微生物微生物的生長(zhǎng)講課文檔

微生物課件微生物的生長(zhǎng)第一頁(yè)，共84頁(yè)。二.以數(shù)量變化對(duì)微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行測(cè)定三.以生物量為指標(biāo)測(cè)定微生物的生長(zhǎng)一.微生物生長(zhǎng)概述要求：掌握微生物生長(zhǎng)的概念及常規(guī)測(cè)定方法

（原理和操作）

第一節(jié)微生物生長(zhǎng)的測(cè)定第二頁(yè)，共84頁(yè)。生長(zhǎng)growth：有機(jī)體的細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加。表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)的量不斷增加，體積加大。繁殖reproduction由于細(xì)胞分裂而引起的個(gè)體數(shù)目的增加。單細(xì)胞微生物如細(xì)菌，生長(zhǎng)往往伴隨著細(xì)胞數(shù)目的增加。多細(xì)胞微生物（如某些霉菌）細(xì)胞數(shù)目的增加（菌絲細(xì)胞的不斷延長(zhǎng)或分裂）如不伴隨著個(gè)體數(shù)目的增加，只能叫生長(zhǎng)。只有通過(guò)形成無(wú)性孢子或有性孢子使得個(gè)體數(shù)目增加的過(guò)程才叫做繁殖。一般情況下，當(dāng)環(huán)境條件適合時(shí)，生長(zhǎng)與繁殖始終是交替進(jìn)行的。從生長(zhǎng)到繁殖是一個(gè)由量變到質(zhì)變的過(guò)程，這個(gè)過(guò)程就是發(fā)育development。一.微生物生長(zhǎng)概述第三頁(yè)，共84頁(yè)。微生物在自然界總是混雜地生活在一起，要想研究某一種微生物，必須把研究對(duì)象從混雜群體中分離出來(lái)。獲得純培養(yǎng)的方法稀釋倒平板法pourplatemethod涂布平板法spreadplatemethod平板劃線分離法streakplatemethod利用選擇培養(yǎng)基分離單細(xì)胞（單孢子）分離法純培養(yǎng)技術(shù)純培養(yǎng)(pureculture)——微生物學(xué)中把從一個(gè)細(xì)胞或一群相同的細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)繁殖而得到的后代,稱純培養(yǎng).第四頁(yè)，共84頁(yè)。1、稀釋倒平板法2、涂布平板法操作較麻煩，對(duì)好氧菌、熱敏感菌效果不好！使用較多的常規(guī)方法，但有時(shí)涂布不均勻！第五頁(yè)，共84頁(yè)。3、平板劃線分離法（StreakPlate）特點(diǎn)：快速、方便。

分區(qū)劃線（適用于濃度較大的樣品）

連續(xù)劃線（適用于濃度較小的樣品）第六頁(yè)，共84頁(yè)。4、選擇培養(yǎng)分離抑制大多數(shù)其它微生物的生長(zhǎng)，使待分離的微生物生長(zhǎng)更快,數(shù)量上升直接挑取待分離的微生物的菌落獲得純培養(yǎng)。為了從混雜的微生物群體中分離出某種微生物，可以根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包括營(yíng)養(yǎng)、生理、生長(zhǎng)條件等，采用選擇培養(yǎng)的方法進(jìn)行分離。＊利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離＊富集培養(yǎng)第七頁(yè)，共84頁(yè)。利用選擇培養(yǎng)基分離根據(jù)所要分離的菌種的特性選用培養(yǎng)基：①分離真菌用馬丁氏培養(yǎng)基，pH偏酸；分離放線菌用高氏1號(hào)，pH中性偏堿。②根據(jù)不同菌對(duì)化學(xué)試劑的敏感性：分離放線菌，培養(yǎng)基中加10%酚，抑制細(xì)菌、真菌；從土壤中分離真菌，加鏈霉素，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。③根據(jù)分離對(duì)象的營(yíng)養(yǎng)特征：分離能發(fā)酵纖維素的菌株，培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源。分離固氮菌，用無(wú)氮培養(yǎng)基。第八頁(yè)，共84頁(yè)。5、單細(xì)胞（單孢子）分離法采用顯微分離法在顯微鏡下從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)。毛細(xì)管法：用毛細(xì)管提取微生物個(gè)體，適于較大微生物顯微操作儀：用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個(gè)細(xì)胞或孢子小液滴法：將經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含一個(gè)細(xì)胞的液滴來(lái)進(jìn)行純培養(yǎng)物的分離。第九頁(yè)，共84頁(yè)。第一節(jié)微生物生長(zhǎng)的測(cè)定二.以數(shù)量變化對(duì)微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行測(cè)定1、培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法2、膜過(guò)濾培養(yǎng)法3、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法三.以生物量為指標(biāo)測(cè)定微生物的生長(zhǎng)1、比濁法2、重量法3、生理指標(biāo)法在微生物學(xué)中提到的“生長(zhǎng)”，一般均指群體生長(zhǎng)。第十頁(yè)，共84頁(yè)。1、培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法二.以數(shù)量變化對(duì)微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行測(cè)定測(cè)定微生物的活菌數(shù)viablecount

稀釋平板測(cè)數(shù)法diluteplatecount以CFU(colonyformingunits)表示

稀釋培養(yǎng)測(cè)數(shù)法（又稱最大概率法，MPNmostprobablenumber）（參見(jiàn)實(shí)驗(yàn)教材）第十一頁(yè)，共84頁(yè)。2、膜過(guò)濾培養(yǎng)法測(cè)定含菌較少的空氣和水中的微生物數(shù)目水中的細(xì)菌總數(shù)：124個(gè)/100ml將定量的樣品通過(guò)濾膜過(guò)濾，菌體被阻留在濾膜上，取下濾膜進(jìn)行培養(yǎng)，然后計(jì)算菌落數(shù)，可求出樣品中所含菌數(shù)。菌數(shù)低的樣品（如水）→膜過(guò)濾→培養(yǎng)→菌落計(jì)數(shù)第十二頁(yè)，共84頁(yè)。（二）以數(shù)量變化對(duì)微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行測(cè)定3、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法采用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下對(duì)微生物數(shù)量進(jìn)行直接計(jì)數(shù)（計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度；個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察。第十三頁(yè)，共84頁(yè)。三.以生物量為指標(biāo)測(cè)定微生物的生長(zhǎng)1、比濁法在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細(xì)胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌數(shù)越多，光密度越大。因此，在一定波長(zhǎng)下測(cè)定菌懸液的光密度，就可反映菌液的濃度。2、重量法細(xì)胞干重測(cè)定：?jiǎn)挝惑w積的培養(yǎng)液中的微生物細(xì)胞的干重。3、生理指標(biāo)法①總氮量：用化學(xué)分析方法測(cè)出微生物細(xì)胞中蛋白質(zhì)或氮元素的含量。②DNA含量：用熒光法測(cè)定微生物細(xì)胞中DNA含量。

