發(fā)酵工程試題及答案

發(fā)酵工程

一、名詞解釋

1、分批發(fā)酵：在發(fā)酵中，營養(yǎng)物和菌種一次加入進(jìn)行培養(yǎng)，直到結(jié)束放出，中間除了空氣進(jìn)入和

尾氣排出外，與外部沒有物料交換。

2、補(bǔ)料分批發(fā)酵：又稱半連續(xù)發(fā)酵，是指在微生物分批發(fā)酵中，以某種方式向培養(yǎng)系統(tǒng)不加一定

物料的培養(yǎng)技術(shù)。

3、絮凝：在某些高分子絮凝劑的作用下，溶液中的較小膠粒聚合形成較大絮凝團(tuán)的過程。

二、填空

1、生物發(fā)酵工藝多種多樣，但基本上包括菌種制備、種子培養(yǎng)、發(fā)酵和提取精制等下游處理幾

個(gè)過程。

2、根據(jù)過濾介質(zhì)截留的物質(zhì)顆粒大小的不同，過濾可分為粗濾、微速、超濾和反滲透四大類。

3、微生物的育種方法主要有三類：誘變法,細(xì)胞融合法,基因工程法。

4、發(fā)酵培養(yǎng)基主要由碳遮，氮遮，無機(jī)鹽,生長因子組成。

5、青霉素發(fā)酵生產(chǎn)中，發(fā)酵后的處理包括：過濾、提煉，脫魚，結(jié)晶。

6、利用專門的滅菌設(shè)備進(jìn)行連續(xù)滅菌稱為連澧，用高壓蒸汽進(jìn)行空罐滅菌稱為土消.

7、可用于生產(chǎn)前的微生物有細(xì)菌、真菌、酵母菌。

常用的發(fā)醉液的預(yù)處理方法有酸化、加熱、加絮凝劑。

8、根據(jù)攪拌方式的不同，好氧發(fā)酵設(shè)備可分為機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐和通風(fēng)攪拌式發(fā)酵罐兩種。

9、依據(jù)培養(yǎng)基在生產(chǎn)中的用途，可將其分成范子培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基二種。

10、現(xiàn)代發(fā)酵工程不僅包括菌體生產(chǎn)和代謝產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn),還包括微生物機(jī)能的利用。

11、發(fā)酵工程的主要內(nèi)容包括生產(chǎn)菌種的選育、發(fā)酵條件的優(yōu)化與控制、反應(yīng)器的設(shè)計(jì)及產(chǎn)物的

分離、提取與精制。

12、發(fā)酵類型有微生物菌體的發(fā)酵、微生物酶的發(fā)酵、微生物代謝產(chǎn)物的發(fā)酵、微生物轉(zhuǎn)化發(fā)

骼生物工程細(xì)胞的發(fā)酵。

13、發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)上常用的微生物主要有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌。

14、當(dāng)前發(fā)酵工業(yè)所用的菌種總趨勢是從野生菌轉(zhuǎn)向變顯菌，從自然選育轉(zhuǎn)向代謝調(diào)控育種,從

誘發(fā)基因突變轉(zhuǎn)向基因重組的定向育種。

15、根據(jù)操作方式的不同，液體深層發(fā)酵主要有分批發(fā)酵、連續(xù)發(fā)酵、補(bǔ)料分批發(fā)酵。

16、分批發(fā)酵全過程包括空罐滅菌、加入滅過菌的培養(yǎng)基、接種、發(fā)酵過程、放罐和洗罐,所需

的時(shí)間總和為一個(gè)發(fā)酵周期。

17、分批發(fā)酵中微生物處于限制性的條件下生長，其生長周期分為延滯期、對(duì)數(shù)生長期、穩(wěn)定

期、衰亡期。

18、根據(jù)攪拌的方式不同，好氧發(fā)酵設(shè)備又可分為機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐、通風(fēng)攪拌式發(fā)酵罐。

19、下流加工過程由許多化工單元操作組成，通?？梢苑譃榘l(fā)酵液預(yù)處理和固液分離、提取、a

制及成品加工四個(gè)階段。

20、當(dāng)前發(fā)酵工業(yè)所用的菌種總趨勢是從野生菌轉(zhuǎn)向變異菌，從自然選育轉(zhuǎn)向代謝調(diào)控育種,從

誘發(fā)基因突變轉(zhuǎn)向基因重組的定向育種。

21、微生物發(fā)酵產(chǎn)酶步驟為先選擇合適的產(chǎn)酶菌株、后采用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)方式進(jìn)行發(fā)的、

微生物發(fā)酵產(chǎn)酶、酶的分離純化、制成酶制劑。

三、判斷

1、微生物發(fā)酵的最適氧濃度與臨界氧濃度的概念是完全一樣的（X）

2、從微生物中發(fā)現(xiàn)的抗生素，有約90%是由放線菌產(chǎn)生的。（X）

3、在微生物殺蟲劑中，引用最廣泛的是蘇云金芽狗桿菌，他用來毒殺鱗翅目和雙翅目的害蟲。

（V）

4、分批發(fā)酵又稱為半連續(xù)發(fā)酵。（X）

5、青霉素是由放線菌產(chǎn)生的。（X）

6、培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌稱為空消（X）

7、在微生物殺蟲劑中，引用最廣泛的是蘇云金芽泡桿菌，他用來毒殺鱗翅目和雙翅目的害蟲。

（V）

8、在分批發(fā)酵中，最好的收獲期是指數(shù)生長期。（X）

9、奶制品的發(fā)酵主要是一種叫大腸桿菌的微生物的作用。（X）

10、固體垃圾進(jìn)行填埋處理時(shí)，必須留有排氣孔。（J）

11、日前，人們把利用微生物在有氧和無氟條件下的生命活動(dòng)來制備微生物菌體或其代謝產(chǎn)物的

過程稱為發(fā)酵。（J）

12、在微生物菌體的對(duì)數(shù)生長期所產(chǎn)生的產(chǎn)物如氨基酸、核甘酸等是菌體生長繁殖所必須的，這

些產(chǎn)物叫初級(jí)代謝產(chǎn)物。（V）

13、微生物轉(zhuǎn)化是利用微生物細(xì)胞的一種或多種酶，把一種化合物轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)相關(guān)的更有經(jīng)濟(jì)價(jià)

