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埃博拉病毒實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告一、生物因子(一)一般特性埃博拉病毒(Ebolavirus)屬絲狀病毒科,為不分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒,是一種導(dǎo)致急性出血性傳染病——埃博拉出血熱(EbolaHemorrhagicFever,EHF)的病原體。埃博拉出血熱病死率高,可達(dá)50%~90%。該病于1976年在非洲首被發(fā)現(xiàn),目前主要在烏干達(dá)、剛果、加蓬、蘇丹、科特迪瓦、南非、幾內(nèi)亞、利比里亞、塞拉利昂等非洲國(guó)家流行。2014年2月初,幾內(nèi)亞?wèn)|南部馬桑達(dá)省出現(xiàn)發(fā)熱死亡病例,周邊省份和首都地區(qū)隨后也發(fā)現(xiàn)類似病例。3月22日,馬桑達(dá)地區(qū)采集的12份疑似病例的樣本在法國(guó)進(jìn)行了檢測(cè)并得到最終確認(rèn),從6例病人樣本中檢測(cè)出埃博拉病毒,并與扎伊爾型有較強(qiáng)的同源性,隨后疫情持續(xù)擴(kuò)散,至7月份,疫情已經(jīng)在幾內(nèi)亞、利比里亞和塞拉利昂三個(gè)國(guó)家內(nèi)蔓延,并波及尼日利亞。截至2014年8月4日,上述四個(gè)國(guó)家的埃博拉出血熱病例數(shù)累計(jì)已達(dá)1211例,其中死亡數(shù)為932例。病例分布如下,幾內(nèi)亞有495例,其中確診病例有351例,疑似病例有133例,可疑病例有11例,死亡數(shù)為363例;利比里亞有516例,其中確診病例有143例,疑似病例有252例,可疑病例有121例,死亡數(shù)為282例;塞拉利昂有691例,其中確診病例有576例,疑似病例有49例,其中可疑病例有66例,死亡數(shù)為有286例;尼日利亞有9例,疑似病例有2例,可疑病例有7例,死亡數(shù)為1例,無(wú)確診病例。埃博拉病毒呈長(zhǎng)絲狀體,可呈桿狀、絲狀、“L”形等多種形態(tài)。毒粒長(zhǎng)度平均為lOOOnm,直徑約lOOnm。病毒有脂質(zhì)包膜,包膜上有呈刷狀排列的突起,主要由病毒糖蛋白組成。埃博拉病毒基因組是不分節(jié)段的負(fù)鏈RNA,大小為18.9kb,編碼7個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和1個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白。編碼的蛋白包括包膜糖蛋白、核衣殼蛋白、基質(zhì)蛋白VP24和VP40,2種非結(jié)構(gòu)蛋白VP30和VP35,以及病毒多聚酶L。其基因排列順序?yàn)?3’引導(dǎo)區(qū)-NPVP35-VP40-GP-VP30-VP24-L-5’末端區(qū)。(二)來(lái)源1976年,在同時(shí)發(fā)生的兩起疫情中首次發(fā)現(xiàn)埃博拉病毒,一起發(fā)生在剛果民主共和國(guó)靠近埃博拉河的一個(gè)村莊,另一起出現(xiàn)在蘇丹的一個(gè)邊遠(yuǎn)地區(qū)。目前發(fā)現(xiàn)的病毒感染病例主要發(fā)生在烏干達(dá)、剛果、加蓬、蘇丹、科特迪瓦、南非、兒內(nèi)亞、利比里亞、塞拉利昂等非洲國(guó)家。目前認(rèn)為埃博拉病毒的自然宿主為狐蝠科的果蝠,尤其是錘頭果蝠、富氏前肩頭果蝠和小領(lǐng)果蝠,但其在自然界的循環(huán)方式尚不清楚。感染埃博拉病毒的人和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物為該病傳染源。人主要通過(guò)接觸病人或感染動(dòng)物的體液、分泌物和排泄物等而感染。(三)傳染性埃博拉病毒為高傳染性病毒,病死率最高可達(dá)50%~90%。病人在潛伏期內(nèi)沒(méi)有傳染性,一旦開(kāi)始出現(xiàn)癥狀,就具有傳染性。(四)傳播途徑接觸傳播是埃博拉病毒最主要的傳播途徑??梢酝ㄟ^(guò)接觸病人和被感染動(dòng)物的各種體液、分泌物、排泄物及其污染物而感染。病人感染后血液中可維持很高的病毒含量,醫(yī)護(hù)人員在治療、護(hù)理病人,或處理病人尸體過(guò)程中,如果沒(méi)有嚴(yán)格的防護(hù)措施,容易受到感染。醫(yī)院內(nèi)傳播是導(dǎo)致埃博拉出血熱暴發(fā)流行的重要因素。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,埃博拉出血熱患者的精液中可分離到病毒,故存在性傳播的可能性。