③代謝活性：根據(jù)微生物生命活動(dòng)的強(qiáng)度來(lái)估算生物量。 如單位體積培養(yǎng)物在單位時(shí)間內(nèi)的O2消耗、糖消耗或產(chǎn)酸產(chǎn)CO2量等。特點(diǎn)：快速、簡(jiǎn)便；但易受干擾。第十四頁(yè)，共84頁(yè)。細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的規(guī)律（標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)曲線）及控制技術(shù)（連續(xù)培養(yǎng)的概念與方法）

第二節(jié)細(xì)菌的群體生長(zhǎng)繁殖第十五頁(yè)，共84頁(yè)。一、生長(zhǎng)曲線一條典型的生長(zhǎng)曲線至少可以分為

遲緩期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期第十六頁(yè)，共84頁(yè)。①遲緩期lagphase（滯留適應(yīng)期）菌種初接入新鮮培養(yǎng)液內(nèi)，微生物細(xì)胞需要通過(guò)自身生理機(jī)能的調(diào)節(jié)逐步適應(yīng)新環(huán)境。表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)量不增加了但細(xì)胞個(gè)體體積增大，代謝活躍菌種：繁殖速度較快的菌種的延遲期一般較短菌齡：用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種接種時(shí)，其延遲期較短，甚至檢查不到延遲期接種量：一般接種量增大可縮短甚至消除延遲期（發(fā)酵工業(yè)上一般采用1/10的接種量）培養(yǎng)基成分：在營(yíng)養(yǎng)成分豐富的天然培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的延滯期比在合成培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)短；接種后培養(yǎng)基成分有較大變化時(shí)，會(huì)使延滯期加長(zhǎng)，所以發(fā)酵工業(yè)上盡量使發(fā)酵培養(yǎng)基的成分與種子培養(yǎng)基接近?！镉绊懷舆t期長(zhǎng)短的因素：第十七頁(yè)，共84頁(yè)。認(rèn)識(shí)延遲期的特點(diǎn)及原因?qū)?shí)踐的指導(dǎo)意義：◆在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短延遲期；采取的縮短lagphase的措施有：①增加接種量；（群體優(yōu)勢(shì)----適應(yīng)性增強(qiáng)）②采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的健壯菌種；③調(diào)整培養(yǎng)基的成分，在種子基中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些成分。④選用繁殖快的菌種◆在食品工業(yè)上，盡量在此期進(jìn)行消毒或滅菌第十八頁(yè)，共84頁(yè)。②對(duì)數(shù)期logarithmicgrowthphase

細(xì)菌生長(zhǎng)旺盛，代謝活力強(qiáng)。分裂速度快，菌數(shù)以指數(shù)級(jí)數(shù)增加，代時(shí)穩(wěn)定。應(yīng)用意義：①由于此時(shí)期的菌種比較健壯，生產(chǎn)上用作接種的最佳菌齡；②發(fā)酵工業(yè)上盡量延長(zhǎng)該期，以達(dá)到較高的菌體密度③食品工業(yè)上盡量使有害微生物不能進(jìn)入此期④是生理代謝及遺傳研究或進(jìn)行染色、形態(tài)觀察等的良好材料。第十九頁(yè)，共84頁(yè)。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期內(nèi)，細(xì)菌數(shù)目的增加是按指數(shù)級(jí)數(shù)增加的，即20→21→22→23……2n

這里的指數(shù)n為細(xì)菌分裂的次數(shù)或者增殖的代數(shù)，也就是一個(gè)細(xì)菌繁殖n代產(chǎn)生2n

個(gè)細(xì)菌。如果在對(duì)數(shù)期開(kāi)始時(shí)間t1的菌數(shù)為x1，繁殖n代后到對(duì)數(shù)期后期t2的菌數(shù)為x2，則代時(shí)(Generationtime，G)（即每增加一代所需要的時(shí)間）

G=（t2-t1）/n 先求代數(shù)n 由于x2=x1·2n lgx2=lgx1+nlg2； n=（lgx2-lgx1）/lg2 n=3.3·lg(x2/x1) G=（t2-t1）/3.3·lg(x2/x1)

第二十頁(yè)，共84頁(yè)。例如：在一細(xì)菌培養(yǎng)液中第一次測(cè)得的細(xì)菌數(shù)為104/ml，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)4h后，又測(cè)得菌液中的細(xì)菌數(shù)為108/ml，求此菌的世代時(shí)間和在此時(shí)間內(nèi)繁殖的代數(shù)。根據(jù)公式：G=（t2-t1）/3.3·lg(x2/x1)t2-t1=（4-0）×60min=240min

x2=108x1=104

lg(x2/x1)=lg108~lg104=8-4=4代入上式G=240/3.3×4=240/13.2=18min即在上述培養(yǎng)液中，世代時(shí)間為18min。細(xì)菌繁殖代數(shù)n=(t2-t1)/G=240/18=13.3繁代。第二十一頁(yè)，共84頁(yè)。③穩(wěn)定期(stationaryphase)又稱恒定期或最高生長(zhǎng)期。處于穩(wěn)定期的微生物，新增殖的細(xì)胞數(shù)與老細(xì)胞的死亡數(shù)幾乎相等，整個(gè)培養(yǎng)物中二者處于動(dòng)態(tài)平衡，此時(shí)生長(zhǎng)速度，又逐漸趨向零。