值的產(chǎn)物。（J）

14、發(fā)酵過程中需要防止雜菌污染，大多數(shù)情況下設(shè)備需要進(jìn)行嚴(yán)格的汨洗、滅菌，但空氣不需

要過濾。（X）

15、酵母菌是兼性厭氧微生物，它在塊氧條件下進(jìn)行厭氧性發(fā)酵積累酒精，在有氧天津下進(jìn)行好

氧發(fā)酵，大量產(chǎn)生菌體細(xì)胞。（J）

16、發(fā)酵工業(yè)中常用的細(xì)菌有：枯草芽抱桿菌、乳酸桿菌、醋酸桿菌、棒狀桿菌、短桿菌等。

（V）

17、發(fā)酵培養(yǎng)基的組成和配比由于菌種不同、設(shè)備和工藝不同等有所差異，但都包括碳源、氮

源、無機(jī)鹽類、生長因子等幾類。（J）

18、發(fā)酵產(chǎn)物的產(chǎn)量與成品的質(zhì)量，與菌種性能及把子和種子的制備情況密切相關(guān)。（J）

19、在發(fā)酵過程中要控制溫度和pH,對(duì)于需氧微生物還要進(jìn)行攪拌和通氣。（V）

20、通用式發(fā)酵罐和自吸式發(fā)酵罐是機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐。（

四.簡答

1、工業(yè)上常用的菌種保藏方法？

①斜面冰箱保藏法；②沙土管保藏法；③石蠟油封保藏法；④真空干燥冷凍保藏法；⑤液氮超

低溫保藏法

2、發(fā)酵培養(yǎng)基由哪些成份組成？

（1）碳源構(gòu)成菌體和產(chǎn)物的碳架及能量來源（2）氮源構(gòu)成微生物細(xì)胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中氮素

來源的營養(yǎng)物質(zhì)（3）無機(jī)鹽和微量元素（4）生長因子（5）水、產(chǎn)物形成的誘導(dǎo)物、前體和促進(jìn)

劑

3、根據(jù)操作方式的不同，發(fā)酵類型主要分成哪幾種？

（1）分批發(fā)酵（2）連續(xù)發(fā)酵（3）補(bǔ)料分批發(fā)酵（4）固體發(fā)酵

4、簡述發(fā)酵工程的類型

（1）微生物菌體發(fā)酵：以獲得具有某種用途的菌體為目的的發(fā)酵。

（2）微生物酶發(fā)酵：微生物具有種類多、產(chǎn)酶品種多、生產(chǎn)容易和成本低等特點(diǎn)。

（3）微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵：初級(jí)代謝產(chǎn)物、次級(jí)代謝產(chǎn)物。

（4）微生物的轉(zhuǎn)化發(fā)酵微生物轉(zhuǎn)化是利用微生物細(xì)胞的一種或多種酶，把一種化合物轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)

相關(guān)的更有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的產(chǎn)物。

（5）生物工程細(xì)胞的發(fā)酵：這是指利用生物工程技術(shù)所獲得的細(xì)胞，如DNA重組的“工程菌”以

及細(xì)胞融合所得的“雜交”細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng)的新型發(fā)酵，其產(chǎn)物多種多樣。

5、簡述發(fā)酵技術(shù)特點(diǎn)

①發(fā)酵過程以生命體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式進(jìn)行，數(shù)十個(gè)反應(yīng)過程能夠在發(fā)酵設(shè)備中一次完成；

②在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和，能耗少，設(shè)備較簡單；

③原料通常以糖蜜、淀粉等碳水化合物為主，可以是農(nóng)副產(chǎn)品、工業(yè)廢水或可再生資源，微生物

本身能有選擇地?cái)z取所需物質(zhì)：

④容易生產(chǎn)復(fù)雜的高分子化合物，能高度選擇地在復(fù)雜化合物的特定部位進(jìn)行氧化、還原、官能

團(tuán)引入或去除等反應(yīng)；

⑤發(fā)酵過程中需要防止雜菌污染，大多情況下設(shè)備需要進(jìn)行嚴(yán)格的沖洗、滅菌，空氣需要過謔

等。

五、論述

1.論述液體深層發(fā)酵有哪些優(yōu)點(diǎn)？發(fā)酵方式分為幾類？

優(yōu)點(diǎn)：

①是很多微生物的最適生長環(huán)境；

②菌體及營養(yǎng)物、產(chǎn)物易于擴(kuò)散，使在均質(zhì)或擬均質(zhì)條件下進(jìn)行，便于挖制，易于擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)

模；

③液體輸送方便，易于機(jī)械化操作；

④廠房面積小，生產(chǎn)效率高，易自動(dòng)化控制，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定；

⑤產(chǎn)品易于提取、精制等。

方式：

（1）分批發(fā)酵：營養(yǎng)物和菌種一次加入進(jìn)行培養(yǎng)，直到結(jié)束放罐，中間除了空氣進(jìn)入和尾氣排

出，與外部沒有物料交換。

（2）連續(xù)發(fā)酵是指以一定的速度向發(fā)酵罐內(nèi)添加新鮮培養(yǎng)基，同時(shí)以相同的速度流出培養(yǎng)液，從

而使發(fā)酵罐內(nèi)的液量維持恒定，微生物在穩(wěn)定狀態(tài)下生長?？梢杂行У匮娱L分批培養(yǎng)中的對(duì)數(shù)

期。

（3）補(bǔ)料分批發(fā)酵又稱半連續(xù)發(fā)酵，是介于分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵之間的一種發(fā)酵技術(shù)，是指在微

