甘油三酯的5％，在常規(guī)測定時應考慮其影響。12.5.2內源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸200mg/ml對測試結果無明顯影響。13參考范圍及醫(yī)學決定水平13.1參考范圍：成年人血清：0.22-1.80mmol/L。13.2醫(yī)學決定水平血清TG含量有隨年齡增高的傾向，成年人血清TG合適水平＜1.69mmol/L；邊緣水平1.70mmol/L～2.25mmol/L；甘油三酯高值2.26mmol/L～5.64mmol/L；甘油三酯極高值＞5.64mmol/L14臨床意義14.1原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高TG血癥與家族性混合型高脂（蛋白）血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見于糖尿病、糖原累積病、甲狀腺機能不足、腎病綜合征、妊娠、口服避孕藥、酗酒等。14.2一般認為單獨高TG不是冠心病的獨立危險因素，同時伴以高TC、高LDL-C、低HDL-C等情況時才有病理意義。目前將血清TG水平作為冠心病的預防和治療時的第二目標。14.3通常將高脂蛋白血癥分為Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等六型，除Ⅱa型外都有高TG，有的TG可高達1000mg/dl以上。14.4影響TG水平的因素有：①年齡與性別，TG水平往往隨年齡上升；②長期高飽合脂肪酸和高熱量飲食；③遺傳因素；④其他，如缺少運動、腦力勞動、精神緊張等可能使TC升高。14.5不應憑一次血脂檢測結果作出血脂水平異常的診斷，有懷疑時應在兩月內進行再次或多次測定，且兩次測定至少要相隔一周；在判斷是否存在高脂血癥或決定防治措施之前，至少應有兩次血脂檢驗的記錄。15結果審核以及分析與相關項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負責檢驗結果的審核。15.2認真審核每一個測定結果，審核者對發(fā)出報告結果的準確性和可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關項目：審核與血脂其他指標和與載脂蛋白等的關系，TG濃度常與HDL-C呈負相關，高甘油三酯的標本肉眼可觀察到渾濁或覆蓋奶酪層。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定通常無威脅生命的‘緊急值’”。17有關引用程序與文件17.1Abbott自動生化分析儀儀器標準操作規(guī)程。17.2生化檢驗室內質控標準操作程序。17.3檢驗結果審核程序。17.4標本