在一定容積的培養(yǎng)基中，細(xì)菌為什么不能按對(duì)數(shù)期的高速率無(wú)限生長(zhǎng)呢?這是由于對(duì)數(shù)期細(xì)菌活躍生長(zhǎng)引起周圍環(huán)境條件條件發(fā)生了一系列變化，某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗，有害代謝產(chǎn)物的積累，以及諸如pH、氧化還原電位、溫度等的改變，限制了菌體細(xì)胞繼續(xù)以高速度進(jìn)行生長(zhǎng)和分裂。

第二十二頁(yè)，共84頁(yè)。穩(wěn)定期的細(xì)胞內(nèi)開(kāi)始積累貯藏物，如肝糖、異染顆粒、脂肪粒等，大多數(shù)芽孢細(xì)菌也在此階段形成芽孢。如果為了獲得大量菌體，就應(yīng)在此階段收獲，因這時(shí)細(xì)胞總數(shù)量最高。這一時(shí)期也是發(fā)酵過(guò)程積累代謝產(chǎn)物的重要階段，某些放線菌抗生素的大量形成也在此時(shí)期。穩(wěn)定期的微生物，在數(shù)量上達(dá)到了最高水平，對(duì)于發(fā)酵生產(chǎn)來(lái)說(shuō)，一般在穩(wěn)定期的后期產(chǎn)物積累達(dá)到高峰，是最佳的收獲時(shí)期。應(yīng)用意義：1）發(fā)酵生產(chǎn)形成的重要時(shí)期（抗生素、氨基酸等），生產(chǎn)上應(yīng)盡量延長(zhǎng)此期，提高產(chǎn)量，措施如下：補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料）調(diào)pH

調(diào)整溫度2）穩(wěn)定期細(xì)胞數(shù)目及產(chǎn)物積累達(dá)到最高。第二十三頁(yè)，共84頁(yè)。④衰亡期(declinephase)細(xì)菌死亡率逐漸增加，群體中活菌數(shù)目急劇下降，出現(xiàn)了“負(fù)生長(zhǎng)”。其中有一段時(shí)間，活菌數(shù)呈幾何級(jí)數(shù)下降，故有人稱之為“對(duì)數(shù)死亡階段”。這一階段的細(xì)胞，有的開(kāi)始自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。菌體細(xì)胞也呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時(shí)產(chǎn)生畸形，細(xì)胞大小懸殊，有的細(xì)胞內(nèi)多液泡，革蘭氏染色反應(yīng)的陽(yáng)性菌變成陰性反應(yīng)等。第二十四頁(yè)，共84頁(yè)。不是所有細(xì)胞均處于完全相同的生理狀態(tài)，因此，在細(xì)菌生長(zhǎng)的整個(gè)周期，細(xì)菌數(shù)和培養(yǎng)時(shí)間，往往是一條緩慢上升以后又逐漸下降的曲線。認(rèn)識(shí)和掌握細(xì)菌生長(zhǎng)曲線，對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)的指導(dǎo)意義：1）計(jì)算生長(zhǎng)速率和代時(shí)；2）不同生長(zhǎng)期的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和生理上可能有很大差別，了解生長(zhǎng)曲線，就能根據(jù)需要進(jìn)取樣和收獲；3）不同的生長(zhǎng)期理化因子對(duì)微生物的影響可能不同。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞較為一致，因此常用于研究細(xì)胞的新陳代謝。第二十五頁(yè)，共84頁(yè)。三、連續(xù)培養(yǎng)（continuousculture）分批培養(yǎng)（batchculture）：將微生物置于一定容積的定量的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基一次性加入。不再補(bǔ)充和更換，最后一次性收獲。連續(xù)培養(yǎng)（continuousculture）：在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中，不斷供給新鮮的營(yíng)養(yǎng)液，同時(shí)排除含菌體及代謝產(chǎn)物的發(fā)酵液，讓培養(yǎng)的微生物長(zhǎng)時(shí)間地處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。連續(xù)培養(yǎng)理論基礎(chǔ)：基于對(duì)典型生長(zhǎng)曲線中穩(wěn)定期形成原因的認(rèn)識(shí)，采取相應(yīng)有效措施推遲其來(lái)臨，從而發(fā)展出連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)。第二十六頁(yè)，共84頁(yè)。原理：當(dāng)微生物在單批培養(yǎng)方式下生長(zhǎng)達(dá)到對(duì)數(shù)期后期時(shí)，一方面以一定的速度流進(jìn)新鮮培養(yǎng)基并攪拌，另一方面以溢流方式流出培養(yǎng)液，使培養(yǎng)物達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，其中的微生物就能長(zhǎng)期保持對(duì)數(shù)期的平衡生長(zhǎng)狀態(tài)和穩(wěn)定的生長(zhǎng)速率。單批培養(yǎng)恒濁法恒化法單批培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng) 時(shí)間連續(xù)流入新鮮培養(yǎng)液lg細(xì)胞數(shù)（個(gè)/ml）連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)原理第二十七頁(yè)，共84頁(yè)。概念：通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基流速，使培養(yǎng)液濁度保持恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法。原理：調(diào)節(jié)新鮮培養(yǎng)基流入的速度和培養(yǎng)物流出的速度來(lái)維持菌濃度不變,即濁度不變。采用光電裝置檢測(cè)培養(yǎng)容器中的濁度，當(dāng)濁度高時(shí)，使新鮮培養(yǎng)基的流速加快，濁度降低，則減慢培養(yǎng)基的流速。特點(diǎn)：基質(zhì)過(guò)量，微生物始終以最高速率進(jìn)行生長(zhǎng)；但工藝復(fù)雜，煩瑣。連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)——恒濁連續(xù)培養(yǎng)使用范圍：用于生產(chǎn)大量菌體、生產(chǎn)與菌體生長(zhǎng)相平行的某些代謝產(chǎn)物，如乳酸、乙醇等。第二十八頁(yè)，共84頁(yè)。連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)——恒化連續(xù)培養(yǎng)概念：以恒定流速使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)濃度恒定并保持細(xì)菌生長(zhǎng)速率恒定，使微生物始終在低于其最高生長(zhǎng)速率下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的方法。原理：通過(guò)控制某一種營(yíng)養(yǎng)物濃度（如碳、氮源、生長(zhǎng)因子等），使其始終成為生長(zhǎng)限制因子，而達(dá)到控制培養(yǎng)液流速保持不變，細(xì)菌的生長(zhǎng)速率將取決于限制性因子的濃度。特點(diǎn)：維持營(yíng)養(yǎng)成分的亞適量，控制微生物生長(zhǎng)速率。菌體生長(zhǎng)速率恒定，菌體均一、密度穩(wěn)定，產(chǎn)量低于最高菌體產(chǎn)量。應(yīng)用范圍：實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究第二十九頁(yè)，共84頁(yè)。裝置控制對(duì)象培養(yǎng)基培養(yǎng)基流速生長(zhǎng)速率產(chǎn)物應(yīng)用范圍恒濁器菌體密度（內(nèi)控制）無(wú)限制生長(zhǎng)因子不恒定最高大量菌體或與菌體形成相平行的產(chǎn)物生產(chǎn)為主恒化器培養(yǎng)基流速（外控制）有限制生長(zhǎng)因子恒定低于最高不同生長(zhǎng)速率的菌體實(shí)驗(yàn)室為主恒濁器恒化器的比較第三十頁(yè)，共84頁(yè)。連續(xù)發(fā)酵（continuousfermentation）連續(xù)培養(yǎng)在生產(chǎn)上的應(yīng)用，相對(duì)于單批發(fā)酵而言。優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：連續(xù)發(fā)酵的生產(chǎn)時(shí)間受以上因素限制，一般只能維持?jǐn)?shù)月~1年。縮短發(fā)酵周期，提高設(shè)備利用率；便于自動(dòng)控制；降低動(dòng)力消耗及體力勞動(dòng)強(qiáng)度；產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定。雜菌污染菌種退化營(yíng)養(yǎng)物利用率低于單批培養(yǎng)第三十一頁(yè)，共84頁(yè)。在分批培養(yǎng)中，各個(gè)細(xì)胞的生理狀態(tài)、代謝活動(dòng)并不完全一樣。為了解決這一問(wèn)題，就必須設(shè)法使群體處于同一發(fā)育階段，使群體和個(gè)體行為變得一致，因而發(fā)展了單細(xì)胞的同步培養(yǎng)技術(shù)。同步培養(yǎng)法synchronousculture：能使培養(yǎng)的微生物處于比較一致的生長(zhǎng)發(fā)育階段上的培養(yǎng)方法。同步生長(zhǎng)的概念：一個(gè)細(xì)胞群體中各個(gè)細(xì)胞都在同一時(shí)間進(jìn)行分裂的狀態(tài)，稱為同步生長(zhǎng)（synchronousgrowth），進(jìn)行同步分裂的細(xì)胞稱為同步細(xì)胞。同步細(xì)胞群體在任何一時(shí)刻都處在細(xì)胞周期的同一相，彼此間形態(tài)、生化特征都很一致，因而是細(xì)胞學(xué)、生理學(xué)和生物化學(xué)等研究的良好材料。四、同步培養(yǎng)第三十二頁(yè)，共84頁(yè)。獲得同步生長(zhǎng)的方法：獲得同步生長(zhǎng)的方法主要有兩類：環(huán)境條件誘導(dǎo)法：變換溫度、光線、培養(yǎng)基等，造成與正常細(xì)胞周期不同的周期變化。選擇法：選擇性過(guò)濾、梯度離心。物理方法，隨機(jī)選擇，不影響細(xì)胞代謝。第三十三頁(yè)，共84頁(yè)。機(jī)械法又稱選擇法微生物的子細(xì)胞與成熟細(xì)胞，通過(guò)機(jī)械法就可使它們?cè)谝欢ǔ潭壬戏珠_(kāi)來(lái)。然后用同樣大小的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)便可獲得同步培養(yǎng)物。