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,埃博拉病毒可通過(guò)氣溶膠傳播。雖然尚未證實(shí)有通過(guò)性傳播和空氣傳播的病例發(fā)生,但應(yīng)予以警惕,做好防護(hù)。(五)易感性人群普遍易感,主要集中在成年人,因暴露或接觸機(jī)會(huì)多。易患人群為醫(yī)務(wù)人員、與患者密切接觸的家人或其他人、在葬禮上按照禮儀與死者尸體有直接接觸的送葬者和與熱帶雨林的死亡動(dòng)物有直接接觸的獵人。(六)潛伏期潛伏期為2~2ld,一般為5~12d。尚未發(fā)現(xiàn)潛伏期有傳染性,病人出現(xiàn)癥狀的時(shí)候具有傳染性。(七)劑量—效應(yīng)關(guān)系尚不清楚病毒的這種特性。但該病毒具有高度感染性,需要做好嚴(yán)密防護(hù),在BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)參照SARS冠狀病毒的個(gè)人防護(hù)要求,特別要注意避免接觸未滅活的生物樣本。(八)致病性1.臨床表現(xiàn)患者急性起病,高熱、畏寒、極度乏力、頭痛、肌痛、咽痛、結(jié)膜充血及相對(duì)緩脈。隨后可出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、黏液便或血便、皮疹等表現(xiàn)。重癥患者可出現(xiàn)神志改變,如嗜睡、譫妄等癥狀,并可出現(xiàn)不同程度的出血表現(xiàn),包括鼻、口腔、結(jié)膜、胃腸道、陰道、皮膚出血或咯血、血尿等,可出現(xiàn)低血壓、體克等。同時(shí),可并發(fā)心肌炎、肺炎和其他多臟器受損。2.病理特征絲狀病毒具有嗜細(xì)胞性,主要是網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和間質(zhì)組織細(xì)胞,尤其是肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。病毒在全身各組織器官中分布,肝、腎、脾、肺中含量最高。病理剖檢變化因毒株不同而有很大差異。常見(jiàn)的病理改變是皮膚、黏膜、臟器的出血,多器官可以見(jiàn)到灶性壞死,肝細(xì)胞點(diǎn)、灶樣壞死是本病的典型特點(diǎn),可見(jiàn)小包涵體和凋亡小體。(九)變異性埃博拉病毒可分為扎伊爾型、蘇丹型、本迪布焦型、塔伊森林型和萊斯頓型。除萊斯頓型對(duì)人不致病外,其余四種亞型感染后均可導(dǎo)致人發(fā)病。不同亞型病毒基因組核苷酸構(gòu)成差異較大,但同一亞型的病毒基因組相對(duì)穩(wěn)定。(十)穩(wěn)定性埃博拉病毒在常溫下較穩(wěn)定,對(duì)熱有中等度抵抗力,56℃不能完全滅活,60℃滅活病毒需要1h;紫外線照射2min可使之完全滅活。對(duì)化學(xué)藥品敏感,乙醚、去氧膽酸鈉、β-丙內(nèi)酯、福爾馬林、次氯酸鈉等消毒劑可以完全滅活病毒的感染性;鈷60照射、γ射線也可使之滅活。埃博拉病毒在血液樣本或病尸中可存活數(shù)周;4℃條件下存放5周可使其感染性保持不變,8周滴度降至一半。-70℃條件下可長(zhǎng)期保存。(十一)預(yù)防和治療1.預(yù)防預(yù)防要針對(duì)傳染源、傳播途徑、易感人群三個(gè)環(huán)節(jié),采取以管理和控制傳染源、預(yù)防控制醫(yī)院內(nèi)傳播為主的綜合性防治措施。(1)控制傳染源對(duì)疑診病例和病人,應(yīng)收入負(fù)壓病房進(jìn)行隔離治療。對(duì)其排泄物及污染物品均嚴(yán)格消毒。(2)切斷傳播途徑嚴(yán)格規(guī)范污染環(huán)境的消毒工作,嚴(yán)格標(biāo)本采集程序,病毒的分離和培養(yǎng)應(yīng)在BSL-4實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)在ABSL-4實(shí)驗(yàn)室、未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在BSL-3實(shí)驗(yàn)室、滅活材料的操作在BSL-2實(shí)驗(yàn)室、無(wú)感染性材料的操作在BSL-1實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。按照《醫(yī)院感染管理規(guī)范》的要求做好院內(nèi)感染控制。(3)保護(hù)易感人群加強(qiáng)個(gè)人防護(hù),使用防護(hù)裝備。