醫(yī)學(xué)微生物學(xué)-真菌病毒總論

1

真菌學(xué)真菌（fungi）是一類真核細(xì)胞型微生物。有典型的細(xì)胞核和完善的細(xì)胞器。2

概念

真菌（fungi）是指具有真正的細(xì)胞核，產(chǎn)生孢子和不含葉綠素，以寄生或腐生方式吸收養(yǎng)料，僅少數(shù)為單細(xì)胞，大多數(shù)都有分支或不分支的絲狀體，能進(jìn)行有性和（或）無性繁殖的一群真核細(xì)胞型生物。

真菌廣泛分布于自然界，種類繁多，有10余萬種。大多對人無害，只有少數(shù)可引起人類疾病。大真菌Mushroom4真菌與人們生產(chǎn)、生活密切相關(guān)

penicilliummicrozyme

在Wittaker（1969）建立的五界分類系統(tǒng)（原核生物界、原生生物界、植物界、真菌界和動物界）中，把真菌單獨(dú)作為一界。而真菌門包括6個門：子囊菌門、擔(dān)子菌門、接合菌門、壺菌門、微孢子菌門和球囊菌門。6FUNGUSYeast（酵母）(singlecellular)Mold（霉菌）(multicellular)sporesporehypha1.真菌的形態(tài)Morphologyoffungi真菌的生物學(xué)特性真菌的結(jié)構(gòu)

Structureoffungi78單細(xì)胞真菌:形態(tài)呈圓形或橢圓形，常見于酵母菌或類酵母菌。它們以芽生方式繁殖產(chǎn)生子代。

新生隱球菌

Cryptococcusneoformans白假絲酵母菌

CandidaalbicansYeasts-Unicellularfungi

酵母菌-單細(xì)胞真菌

Budding出芽pseudomycelium10酵母菌芽生新生隱球菌繁殖

Cryptococcusneoformans

新生隱球菌

Candidaalbicans

白假絲酵母菌13

多細(xì)胞真菌

菌絲+孢子，交織成團(tuán)—菌絲體（霉菌）14菌絲（hypha)

菌絲是由成熟的孢子在環(huán)境合適的條件下長出的芽管并進(jìn)一步延伸呈絲狀。菌絲分為營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲中能形成孢子的叫做繁殖菌絲。15孢子(spore)

真菌的繁殖結(jié)構(gòu)，由生殖菌絲產(chǎn)生。根據(jù)繁殖方式，孢子可分為有性孢子和無性孢子。Molds-MulticellularfungiHyphaspore17無性孢子

分生孢子葉狀孢子孢子囊孢子分生孢子孢子囊孢子18有性孢子：接合孢子19真菌孢子與細(xì)菌芽胞的區(qū)別真菌孢子細(xì)菌芽胞抵抗力不強(qiáng)，60～70℃短時間即死抵抗力強(qiáng)，能耐煮沸1～2小時一條菌絲可產(chǎn)生多個孢子一個細(xì)菌只產(chǎn)生一個芽胞是真菌的繁殖形式是細(xì)菌的休眠狀態(tài)20培養(yǎng)特性常用培養(yǎng)基：沙保（Sabouraud’smedium）培養(yǎng)基，pH值5.5（4.0～6.0）培養(yǎng)溫度：淺部真菌22~28C℃

深部真菌37

℃

生長速度：1～4W菌落類型：酵母型菌落；絲狀菌落。21單細(xì)胞真菌菌落Unicellularfungi

Colony23多細(xì)胞真菌菌落MulticellularfungimoldMulticellularfungi26

有些真菌在不同寄生環(huán)境和培養(yǎng)條件下出現(xiàn)兩種形態(tài)，稱雙相性真菌（dimorphicfungi），即在機(jī)體內(nèi)或含血培養(yǎng)中37℃孵育，呈現(xiàn)酵母型菌落，而在沙保培養(yǎng)基上室溫孵育，則形成絲狀菌落。如莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌等。27抵抗力

真菌對干燥，陽光，紫外線及一般消毒劑有較強(qiáng)的抵抗力。但對2.5%碘酒，10%福爾馬林都敏感，一般可用甲醛薰蒸被真菌污染的房間。對熱敏感，一般60℃1小時可殺死真菌菌絲和孢子。28致病性致病物質(zhì)：細(xì)胞壁糖蛋白（有內(nèi)毒素樣活性），毒素，莢膜等。致病方式（五種）：

致病性真菌感染（主要是外源性真菌）條件致病性真菌感染（主要是內(nèi)源性真菌）真菌超敏反應(yīng)性疾?。ㄆぱ?、哮喘等）真菌性中毒（毒素引起）

真菌毒素與腫瘤的關(guān)系（黃曲霉毒素等）29

有些真菌本身就具有毒性，稱為有毒真菌，如毒蘑菇，食用后可引起人畜的直接中毒。免疫性1、天然免疫（1）皮膚粘膜屏障①機(jī)械阻擋②皮脂腺，汗腺，分泌酸性物質(zhì)（兒童易患頭癬，成人易患手足癬）③正常菌群拮抗（2）吞噬細(xì)胞（3）體液抗菌物質(zhì)2、獲得性免疫：真菌感染的恢復(fù)主要依靠細(xì)胞免疫。3031主要致病性真菌分類：依據(jù)侵犯部位和臨床表現(xiàn)