生物分批發(fā)酵中，以某種方式向培養(yǎng)系統(tǒng)補(bǔ)加一定物料的培養(yǎng)技術(shù)。可以使培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物濃

度較長時(shí)間地保持在一定范圍內(nèi)，既保證微生物的生長需要，又不造成不利影響，從而達(dá)到提高

產(chǎn)率的目的。

2、論述發(fā)酵下游加工過程

（1）預(yù)處理方法：

加熱：適當(dāng)加熱之后，發(fā)酵液中的蛋白由于變性而凝聚，形成較大的顆粒，發(fā)酵液的粘度就會(huì)降

低。此法僅適用于對(duì)非熱敏感性產(chǎn)品發(fā)酵液的預(yù)處理。

調(diào)節(jié)PII值：適當(dāng)?shù)腜H值可以提高產(chǎn)物的穩(wěn)定性，減少其在隨后的分離純化過程中的損失。此外，

發(fā)酵液PH值的改變會(huì)影響發(fā)酵液中某些成分的電離程度，從而降低發(fā)酵液的粘度。注意選擇比較

溫和的酸和堿，以防止局部過酸或過減。草酸較常用。

加入絮凝劑：通常情況下，細(xì)菌的表面都帶有負(fù)電荷，可以在發(fā)醉液中加入帶正電荷的絮凝劑，

從而使菌體細(xì)胞與絮凝劑結(jié)合形成絮狀沉淀，降低發(fā)酵液的上粘度，利于菌體的收獲。

（2）固液分離方法：常用到過濾、離心等方法。如果欲提取的產(chǎn)物存在于細(xì)胞內(nèi)，還需先對(duì)細(xì)胞

遂行破碎。沉淀提取法、色譜分離法、萃取法、膜分離技術(shù)

（3）精制：初步純化中的某些操作，如沉淀、超濾等也可應(yīng)用于精制。大分子（蛋白質(zhì)）精制依賴

于層析分離，小分子物質(zhì)的精制則可利用結(jié)晶操作

（4）成品加工：經(jīng)提取和精制后，根據(jù)產(chǎn)品應(yīng)用要求，有時(shí)還需要濃縮、無菌過濾和去熱原、干

燥、加穩(wěn)定劑等加工步驟。

第二套

一、名稱解釋

1、前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，能直接彼微生物在生物合成過程中合成到產(chǎn)物物分

子中去，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。

2、發(fā)酵生長因子從廣義上講，凡是微生物生長不可缺少的微量的有機(jī)物質(zhì)，如氨基酸、喋吟、

喘咤、維生素等均稱生長因子

3、菌濃度的測定是衡量產(chǎn)生菌在整個(gè)培養(yǎng)過程中菌體量的變化，一般前期菌濃增長很快，中期

菌濃基本恒定。補(bǔ)料會(huì)引起菌濃的波動(dòng)，這也是衡量補(bǔ)料量適合與否的一個(gè)參數(shù)。

4、攪拌熱：在機(jī)械攪拌通氣發(fā)酵罐中，由于機(jī)械攪拌帶動(dòng)發(fā)酵液作機(jī)械運(yùn)動(dòng)，造成液體之間，

液體與攪拌器等設(shè)備之間的摩擦，產(chǎn)生可觀的熱量。攪拌熱與攪拌軸功率有關(guān)

5、分批培養(yǎng)：簡單的過程，培養(yǎng)基中接入菌種以后，沒有物料的加入和取出，除了空氣的通入

和排氣。整個(gè)過程中菌的濃度、營養(yǎng)成分的濃度和產(chǎn)物濃度等參數(shù)都隨時(shí)間變化。

6、接種量：移入種子的體積

接種量=------------------

接種后培養(yǎng)液的體積

7、比耗氧速度或呼吸強(qiáng)度單位時(shí)間內(nèi)單位體積重量的細(xì)胞所消耗的氧氣，mmolO2?g菌

8、次級(jí)代謝產(chǎn)物是指微生物在一定生長時(shí)期，以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體物質(zhì)，合成一些對(duì)微生物

的生命活動(dòng)無明確功能的物質(zhì)過程，這一過程的產(chǎn)物，即為次級(jí)代謝產(chǎn)物。

9、實(shí)罐滅菌實(shí)罐滅菌（即分批滅菌）將配制好的培養(yǎng)基放入發(fā)酵罐或其他裝置中，通入蒸汽將

培養(yǎng)基和所用設(shè)備加熱至滅菌溫度后維持一定時(shí)間，在冷卻到接種溫度，這一工藝過程稱為實(shí)罐

滅菌，也叫間歇滅菌。

10、種子擴(kuò)大培養(yǎng)：指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化

后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培

養(yǎng)物稱為種子。

11、初級(jí)代謝產(chǎn)物是指微生物從外界吸收各種營養(yǎng)物質(zhì)，通過分解代謝和合成代謝，生成維持

生命活動(dòng)所需要的物質(zhì)和能量的過程，這一過程的產(chǎn)物即為初級(jí)代謝產(chǎn)物。

12、倒種：一部分種子來源于種子罐，一部分來源于發(fā)酵罐。

13、維持消耗（m）指維持細(xì)胞最低活性所需消耗的能量，一般來講，單位重量的細(xì)胞在單位時(shí)

間內(nèi)用于維持消耗所需的基質(zhì)的量是一個(gè)常數(shù)。

14、產(chǎn)物促進(jìn)劑是指那些非細(xì)胞生長所必須的營養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添

加劑

15、補(bǔ)料分批培養(yǎng)：在分批培養(yǎng)過程中補(bǔ)入新鮮的料液，以克服營養(yǎng)不足而導(dǎo)致的發(fā)酵過早結(jié)束

的缺點(diǎn)。

在此過程中只有料液的加入沒有料液的取出，所以發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液體積比發(fā)酵開始時(shí)有所增

加。在工廠的實(shí)際生產(chǎn)中采用這種方法很多。

16、發(fā)酵熱：所謂發(fā)酵熱就是發(fā)酵過程中釋放出來的凈熱量。什么叫凈熱最呢？在發(fā)酵過程中產(chǎn)