離心沉降分離法過(guò)濾分離法硝酸纖維薄膜法機(jī)械法同步培養(yǎng)物是在不影響細(xì)菌代謝的情況下獲得的，因而菌體的生命活必然較為正常。局限性：有些微生物即使在相同的發(fā)育階段，個(gè)體大小也不一致，甚至差別很大，這樣的微生物不宜采用這類方法。第三十四頁(yè)，共84頁(yè)。Helmstetter-Cummings法原理：一些細(xì)菌細(xì)胞會(huì)緊緊粘附于硝酸纖維微孔濾膜上。步驟：菌懸液通過(guò)微孔濾膜，細(xì)胞吸附其上；反置濾膜，以新鮮培養(yǎng)液通過(guò)濾膜，洗掉浮游細(xì)胞；除去起始洗脫液后就可以得到剛剛分裂下來(lái)的新生細(xì)胞，即為同步培養(yǎng)。第三十五頁(yè)，共84頁(yè)。調(diào)整生理?xiàng)l件的同步法（誘導(dǎo)法）溫度調(diào)整法將微生物的培養(yǎng)溫度控制在亞適溫度條件下一段時(shí)間，使細(xì)胞的生長(zhǎng)在分裂前不久的階段稍微受到抑制，然后將培養(yǎng)溫度提高或降低到最適生長(zhǎng)溫度，大多數(shù)細(xì)胞就會(huì)進(jìn)行同步分裂。營(yíng)養(yǎng)條件調(diào)整法即控制營(yíng)養(yǎng)物的濃度或培養(yǎng)基的組成以達(dá)到同步生長(zhǎng)。例如限制碳源或其他營(yíng)養(yǎng)物，使細(xì)胞只能一次分裂而不能繼續(xù)生長(zhǎng)，從而獲得了剛分裂的細(xì)胞群體，然后再轉(zhuǎn)入適宜的培養(yǎng)基中，它們例進(jìn)入了同步生長(zhǎng)。用最高穩(wěn)定期的培養(yǎng)物接種抑制DNA合成法利用代謝抑制劑阻礙DNA合成相當(dāng)一段時(shí)間，然后再解除其抑制，也可達(dá)到同步化的目的。試驗(yàn)證明：氨甲蝶呤、5-氟脫氧尿苷、羥基尿素、胸腺苷、脫氧腺苷和脫氧鳥(niǎo)苷等，對(duì)細(xì)胞DNA合成的同步化均有作用。