淺部感染真菌深部感染真菌條件致病性真菌一、淺部感染真菌（皮膚癬菌）

黃癬白癬體癬毛癬菌（Trichophyton）表皮癬菌（Epidermophyton）小孢子癬菌（Microsprum）33股癬甲癬足癬Malasseziafurfur（秕糠馬拉癬菌）35微生物學(xué)檢查法

1.標(biāo)本：根據(jù)病變部位取材2.直接鏡檢：觀察菌絲和孢子結(jié)構(gòu)淺部感染真菌的病變標(biāo)本如毛發(fā)、皮屑、甲屑置玻片上，滴加10%KOH，加蓋玻片微熱熔化角質(zhì)層，再將玻片壓緊，用吸水紙吸去周圍多余堿液，在顯微鏡下觀察，見皮屑、甲屑中有菌絲，或毛發(fā)內(nèi)部或外部有成串孢子，即可初步診斷為癬菌感染，但不能確定菌種。3.分離培養(yǎng)：沙保培養(yǎng)基許蘭毛癬菌石膏毛癬菌Trichophyton

毛癬菌屬Epidermophyton

表皮癬菌（絮狀表皮癬菌）Microsprum

小孢子菌屬（犬小孢子菌）39二、深部真菌感染

深部或系統(tǒng)性感染真菌是能侵襲深部組織和內(nèi)臟以及全身的真菌。感染大多系外源性，致病性較強(qiáng)，能引起慢性肉芽腫樣炎癥，潰瘍和壞死等。40（一）皮下組織感染真菌引起皮下組織感染真菌病的真菌有很多種，分別屬于不同菌屬，但它們有以下兩個共同點(diǎn)：①為自然生長于土壤或腐壞植物中的腐生菌；②必須經(jīng)由宿主的創(chuàng)口才能進(jìn)入皮下組織，蔓延致病。主要有：孢子絲復(fù)合體是孢子絲菌病的病原體；黑霉菌可引起產(chǎn)色霉菌病；足分枝菌病真菌引起足分枝菌病。41致病性真菌疾病名稱皮炎芽生菌(Blastomycesdermatitidis)芽生菌病巴西副球孢子菌(Paracoccidioidesbrasiliensis)副球孢子菌病莢膜組織胞漿菌(Histoplasmacapsulaum)組織胞漿菌病粗球孢子菌(Coccidioidesimmitis)球孢子菌病（二）系統(tǒng)性感染真菌系統(tǒng)性真菌?。╯ystemicmycoses）是由土壤中的真菌所引起的，通常是由呼吸道吸入或傷口進(jìn)入而感染。主要的系統(tǒng)性真菌有四種，這些真菌均具有雙相性。42新生隱球菌

Cryptococcusneoformans1、生物學(xué)特性（1）形態(tài)結(jié)構(gòu)和染色：圓形，厚莢膜。（2）培養(yǎng)：沙保培養(yǎng)基或血瓊脂培養(yǎng)基溫度：25°C和37°C皆能生長

菌落：酵母型菌落

43442、致病性

傳染源：禽類，如鴿子糞便傳播途徑：呼吸道傳播病變部位：肺，腦多見預(yù)防本菌感染，除應(yīng)增強(qiáng)機(jī)體免疫力外，避免創(chuàng)口感染（土壤及鳥糞等）45三、條件致病性真菌特點(diǎn):致病力不是很強(qiáng)；引起感染多為內(nèi)源性；往往是繼發(fā)感染，如久病體弱，免疫力低下或菌群失調(diào)時發(fā)生。OpportunisticMycosesCandida（假絲酵母菌）Aspergillus（曲霉）Mucor（毛霉）Pneumocystiscarinii(卡氏肺孢子菌）

47（一）假絲酵母菌（俗稱念珠菌）48形態(tài)、染色:白假絲酵母菌菌體圓形或卵圓形，革蘭染色陽性，大小不等，著色不均勻白假絲酵母菌形成假菌絲和厚膜孢子，有助鑒別假菌絲：孢子伸長成芽管，不與母體脫離，形成較長的假菌絲厚膜孢子:在玉米培養(yǎng)基上可長出厚膜孢子49假菌絲和厚膜孢子50致病性（1）入侵原因機(jī)體抵抗力下降（AIDS）大量、長期使用抗菌藥物，激素和免疫抑制劑（2）入侵部位皮膚粘膜感染：以鵝口瘡、陰道炎最多見內(nèi)臟感染：有肺炎、腸胃炎、心內(nèi)膜炎等，偶而也可發(fā)生敗血癥中樞神經(jīng)感染：腦膜炎、腦炎51念珠菌性口腔炎真菌引起的過敏與中毒交鏈孢霉屬分枝孢子菌霉曲霉屬青霉菌屬Aspergillus曲霉菌Aspergillusfumigatus

煙曲霉菌：allergic,pneumonia

Aspergillusflavus黃曲霉菌：Mycotoxinandtumor(livercancer)黃曲霉菌的黃曲霉毒素與肝癌等惡性腫瘤密切相關(guān)我國肝癌高發(fā)區(qū)廣西福綏縣和江蘇祁東縣（玉米，花生中黃曲霉毒素超標(biāo)）54曲霉菌Aspergillus