目前尚無(wú)獲準(zhǔn)使用的埃博拉疫苗,有幾種疫苗正在進(jìn)行臨床試驗(yàn),但目前尚無(wú)任何疫苗可用于臨床。2.治療目前尚缺乏特效治療方法,主要是對(duì)癥和支持治療。注意水、電解質(zhì)平衡,預(yù)防和控制出血,控制繼發(fā)感染,治療腎功能衰竭和出血等并發(fā)癥。危重病例需要加強(qiáng)支持性護(hù)理,病人往往會(huì)脫水,需要以電解質(zhì)溶液進(jìn)行靜脈輸液或口服補(bǔ)液。尚沒(méi)有特殊的治療方法,新的藥物療法正在進(jìn)行評(píng)估。(十二)事故分析迄今為止,國(guó)內(nèi)外還未報(bào)道實(shí)驗(yàn)室感染事件。一旦發(fā)生此類事件,應(yīng)按照體系規(guī)定程序進(jìn)行報(bào)告。對(duì)開(kāi)展埃博拉病毒檢測(cè)、科研工作的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行嚴(yán)格控制,確保實(shí)驗(yàn)室生物安全。從事埃博拉病毒科研、檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)生物安全管理,應(yīng)建立健全烈性傳染病病原管理組織;制訂和完善埃博拉病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全的技術(shù)操作規(guī)范;加強(qiáng)可能暴露于埃博拉病毒或潛在感染性材料的相關(guān)業(yè)務(wù)人員的生物安全知識(shí)培訓(xùn)和風(fēng)險(xiǎn)意識(shí)教育;切實(shí)落實(shí)各項(xiàng)管理制度,預(yù)防和控制實(shí)驗(yàn)室等造成埃博拉病毒的感染和傳插的渠道;建立實(shí)驗(yàn)室工作人員可疑癥狀報(bào)告的制度,并保證他們能及時(shí)被定點(diǎn)專科醫(yī)院收治。二、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與風(fēng)險(xiǎn)控制(一)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)BSL-3實(shí)驗(yàn)室從事埃博拉病毒的核酸檢測(cè)與血清學(xué)檢測(cè)。1.埃博拉病毒的核酸檢測(cè)的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施(見(jiàn)表8-37)表8-37埃博拉病毒的核酸檢測(cè)的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施序號(hào)實(shí)驗(yàn)操作可能風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生概率發(fā)生范圍控制措施殘留風(fēng)險(xiǎn)標(biāo)本處理1.標(biāo)本轉(zhuǎn)移至生物安全柜離心管掉落破裂或破碎,感染性物質(zhì)濺出,同時(shí)可能產(chǎn)生氣溶膠低生物安全柜內(nèi)實(shí)驗(yàn)操作人員在標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)的基礎(chǔ)上,要做好接觸防護(hù)和呼吸道防護(hù)。標(biāo)本或血清處理時(shí)要?jiǎng)幼鬏p柔,應(yīng)事先在操作臺(tái)下面鋪新鮮配制的含有5000mg/L有效氯的次氯酸鈉紗布。一旦發(fā)生上述意外,馬上將污染的紗布或紙棄入含5000mg/L有效氯的次氯酸鈉的消毒缸內(nèi)并立即消毒臺(tái)面及更換新的紗布或吸水紙低2.核酸提取1.液體濺出,離心管滑落,打翻標(biāo)本2.標(biāo)本轉(zhuǎn)移時(shí),吸頭漏液3.加樣時(shí),感染性液體濺出,污染離心管外部、手臂或生物安全柜臺(tái)面4.產(chǎn)生氣溶膠低生物安全柜內(nèi)或離心機(jī)在操作時(shí),動(dòng)作要小心,以防開(kāi)蓋時(shí)離心管滑落、打翻或?yàn)R出使用移液器時(shí),確保吸頭與移液器連接緊密樣品打開(kāi)前進(jìn)行短暫離心,去除樣品管蓋上的殘留,避免開(kāi)蓋時(shí)樣品濺出使用帶濾芯的吸管,動(dòng)作要輕緩。若滴落在生物安全柜臺(tái)面,應(yīng)及時(shí)消毒處理,以5000mg/L有效氯的次氯酸鈉紗布、75%的酒精紗布處理。若皮膚暴露于感染材料,應(yīng)立即用清水或肥皂水徹底清洗,或用0.5%碘伏消毒液、75%酒精氯己定擦拭消毒,使用清水或肥皂水徹底清洗;黏膜應(yīng)用大量清水沖洗或0.05%碘伏沖洗。