第三十六頁(yè)，共84頁(yè)。機(jī)械法對(duì)細(xì)胞正常生理代謝影響很少；而誘導(dǎo)同步分裂雖然方法多，應(yīng)用廣，但對(duì)正常代謝有時(shí)有影響，而且對(duì)其誘導(dǎo)同步化的生化基礎(chǔ)了解很少。必須根據(jù)待試微生物的形態(tài)、生理性狀來(lái)選擇適當(dāng)?shù)姆椒?。同步生長(zhǎng)的時(shí)間，因菌種和條件而變化，由于同步群體的個(gè)體差異，同步生長(zhǎng)不能無(wú)限地維持，往往會(huì)逐漸破壞，最多能維持2~3個(gè)世代，又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機(jī)生長(zhǎng)，即非同步化。第三十七頁(yè)，共84頁(yè)。第三節(jié)真菌的生長(zhǎng)

一、菌絲的生長(zhǎng)繁殖

菌絲的生長(zhǎng)是頂端生長(zhǎng)，菌絲各個(gè)部分都有極性之分，即位于前端的為幼齡菌絲，位于后面的為老齡菌絲。菌絲生長(zhǎng)與營(yíng)養(yǎng)有關(guān)，營(yíng)養(yǎng)豐富則分支點(diǎn)與菌絲生長(zhǎng)頂端的距離短，即分支多而頻繁；營(yíng)養(yǎng)貧乏分支點(diǎn)同菌絲生長(zhǎng)頂端距離長(zhǎng)，即分支少。菌絲在固體培養(yǎng)基或在液體培養(yǎng)中靜止培養(yǎng)時(shí)形成菌落，在液體培養(yǎng)中振蕩培養(yǎng)時(shí)則形成菌絲球。第三十八頁(yè)，共84頁(yè)。二、孢子生長(zhǎng)

無(wú)性孢子繁殖孢子的生長(zhǎng)包括:孢子腫脹（外源腫脹，不需營(yíng)養(yǎng)；內(nèi)源腫脹，需要營(yíng)養(yǎng)）萌發(fā)管形成菌絲生長(zhǎng)。有性孢子繁殖第一階段是質(zhì)配（plasmogamy）第二階段為核配（karyogamy）第三階段是減數(shù)分裂（meiosis）第三十九頁(yè)，共84頁(yè)。絲狀微生物的群體生長(zhǎng)絲狀微生物的純培養(yǎng)采用孢子接種，在液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)或深層通氣加攪拌培養(yǎng)，菌絲體通過(guò)斷裂繁殖不形成產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)?？梢杂镁z干重作為衡量生長(zhǎng)的指標(biāo)，即以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以菌絲干重為縱坐標(biāo)，繪制生長(zhǎng)曲線?？煞譃槿齻€(gè)階段：1、生長(zhǎng)停滯期2、迅速生長(zhǎng)期3、衰退期第四十頁(yè)，共84頁(yè)。1、生長(zhǎng)停滯期:造成生長(zhǎng)停滯的原因一是孢子萌發(fā)前真正的停滯狀態(tài)，另一種是生長(zhǎng)已經(jīng)開(kāi)始，但還無(wú)法測(cè)定。2、迅速生長(zhǎng)期:菌絲體干重迅速增加，其立方根與時(shí)間呈直線關(guān)系，菌絲干重不以幾何級(jí)數(shù)增加，沒(méi)有對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。生長(zhǎng)主要表現(xiàn)在菌絲尖端的伸長(zhǎng)和出現(xiàn)分支、斷裂等，此時(shí)期的菌體呼吸強(qiáng)度達(dá)到高峰，有的開(kāi)始積累代謝產(chǎn)物。3、衰退期:菌絲體干重下降，到一定時(shí)期不再變化。大多數(shù)次級(jí)代謝產(chǎn)物在此期合成，大多數(shù)細(xì)胞都出現(xiàn)大的空泡。有些菌絲體還會(huì)發(fā)生自溶菌絲體，這與菌種和培養(yǎng)條件有關(guān)。絲狀微生物的群體生長(zhǎng)第四十一頁(yè)，共84頁(yè)。第四節(jié)微生物生長(zhǎng)繁殖的控制控制（有害）微生物的生長(zhǎng)速率或消滅不需要的微生物，在實(shí)際應(yīng)用中具有重要的意義。抑制(Inhibition)：生長(zhǎng)停止，但不死亡；死亡(Death)：生長(zhǎng)能力不可逆喪失；防腐(Antisepsis)：防止或抑制霉腐微生物在食品等物質(zhì)上的生長(zhǎng)；化療(Chemotherapy)：殺死或抑制宿主體內(nèi)的病原微生物；消毒(Disinfection)：殺死或滅活病原微生物（營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞）；滅菌(Sterilization)：殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物；第四十二頁(yè)，共84頁(yè)。防腐antisepsis一種抑菌作用，利用某些理化因子，使物體內(nèi)外的微生物暫時(shí)處于不生長(zhǎng)繁殖但又未死亡的狀態(tài)。這是一種防止食品腐敗和其他物質(zhì)霉變的技術(shù)措施。如低溫、干燥、鹽腌、糖漬等等。消毒disinfection是指殺死或消除所有病原微生物的措施，可達(dá)到防止傳染病傳播的目的。例如將物體煮沸10min，就可殺死病原菌的營(yíng)養(yǎng)體，但絕非殺死所有的芽孢，常用于牛奶、食品以及某些物體表面的消毒。利用消毒劑（disinfectant），也可進(jìn)行皮膚、體膜或體內(nèi)的處理。第四十三頁(yè)，共84頁(yè)。滅菌sterilization是指用物理或化學(xué)因子，殺滅物體中的所有活微生物，包括最耐熱的細(xì)菌芽孢。這是一種徹底的殺菌措施。通過(guò)滅菌的物品不再存在任何有生命的有機(jī)體。化學(xué)治療chemotherapy是指利用某些具有選擇毒性的化學(xué)藥物(如磺胺)或抗生素，對(duì)生物體的深部感染進(jìn)行治療，可以有效地消除宿主體內(nèi)的病原體，但對(duì)宿主卻沒(méi)有或基本上沒(méi)有損害。第四十四頁(yè)，共84頁(yè)。一、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)化學(xué)物質(zhì)的抗微生物能力的測(cè)定液體培養(yǎng)法最低抑制濃度（minimuminhibitoryConcentration（MIC））實(shí)驗(yàn)平板培養(yǎng)法抑菌圈（zoneofinhibition）試驗(yàn)第四十五頁(yè)，共84頁(yè)。微生物生長(zhǎng)繁殖的控制一、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)抗微生物劑抑菌：抑菌劑(Bacteriostaticagent)殺菌殺菌劑(Bactericide)溶菌劑(Bacteriolysis)待測(cè)化學(xué)物質(zhì)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)培養(yǎng)物定時(shí)測(cè)定總菌數(shù)和活菌數(shù)第四十六頁(yè)，共84頁(yè)。類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍醇類70%—75%乙醇脫水、蛋白質(zhì)變性皮膚、器皿醛類0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）36%甲醛溶液（6ml/m3）＋高錳酸鉀適量產(chǎn)氣熏蒸蛋白質(zhì)變性房間、物品消毒（不適合食品廠）酚類3%—5%石炭酸0.5—1%2%來(lái)蘇兒3%—5%來(lái)蘇兒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變性桌面、地面、器具皮膚消毒皮膚地面、器具氧化劑0.1%高錳酸鉀3%過(guò)氧化氫0.2%—0.5%過(guò)氧乙酸氧化蛋白質(zhì)活性基團(tuán)，酶失活皮膚、尿道、水果、蔬菜皮膚、物品表面皮膚、塑料、玻璃、人造纖維、水果、蔬菜等常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用