ASPERGILLOSIS（曲霉?。?/p>

曲霉菌在自然界中廣泛分布，已發(fā)現(xiàn)300多種曲霉菌，其中僅少數(shù)屬于機(jī)會致病菌，以煙曲霉菌最常見。

Aspergillusfumigatus（煙曲霉）

Aspergillusniger（黑曲霉）Allergic-hypersensitivitytotheorganism.Aggressivetissueinvasion.Primarilyapulmonarydisease,buttheaspergillimaydisseminatetoanyorgan.Theymaycauseendocarditis（心內(nèi)膜炎）,osteomyelitis（骨髓炎）,otomycosis（霉菌?。゛ndcutaneouslesions.55肺曲霉菌病56毛霉菌毛霉菌廣泛分布在自然界中，常引起食物霉變。毛霉菌是人體的機(jī)會致病菌，多在機(jī)體免疫力極度降低情況下發(fā)病?？汕址阜?，鼻、鼻竇、眼眶、腦及消化道等。57

鼻腦毛霉菌病是最常見的類型，但有時也可發(fā)生原發(fā)性皮膚，肺或胃腸道病變，也可經(jīng)血流播散到其他部位。鼻腦感染通常是暴發(fā)性的，并且常致死。組織壞死性病變常發(fā)生于鼻粘膜，有時可見于腭部。菌絲侵犯血管可引起鼻中隔，腭和眼眶或鼻竇周圍骨骼的進(jìn)行性組織壞死。壞死的進(jìn)行性擴(kuò)展可累及大腦，而引起篩狀竇栓塞體征，驚厥，失語或偏癱。糖尿病酮酸中毒癥的病人最易受感染。58防治原則

真菌感染尚無特異預(yù)防，主要注意公共衛(wèi)生和個人衛(wèi)生，碘化物治療孢子絲菌病、毛霉菌病有一定療效。制霉素、灰黃霉素、克霉唑（三苯甲霉唑）、酮康唑等外用或內(nèi)服對癬癥和白色念珠菌病等有較好療效。近年服用5-氟胞嘧啶（5-FC）治療單細(xì)胞真菌感染療效顯著。二性霉素B可用于深部全身真菌感染。59真核細(xì)胞型微生物真菌有完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)如細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，胞漿，細(xì)胞核有DNA和RNA80S核糖體有較多的細(xì)胞器出芽

酮康唑，咪康唑，兩性霉素B，…尚缺乏安全高效的抗真菌藥醫(yī)學(xué)病毒學(xué)MedicalVirologySmallpoxinChina1000BCVariolation種痘天花，種痘病毒（virus）的概念病毒是一類體積微小，結(jié)構(gòu)簡單，僅含一種類型核酸，必須在活的敏感細(xì)胞內(nèi)才能生長繁殖的非細(xì)胞型微生物。1、近75％的傳染病由病毒引起2、傳染性強(qiáng)，傳播迅速，流行廣泛，死亡率高3、病毒與腫瘤及自身免疫性疾病的發(fā)生密切相關(guān)，有致畸作用4、目前病毒感染的診療還相對滯后，部分病毒尚缺乏有效疫苗5、不斷發(fā)現(xiàn)引起人類疾病的新病毒醫(yī)學(xué)病毒學(xué)現(xiàn)狀新現(xiàn)的主要病毒種類人類免疫缺陷病毒埃博拉病毒SARS病毒禽流感病毒瘋牛病病毒一.病毒的基本性狀病毒的大小和形態(tài)（一）大小

測量單位為納米(nm)最大的痘苗病毒為300nm較小的脊髓灰質(zhì)炎病毒為30nm

#準(zhǔn)確測量方法：電鏡

(Electronmicroscope，EM)

病毒體（virion）完整性

感染性葡萄球菌(1000nm）

牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體

(65×95nm)B、腺病毒

(70nm)C、脊髓灰質(zhì)炎病毒

(30nm)D、乙腦病毒

(40nm)E、卵蛋白分子

(10nm

)F、流感病毒

(100nm)G、煙草花葉病毒（二）形態(tài)（三）病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成1.基本化學(xué)組成：核酸+蛋白質(zhì)2.病毒的結(jié)構(gòu)：

裸病毒核心（核酸）衣殼（蛋白質(zhì)）包膜核衣殼包膜病毒NakedvirusesNeucleocapsidEnvelopedviruses(1)病毒核酸核酸種類：DNA或者RNA形態(tài)分類：線形/環(huán)形；單/雙；+/-；節(jié)段

開放讀碼框

(openreadingframe,ORF)間可有基因重疊現(xiàn)象(overlappinggene)

基因重疊模式圖（2）衣殼

ViralCapsidTheproteinshell,orcoat,thatenclosesthenucleicacidgenome.Functions:a.Protecttheviralnucleicacidb.Participateintheviralinfectionc.Sharetheantigenicity衣殼組成：殼粒(capsomeres)殼粒數(shù)目排列螺旋對稱型

20面體立體對稱型

復(fù)合對稱型

衣殼的對稱結(jié)構(gòu)型衣殼蛋白的功能保護(hù)病毒核酸特異性吸附宿主細(xì)胞表面受體抗原成分，誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng)(3)包膜EnvelopeAlipid-containingmembranethatsurroundssomeviralparticles.Itisacquiredduringviralmaturationbyabuddingprocessthroughacellularmembrane.envelopedvirusandnakedvirus

包膜子粒(peplomere)或刺突(spike):GlycoproteinsenchasedinenvelopeEnvelopedVirusNakedVirusCubicHelical病毒體結(jié)構(gòu)模式圖（四）病毒的分類

分類原則：1、核酸類型與結(jié)構(gòu)2、病毒體的形狀和大小3、病毒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)4、對脂溶劑的敏感性