生菌分解基質(zhì)產(chǎn)生熱量，機(jī)械攪拌產(chǎn)生熱量，而罐壁散熱、水分蒸發(fā)、空氣排氣帶走熱量。這各

種產(chǎn)生的熱量和各種散失的熱量的代數(shù)和就叫做凈熱量。發(fā)醉熱引起發(fā)醉液的溫度上升。發(fā)酵熱

大，溫度上升快，發(fā)酵熱小，溫度上升慢。

17、染菌率總?cè)揪手敢荒臧l(fā)酵染菌的批（次）數(shù)與總投料批（次）數(shù)之比的百分率。染菌批次

數(shù)應(yīng)包括染菌后培養(yǎng)基經(jīng)重新滅菌，又再次染菌的批次數(shù)在內(nèi)

18、連續(xù)培養(yǎng)：發(fā)酵過程中一邊補(bǔ)入新鮮料液一邊放出等量的發(fā)酵液，使發(fā)酵罐內(nèi)的體積維持

恒定。

達(dá)到穩(wěn)態(tài)后，整個(gè)過程中菌的濃度，產(chǎn)物濃度，限制性基質(zhì)濃度都是恒定的。

19、臨界溶氧濃度指不影響呼吸所允許的最低溶氧濃度

20、回復(fù)突變由突變型回到野生型的基因突變

21、種子見種子擴(kuò)大培養(yǎng)

22、培養(yǎng)基廣義上講培養(yǎng)基是指一切可供微生物細(xì)胞生長繁殖所需的一組營養(yǎng)物質(zhì)和原料。同

時(shí)培養(yǎng)基也為微生物培養(yǎng)提供除營養(yǎng)外的其它所必須的條件。

23、發(fā)酵工程：利用微生物特定性狀和功能，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)有用物質(zhì)或直接應(yīng)用于工

業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系，是將傳統(tǒng)發(fā)酵于現(xiàn)代的DNA重組、細(xì)胞融合、分子修飾和改造等新技術(shù)集

合并發(fā)展起來的發(fā)酵技術(shù)。

二、填空題

1、微生物發(fā)酵培養(yǎng)（過程）方法主要有分批培養(yǎng)、補(bǔ)料分批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)

四種.

2、微生物生長一般可以分為：調(diào)整期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。

3、發(fā)酵過程工藝控制的只要化學(xué)參數(shù)溶解氧、PH、核酸量等.

4、發(fā)酵過程控制的目的就是得到最大的比生產(chǎn)率和最大的得率。

5、菌種分離的一般過程采樣、富集、分離、目的菌的篩選。

6、富集培養(yǎng)目的就是讓目的菌在種群中占優(yōu)勢，使篩選變得可能。

7、根據(jù)工業(yè)微生物對(duì)氧氣的需求不同，培養(yǎng)法可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩種。

8、微生物的培養(yǎng)基根據(jù)生產(chǎn)用途只要分為抱子培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基。

9、常用滅菌方法：化學(xué)滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌

10、常用工業(yè)微生物可分為：細(xì)菌、酵母菌、霉菌、放線菌四大類。

11、發(fā)酵過程工藝控制的代謝參數(shù)中物理參數(shù)溫度、壓力、攪拌轉(zhuǎn)速、功率輸入、流加數(shù)率和

質(zhì)量等

12、環(huán)境無菌的檢測方法有：顯微鏡檢查法、肉湯培養(yǎng)法、平板培養(yǎng)法、發(fā)酵過程的異常觀察法

等

13、染菌原因：發(fā)酵工藝流程中的各環(huán)節(jié)漏洞和發(fā)酵過程管理不善兩個(gè)方面。

14、實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的發(fā)酵菌液體發(fā)酵方式主要有四種：試管液體培養(yǎng)、淺層液體培養(yǎng)、搖瓶培

養(yǎng)、臺(tái)式發(fā)酵罐

15、發(fā)酵高產(chǎn)菌種選育方法包括（自然選育）、（雜交育種）、（誘變育種）、（基因工程育種）、

（原生質(zhì)體融合）。

16、發(fā)酵產(chǎn)物整個(gè)分離提取路線可分為：預(yù)處理、固液分離、初步純化、精細(xì)純化和成品加工加

工等五個(gè)主要過程。

17、發(fā)酵過程主要分析項(xiàng)目如下：pH、排氣氧、排氣C02和呼吸燃、糖含量、氨基氮和氨氮、

磷含量、菌濃度和菌形態(tài)。

18、微生物調(diào)節(jié)其代謝采用酶活性、能合成量、細(xì)胞膜的透性。

19、工業(yè)微生物菌種可以來自自然分離，也可以來自從微生物菌種保藏機(jī)構(gòu)單位獲取。

20、發(fā)酵工業(yè)上常用的糖類主要有福萄糖、糖蜜。

21、工業(yè)發(fā)酵方式根據(jù)所用菌種是單一或是多種可以分為單一純種發(fā)酵和混合發(fā)酵。

22、種子及發(fā)酵液進(jìn)行無菌狀況控制常用的方法顯微鏡檢測法、酚紅肉湯培養(yǎng)基法、平板畫線

培養(yǎng)法、發(fā)酵過程的異常觀察法。

23、菌種的分離和篩選一般分為采樣、富集、分離、目的菌的篩選步驟。

24、菌種的分離和篩選一般可分為。

25、常用滅菌方法有：化學(xué)滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌

三、問答題

1、發(fā)酵工程的概念是什么？發(fā)酵工程基本可分為那兩個(gè)大部分，包括哪些內(nèi)容？

答：發(fā)酵工程是利用微生物特定性狀好功能，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)有用物質(zhì)或其直接應(yīng)用于

工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系，是將傳統(tǒng)發(fā)酵與現(xiàn)代的DNA重組、細(xì)胞融合、分子修飾和改造等新技術(shù)