若手接觸感染材料,用75%的酒精消毒后脫去最外層的手套,換一副新手套,并用75%的酒精紗布擦拭管壁,將污染的紗布放在生物安全柜內(nèi)的垃圾袋內(nèi),封口后移出生物安全柜,進(jìn)行高壓處理5.實(shí)驗(yàn)室采用帶有安全套蓋的離心套筒,如離心過(guò)程中發(fā)生收集管破裂時(shí),應(yīng)關(guān)閉電源,在生物安全柜內(nèi)處理相關(guān)感染性物質(zhì),徹底清潔和消毒離心機(jī)套桶。如果在不帶有安全套筒的離心機(jī)操作,離心過(guò)程中發(fā)生收集管破裂時(shí),應(yīng)關(guān)閉電源并且保持離心機(jī)蓋子關(guān)閉30min。如果在機(jī)器停止運(yùn)行后發(fā)生了破裂時(shí),離心機(jī)蓋應(yīng)立即關(guān)閉并保持30min,并及時(shí)通知本實(shí)驗(yàn)室生物安全員采取相應(yīng)措施。2.埃博拉病毒的血清學(xué)檢測(cè)的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施(見(jiàn)表8-38)表8-38埃博拉病毒的血清學(xué)檢測(cè)的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施序號(hào)實(shí)驗(yàn)操作可能風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生概率發(fā)生范圍控制措施殘留風(fēng)險(xiǎn)1.標(biāo)本處理1.標(biāo)本轉(zhuǎn)移至生物安全柜離心管掉落破裂或破碎,感染性物質(zhì)濺出,同時(shí)可能產(chǎn)生氣溶膠低生物安全柜內(nèi)實(shí)驗(yàn)操作人員在標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)的基礎(chǔ)上,要做好接觸防護(hù)和呼吸道防護(hù)。標(biāo)本或血清處理時(shí)要?jiǎng)幼鬏p柔,應(yīng)事先在操作臺(tái)下面鋪新鮮配制的含有5000mg/L有效氯的次氯酸鈉紗布。一旦發(fā)生上述意外,馬上將污染的紗布或紙棄入含5000mg/L有效氯的次氯酸鈉的消毒缸內(nèi)并立即消毒臺(tái)面及更換新的紗布或吸水紙低2.對(duì)標(biāo)本或血清進(jìn)行稀釋、震蕩產(chǎn)生氣溶膠和濺出液體低生物安全柜內(nèi)稀釋與震蕩時(shí)要?jiǎng)幼鬏p柔,應(yīng)事先在操作臺(tái)下面鋪新鮮配制的含有5000mg/L有效氯的次氯酸鈉紗布。一旦發(fā)生上述意外,馬上將污染的紗布或紙棄入含5000mg/L有效氯的次氯酸鈉的消毒缸內(nèi)并立即消毒臺(tái)面及更換新的紗布或吸水紙低2.抗原抗體反應(yīng)與結(jié)果測(cè)定過(guò)程1.吸取稀釋后標(biāo)本或血清至微孔或抗原片標(biāo)本滴落臺(tái)面或抽吸的過(guò)程,形成氣溶膠低生物安全柜內(nèi)使用帶濾芯的吸管,動(dòng)作要輕緩。若滴落在生物安全柜臺(tái)面,應(yīng)及時(shí)消毒處理,以5000mg/L有效氯的次氯酸鈉紗布、75%的酒精紗布處理。若皮膚暴露于感染材料,應(yīng)立即用清水或肥皂水徹底清洗,或用0.5%碘伏消毒液、75%酒精氯己定擦拭消毒,使用清水或肥皂水徹底清洗;黏膜應(yīng)用大量清水沖洗或0.05%碘伏沖洗。若手接觸感染材料,用75%的酒精消毒后脫去最外層的手套,換一副新手套,并用75%的酒精紗布擦拭管壁,將污染的紗布放在生物安全柜內(nèi)的垃圾袋內(nèi),封口后移出生物安全柜,進(jìn)行高壓處理低2.移至孵箱孵育加樣后微孔板或抗原片跌落,形成氣溶膠低實(shí)驗(yàn)室污染區(qū)將微孔板或抗原片置濕盒中,封口膜妥善密封,轉(zhuǎn)移時(shí)使用轉(zhuǎn)移托盤(pán)低3.微孔板或抗原片洗滌洗滌后的液滴滴落臺(tái)面或抽吸的過(guò)程形成氣溶膠低生物安全柜內(nèi)使用帶濾芯的吸管,動(dòng)作要輕緩。若滴落在生物安全柜臺(tái)面,應(yīng)及時(shí)消毒處理,以5000mg/L有效氯的次氯酸鈉紗布、75%的酒精紗布處理。若皮膚暴露于感染材料,應(yīng)立即用清水或肥皂水徹底清洗,或用0.5%碘伏消毒液、75%酒精氯己定擦拭消毒,使用清水或肥皂水徹底清洗;黏膜應(yīng)用大量清水沖洗或0.05%碘伏沖洗。若手接觸感染材料,用75%的酒精消毒后脫去最外層的手套,換一副新手套,并用75%的酒精紗布擦拭管壁,將污染的紗布放在生物安全柜內(nèi)的垃圾袋內(nèi),封口后移出生物安全柜,進(jìn)行高壓處理低4.酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度或熒光顯微鏡觀察移動(dòng)過(guò)程跌落導(dǎo)致溢出或形成氣溶膠低實(shí)驗(yàn)室污染區(qū)放置托盤(pán)中,移動(dòng)時(shí)輕緩,注意安全。此時(shí)微孔板或抗原片中殘留感染性病毒的可能已極低。溢出或滴落時(shí),停止實(shí)驗(yàn),先用一塊布或紙巾蓋上,再把消毒劑倒到上面,實(shí)驗(yàn)人員先退出實(shí)驗(yàn)室,至少靜置30min,然后才可把布和紙巾等物品清理走。另應(yīng)注意反應(yīng)液的化學(xué)危害或抗原片跌落破裂導(dǎo)致的物理傷害低(二)設(shè)施設(shè)備設(shè)施設(shè)備中,生物安全柜、水浴箱、離心機(jī)、振蕩器、冰箱、高壓滅菌器的可能風(fēng)險(xiǎn)以及控制措施見(jiàn)表8-39。表8-39設(shè)施、設(shè)備中的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施儀器名稱可能風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生可能性后果描述控制措施生物安全柜氣流異??赡苄缘蛯?duì)實(shí)驗(yàn)人員及實(shí)驗(yàn)室的高度危險(xiǎn)操作培訓(xùn),設(shè)備定期維護(hù)。使用時(shí),觀察窗不要抬得過(guò)高;柜內(nèi)盡量少放儀器和物品,不要阻塞后面氣口處的空氣流通;禁止在柜內(nèi)使用酒精燈;在柜內(nèi)的所有工作都要在工作臺(tái)中央或后部進(jìn)行,并且通過(guò)觀察窗能看見(jiàn)柜內(nèi)的操作;盡量減少操作者后面的人員走動(dòng),操作者不要頻繁移動(dòng)及揮動(dòng)手臂以免破壞定向氣流;前面的空氣柵格不要被吸管或其他材料擋住;生物安全柜的風(fēng)扇在工作開(kāi)始前及操作結(jié)束后至少要再運(yùn)行5min離心機(jī)離心管發(fā)生破裂,氣溶膠釋放可能性低人員接觸污染配備離心機(jī)有安全套筒,可轉(zhuǎn)移到生物安全柜內(nèi)處理振蕩器產(chǎn)生氣溶膠、泄漏和容器破裂可能性低人員樣品接觸污染必須使用塑料的器皿,因?yàn)椴AЭ赡軙?huì)破裂而釋放出感染性物質(zhì),而且可能傷及操作者。在操作結(jié)束后,容器應(yīng)在生物安全柜里才能重新開(kāi)啟水浴箱產(chǎn)生氣溶膠、水浴箱溫度不準(zhǔn)可能性低病毒滅活不徹底,人員接觸污染操作輕柔,樣本密封后放入水浴箱,樣本開(kāi)蓋操作在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行;水浴箱定期進(jìn)行校準(zhǔn)冰箱保存管泄漏可能性極低人員樣品接觸污染操作培訓(xùn),做好個(gè)人防護(hù)高壓滅菌器人員接觸高溫部位,發(fā)生燙傷可能性中等人員發(fā)生燙傷操作培訓(xùn),做好個(gè)人防護(hù)(三)人員1.健康監(jiān)測(cè)和健康狀況評(píng)估實(shí)驗(yàn)人員、輔助人員、后勤保障人員上崗前應(yīng)建立個(gè)人健康檔案,進(jìn)行定期的健康體檢和相應(yīng)的免疫接種。人員的健康狀況應(yīng)當(dāng)符合實(shí)驗(yàn)室的安全工作要求。從事埃博拉病毒研究的實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作。出現(xiàn)下列情況時(shí)不能進(jìn)入:患發(fā)熱性疾??;感冒、上呼吸道感染,或其他導(dǎo)致抵抗力下降的情況;妊娠;已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作4h以上,或其他原因造成的疲勞狀態(tài);心理素質(zhì)不穩(wěn)定的也盡量避免進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室;未經(jīng)充分專業(yè)操作技能培訓(xùn)的人員。埃博拉病毒實(shí)驗(yàn)人員的監(jiān)測(cè)期從開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)當(dāng)日開(kāi)始,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束后3周。期間應(yīng)每日早晚測(cè)量體溫并觀察相應(yīng)癥狀。