一般分為DNA病毒、RNA病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒三類。

不分節(jié)段（Polio病毒）

+RNA-V

分節(jié)段（RNA腫瘤病毒）

ssRNA

不分節(jié)段（副粘病毒）

RNA-V

-RNA-V

分節(jié)段（正粘病毒）

dsRNA---------±RNA-V---分節(jié)段（呼腸病毒）

ssDNA---------+DNA(AAV)

DNA-V

dsDNA--------±DNA(HSV)

逆轉(zhuǎn)錄病毒非尋常病毒朊粒(prion)，蛋白侵染顆粒，生物學(xué)地位待定，僅由一種耐蛋白酶K的蛋白分子組成。

二.病毒的增殖

（一）病毒的復(fù)制周期特點(diǎn)：復(fù)制（自我復(fù)制self-replication）病毒的復(fù)制周期：病毒進(jìn)入敏感細(xì)胞后，以其基因組為模板，借助細(xì)胞中的原料、能量及場所合成自己的大分子（蛋白質(zhì)與核酸）以組裝子代病毒顆粒，最終按一定方式釋放出細(xì)胞。病毒復(fù)制過程

吸附穿入脫殼復(fù)制周期生物合成(replicationcycle)

裝配釋放通過病毒的包膜或無包膜病毒表面的配體位點(diǎn)與細(xì)胞表面的特異受體結(jié)合而吸附。1、吸附

adsorption病毒受體感染細(xì)胞HIVCD4分子CD4＋T細(xì)胞EB病毒CR2（補(bǔ)體受體2）B細(xì)胞流感病毒糖蛋白末端神經(jīng)氨酸許多細(xì)胞丙型肝炎病毒CD81肝細(xì)胞等adsorption2、穿入penetration包膜病毒—包膜與宿主細(xì)胞膜融合為主無包膜病毒—胞飲和直接進(jìn)入penetrationherpesviruses,paramyxoviruses,HIV直接穿入penetration直接穿入penetration

病毒在細(xì)胞內(nèi)脫去衣殼后，核酸才可發(fā)揮指令作用，多數(shù)是在細(xì)胞的溶酶體酶作用下脫殼釋放出病毒基因組。3、脫殼

uncoating4、生物合成

biosynthesis

通過病毒基因組表達(dá)與復(fù)制來完成的，包括蛋白質(zhì)的合成與核酸的復(fù)制，此階段無完整病毒可見，也不能用血清學(xué)檢測出病毒的抗原，稱為隱蔽期。發(fā)生在病毒核酸復(fù)制之前的轉(zhuǎn)錄稱為早期轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)物為早期mRNA，翻譯出早期蛋白；發(fā)生在病毒核酸復(fù)制開始或之后的轉(zhuǎn)錄稱為晚期轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)物為晚期mRNA，翻譯出晚期蛋白。早期蛋白(earlyprotein):是功能性蛋白質(zhì)，為病毒核酸復(fù)制提供酶類，抑制宿主細(xì)胞的自身代謝過程。晚期蛋白(lateprotein):主要是病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，與病毒的形態(tài)構(gòu)成有關(guān)。dsDNA-V（大多數(shù)DNA病毒，如HSV皰疹病毒）DNA半保留復(fù)制；

細(xì)胞核中合成DNA，細(xì)胞質(zhì)中合成病毒蛋白；根據(jù)病毒核酸復(fù)制時點(diǎn)將轉(zhuǎn)錄分為早期轉(zhuǎn)錄和晚期轉(zhuǎn)錄。早期早期（TK脫氧胸苷激酶）晚期晚期（結(jié)構(gòu)）ssDNAvirus(微小病毒、TTV)

-ssDNA復(fù)制中間體解鏈，轉(zhuǎn)錄翻譯裝配衣殼核衣殼子代-ssDNA+ssRNA-V（如poliovirus

）（１）本身具有mRNA功能，形成多聚大蛋白；（２）復(fù)制中間體（replicativeintermediate,RI）:±RNA；（３）在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)合成子代RNA和病毒蛋白+ssRNA(mRNA)復(fù)制中間體(±RNA)轉(zhuǎn)譯病毒的非結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)蛋白裝配衣殼核衣殼解鏈子代+ssRNA-ssRNA-V（如influenzaAvirus）（１）本身沒有mRNA功能；（２）復(fù)制互補(bǔ)＋RNA，作為mRNA

-ssRNA轉(zhuǎn)錄翻譯裝配衣殼核衣殼解鏈子代-ssRNA復(fù)制中間體自身攜帶的RNA多聚酶dsRNA-V（如Rotavirus）dsRNA翻譯裝配衣殼核衣殼解鏈Retrovirus（如

HIV）逆轉(zhuǎn)錄酶，以親代RNA為模板合成互補(bǔ)DNA復(fù)制中間體：+RNA-DNA雜交體；前病毒（provirus）整合入細(xì)胞的染色體DNA，可隨宿主細(xì)胞分裂而存在于子代細(xì)胞中。

Retrovirus+ssRNA反轉(zhuǎn)錄翻譯裝配衣殼核衣殼酶解RNA鏈合成DNA鏈子代+ssRNA復(fù)制中間體整合細(xì)胞染色體104BindingFusionReversetranscriptionNuclearlocalizationUncoatingIntegrationTranscriptionSplicingRNAexportGenomicRNAmRNATranslationModificationBuddingAssemblyMaturationEndocytosisLysosome1055、裝配與釋放

assemblyandrelease裂解細(xì)胞：腺病毒等無包膜病毒出芽方式：皰疹病毒等包膜病毒細(xì)胞融合：巨細(xì)胞病毒等整合方式：人類免疫缺陷病毒等