結(jié)合并發(fā)展起來的發(fā)醉技術(shù)。也可以說是滲透有工程學(xué)的微生物學(xué)，是發(fā)酵技術(shù)工程化的發(fā)展，

由于主要利用的是微生物發(fā)酵過程來生產(chǎn)產(chǎn)品，因此也稱為微生物工程。

一.發(fā)酵部分:？1.菌種的特征和選育2.培養(yǎng)基的特性，選擇及其滅菌理論3.發(fā)酵液的特性

4,發(fā)酵機(jī)理。5.發(fā)酵過程動(dòng)力學(xué)6.空氣中懸浮細(xì)菌微粒的過漉機(jī)理7.氧的傳遞。溶解。吸

收。理論。8.連續(xù)培養(yǎng)和連續(xù)發(fā)酵的控制

二.提純部分1.細(xì)胞破碎，分離2.液輸送，過濾.除雜3.離子交換滲析，逆滲透，超濾

4.凝膠過濾，沉淀分離5溶媒萃取，蒸發(fā)蒸儲(chǔ)結(jié)晶，干燥，包裝等過程和單元操作

2、現(xiàn)代發(fā)酵工程所用的發(fā)酵罐應(yīng)具備那些特征？

答：（1）、發(fā)酵罐應(yīng)有適宜的徑高比。罐身較長，氧的利用率較高；

（2）、發(fā)酵罐應(yīng)能承受一定的壓力。因?yàn)榘l(fā)酵罐在滅菌和正常工作時(shí)，要承受一定的壓力（氣壓

和液壓）和溫度；

（3）、發(fā)酵罐的攪拌通風(fēng)裝置能使氣液充分混合，實(shí)現(xiàn)傳質(zhì)傳熱作用，保證微生物發(fā)酵過程中所

需的溶解氧；

（4）、發(fā)酵罐內(nèi)應(yīng)盡量減少死角，避免藏污納垢，保證滅菌徹底，防止染菌；

（5）、發(fā)酵罐應(yīng)具有足夠的冷卻面積；

（6）、攪拌器的軸封要嚴(yán)密，以減少泄露。

3、微生物發(fā)酵的種子應(yīng)具備那幾方面條件？

答：（1）、菌種細(xì)胞的生長活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵罐后能迅速生長，遲緩期短。

（2）、生理性狀穩(wěn)定。

（3）、菌體總量及濃度能滿足大量發(fā)酵罐的要就。

(4)、無雜菌污染。

(5)、保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。

4、發(fā)酵工業(yè)上常用的氮源有那些，起何作用？

答：氮源主要用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)(氨基酸，蛋白質(zhì)、核酸等)和含氮代謝物。常用的氮源可分

為兩大類：有機(jī)氮源和無機(jī)氮源。

1、無機(jī)氮源

種類：氨鹽、硝酸鹽和氨水

特點(diǎn)：微生物對(duì)它們的吸收快，所以也稱之謂迅速利用的氮源。但無機(jī)氮源的迅速利用常會(huì)引起

pH的變化如：

(NH4)2SO42NH3+2H2SO4

NaN03+4H2-NH3+2H2O+NaOH

無機(jī)氮源被菌體作為氮源利用后，培養(yǎng)液中就留下了酸性或堿性物質(zhì)，這種經(jīng)微生物生理作用(代

謝)后能形成酸性物質(zhì)的無機(jī)氮源叫生理酸性物質(zhì)，如硫酸胺，若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則

此種無機(jī)氮源稱為生理堿性物質(zhì)，如硝酸鈉。正確使用生理酸堿性物質(zhì)，對(duì)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程

的pH有積極作用。

所以選擇合適的無機(jī)氮源有兩層意義：滿足菌體生長；穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)醉過程中的pH

2、有機(jī)氮源

來源：工業(yè)上常用的有機(jī)氮源都是一些廉價(jià)的原料，花生餅粉、黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、

玉米蛋白粉、蛋白月東、酵母粉、魚粉、蠶蛹粉、尿素、廢菌絲體和酒糟。

成分復(fù)雜：除提供氮源外，有些有機(jī)氮源還提供大量的無機(jī)鹽及生長因子。

有機(jī)氮源成分復(fù)雜可以從多個(gè)方面對(duì)發(fā)酵過程進(jìn)行影響，而另一方面有機(jī)氮源的來源具有不穩(wěn)定

性。所以在有機(jī)氮源選取時(shí)和使用過程中，必須考慮原料的波動(dòng)對(duì)發(fā)酵的影響

5、發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)特點(diǎn)是什么，什么是種子擴(kuò)大培養(yǎng)，其任務(wù)是什么？

答：(2)、種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜

面活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些

純種培養(yǎng)物稱為種子。

(3)、種子擴(kuò)大培養(yǎng)的任務(wù)：現(xiàn)代的發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)規(guī)模越來越大，每只發(fā)酵罐的容積有幾十立方

米甚至幾百立方米，？要使小小的微生物在幾十小時(shí)的較短時(shí)間內(nèi)，完成如此巨大的發(fā)酵轉(zhuǎn)化任

務(wù)，那就必須具備數(shù)量巨大的微生物細(xì)胞才行.