第四十七頁(yè)，共84頁(yè)。常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05%—0.1%升汞2%紅汞0.1%—1%硝酸銀0.1%—0.5%硫酸銅蛋白質(zhì)變性、酶失活變性、沉淀蛋白蛋白質(zhì)變性、酶失活非金屬器皿皮膚、粘膜、傷口皮膚、新生兒眼睛防治植物病害表面活性劑0.05%—0.1%新潔爾滅0.05%—0.1%杜滅芬蛋白變性、破壞細(xì)胞膜皮膚、粘膜、器械皮膚、金屬、棉織品、塑料鹵素及其化合物0.2—0.5mg/L氯氣10%—20%漂白粉0.5%—1%漂白粉2.5%碘酒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)飲水、游泳池水地面和廁所消毒

水、空氣及飲水消毒皮膚染料2%—4%龍膽紫與蛋白質(zhì)的羧基結(jié)合皮膚、傷口酸類

0.1%苯甲酸

0.1%山梨酸食品防腐食品防腐第四十八頁(yè)，共84頁(yè)。（一）抗代謝類藥物（生長(zhǎng)因子類似物）:概念：有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似，以致于可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙酶的功能，干擾代謝的正常進(jìn)行，這些物質(zhì)叫抗代謝物，用于疾病治療，稱抗代謝類藥物，如：磺胺類藥物。機(jī)理：作為細(xì)菌細(xì)胞基本生長(zhǎng)因子的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（與相應(yīng)酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合）而阻止微生物對(duì)生長(zhǎng)因子的利用，因而可以抑制微生物的生長(zhǎng)。只有當(dāng)正常代謝產(chǎn)物的量少或不存在時(shí)，抗代謝物才有用。種類：磺胺藥——對(duì)氨基本甲酸

；

6-巰基嘌呤——嘌呤；

5-甲基色氨酸——氨基酸；異煙肼——吡哆醇。第四十九頁(yè)，共84頁(yè)。上次課知識(shí)點(diǎn)回顧1、微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定2、細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線3、分批培養(yǎng)與連續(xù)培養(yǎng)（恒化法與恒濁法）4、微生物生長(zhǎng)的控制。第五十頁(yè)，共84頁(yè)。第三節(jié)微生物生長(zhǎng)繁殖的控制一、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)抗微生物劑非選擇性（對(duì)所有細(xì)胞均有毒性）有選擇性（對(duì)病原微生物毒性更強(qiáng)）消毒劑(Disinfectant)防腐劑(Antisepsis)抗代謝藥物抗生素中草藥有效成分（化學(xué)治療劑）第五十一頁(yè)，共84頁(yè)。二.化學(xué)治療劑對(duì)微生物的作用

能直接干擾病原微生物的生長(zhǎng)繁殖并可用于治療感染性疾病的化學(xué)藥物。它能選擇性地作用于病原微生物新陳代謝的某個(gè)環(huán)節(jié)，使其生長(zhǎng)受到抑制或致死?？勾x藥物抗生素中草藥有效成分化學(xué)治療劑種類第五十二頁(yè)，共84頁(yè)。（一）抗代謝物磺胺藥物是最早發(fā)現(xiàn)，也是最常見(jiàn)的化學(xué)治療劑，抗菌譜廣，能治療多種傳染性疾病。大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌（如肺炎球菌、溶血性鏈球菌等）某些革蘭氏陰性細(xì)菌（如痢疾桿菌、腦膜炎球菌、流感桿菌等）對(duì)放線菌也有一定的作用。1934年，德國(guó)I.G.Farben染料廠的G.Domagkprontosil在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成了具有抑菌作用的磺胺G.Domagk因發(fā)明第一種治療微生物疾病的“神藥”獲得了1939年的諾貝爾生理和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)一種紅色染料（prontosil），白鼠靜脈注射可治療因鏈球菌引起的感染，但在體外卻無(wú)作用。1935年，進(jìn)一步證明prontosil對(duì)人的鏈球菌病也有效。第五十三頁(yè)，共84頁(yè)。二氫蝶啶