病毒復(fù)制周期

理化因素對病毒的影響滅活（inactivation）：病毒體受理化因素作用后，失去感染性；保留其抗原性、紅細(xì)胞吸附等生物學(xué)功能。物理因素：溫度、pH、射線化學(xué)因素：脂溶劑、化學(xué)消毒劑等溫度：病毒在pH5.0以下或pH9.0以上迅速滅活射線：大多病毒耐冷不耐熱，HAV耐熱。pH：γ射線，χ射線，紫外線多能使病毒滅活物理因素化學(xué)因素：氧化劑、鹵素及其他化合物有滅活病毒的功能脂溶劑可破壞有包膜的病毒酚類可除去病毒衣殼蛋白甲醛可破壞對病毒的感染性而對抗原性影響不大三.病毒的遺傳和變異

病毒株(strain)：同種病毒的不同分離株。病毒型別(type)：同種病毒的不同血清型。突變株(mutant)：基因改變而發(fā)生某些生物特性改變的毒株。病毒準(zhǔn)種(quasispecies)：從一個原始的特定病毒序列開始，病毒的每一輪復(fù)制均導(dǎo)致變異株的出現(xiàn)。一組自身復(fù)制的分子，彼此不同又密切相關(guān)。在任何時點(diǎn)，病毒群總是由常見的代表性序列（主序列）和同一組不同的但又密切相關(guān)的序列組成。遺傳型變異：非遺傳型變異:病毒變異的類型和機(jī)制病毒基因組堿基突變(mutation)病毒與病毒基因組之間的相互作用：重組(recombination)

重配(reassortment)表型混合表型交換遺傳型變異

基因突變（genemutation）

突變株（mutant）表現(xiàn)為宿主范圍、組織親嗜性、抗原成分、耐藥性、毒力等性狀改變遺傳型變異病毒基因組堿基突變自發(fā)突變spontaneousmutation

RNA病毒﹥DNA病毒誘發(fā)突變inducedmutation突變株（mutant）：表現(xiàn)為宿主范圍、組織親嗜性、抗原成分、耐藥性、毒力等性狀改變。溫度敏感突變株（temperaturesensitivemutant，ts）：高溫下基因編碼的蛋白或酶失去功能。宿主范圍突變株（host-rangemutant,hr）：改變了對宿主細(xì)胞的吸附或相互作用。eg:流感病毒耐藥突變株drug-resistantmutant：病毒靶酶基因發(fā)生改變。

eg:HIV的AZT變異株。減毒突變株Attenuatedmutantsmilder(orno)symptomsPotentialroleinvaccinedevelopmentLostthepathogenesis,retaintheantigenicity引起新流行SARS,avianflu抗原成分突變增加診斷的困難耐藥突變drug-resistantmutant

病毒靶酶基因發(fā)生改變→耐藥；HIV→AZT（疊氮脫氧胸苷）變異株?；蛑亟Mgeneticrecombination

形成兼有兩親代病毒特性的子代病毒?；蛑嘏?/p>

geneticreassortment

通過交換RNA節(jié)段而進(jìn)行的重組！甲型流感病毒抗原轉(zhuǎn)換引起的流行流行年代亞型類別流行情況1918Hsw1N1可能為豬流感病毒西班牙流感，全球2000-4000萬人死亡1957H2N2（亞洲甲型）亞洲流感，美國7萬人死亡1968H3N2（香港甲型）香港流感，美國3.4萬人死亡1977H1N1H3N2俄羅斯流感1997H5N1中國香港，大規(guī)模禽流感，35人發(fā)病2000H3N2歐，美，亞三洲2004禽流感大規(guī)模，東南亞2009H1N1世界范圍，1.85萬人死亡2014H9N2，H7N9禽流感四.

病毒的感染與免疫病毒感染viralinfection

病毒通過多種傳播途徑進(jìn)入機(jī)體并在細(xì)胞中增殖的過程。病毒與機(jī)體病毒與細(xì)胞

病毒感染的傳染源

病人病毒攜帶者患病或攜帶病毒的中間宿主醫(yī)源性感染病毒的傳播方式一、水平傳播(horizontalinfection)

二、垂直傳播(verticalinfection)水平傳播:是指病毒在人群不同個體間的傳播所導(dǎo)致的感染，其傳播途徑包括：呼吸道、消化道、泌尿生殖道、眼和破損皮膚等。主要感染途徑傳播方式與媒介病毒種類呼吸道空氣、飛沫流感病毒、麻疹病毒等消化道污染水或食物脊髓灰質(zhì)炎病毒、輪狀病毒等輸血、注射或器官移植污染血或血制品、污染注射器等人類免疫缺陷病毒、乙肝病毒和丙肝病毒等眼或泌尿生殖道接觸、游泳池或性接觸人類免疫缺陷病毒、乳頭瘤病毒破損皮膚昆蟲叮咬、狂犬、鼠類腦炎病毒、出血熱病毒等垂直傳播:是病毒通過胎盤、產(chǎn)道等途徑由親代傳給子代的過程，常見的是RUV、CMV、HBV、HIV。TORCH：常見經(jīng)垂直感染致胎兒畸形的病原體。梅毒螺旋體（T.pallidum,Tp）、弓形蟲（Toxoplasma,Tox）、風(fēng)疹病毒（rubellavirus,Rv）、巨細(xì)胞病毒（Cytomegalovirus,Cmv）、單純庖疹病毒（herpessimplexvirus,HSV）。垂直傳播發(fā)生的過程