(1)發(fā)酵和其他化學(xué)工業(yè)的最大區(qū)別在于它是生物體所進(jìn)行的化學(xué)反應(yīng)。其主要特點(diǎn)如下：

1.發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進(jìn)行的生物化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)安全，要求條件也比較簡單。

2,發(fā)酵所用的原料通常以淀粉、糖蜜或其他農(nóng)副產(chǎn)品為主，只要加入少量的有機(jī)和無機(jī)氮源就可

進(jìn)行反應(yīng)。微生物因不同的類別可以有選擇地去利用它所需要的營養(yǎng)?；谶@一特性，可以利用

廢水和廢物等作為發(fā)酵的原料進(jìn)行生物資源的改造和更新。

3.發(fā)酵過程是通過生物體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式來完成的，反應(yīng)的專一性強(qiáng)，因而可以得到較為單一的

代謝產(chǎn)物。

4,由于生物體本身所具有的反應(yīng)機(jī)制，能夠?qū)Ｒ恍缘睾透叨冗x擇性地對(duì)某些較為復(fù)雜的化合物進(jìn)

行特定部位地氧化、還原等化學(xué)轉(zhuǎn)化反應(yīng)，也可以產(chǎn)生比較復(fù)雜的高分子化合物。

5,發(fā)酵過程中對(duì)雜菌污染的防治至關(guān)重要。除了必須對(duì)設(shè)備進(jìn)行嚴(yán)格消毒處理和空氣過濾外，反

應(yīng)必須在無菌條件下進(jìn)行。如果污染了雜菌，生產(chǎn)上就要遭到巨大的經(jīng)濟(jì)損失，要是感染了噬菌

體，對(duì)發(fā)酵就會(huì)造成更大的危害。因而維持無菌條件是發(fā)酵成敗的關(guān)鍵。

6.微生物菌種是進(jìn)行發(fā)酵的根本因素，通過變異和菌種篩選，可以獲得高產(chǎn)的優(yōu)良菌株并使生產(chǎn)

設(shè)備得到充分利用，也可以因此獲得按常規(guī)方法難以生產(chǎn)的產(chǎn)品。

7.工業(yè)發(fā)酵與其他工業(yè)相比，投資少，見效快，開可以取得顯著的經(jīng)濟(jì)效益。

基于以上特點(diǎn)，工業(yè)發(fā)酵日益引起人們重視。和傳統(tǒng)的發(fā)酵工藝相比，現(xiàn)代發(fā)酵工程除了上述的

發(fā)酵特征之外更有其優(yōu)越性。除了使用微生物外，還可以用動(dòng)植物細(xì)胞和酶，也可以用人工構(gòu)建

的“工程菌'來進(jìn)行反應(yīng)；反應(yīng)設(shè)備也不只是常規(guī)的發(fā)酵罐，而是以各種各樣的生物反應(yīng)器而代之，

自動(dòng)化連續(xù)化程度高，使發(fā)酵水平在原有基礎(chǔ)上有所提高和和創(chuàng)新。

發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)特點(diǎn)：

①一般操作條件比較溫和；

②以淀粉、糖蜜等為主，輔以少量有機(jī)、無機(jī)氮源為原料；

③過程反應(yīng)以生命體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式進(jìn)行；

④能合成復(fù)雜的化合物如酶、光學(xué)活性體等；

⑤能進(jìn)行一些特殊反應(yīng)，如官能團(tuán)導(dǎo)入；

⑥生產(chǎn)產(chǎn)品的生物體本身也是產(chǎn)物，含有多種物質(zhì)：

⑦生產(chǎn)過程中，需要防止雜菌污染；

⑧菌種性能被改變，從而獲得新的反應(yīng)性能或提高生產(chǎn)率。

6、培養(yǎng)成分用量的確定有什么規(guī)律？

答：(1)、參照微生物細(xì)胞內(nèi)元素的比例確定。培養(yǎng)基的成分配比雖然千差萬別，但都是用來培

養(yǎng)某種微生物的，而不同類型的微生物細(xì)胞的成分比例其實(shí)是有一定規(guī)律的。這些規(guī)律可以在很

大程度上知道培養(yǎng)基的基本成分配比的選擇。

不同種類的微生物內(nèi)某種成分的含量其實(shí)是比較穩(wěn)定的。培養(yǎng)基最終會(huì)被微生物吸收利用，因此

其成分比例可以參考該種微生物的成分比例，至少可以作為一個(gè)重要依據(jù)。另外，盡管不同種類

的微生物的成分比例有一定的差異，但還是有一定共性的。所以培養(yǎng)基中這集中營養(yǎng)成分不管由

什么具體物質(zhì)提供，其用量基本上也符合這種關(guān)系。

(2)參照碳氮比確定。如果培養(yǎng)基中碳源過多，不利產(chǎn)物的合成。同樣碳源過少或氮源過少對(duì)發(fā)

醉的影響也是不利的。不同種微生物碳氮比差異很大，既是同種微生物在其不同生理時(shí)期對(duì)碳氮

比要求也有不同，所以最適碳氮比要通過試驗(yàn)確定，一般在100：(1-20)之間。

(3)、其他因素。培養(yǎng)基中一些用量極少的物質(zhì)一般要嚴(yán)格控制，不能過量。例如，維生素、微

量元素、某些生長因子、前體等.具體用量要通過試驗(yàn)確定.培養(yǎng)基中的一些成分的比例會(huì)影響

培養(yǎng)基的某些理化性質(zhì)，這時(shí)要引起重視。

7、敘述防止發(fā)酵菌種退化的具體條件措施有那些？

答：(1)控制傳代次數(shù)：盡量避免不必要的移種和傳代，并將必要的傳代降低到最低限度，以減

少細(xì)胞分裂過程中所產(chǎn)生的自發(fā)突變幾率。

(2)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件：如在赤霉素生產(chǎn)菌的培養(yǎng)基中，加入糖蜜、天冬酰胺、谷氨酰胺、5-

核甘酸或甘露醇等豐富營養(yǎng)物時(shí)，有防止衰退效果。

(3)利用不易衰退的細(xì)胞傳代：對(duì)于放線菌和霉菌，菌絲細(xì)胞常含有幾個(gè)細(xì)胞核，因此用菌絲接

種就易出現(xiàn)衰退，而泡子一般是單核的，用于接種就可避免這種現(xiàn)象。

(4)采用有效的菌種保藏方法

(5)合理的育種：選育菌種是所處理的細(xì)胞應(yīng)使用單核的，避免使用多核細(xì)胞;合理選擇誘變劑種

類或增加突變位點(diǎn)，以減少分離回復(fù)突變；在誘變處理后及分離提純化，從而保證保藏菌種的純

度。

（6）、選用合適的培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中添加某種化學(xué)物質(zhì)可以防止菌種退化?；蛘哌x取營養(yǎng)相對(duì)