+對(duì)氨基苯甲酸二氫葉酸四氫葉酸

磺胺藥核酸合成二氫葉酸合成酶二氫葉酸還原酶磺胺藥作用機(jī)理：細(xì)菌需要利用對(duì)氨基苯甲酸合成生長(zhǎng)所需的葉酸：磺胺對(duì)人體無(wú)毒性，因?yàn)槿巳狈膶?duì)氨基苯甲酸合成葉酸的相關(guān)酶----二氫葉酸合成酶，不能用外界提供的對(duì)氨基苯甲酸自行合成葉酸，而必須直接利用葉酸為生長(zhǎng)因子進(jìn)行生長(zhǎng)?；前肥菍?duì)氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物，在一定條件下它們竟?fàn)幮缘嘏c二氫葉酸合成酶結(jié)合，阻止或取代了PABA進(jìn)入葉酸分子中，從而阻止了葉酸的合成。（PABA）第五十四頁(yè)，共84頁(yè)。抗代謝物與抗代謝類藥物有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似，以致可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙酶的功能，干擾代謝的正常進(jìn)行，這些物質(zhì)叫抗代謝物，用于疾病治療，稱抗代謝類藥物。機(jī)理：作為細(xì)菌細(xì)胞基本生長(zhǎng)因子的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（與相應(yīng)酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合）而阻止微生物對(duì)生長(zhǎng)因子的利用，因而可以抑制微生物的生長(zhǎng)。第五十五頁(yè)，共84頁(yè)。（二）抗生素概念：微生物在其生命過(guò)程中產(chǎn)生的一類低分子量代謝產(chǎn)物，在很低濃度下就能抑制或殺死其它微生物的生長(zhǎng)。最小抑制濃度（MinimalInhibitoryConcentration,MIC）表示抗生素的抗菌活性，單位是

g/ml.抗菌譜：抗生素的作用范圍。廣譜抗生素：對(duì)多種微生物有作用（如土霉素、四環(huán)素）窄譜抗生素：僅對(duì)某一類微生物有作用（如多粘菌素）第五十六頁(yè)，共84頁(yè)?？股氐淖饔脵C(jī)理1）作用于細(xì)胞壁青霉素類、頭孢菌素類、桿菌肽、環(huán)絲氨酸、萬(wàn)古霉素；多氧霉素2）干擾細(xì)胞膜功能多粘菌素、短桿菌素；制霉菌素、兩性霉素；纈氨霉素、莫能菌素；殺螨素。3）作用于蛋白質(zhì)合成卡那霉素、鏈霉素、四環(huán)素等主要作用于30S亞基；氯霉素、林可霉素、紅霉素等則作用于50S亞基。4）抑制核酸復(fù)制與轉(zhuǎn)錄絲裂霉素C(自力霉素)、博萊霉素(爭(zhēng)光霉素)、放線菌素D(更生霉素)、蒽環(huán)類；新生霉素、香豆霉素；喹諾酮類；利福霉素5）作用于能量代謝系統(tǒng)抗霉素、寡霉素第五十七頁(yè)，共84頁(yè)。微生物的抗藥性：①使抗生素向無(wú)活性的形式轉(zhuǎn)化；②抗生素作用靶位的修飾；③微生物對(duì)抗生素通透性的改變；④主動(dòng)外排系統(tǒng)的產(chǎn)生。第五十八頁(yè)，共84頁(yè)。二、控制微生物的物理因素殺滅或抑制微生物的物理因素溫度輻射過(guò)濾滲透壓干燥超聲波第五十九頁(yè)，共84頁(yè)。一、溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（一）微生物生長(zhǎng)的溫度類型第六十頁(yè)，共84頁(yè)。低溫型微生物psychrophiles可分為專性嗜冷和兼性嗜冷兩種。冷藏食物的腐敗往往由這類微生物引起。分布：地球兩極5℃左右的海洋中1~2℃的海洋深處冷泉機(jī)理：細(xì)胞內(nèi)的酶在低溫下仍能有效地發(fā)揮作用；細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸含量較高，細(xì)胞膜在低溫下仍保持半流動(dòng)狀態(tài)，從而能進(jìn)行活躍的物質(zhì)代謝。第六十一頁(yè)，共84頁(yè)。中溫型微生物mesophiles又可分為室溫性微生物和體溫性微生物。室溫性微生物適于20~30℃生長(zhǎng)，如土壤微生物、植物病原微生物。主要為腐生或植物寄生，存在植物或土壤中。體溫性微生物多為人及溫血?jiǎng)游锏牟≡?，最適生長(zhǎng)溫度與其宿主體溫相近，在25~40℃之間，人體寄生菌為37℃左右。第六十二頁(yè)，共84頁(yè)。高溫型微生物themophiles適于在45~50℃以上的溫度中生長(zhǎng)，常見(jiàn)類群有Bacillus、Methanobacterium等，常給罐頭工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)帶來(lái)麻煩。分布：局限于堆肥、溫泉、火山等。耐高溫的原因：菌體內(nèi)的酶和蛋白質(zhì)對(duì)熱更穩(wěn)定；核糖體和其他成分對(duì)高溫也具較大的抗性；細(xì)胞膜中飽和脂肪酸含量高，使膜在高溫下能保持其穩(wěn)定性并具正常的功能。第六十三頁(yè)，共84頁(yè)。不同微生物的致死溫度不同，同一菌種不同菌株或不同菌齡，其抗熱性也可能不同：一般幼齡的比老齡的對(duì)熱敏感。一般原核生物能在比真核生物更耐高溫；非光合微生物能在比光合微生物耐溫；噬菌體較其宿主細(xì)胞抗熱；放線菌和霉菌孢子比營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的抗熱性強(qiáng)；細(xì)菌芽孢抗熱性最強(qiáng)。

第六十四頁(yè)，共84頁(yè)。

高溫殺菌干熱滅菌①焚燒滅菌法此法滅菌徹底，迅速簡(jiǎn)便，但使用范圍有限。常用于接種工具、污染物品以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體等廢棄物的處理。②干熱滅菌法160~170℃處理2h主要在干燥箱中利用熱空氣進(jìn)行滅菌,只適用于玻璃器皿、金屬用具等耐熱物品的滅菌。其優(yōu)點(diǎn)是可保持物品干燥。第六十五頁(yè)，共84頁(yè)。濕熱滅菌①煮沸消毒法在水中煮沸15min以上，可殺死細(xì)菌的所有營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢。這種方法適用于注射器、解剖用具等的消毒。②高壓蒸汽滅菌法