病毒組特征舉例蟲媒病毒吸血昆蟲傳播布尼亞病毒、黃病毒消化道傳播病毒胃腸道感染小RNA病毒、杯狀病毒、星狀病毒、輪狀病毒呼吸道病毒呼吸道傳播正粘、副粘、鼻病毒、腺病毒肝炎病毒感染肝臟HA\HB\HC\HD\HEV性傳播病毒性接觸傳播HPV\HIV輸血傳播病毒HB\HC\HPV按病毒傳播方式和感染部位把人類病毒分類呼吸道病毒正粘病毒(orthomyxoviridae):流感病毒副粘病毒(paramyxoviridae)：副流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒其他病毒：腺病毒、風(fēng)疹病毒、鼻病毒、冠狀病毒人類腸道病毒包括：1、脊髓灰質(zhì)炎病毒(poliovirus)：1～3型。2、柯薩奇病毒(coxsackievirus)3、人腸道致細(xì)胞病變孤兒病毒（埃可病毒）

(entericcytopathogenichumanorphanvirus，ECHO)4、新腸道病毒：68、69、70、71型急性胃腸炎病毒：輪狀病毒、杯狀病毒、星狀病毒。。。

消化道病毒肝炎病毒病毒種類HAVHBVHCVHDVHEV病毒分類小RNA病毒科嗜肝DNA病毒科黃病毒科缺陷病毒杯狀病毒科病毒大小(nm)274240~6035~3732~34基因+ssRNAdsDNA+ssRNA-ssRNA+ssRNA抗原HAVAgHBsAg/HBcAg/HBeAgHCVAgHDVAgHEVAg傳播途徑消化道血源血源血源消化道潛伏期(天)15～5030～16015～9025～7510～60慢性化無3～10%40~70%2~7%無蟲媒病毒arbovirus

通過吸血節(jié)肢動物(蚊、蜱、白蛉等)叮咬人、家畜及野生動物而傳播疾病的病毒。伊蚊虱、蜱吸血白蛉庫蚊其他病毒出血熱病毒：漢坦病毒皰疹病毒：HSV，VZV，CMV。。。逆轉(zhuǎn)錄病毒：HIV狂犬病病毒人乳頭瘤病毒：HPV細(xì)小DNA病毒痘病毒朊粒病毒的致病機(jī)制一、病毒對宿主細(xì)胞的致病作用二、病毒感染的免疫病理作用一、病毒對宿主細(xì)胞的致病作用溶細(xì)胞感染

cytocidalinfection穩(wěn)定狀態(tài)感染

steadystateinfection細(xì)胞凋亡

apoptosis細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)化cellproliferationandtransformation病毒基因組的整合integrationinfectionCytopathiceffect(CPE)

細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathiceffect,CPE）：溶細(xì)胞型病毒感染細(xì)胞后，可出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)縮、裂解或細(xì)胞腫大，或數(shù)個細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞或細(xì)胞聚集成葡萄串狀、脫落或死亡等。溶細(xì)胞型感染病毒在宿主細(xì)胞復(fù)制成熟后，一次釋放大量子代病毒，細(xì)胞裂解死亡。主要見于無包膜、殺傷性強(qiáng)的病毒：poliovirus，多引起急性感染。阻斷細(xì)胞大分子合成；引起細(xì)胞溶酶體膜通透性增高；病毒蛋白的毒性作用溶細(xì)胞感染

cytocidalinfection

多見于nakedviruses

穩(wěn)定狀態(tài)感染有包膜的病毒以出芽方式釋放子代，細(xì)胞短時間內(nèi)不立即被溶解與死亡。包涵體形成細(xì)胞膜發(fā)生變化：CTL識別病毒抗原；細(xì)胞膜融合形成多核巨細(xì)胞，如：

麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒等。多次釋放后，細(xì)胞死亡巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus,CMV）核內(nèi)包涵體呈“貓頭鷹眼”狀：細(xì)胞腫大、變圓、核變大，形成巨大細(xì)胞；核內(nèi)出現(xiàn)大型的嗜酸性包涵體。包涵體形成

inclusionbody內(nèi)基氏小體（Negribodies）:狂犬病毒感染腦組織神經(jīng)元細(xì)胞中嗜酸性細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的包涵體病毒基因組的整合感染

integrationinfection

完全整合：逆轉(zhuǎn)錄病毒以雙鏈DNA整合到宿主細(xì)胞染色體DNA。失常式整合：DNA病毒在細(xì)胞核內(nèi)偶然地以部分病毒基因片段與細(xì)胞染色體DNA隨機(jī)重組，整合的病毒DNA隨細(xì)胞分裂進(jìn)入子細(xì)胞。

有少數(shù)病毒可促進(jìn)細(xì)胞的DNA合成，促進(jìn)細(xì)胞增生，細(xì)胞繁殖增快，失去細(xì)胞間的接觸抑制，在動物試驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)時，均可觀察到細(xì)胞的增生和轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。如HBxAg、HPV16-E6、HPV16-E7和SV40-Tprotein等。細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)化cellproliferationandtransformationFigCulturedratpancreaticcellsandtransformedcells.細(xì)胞凋亡apoptosis

是一種由基因控制的細(xì)胞自主性死亡，受多種基因調(diào)節(jié)。在某些病毒感染時可由于病毒本身或病毒編碼的蛋白間接作用誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。*HCV感染肝細(xì)胞病毒刺激CTL↓↓