若操作者或其所在實(shí)驗(yàn)室的工作人員在此期間出現(xiàn)發(fā)熱、出血、頭疼、嘔吐、腹瀉等類似癥狀,則應(yīng)被視為可能發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染,應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。采取早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早隔離、早治療以控制管理傳染源為主的綜合性防治措施,并在2h內(nèi)報(bào)告所在地的縣級(jí)人民政府衛(wèi)生主管部門。對(duì)疑似感染者,采取嚴(yán)格的隔離防護(hù)措施,送至指定醫(yī)院就診,并做好轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程的安全隔離和防護(hù)、消毒工作。另外措施有實(shí)驗(yàn)活動(dòng)前采集本底血清樣本.實(shí)驗(yàn)活動(dòng)期間每天測(cè)體溫,必要時(shí)采集血液樣本進(jìn)行前后對(duì)比檢測(cè),以確定是否感染。人員資質(zhì)和培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)人員、輔助人員、后勤保障人員上崗前均須接受嚴(yán)格的生物安全,以及相關(guān)操作的技術(shù)培訓(xùn),包括實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、設(shè)備、個(gè)體防護(hù)、操作等培訓(xùn)。同時(shí),必須熟悉和嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的管理要求。人員資質(zhì)和培訓(xùn)的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施見(jiàn)表8-40。表8-40人員資質(zhì)和培訓(xùn)的風(fēng)險(xiǎn)和控制措施潛在風(fēng)險(xiǎn)因素發(fā)生可能性后果嚴(yán)重性控制措施實(shí)驗(yàn)人員技術(shù)水平技術(shù)培訓(xùn)不足或操作不熟練導(dǎo)致誤操作嚴(yán)重實(shí)驗(yàn)人員需接受相關(guān)技術(shù)培訓(xùn)并考核合格后方能上崗;定期進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)及演練人員健康水平實(shí)驗(yàn)人員身體狀況不佳或患有基礎(chǔ)疾病嚴(yán)重實(shí)驗(yàn)室工作人員每年參加體檢,預(yù)留本底血清標(biāo)本;實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室前需測(cè)量體溫,體溫高于37℃者不能進(jìn)入未經(jīng)授權(quán)人員未經(jīng)授權(quán)人員進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)重進(jìn)入BSL-3實(shí)驗(yàn)室須得到相關(guān)部門和實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的批準(zhǔn),應(yīng)詳細(xì)登記出入時(shí)間,并保證兩名以上的人員同時(shí)進(jìn)入(四)意外事件、事故帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)埃博拉病毒的安全防護(hù)重點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中避免與感染材料直接接觸,盡量減少氣溶膠的產(chǎn)生和對(duì)相關(guān)人員的吁吸道的保護(hù),在標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)的基礎(chǔ)上,要做好接觸防護(hù)和呼吸道防護(hù)。1.臨床標(biāo)本的處理疑似埃博拉病毒感染的病人的分泌物、排泄物和血液標(biāo)本等這些標(biāo)本當(dāng)中有可能含活病毒,但濃度不詳。對(duì)此類臨床標(biāo)本的操作都必須在實(shí)驗(yàn)室生物安全柜內(nèi)操作,實(shí)驗(yàn)操作人員按三級(jí)防護(hù)級(jí)別進(jìn)行個(gè)人防護(hù)。2.