貧乏的培養(yǎng)基在菌種保藏培養(yǎng)基，限制菌株的生長代謝減少變異反而發(fā)生從而防止菌種的退化。

8、如何選擇最適發(fā)酵溫度？

答：1、根據(jù)菌種及生長階段選擇。

微生物種類不同，所具有的酶系及其性質(zhì)不同，所要求的溫度范圍也不同。在發(fā)酵前期由于菌量

少，發(fā)酵目的是要盡快達(dá)到大量的菌體，取稍高的溫度，促使菌的呼吸與代謝，使菌生長迅速；

在中期菌量已達(dá)到合成產(chǎn)物的最適量，發(fā)酵需要延長中期，從而提高產(chǎn)量，因此中期溫度要稍低

一些，可以推遲衰老。發(fā)酵后期，產(chǎn)物合成能力降低，延長發(fā)酵周期沒有必要，就又提高溫度，

刺激產(chǎn)物合成到放罐。

2、根據(jù)培養(yǎng)條件選擇。

溫度選擇還要根據(jù)培養(yǎng)條件綜合考慮，靈活選擇。

通氣條件差時(shí)可適當(dāng)降低溫度，使菌呼吸速率降低些，溶氧濃度也可高些。

培養(yǎng)基稀薄時(shí)，溫度也該低些。因?yàn)闇囟雀郀I養(yǎng)利用快，會(huì)使菌過早自溶。

3、根據(jù)菌生長情況

菌生長快，維持在較高溫度時(shí)間要短些；菌生長慢，維持較高溫度時(shí)間可長些。培養(yǎng)條件適宜，

如營養(yǎng)豐富，通氣能滿足，那么前期溫度可高些，以利于菌的生長?？偟膩碚f，溫度的選擇根據(jù)

菌種生長階段及培養(yǎng)條件綜合考慮。要通過反復(fù)實(shí)踐來定出最適溫度。

10、發(fā)酵級(jí)數(shù)確定的依據(jù)是什么？

一般由菌絲體培養(yǎng)開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)，但有時(shí)，工廠從第一級(jí)種子罐開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)

谷氨酸：三級(jí)發(fā)酵

一級(jí)種子（搖瓶）一二級(jí)種子（小罐）一發(fā)酵

青霉素：三級(jí)發(fā)酵

一級(jí)種子（小罐）一二級(jí)種子（中罐）一發(fā)酵

1、發(fā)酵級(jí)數(shù)確定的依據(jù)：級(jí)數(shù)受發(fā)酵規(guī)模、菌體生長特性、接種量的影響。

2、級(jí)數(shù)大，難控制、易染菌、易變異，管理困難，一

般2-4級(jí)。

3、在發(fā)酵產(chǎn)品的放大中，反應(yīng)級(jí)數(shù)的確定是非常重要

的一個(gè)方面

12、什么是半連續(xù)培養(yǎng)，說明其優(yōu)缺點(diǎn).

答：在補(bǔ)料分批培養(yǎng)的基礎(chǔ)上間歇放掉部分發(fā)酵液（帶放）稱為半連續(xù)培養(yǎng)。某些品種采取這種方

式，如四環(huán)素發(fā)酵

優(yōu)點(diǎn)放掉部分發(fā)酵液，再補(bǔ)入部分料液，使代謝有害物得以稀釋有利于產(chǎn)物合成，提高了總產(chǎn)

量。

缺點(diǎn)代謝產(chǎn)生的前體物被稀釋，提取的總體積增大

13、發(fā)酵工程主題微生物有什么特點(diǎn)？

答：發(fā)酵工程所利用的微生物主要是細(xì)菌、放線菌，酵母菌和霉菌

特點(diǎn)：（1）對(duì)周圍環(huán)境的溫度、壓強(qiáng)、滲透壓、酸堿度等條件有極大的適應(yīng)能力

（2）有極強(qiáng)的消化能力

（3）有極強(qiáng)的繁殖能力

第三套

一、選擇題：（每小題2分，共32分）

1、下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是（）

A、大腸桿菌以復(fù)制方式進(jìn)行繁殖，其擬核是一個(gè)環(huán)狀DNA分子

B、在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上，大腸桿菌首先利用乳糖作碳源

C、用大腸桿菌_L程菌生產(chǎn)干擾素時(shí)，應(yīng)及時(shí)添加核酸等生長因子

D、處于對(duì)數(shù)期的大腸桿菌，常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料

2、酵母菌培養(yǎng)過程中的生長曲線如圖所示:a、b、c、d分別表示不同的生長時(shí)期，其中適于產(chǎn)生

次級(jí)代謝產(chǎn)物的時(shí)期是

A、a

B、b

C^c

D、d

3、下列對(duì)根瘤菌的敘述，正確的是（

A根瘤菌在植物根外也能固氮

B根瘤菌離開植物根系不能存活

C土壤浸水時(shí)，根瘤菌固氮量減少

D大豆植株生長所需的氮都來自根瘤菌

4、發(fā)酵工程的第一個(gè)重要工作是從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種，獲得純種的方法不

包括：（）

A.根據(jù)微生物對(duì)碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基

B.根據(jù)微生物缺乏生長因子的種類，在培養(yǎng)基中增減不同的生長因子

C.利用高溫高壓消滅不需要的雜菌

D.根據(jù)微生物對(duì)抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素

5、下面關(guān)于微生物最適生長溫度判斷，正確的是（？）

A.微生物群體生長繁殖速度最快的溫度

B.?發(fā)酵的最適溫度

C.積累某一代謝產(chǎn)物的最適溫度

D.無法判斷

6、發(fā)薛法生產(chǎn)酵母菌時(shí)，正確的措施是（）

A、密閉隔絕空氣B、用萃取、離子交換獲得產(chǎn)品

C、在穩(wěn)定期獲得菌種D、使菌體生長長期處于穩(wěn)定期

7,下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是（）

成分蛋臼陳葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸儲(chǔ)水

含量10g10g2g1000mL

A、從化學(xué)成分看該培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基

B、培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白陳

C、該培養(yǎng)基缺少能提供生長因子的物質(zhì)

D、該培養(yǎng)基PH調(diào)好后就可以接種菌

8.右圖是某種微生物體內(nèi)某一物質(zhì)代謝過程的示意圖。下列有關(guān)酶活性調(diào)節(jié)的敘述，錯(cuò)誤的是

麗3

A.丁物質(zhì)既是酶③催化生成的產(chǎn)物，又蕈溺艮饋抑制物

戊物質(zhì)通過與酶④結(jié)合導(dǎo)致酶④結(jié)構(gòu)變金湎祕(mì)制活性下降

B.