高表達(dá)Fas高表達(dá)FasL↓↓CTL導(dǎo)致大量肝細(xì)胞凋亡→暴發(fā)性肝功能衰竭

*HBV、HCV感染→刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α↑→肝細(xì)胞凋亡或壞死細(xì)胞凋亡與病毒性肝炎二、病毒感染的免疫病理作用

免疫抑制或免疫缺陷免疫病理反應(yīng)免疫應(yīng)答紊亂1、免疫抑制或免疫缺陷病毒感染免疫細(xì)胞如：麻疹病毒感染巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞，PPD-

EB病毒感染單核細(xì)胞

HIV感染CD4+T細(xì)胞免疫細(xì)胞MHC-I/MHC-II

表達(dá)↓病毒抗原與細(xì)胞因子結(jié)構(gòu)相似病毒藏匿于免疫細(xì)胞或抗體難以作用的部位

2、免疫病理反應(yīng)Ⅱ型超敏反應(yīng)：細(xì)胞毒型變態(tài)反應(yīng)Ⅲ型超敏反應(yīng)：免疫復(fù)合物型變態(tài)反應(yīng)Ⅳ型超敏反應(yīng)：遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)3、病毒感染引起免疫應(yīng)答紊亂

免疫系統(tǒng)失去抗原識別功能，發(fā)生自身免疫病。隱性感染有無臨床表現(xiàn)顯性感染急性感染臨床癥狀長短慢性感染持續(xù)性感染潛伏性感染慢發(fā)病毒感染病毒的感染類型1、隱性感染

inapparentinfection

原因：病毒毒力較弱或機(jī)體免疫力強(qiáng)病毒不能到達(dá)靶細(xì)胞

有排毒的可能傳染源病毒攜帶者(viralcarrier)2、顯性感染

apparentinfection

（1）急性病毒感染acuteviralinfection

大多數(shù)病毒感染屬之（2）持續(xù)性病毒感染persistentviralinfection

慢性感染潛伏性感染慢發(fā)病毒感染

a、慢性感染

chronicinfection

癥狀輕微或缺如；可排毒；病程不一定呈進(jìn)行性發(fā)展。b、潛伏性感染

latentinfection病毒基因組潛伏于組織或細(xì)胞中c、慢發(fā)病毒感染

slowviralinfection潛伏期長，病程呈亞急性、進(jìn)行性，常導(dǎo)致死亡。如SSPE、Kuru

病等。

慢性感染chronicinfection顯性感染或隱性感染后，病毒未完全清除，可持續(xù)存在血液或組織中并不斷排出，可出現(xiàn)癥狀，也可無癥狀。HBV,HCV,HIV潛伏性感染latentinfection顯性或隱性感染后，病毒基因組潛伏于一定的組織或細(xì)胞中，但并不能產(chǎn)生有感染性的病毒體，在某些條件下病毒可被激活而急性發(fā)作。LatentinthetrigeminalorthoracicganglioncellsInitialinfection:varicellaPainfulvesiclesofzosterchickenpoxshingles慢發(fā)病毒感染Slowvirusinfection

較少見但后果嚴(yán)重。病毒感染后有很長的潛伏期，既不能分離出病毒也無癥狀。經(jīng)數(shù)年或數(shù)十年，發(fā)生某些進(jìn)行性疾病，并導(dǎo)致死亡。Measlesvirus–Sub-acuteSclerosingpanencephalitis(SSPE)病毒感染的過程與結(jié)局局部感染（Localinfection)：病毒局限于入侵部位增殖并導(dǎo)致疾病，如鼻病毒、輪狀病毒、流感病毒。全身感染(Systemicinfection)：病毒經(jīng)一定途徑感染機(jī)體后，在一種組織或細(xì)胞內(nèi)增殖后，病毒釋放入血或經(jīng)淋巴系統(tǒng)或經(jīng)神經(jīng)系統(tǒng)，再入侵靶器官中的易感細(xì)胞，損傷細(xì)胞引起疾病。感染過程涉及多個組織、器官，如麻疹、肝炎病毒等。

持續(xù)性感染發(fā)生機(jī)制①病毒抗原發(fā)生變異或免疫原性弱；②病毒基因組整合于宿主細(xì)胞染色體上；③機(jī)體免疫力低下，不能形成有效的免疫應(yīng)答?？共《久庖呦忍煨悦庖撸ǚ翘禺愋悦庖撸┇@得性免疫（特異性免疫）干擾素（IFN）NKcells…體液免疫細(xì)胞免疫干擾素(interferon,IFN)1957年研究滅活病毒干擾活病毒現(xiàn)象時，發(fā)現(xiàn)由細(xì)胞產(chǎn)生的具有抗病毒活性的糖蛋白。是機(jī)體受病毒或其他干擾素誘生劑刺激巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及體細(xì)胞產(chǎn)生的具有多種生物學(xué)活性的糖蛋白。

1、生物學(xué)功能抗病毒抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)

2、種類：免疫原性IFN-

IFN-

IFN-

主要由人白細(xì)胞產(chǎn)生主要由人成纖維細(xì)胞產(chǎn)生主要由人T細(xì)胞產(chǎn)生3、抗病毒機(jī)制：誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白INTERFERONINTERFERONantiviralstateantiviralstateantiviralstateantiviralstateINTERFERONantiviralstateantiviralstateantiviralstateantiviralstateINTERFERONantiviralstateantiviralstateantiviralstateantiviralstate4、特點(diǎn)：廣譜抗病毒間接抑制病毒而不是殺病毒抗病毒作用具有種屬特異性發(fā)揮作用迅速Diseasescurrentlytreatedwith