√是實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)中常用的滅菌方法。加壓則可提供高于100℃的蒸汽，熱穿透力強(qiáng)，可迅速引起蛋白質(zhì)凝固變性。所以高壓蒸汽滅菌在濕熱滅菌法中效果最佳、應(yīng)用較廣。一般培養(yǎng)基、各種緩沖溶液、玻璃器皿等，常采用1kg/cm2(121℃)處理15~30min即可達(dá)到滅菌的目的。第六十六頁(yè)，共84頁(yè)。③間歇滅菌法常壓下100℃處理15~30min，以殺死其中的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞。冷卻后，置于一定溫度(28~37℃)保溫過(guò)夜，使其中可能殘存的芽孢萌發(fā)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，再以同樣方法加熱處理。如此反復(fù)三次，可殺滅所有芽孢和營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，以達(dá)到滅菌的目的。此法的缺點(diǎn)是滅菌比較費(fèi)時(shí)，一般只用于不耐熱的藥品、營(yíng)養(yǎng)物、特殊培養(yǎng)基等的滅菌。在缺乏高壓蒸汽滅菌設(shè)備時(shí)亦可用于一般物品的滅菌。

④巴斯德消毒法即用較低的溫度處理牛奶、酒類等飲料，以殺死其中的病原菌如結(jié)核桿菌、傷寒桿菌等，但又不損害營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味。如用62~63℃則處理30min，若以71℃，只需15min。處理后的物品應(yīng)迅速冷卻至10℃左右即可飲用。這種方法只能殺死大多數(shù)腐生菌的營(yíng)養(yǎng)體而對(duì)芽孢無(wú)損害。此法是基于結(jié)核桿菌的致死溫度62℃15min而規(guī)定的。

第六十七頁(yè)，共84頁(yè)。微生物的致死溫度在一定時(shí)間內(nèi)（如10min）殺死微生物所需要的最低溫度稱為微生物的致死溫度。生物的致死時(shí)間在一定溫度下殺死微生物所需要的最短時(shí)間稱為微生物的致死時(shí)間。溫度愈高，致死時(shí)間愈短。D值decimusvalue在特定溫度下使微生物菌數(shù)減少10倍所需的時(shí)間。第六十八頁(yè)，共84頁(yè)。◆影響膜表面電荷的性質(zhì)及膜的通透性，進(jìn)而影響對(duì)物質(zhì)的吸收能力?！舾淖兠富睢⒚复俜磻?yīng)的速率及代謝途徑◆影響培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收或有毒物質(zhì)的毒性。二、pH值與微生物生長(zhǎng)的相互影響（一）環(huán)境pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響第六十九頁(yè)，共84頁(yè)。微生物的生長(zhǎng)pH值范圍極廣，但是絕大多數(shù)種類都生活在pH5.0~9.0之間。細(xì)菌、藻類、原生動(dòng)物 最適pH為6.5~7.5放線菌 最適pH7.5~8.0霉菌、酵母 最適pH5~6（二)不同微生物對(duì)pH要求不同第七十頁(yè)，共84頁(yè)。同一種微生物在其不同的生長(zhǎng)階段和不同的生理生化過(guò)程中，對(duì)pH值的要求也不同。在發(fā)酵工業(yè)中，控制pH值尤其重要。

微生物 生長(zhǎng)最適pH 合成抗生素最適pH灰色鏈霉菌 6.3~6.9 6.7~7.3紅霉素鏈霉菌 6.6~7.0 6.8~7.3產(chǎn)黃青霉 6.5~7.2 6.2~6.8金霉素鏈霉菌 6.1~6.6 5.9~6.3龜裂鏈霉菌 6.0~6.6 5.8~6.1灰黃青霉 6.4~7.0 6.2~6.5（三）生長(zhǎng)的最適pH值與發(fā)酵的最適pH值第七十一頁(yè)，共84頁(yè)。同一種微生物在不同的生長(zhǎng)階段和不同生理生化過(guò)程中，對(duì)環(huán)境pH值要求不同。例如：丙酮丁醇梭菌

在pH值=5.5—7.0時(shí)，以菌體生長(zhǎng)為主在pH值=4.3—5.3時(shí)，進(jìn)行丙酮丁醇發(fā)酵同一種微生物由于環(huán)境pH值不同，可能積累不同的代謝產(chǎn)物。例如：黑曲霉pH值=2-2.5時(shí)，有利于合成檸檬酸，只產(chǎn)少量草酸pH2.5-6.5時(shí)，以菌體生長(zhǎng)為主pH值在7左右時(shí)，合成草酸為主，只產(chǎn)少量檸檬酸第七十二頁(yè)，共84頁(yè)?？衫梦⑸飳?duì)pH要求的不同，控制雜菌的污染。無(wú)機(jī)酸如硫酸、鹽酸等殺菌力雖強(qiáng)，但腐蝕性大；某些有機(jī)酸如苯甲酸可用作防腐劑；酸菜、飼料青貯則是利用乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸抑制腐敗性微生物的生長(zhǎng)。強(qiáng)堿可用作殺菌劑，但由于其毒性大，用途局限于對(duì)排泄物及倉(cāng)庫(kù)、棚舍等環(huán)境的消毒。強(qiáng)堿對(duì)G+與病毒比對(duì)G-作用強(qiáng)。結(jié)核分枝桿菌抗堿力特強(qiáng)。第七十三頁(yè)，共84頁(yè)。根據(jù)微生物與氧的關(guān)系,可把它們分為幾種類群:

專性好氧菌好氧菌

微好氧菌兼性厭氧菌耐氧厭氧菌

厭氧菌專性厭氧菌三、氧氣對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響第七十四頁(yè)，共84頁(yè)。專性好氧菌（strictaerobe）必須在有分子氧的條件下才能生長(zhǎng)。在有氧或無(wú)氧條件下均能生長(zhǎng)，但有氧情況下生長(zhǎng)得更好，在有氧時(shí)靠呼吸產(chǎn)能，無(wú)氧時(shí)經(jīng)發(fā)酵或無(wú)氧呼吸產(chǎn)能。微好氧菌（microaerophilicbacteria）只能較低的氧分壓下才能正常生長(zhǎng)，通過(guò)呼吸鏈并以氧為最終氫受體而產(chǎn)能。兼性好氧菌（facultativeaerobe）耐氧菌（aerotolerantanaerobe）可在分