C.當(dāng)丁物質(zhì)和戊物質(zhì)中任意一種過量時(shí)，酶①的活性都將受到抑制

D.若此代謝途徑的終產(chǎn)物不斷排出菌體外，則可消除丙物質(zhì)對(duì)酶①的抑制作用

9.屬于細(xì)菌細(xì)胞特殊結(jié)構(gòu)的為（）

A、莢膜B、細(xì)胞壁C、細(xì)胞膜D、核質(zhì)體

10.下列關(guān)于幾種微生物的營養(yǎng)代謝和生長繁殖的描述，正確的是

A.根瘤菌通過生物固氮，制造了含氮喬料和含碳有機(jī)物

B.接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進(jìn)入對(duì)數(shù)期能大量積累青霉素

C.培養(yǎng)液中溶解氧量的變化，會(huì)影響酵母菌的生長繁殖和代謝途徑

D.用32P標(biāo)記的噬菌體感染細(xì)菌.在新形成的噬菌體中都能檢測到32P

11.下列關(guān)于通過發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述，曲誼的是

A.發(fā)酵時(shí)需不斷通入無菌空氣，否則會(huì)積累乳酸

B.發(fā)酵時(shí)常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基

C.從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)

D.當(dāng)菌體生長進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)，補(bǔ)充營養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量

12.圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期接種

醋酸菌，適當(dāng)升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個(gè)發(fā)酵過程培養(yǎng)液pH變化的

曲線是（）

A.①B.②C.③D.④

13.生產(chǎn)實(shí)踐中配制微生物發(fā)酵所需要的培養(yǎng)基時(shí)，一般遵循“經(jīng)濟(jì)節(jié)約”的原則。如“以野（野

生植物）代家（栽培植物）”、“以纖（秸稈）代糖（淀粉）”、“以氮（非蛋白氮）代胱（蛋白氮）”、“以炫

代糧”等。下列表述不正確的是（）

A.“以野代家”培養(yǎng)微生物時(shí)，需要加入更多的生長因子

B.“以纖代糖”能為某些微生物的生長提供碳源和能源

C.“以氮代骯”是因?yàn)殄X鹽、硝酸鹽等是微生物常用的氮源

D.“以燃代糧”培養(yǎng)的微生物可以用于凈化被石油污染的海域

14、下述那個(gè)時(shí)期細(xì)菌群體倍增時(shí)間最快（？?）

A穩(wěn)定期？??B衰亡期??？C對(duì)數(shù)期????？D延滯期

15、下面關(guān)于連續(xù)培養(yǎng)的說法中，敘述不正確的是（?？）

A.恒化連續(xù)培養(yǎng)的控制對(duì)象是菌體密度

B.恒濁連續(xù)培養(yǎng)中微生物菌體以最高生長速率生長

C.恒化連續(xù)培養(yǎng)的產(chǎn)物是不同生長速率的菌體

D.恒濁連續(xù)培養(yǎng)無生長限制因子

16.大腸桿菌某個(gè)品系能夠合成干擾素，一制藥廠引進(jìn)該品系菌株后對(duì)其培養(yǎng)研究。在特定的培

養(yǎng)基中，接入少量菌種后，每3h測定一次菌體密度和

培養(yǎng)基的pH,并作記錄。但由于一時(shí)疏忽弄亂了記錄雨體幅度萬個(gè)/mLpH

0.177.47

的順序。請(qǐng)根據(jù)下表的記錄數(shù)據(jù)，判斷以下說法中錯(cuò)誤4.9x10-6.72

1.8x1O27.14

的是（）2.0x1O46.37

46.43

A.該品系大腸桿菌的培育是采用了基因工程的方法2.2x10

0.057.49

B.可以通過培養(yǎng)基的pH由大到小調(diào)整記錄順序1.4x10%5.82

0.0377.50

C.樣本pH為6.43,菌體密度為2.2x104是培養(yǎng)到24h時(shí)測量的結(jié)果6.56

1.67.36

D.樣本PH為6.37,菌體密度為2.0x10^4,處于細(xì)菌牛.長的對(duì)數(shù)期

二、填空題：（每空2分，共20分）

17、在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮、和滲透壓等條件。

由于該細(xì)菌具右體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、、等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺

傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

18、在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行：操作者

的雙手需要進(jìn)行清洗和；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)

變性，還能o

19、通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的

20、若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄，以

防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散.

21、培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方

法是O

22、對(duì)細(xì)菌簡單染色法的一般步驟是？？？？？？。常用的染料有

???和？？？？？等。?

23、在混合菌樣中獲得純菌株的方法主要有？？？？？？和？？？？等。

24、在微生物培養(yǎng)過程中，引起培養(yǎng)基DH值改變的原因主要有？？？？？？和？？？？？

等。？

25、實(shí)驗(yàn)室常用的有機(jī)氮源有？？？？和？？？？？？等,無機(jī)氮源有？？？？？和？？？

。？等。為節(jié)約成本，工廠中常用？？？？？？？等做有機(jī)氮源。??

26、在微生物學(xué)奠基時(shí)代（生理學(xué)期）公認(rèn)的代表人物為？？？？？？和？？？？？？。前

者的主要業(yè)績有？？？？等,后者的主要業(yè)績有？？？？？？等。

三、名