IFN-alphaandIFN-betahepatitisChepatitisBpapillomawartsandearlytrialswithcervicalcarcinomaKaposisarcomaofAIDS,colontumorskidneytumors(usuallyincombinationwithotherdrugs).BasalcellcarcinomaBreastcancercombinedwithtamoxifan五.病毒感染

的檢測與防治原則

（一）、病毒感染的檢測標(biāo)本的采集與運(yùn)送急性期標(biāo)本根據(jù)感染性質(zhì)取不同的標(biāo)本標(biāo)本置于轉(zhuǎn)運(yùn)液中冷藏快運(yùn)血清標(biāo)本需取雙份病毒分離培養(yǎng)1、病毒分離的一般程序是

動物接種出現(xiàn)癥狀雞胚接種病變或死亡血清學(xué)鑒定細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞病變采集處理標(biāo)本標(biāo)本2、病毒的分離培養(yǎng)方法動物接種雞胚培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞株傳代細(xì)胞系（1）原代細(xì)胞培養(yǎng)：

動物或人組織直接用蛋白酶消化所得的細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)后可貼壁或懸浮生長。

（2）二倍體細(xì)胞株：在體外連續(xù)培養(yǎng)50~60代仍保持其二倍染色體數(shù)目的單型細(xì)胞。為生產(chǎn)人用疫苗的首選細(xì)胞株。（3）傳代細(xì)胞系

能在體外連續(xù)傳代、來自癌細(xì)胞或發(fā)生自發(fā)轉(zhuǎn)化、突變的原代細(xì)胞或二倍體細(xì)胞株。臨床病毒實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)常用的名稱組織來源

傳代數(shù)原代

HEKPMKRKGPE/CE

人胚腎恒河猴腎兔腎豚鼠胚或雞胚1～2

二倍體

HEL(MRC-5)HDF

人胚肺人新生兒包皮

20～50

異倍體

Hep-2HeLaA549Vero

人喉癌人子宮頸癌人肺癌非洲綠猴腎

無限

識別病毒增殖的方法（1）細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathiceffect,CPE）

溶細(xì)胞型病毒感染細(xì)胞后，可出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)縮、裂解或細(xì)胞腫大、數(shù)個細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞或細(xì)胞聚集成葡萄串狀、脫落或死亡等。fibroblasticcells-herpessimplexvirusuninfectedearlyinfectionlateinfectionslidesfromCDCIdentificationincellculture

Cytopathiceffect(CPE)MultinucleatedgiantcellsTheclinicaldiagnosisofherpesvirusskininfectionisaidedbythefindingofmultinucleatedgiantcellswitheosinophilicintranuclearinclusionsinskinscraping.（2）紅細(xì)胞吸附(hemadsorption)：流感病毒和某些副粘病毒感染細(xì)胞后24～48小時，細(xì)胞膜上出現(xiàn)病毒的血凝素，能吸附豚鼠、雞等動物及人的紅細(xì)胞，發(fā)生紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象。（3）觀察病毒的包涵體（4）電子顯微鏡：直接觀察病毒Microscopicidentification

rotavirusastrovirusescoronavirusadenovirus測定病毒數(shù)量可用空斑形成單位（PFU）表示。一個空斑是標(biāo)本中一個病毒大量復(fù)制所致，有感染性的病毒經(jīng)適當(dāng)稀釋后接種于單層細(xì)胞，由于單個病毒的復(fù)制增殖使局部單層細(xì)胞脫落（CPE），即空斑。經(jīng)染色后計(jì)算空斑數(shù)。病毒量測定PLAQUEASSAYPLAQUEASSAYPLAQUEASSAYPLAQUEASSAYPlaqueformingunits(PFU)Ameasureofthequantityofindividualinfectiousparticles

Diluted10foldDiluted100foldDiluted1000fold檢測病毒抗原的快速方法免疫熒光技術(shù)ELISA血清學(xué)方法Westernblot

……ELISA1°Ab2°AbQuantitationtest

IgG抗體效價需4倍或以上變化

補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

紅細(xì)胞凝集和凝集抑制試驗(yàn)

檢測病毒抗體方法PCRcycler（二）病毒感染的防治

病毒感染的預(yù)防人工主動免疫人工被動免疫人工主動免疫FigEdwardJennervaccinating(inoculating)JamesPhippswithcowpoxmaterial.病毒感染的預(yù)防滅活疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗核酸疫苗減毒疫苗回復(fù)突變導(dǎo)致毒性增強(qiáng)；在免疫系統(tǒng)受損的人中導(dǎo)致疾?。粚?dǎo)致先天缺陷，尤其是在懷孕頭3個月接種活疫苗；減毒疫苗和其他病毒重組。注意事項(xiàng)成功的天花疫苗天花

人痘接種Variolation天花

琴納1796：牛痘/豬痘1800’s強(qiáng)制兒童免疫1930’s英國最后一例自然感染

1940’s美國最后一例自然感染1958WHO推廣1977.8：全世界最后一例，索馬里1979WHO宣布脊髓灰質(zhì)炎Polio1954，Salk，滅活病毒疫苗1957，Sabin，減毒口服活疫苗WHOplan：2000消滅脊灰

發(fā)達(dá)國家多用滅活Salk中國：Sabin苗

VAPP(vacc