涉及活病毒的操作病毒培養(yǎng)在BSL-4實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)在ABSL-4實(shí)驗(yàn)室、未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在BSL-3實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。3.已滅活的病毒或標(biāo)本的操作已滅活的病毒或血清標(biāo)本等,用于病毒特異性核酸、抗原、抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)時(shí),可在BSL-2級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。實(shí)驗(yàn)操作人員按二級(jí)防護(hù)級(jí)盡量使用塑料材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)物品,避免使用尖銳物品和利器。必須使用時(shí)應(yīng)倒放在耐扎的容器內(nèi),使用后收集在特定的帶蓋的銳器容器內(nèi)保存至最后消毒處理或毀掉。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。嚴(yán)格禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。禁止徒手處理破損或打碎的玻璃器材。對(duì)實(shí)驗(yàn)室的臺(tái)面,應(yīng)當(dāng)對(duì)其銳角進(jìn)行處理,如加裝桌角保護(hù)器或?qū)ψ澜沁M(jìn)行打磨等,使桌角保持光滑,避免割傷皮膚。實(shí)驗(yàn)室操作后的消毒措施涉及臨床標(biāo)本和活病毒的實(shí)驗(yàn)操作,在實(shí)驗(yàn)完畢后用含0.5%有效氯的次氯酸鈉消毒劑溶液擦拭工作臺(tái)面、生物安全柜內(nèi)壁及臺(tái)面,實(shí)驗(yàn)器材表面用70%酒精擦拭后移出生物安全柜。廢棄物在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)121℃高壓處理30min后才允許運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。在BSL-2實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行核酸擴(kuò)增、抗體檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)時(shí),為了確保安全,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的廢液和使用過(guò)的耗材等都必須用含10%有效氯的次氯酸鈉消毒液浸泡30min后,才允許運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室并存放在指定的存放點(diǎn)進(jìn)行集中處理。(五)其他風(fēng)險(xiǎn)控制其他風(fēng)險(xiǎn)主要包括對(duì)化學(xué)、物理、輻射、電器和水災(zāi)、火災(zāi)等自然災(zāi)害等引起的風(fēng)險(xiǎn)。化學(xué)風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)熟知實(shí)驗(yàn)涉及的試劑的化學(xué)品安全說(shuō)明書(shū),本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能接觸免疫學(xué)檢測(cè)中的酸、堿、抗原片制備過(guò)程中的固定試劑,應(yīng)注意操作輕緩,防止濺落而接觸皮膚。如發(fā)生皮膚接觸,應(yīng)停止實(shí)驗(yàn),在做好緊急處置后,撤離實(shí)驗(yàn)區(qū),用大量水沖洗,如有需要,應(yīng)就醫(yī)。2.物理風(fēng)險(xiǎn)如破損器皿的刺傷、使用銳器不當(dāng)造成的扎傷、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面的銳角割傷等。在BSL-3實(shí)驗(yàn)室中,各實(shí)驗(yàn)區(qū)空間一般較為狹小,在放置了各種實(shí)驗(yàn)設(shè)備、實(shí)驗(yàn)人員穿戴兩層防護(hù)用品后,行動(dòng)難以自如,存在被絆倒的可能。如果實(shí)驗(yàn)臺(tái)的臺(tái)面和其他部位存在銳角設(shè)
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